肝癌移植瘤小鼠髓样抑制细胞比例变化及亚砷酸的调节作用*

目的:探讨髓样抑制细胞（MDSCs）与肿瘤发生、发展的相关性,寻找抑制肿瘤生长的方法。方法:建立H22肝癌细胞昆明鼠皮下移植瘤模型,用共聚焦显微镜观察MDSCs 形态;应用流式细胞仪检测外周血及脾脏中MDSCs 数量在肿瘤生长过程中的变化趋势;给予As2O3 药物干预,即随机分为对照组、As2O3 低剂量组（2mg/kg）、As2O3 高剂量组（4mg/kg）;每周腹腔给药2 次,重复上述测量,统计学分析组间差异;体外细胞培养观察As2O3 对小鼠MDSCs 数量的直接影响。结果:皮下接种肿瘤细胞株后,瘤重逐渐增加,第25天增加至5.67g,外周血和脾脏MDSCs 比例也逐渐增加,分别达20.46% 和9.50% ;对瘤重与外周血和脾脏MDSCs 比例的变化趋势进行相关性分析,相关系数r 值分别为0.95和0.96（t=5.270、5.939,P<0.05）,两者明显呈正相关关系。当用As2O3 药物干预时,外周血低剂量组和高剂量组MDSCs 比例在第28天上升至11.31% 和10.00% ,明显低于阴性对照组（t=3.193、5.486,P<0.05）,且高剂量组MDSCs 比例明显低于低剂量组（t=3.066,P<0.05）;脾脏低剂量组和高剂量组MDSCs 比例在第28天上升至10.90% 和9.04% ,明显低于阴性对照组（t=3.586、5.279,P<0.05）,但高、低剂量组间差异无统计学意义（t=1.298,P>0.05）。 体外实验中,在加入H22肿瘤腹水上清后,培养液中MDSCs 比例于第12天上升至12.67%;加入As2O3 继续培养,MDSCs 的比例于第18天下降至7.44% ,分别与其前一时间点比较,差异有统计学意义（P<0.05）。 结论:荷H22肝癌细胞小鼠体内MDSCs 比例随着肿瘤负荷增大而增加,两者存在正相关性;As2O3 可以降低MDSCs 的比例,缓解肿瘤发生、发展。      

髓系来源的抑制性细胞在小鼠H22原位种植性肝癌中的表达及其意义

目的:比较小鼠H22原位种植性肝癌模型中髓系来源的抑制性细胞（MDSCs）和调节性T细胞（Tregs）的表达，确定主要的免疫抑制性细胞。并探讨主要免疫抑制性细胞在小鼠H22原位种植性肝癌模型中的意义。方法:建立小鼠H22原位种植性肝癌模型，用流式细胞术的方法比较外周血、脾脏、肿瘤组织中MDSCs、Tregs的比例。分析MDSCs与CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞、NKT细胞的相关性。通过脾脏切除的方法下调MDSCs的表达，观察对肿瘤存活的影响。结果:MDSCs的比例无论在外周血、脾脏还是肿瘤组织中都显著高于Tregs。MDSCs的比例与CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞、NKT细胞呈负相关。下调MDSCs的比例可以显著延长小鼠存活期。结论:小鼠H22原位种植性肝癌中主要的免疫抑制性细胞是MDSCs。MDSCs的高表达预示着不良的小鼠存活期。     

髓样抑制细胞在肿瘤生物学中作用的研究进展

髓样抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)是存在于荷瘤小鼠及肿瘤患者体内、具有免疫抑制功能的细胞群。它由髓系来源的未分化成熟的具有异质性的细胞组成,其中包括树突状细胞、巨噬细胞和粒细胞等。肿瘤细胞分泌的各种因子能诱导MDSCs的产生、运动及活化。荷瘤小鼠来源的MDSCs主要表达CD11b+Gr1+,而肿瘤患者来源的MDSCs主要表达CD11b+CD14-。在荷瘤小鼠骨髓、脾脏和外周血及肿瘤患者的外周血中MDSCs水平升高。MDSCs通过抑制机体免疫功能和促进新生血管生成等机制参与肿瘤的生长及向远处转移。抑制体内MDSCs的功能和降低其数量有助于恢复机体识别、杀伤肿瘤细胞的能力,并提高药物疗效。本文对MDSCs在肿瘤领域的最新研究进展进行综述。     

吉西他滨对卵巢癌移植瘤小鼠的免疫调节作用

目的:观察吉西他滨(gemcitabine,GEM)对卵巢癌移植瘤小鼠肿瘤免疫微环境的调节作用.方法:C57BL/6小鼠皮下注射卵巢癌ID8细胞构建卵巢癌移植瘤模型,实验组腹腔注射GEM,对照组注射生理盐水,观察肿瘤生长情况.流式细胞术检测小鼠脾脏及肿瘤组织的调节性T细胞(regulatoryT cells,Treg)及髓来源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSC),实时定量PCR检测小鼠肿瘤组织arginase-1(Arg-D和Foxp3 mRNA的表达,流式细胞仪检测小鼠脾脏CD8+T细胞的比例,ELLSE法检测小鼠血清IFN-γ及IL-2的表达.结果:GEM处理后的移植瘤小鼠肿瘤生长明显受到抑制[(366.8±44.88) vs (499.3±24.14)mm3,P＜0.01].移植瘤小鼠肿瘤组织及脾脏Treg比率明显降低[(12.71±2.31)％ vs (20.36±2.65)％、(10.09±1.69)％ vs (13.79±1.31)％,均P＜0.01].实验组的相关基因mRNA表达较对照组显著降低[Foxp3:(4.30±0.46)vs (6.35±0.58);Arg-1:(16.32±0.38)vs(13.26±0.37);均P＜0.01].实验组血清中的IFN-γ和IL-2含量明显高于对照组[IFN-γ:(71.90±2.28)vs (53.91±3.91) pg/ml;IL-2:(51.46±1.69)vs (40.90±1.50) pg/ml,均P＜0.01].结论:GEM下调卵巢癌移植瘤小鼠免疫抑制活性,并可上调小鼠抗肿瘤免疫原性,该结果可为GEM作为卵巢癌免疫治疗干预措施提供实验依据.     

三氧化二砷抑制肝癌Hep G2 细胞侵袭转移 及对RhoC 基因表达的影响

 目的　了解三氧化二砷(As2 O3 ) 对肝癌Hep G2 细胞体外黏附、侵袭和迁移的抑制作用及对转 移基因RhoC 表达的影响,探讨As2O3 抑制肝癌细胞转移的机制。方法　分别采用MTT 法、Transwell 检测As2O3 对Hep G2 细胞黏附、迁移、侵袭能力的影响; 采用RT2PCR、Western blot 方法检测As2O3 作 用前后Hep G2 细胞中RhoC 基因的表达及变化。结果　As2O3 作用后Hep G2 细胞黏附率、侵袭及侵袭 细胞数较对照组明显下降( P < 0. 05) 。As2O3 作用4 、6 、8 天后RhoC2mRNA 及蛋白表达水平逐渐下降 ( P < 0. 05) 。Hep G2 细胞中RhoC2mRNA 表达和蛋白表达具有相关性( r = 0. 92 , P = 0. 046) 。结论　 As2O3 可明显抑制Hep G2 细胞细胞黏附、迁移和侵袭的能力;并可通过下调RhoC 基因的表达而抑制其 侵袭转移。     

肿瘤诱导的髓系来源抑制细胞中IDO表达相关机制研究

目的:建立正常CD33+细胞与肿瘤细胞共培养系统,模拟肿瘤局部髓系来源抑制细胞的诱导过程,观察吲哚胺2,3双加氧酶在MDSCs中表达及其免疫抑制作用,并探讨MDSCs中IDO表达相关机制.方法:免疫磁珠分选健康供者CD33+细胞,体外与乳腺癌细胞系MDA-MB-231共孵育诱导MDSCs,以单独培养CD33+细胞为对照组,培养2天后收获实验组MDSCs及对照组CD33+细胞,流式细胞仪检测细胞表型;实时定量PCR和Western Blotting方法检测IDO和STAT3的表达与活化情况;Annexin V-FITC的方法检测MDSCs对T细胞促凋亡作用,并观察IDO在MDSCs诱导T细胞凋亡中的作用.结果:正常CD33+细胞与MDA-MB-231共孵育2天后,出现一群表型为Lin-CD33+13+CD14-CD15-的MDSCs,体外诱导的MDSCs中IDOmRNA及蛋白表达增加、STAT3蛋白磷酸化增强,经过STAT3磷酸化抑制剂JSI-124预处理后,MDSCs中IDO蛋白表达明显降低并可诱导高百分比T细胞凋亡,经IDO抑制剂1-MT处理后T细胞凋亡显著降低.结论:体外将乳腺癌细胞系与正常CD33+细胞共孵育可以诱导出具有独特表型特征和免疫抑制活性的MDSCs,而STAT3磷酸化导致的IDO表达升高可能是MDSCs抑制T细胞功能的主要机制之一.     

三氧化二砷抑制乳腺癌MCF-7细胞作用机制的研究

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)抑制乳腺癌MCF-7细胞的作用机制.方法:噻唑兰(MTT)法检测As2O3对MCF-7细胞存活率的影响;流式细胞技术检测As2O3引起MCF-7细胞凋亡.通过caspas-3试剂盒检测其活性,推测其可能的凋亡信号通路.结果:MTr实验表明As2O3使MCF-7细胞存活率下降并呈现剂量依赖的量效关系;流式细胞测定结果证实As2O3对乳腺癌细胞具有致凋亡作用;As2O3作用后的MCF-7细胞caspase-3的活性显著增高.结论:As2O3诱导MCF-7细胞凋亡,其机制至少部分与激活caspase-3有关.     

MDSCs与肿瘤免疫逃逸

髓源抑制性细胞(myeloidderived suppressor cells, MDSCs)是一群异质性细胞,来源于骨髓祖细胞和未成熟髓细胞(immature myeloid cells, IMCs),是树突状细胞（dendritic cells, DCs）、巨噬细胞和（或）粒细胞的前体。在荷瘤小鼠的血液、脾脏和肿瘤组织及肿瘤患者的外周血和肿瘤组织存在大量MDSCs的扩增。MDSCs可以通过多种途径抑制机体的获得性和天然抗肿瘤免疫,使肿瘤细胞逃避机体的免疫监视和攻击,促进肿瘤发展。MDSCs首先从骨髓募集到外周,并在外周被激活后才能发挥抗肿瘤免疫抑制功能,肿瘤来源的慢性炎症相关的一系列因子在介导MDSCs的募集和活化中起关键作用。当前靶向MDSCs的抗肿瘤治疗取得了一定的进展,但MDSCs从发现到现在仅仅经历了10年左右的时间,该领域中许多的未知尚需要大量的基础和临床研究来阐明。本文主要介绍MDSCs的特征及其亚群、MDSCs的募集和活化、MDSCs介导免疫逃逸的机制及当前靶向MDSCs的抗肿瘤治疗策略,以期为从事该领域的研究工作者提供参考。     

米托蒽醌通过诱导钙网蛋白的表达抑制黑素瘤的生长

目的：观察米托蒽醌（mitoxantrone,MIT）对黑素瘤B16细胞钙网蛋白（calreticulin, CRT）表达的影响,探讨高表达CRT的B16细胞膜抗原疫苗的免疫效果及其机制。方法：不同剂量MIT处理B16细胞,免疫荧光法检测B16细胞CRT的表达。以B16细胞建立小鼠荷瘤模型,用不同剂量的MIT治疗荷瘤小鼠,观察MIT对黑素瘤生长及肿瘤组织中CRT表达的影响。制备B16细胞膜蛋白和MIT处理后B16细胞膜蛋白作为疫苗分别免疫小鼠,免疫组化检测小鼠移植瘤组织内免疫细胞的浸润情况,流式细胞术检测荷瘤小鼠脾脏中CD4+、CD8+T细胞比例的变化。结果：MIT可剂量依赖性地上调B16细胞表面CRT的表达,对照组B16细胞表面CRT为（29.40±3.57）%,高剂量MIT处理组为（72.20±2.94）%（P<0.05）;MIT促进移植瘤组织中CRT的表达,对照组为（3.21±1.37）,高剂量MIT组为（9.17±106）（P<0.05）。MIT有效抑制小鼠黑素瘤的生长（P<0.05,P<0.01）。与B16细胞膜蛋白疫苗相比,高表达CRT的MITB16细胞膜蛋白疫苗可明显上调小鼠黑素移植瘤组织中的DCs和T细胞的数量,以及脾脏细胞中CD4+、CD8+T细胞的比例（P<0.05）。结论：MIT能够上调CRT在B16细胞表面的表达,高表达CRT的B16细胞膜蛋白疫苗能够提高肿瘤组织中浸润DCs和T细胞的数量,抑制黑素瘤的生长。     

三氧化二砷诱导HL-60细胞凋亡过程中ROS、NF-kB和C-IAP2的变化

背景与目的:探讨As2O3(arsenic trioxide,ATO)对HL-60细胞凋亡过程中细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、NF-kB(nuclear factor kappa B).及GIAP2(cellular inhibitor of apoptosis proteins 2)的影响.材料与方法:以7.5 umol L As2O3单独应用及与500 umol L N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-Lcysteine,NAC)联合作用于HL-60细胞12、24 h后,流式细胞术检测HL-60细胞ROS的产生量;Western blot法检测NF-kB P65核蛋白的变化情况;半定量RT-PCR法检测C-IAP2的相对表达量.结果:7.5 umol L的As2O3作用HL-60细胞12、24 h后细胞内ROS的生成增加,与阴性对照比较,差异具有统计学意义(P<0.05).NF-kB P65核蛋白的相对含量分别为49.3%±4.4%和23.1%±2.1%,C-IAP2的相对表达分别为72.9%±5.8%和59.3%±4.4%,较对照组均明显降低(P<0.05).500 umol L NAC和7.5 umol L As2O3共同作用HL-60细胞12、24 h后细胞ROS生成量相对减少,与AS2O3单独作用组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);NF-kB P65核蛋白的相对含量分别为65.4%±4.9%和37.1%±3.4%,C-IAP2的相对表达量分别为81.1%±5.8%和73.7%±4.9%.较As2O3单独作用组均明显增加(P<0.05).结论:As2O3诱导HL-60细胞凋亡过程中,细胞内ROS生成增加,抑制NF-kB活性,同时下调其靶基因C-IAP2等的表达;NAC能阻断As2O3诱导HL-60细胞凋亡过程中ROS的生成,部分阻断了NF-kB活性的抑制.     

肿瘤特异性个体化多靶点DC-CIK 治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效与安全性

目的：评价肿瘤特异性个体化多靶点树突状细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞（DC-CIK）治疗晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者的临床疗效和安全性。方法：回顾性分析2019 年10 月1日至2022 年10 月31 日东部战区总医院生物治疗科行肿瘤特异性个体化多靶点DC-CIK 治疗晚期NSCLC患者的临床资料。统计NSCLC患者的临床疗效和不良反应,分析治疗前后血清中肿瘤标志物的变化,FCM检测患者治疗前后的淋巴细胞亚群和各种细胞因子的表达情况,用质谱仪检测治疗前后靶点的变化。结果:共入组52 例晚期NSCLC 患者,其中女性21例、男性31例;年龄32~71岁,平均年龄（50.97±10.72）岁,中位年龄47.5岁。经DC-CIK 治疗后,CR 0例,PR 0例,SD 27 例,PD 25 例。与治疗前比较,DC-CIK 治疗后：（1）CEA和CYFRA21-1水平无显著改变,CA125 水平显著低于治疗前（P<0.01）;（2）治疗后患者淋巴细胞亚群无显著变化;（3）治疗后患者外周血IL-2、IL-4、IFN-γ 和TNF-α水平显著升高（均P<0.01）,IL-6、IL-10 及IL-17 水平无明显变化（;4）治疗后靶点数下降明显。DC-CIK 治疗过程中无严重不良反应发生。结论:晚期NSCLC患者行肿瘤特异性个体化多靶点自体DC-CIK 治疗是安全的,能使患者产生抗肿瘤免疫反应并得到一定的临床获益。     

Fludarabine and melphalan conditioning with tacrolimus as GVHD prophylaxis for allogeneic stem cell transplant recipients is an effective reduced-intensity combination regimen compared to the conventional regimen

Background  As a reduced-intensity stem-cell transplantation (RIST) regimen, the combination of fludarabine and melphalan (FM) with an appropriate immunosuppressant reduces nonrelapse mortality (NRM). Methods  We retrospectively compared the efficacy of a RIST regimen with FM with that of a conventional stem cell transplantation (CST) regimen. Eighty-two consecutive hematological patients who underwent allogeneic stem-cell transplantation (SCT) at our hospital were enrolled. Preparation for RIST consisted of 25 mg/m² fludarabine and melphalan 70 mg/m². The conventional regimen employed high-dose cyclophosphamide and total-body irradiation (12 Gy) or busulfan and high-dose cyclophosphamide. Graft-versus-host disease (GVHD) prophylaxis for RIST consisted of tacrolimus alone or in conjunction with short-term methotrexate for unrelated donors. Results  Of the 82 patients, 42 received the conventional CST regimen (median age, 35 years) and 40 received the RIST regimen (median age, 51 years). The probability of NRM was 17% (7/42) in the CST group and 8% (3/40) in the RIST group. Grade II to IV GVHD occurred in significantly more CST patients (38%) than RIST patients (28%). However, the overall survival was the same in the two groups (43%). Conclusion  The RIST regimen with FM incorporating tacrolimus and methotrexate demonstrated low TRM incidence and moderate control of GVHD and had efficacy comparable to that of the CST regimen, despite the advanced age of the RIST patient group.     

A method to generate mature dendritic cells from cryopreserved PBMC

To established methods for cryopresserving peripheral blood mononuclear cells(PBMCs)and producing DCs from cryopresserved PBMCs.Methods:Mature DCs were generated from cryopreserved PBMCs by using IL-4,GM-CSF,TNFα,IL-1β,IL-6,pgE2 and LPS.The phenotype of the resultant DCs was investigated by flow cytometry.The functions of the resultant DCs were verified by Elispot assay.Results:The resultant DCs expressed high levels of HLA ABC,HLA DR,costimulatory molecules and the DC maturation marker CD83.The mature DCs we generated from frozen PBMCs were able to prime CD8 T cells into long term IFN-γ producing peptide specific CTL.Conclusion:The DCs we developed from cryopreserved PBMC were fully mature and had the capability to stimulate immune reaction.Thus,we developed a method to generate functional mature DC from cryopreserved PBMC.     

CLINICAL SIGNIFICANCES OF THE EXPRESSION OF METALLOTHIONEIN IN FIVE TYPES EPITHELIUM CELL CANCER

Objective： To study the expressions of （CSC）, bladder transitional cell cancer metallothionein and the significances in cervical squamous cell cancer （BTC）, esophageal squamous cell cancer （ESC）, gastral tubular adenocarcinoma （GC） and large intestinal tubular adenocarcinoma （LIC）. Methods： lmmunohistochemical method was used to examine the expression rates of MT in five types of cancer tissue. Results： The expression rates of MT were 75.00% （24/32） in ESC, 52.27% （46/88） in GTC, 59.46% （44/74） in LIC, 64.86% （48/74） in BTC and 58.57% （41/70） in CSC respectively. The positive rates of MT expression were higher in low differentiation and deep muscular group than those in medium or high differentiation and superficial muscular invasion group （P〈0.05）. Conclusion： The expression of MT is related to differentiation degree and invasion degree.     

造血干细胞移植后淋巴细胞增殖症患者单个核细胞来源DC负载EBV抗原肽制备DC-CIK

目的：以造血干细胞移植后并发淋巴细胞增殖症（posttransplant lympholiferative disorder, PTLD)患者外周血单核细胞培养诱导DC,负载抗原肽后制备DCCIK（cytokineinduced killer cell）,为探索新的PTLD治疗方法奠定基础。方法: 分离造血干细胞移植后EBV（EpsteinBarr virus)感染致PLTD患者外周血单个核细胞,贴壁细胞培养诱导DC,悬浮细胞诱导CIK;负载EBV抗原肽LMP2后建立DCCIK共培养体系。流式细胞仪分析共培养前后细胞的免疫表型,ELISA检测共培养前后细胞上清IFNγ的分泌水平,基因扫描仪分析T细胞受体(T cell receptor, TCR)β家族基因谱。结果: 成功制备负载EBV抗原肽的DCCIK,HLADR+CD86+DC细胞从诱导前的12.5%增加到91.17%;DCCIK共培养14 d后,两例患者的CIK数量分别增加了5.3和6.8倍;CD3+、CD8+、CD3+CD8+以及CD3+CD56+ 细胞比例在DCCIK共培养后均明显升高(均P<005)。抗原肽负载的DCCIK共培养体系中IFNγ的分泌水平明显高于未经抗原肽负载的DC组\[（1 332.6±92.38）pg/ml vs (693.42±62.41) pg/ml,P<0.01）\]。DCCIK培养后细胞的TCRβ家族基因在5.2家族出现单克隆表达峰。结论：EBV抗原肽负载后DC可诱导DCCIK共培养体系中CD3+CD8+以及CD3+CD56+ 细胞扩增,并分泌高水平IFNγ,为临床应用DCCIK对移植后EBV感染致PTLD患者进行过继性细胞免疫治疗提供实验基础。     

A child case of CD34, CD33, HLA-DR, CD7, CD56 stem cell leukemia with thymic involvement

It has been reported that the CD56⁺/CD7⁺/CD3⁻ phenotype of natural killer (NK) cells develop from the CD34⁺/HLA-DR⁻ bone marrow (BM) mononuclear cell population in long-term BM culture (LTBMC). An HLA-DR⁻/CD33⁺/CD56⁺/CD16⁻ myeloid/natural killer cell acute leukemia has been described. We report here a 7-year-old boy who developed stem cell acute leukemia with superior vena cava syndrome secondary to thymic involvement. Surface marker analyses revealed that the leukemia cells showed CD34⁺/HLA-DR⁻/CD33⁻/CD7⁺/CD56⁺ phenotype. When stimulated with phorbol ester in vitro the leukemic cells morphologically differentiated to myeloid cells developing CD13, CD15 and CD56 antigens. Our results suggest that CD34⁺/HLA-DR⁻/CD7⁺/CD56⁺ stem cell leukemia may arise from transformation of a pluripotent precursor cell, which could differentiate to both myeloid and NK cell lineages.     

氨磷汀与峰龄多糖对人外周血粒-巨噬祖细胞的化疗保护作用

目的　观察氨磷汀 (amifostine ,化学代号 :WR 2 72 1)和峰龄多糖 (fenglingpolysaccharide ,FLPS)对人外周血粒 -巨噬祖细胞 (CFU GM )及HL60白血病细胞的化疗保护作用。方法　应用Ficoll分离单个核细胞 (MNC) ;甲基纤维素半固体培养法测定CFU GM集落 ;XTT法测定HL60细胞存活率 ;WR 2 72 1及FLPS处理的MNC ,与VP 16作用后 ,测定CFU GM集落产率 ,研究WR 2 72 1和FLPS对CFU GM的保护作用。结果　经WR 2 72 1和FLPS处理的MNC与VP 163 7℃作用 14h后 ,CFU GM集落产率均明显高于VP 16对照组 ,CFU GM集落数在VP 16对照组、空白对照组、WR 2 72 1 VP 16组、FLPS VP 16组和WR 2 72 1 FLPS VP 16组分别为每 1× 10 5个MNC 3 0 .9± 2 2 .5、83 .2± 43 .8、64 .6± 41.2、5 5 .3± 3 3 .5和 78.3± 48.2 ,与VP 16对照组相比 ,P值均 <0 .0 1;WR 2 72 1处理后的HL60细胞对VP 16的敏感性增强 ,IC50 由 5 2 .5 μg/ml下降为 40 .5 μg/ml ;VP 16对FLPS处理前后的HL60细胞的作用无明显改变。结论　WR 2 72 1和FLPS对人外周血CFU GM具有明显化疗保护作用。WR 2 72 1能增强HL60细胞对VP 16的敏感性。FLPS对HL60细胞的化疗损伤无保护作用     

Beneficial effect of KYP-2047, a propyl-oligopeptidase inhibitor,on oral squamous cell carcinoma

Oral squamous cell-carcinoma (OSCC) is a common cancer which arises from the alveolar ridge, buccal mucosa, and tongue. Among OSCC, the incidence of tongue squamous cell-carcinoma (TSCC) is growing all over the world. Oral carcinogenesis has been linked to genetic mutations, chromosomal aberrations and viral factors. Apoptosis and angiogenesis play a key role in the development of oral cancer. Therefore, it is very important discover new therapeutic strategies to counteract oral cancer progression. This study aimed to investigate the effect of KYP-2047 in an in vitro model of TSCC and in vivo CAL27-xenograft model. Our results demonstrated that KYP-2047 was able to reduce TSCCs cell viability at the concentrations of 50 μM and 100 μM. Additionally, KYP-2047 was able to increase Bax, Bad and caspase-3 expression, whereas Bcl-2 and p53 expression were reduced. Moreover, KYP-2047 significantly reduced vascular-endothelial-growth-factor (VEGF) and endothelial-nitric-oxide-synthase (eNOS) expression. In the vivo xenograft model, KYP-2047 at doses of 1 and 5 mg/kg significantly reduced tumor burden and tumor weight, decreasing also angiogenesis markers VEGF and eNOS. Moreover, KYP-2047 increased Bax and reduced Bcl2 expressions. Thus, KYP-2047 could represent a potential therapeutic treatment to counteract tongue oral-cancer growth, thanks its abilities to modulate angiogenesis and apoptosis pathways.     

树突细胞激活的肿瘤浸润性淋巴细胞抗肝癌免疫活性的研究

目的　探讨树突细胞 (DC)激活的肿瘤浸润性淋巴细胞 (TIL)体外对肝癌细胞的杀伤活性。方法　从肝癌患者外周血获取DC ,应用粒 /巨噬细胞集落刺激因子 (GM -CSF)、白细胞介素 -4 (IL -4 )和肿瘤抗原激活DC ,然后用DC激活TIL ,观察TIL在体外对自体肝癌细胞和Hep3B细胞的杀伤活性。 结果　DC激活的TIL对自体肝癌细胞具有很强的杀伤活性 ,杀伤率为89 .39%± 3.0 5 %,明显高于未经DC激活的TIL、DC激活的T淋巴细胞和未经DC激活的T淋巴细胞对自体肝癌细胞的杀伤率(分别为 5 5 .2 3%± 1.5 3%、5 4.89%± 1.48%和 3.6 5 %± 0 .2 6 %)。而它们对Hep3B细胞的杀伤活性则相对较低。 结论　肝癌患者外周血DC能诱导TIL产生高效而特异的抗肝癌免疫活性。     

Hsa-miR-34a作为肾癌早期诊断指标的临床探讨

目的:探讨hsa-miR-34a作为肾癌早期诊断分子指标的可行性.方法:选择27例肾细胞癌患者的肿瘤组织及相匹配的正常组织进行高通量的real-time PCR检测鉴定,数据采用SPSS17.0作统计学处理,分析hsa-miR-34a在肾癌组织与相匹配的正常组织的表达差异性.并结合临床数据进行分析.结果:hsa-miR-34a在肾细胞癌组织中表达显著上调(P＜0.05).hsa-miR-34a的表达与肾癌患者的病理核分级及临床分期呈显著正相关.结论:hsa-miR-34a的表达异常可能与肿瘤侵袭性有关,提示hsa-miR-34a可能可以作为肾癌的早期诊断的重要分子指标.