豆蔻提取物对人胃癌细胞裸鼠移植瘤的影响的实验研究

目的观察豆蔻提取物对人胃癌细胞裸鼠移植瘤的影响及可能的机制。方法建立24只裸小鼠胃癌原位移植瘤模型,随机分成4组（每组6只）：对照组、5-FU组、豆蔻提取物组、联合组,各组按设计剂量给药,实验期间,每3d测量移植瘤瘤径及体积,4周后,颈椎脱臼法处死,计算抑瘤率,用免疫组化法检测各组移植瘤瘤体中ODX-2和VEGF的表达情况。结果成功建立胃癌裸鼠原位移植瘤模型,各组实验裸鼠体重下降明显低于对照组,各组抑瘤率分别为：5-FU组55．99％,豆蔻提取物组42．81％,联合用药组67．36％,联合用药组瘤体中COX-2和VEGF的表达明显下调。结论豆蔻提取物可抑制胃癌原位移植瘤的生长,豆蔻提取物联合5-FU可显著抑制胃癌原位移植瘤的生长,2组具有协同作用,其抑制人胃癌裸鼠原位移植瘤生长和转移的作用机制可能与下调COX-2和VEGF的表达有关。     

豆蔻提取物对人胃癌细胞裸鼠移植瘤的影响的实验研究

目的观察豆蔻提取物对人胃癌细胞裸鼠移植瘤的影响及可能的机制。方法建立24只裸小鼠胃癌原位移植瘤模型,随机分成4组(每组6只):对照组、5-FU组、豆蔻提取物组、联合组,各组按设计剂量给药,实验期间,每3 d测量移植瘤瘤径及体积,4周后,颈椎脱臼法处死,计算抑瘤率,用免疫组化法检测各组移植瘤瘤体中COX-2和VEGF的表达情况。结果成功建立胃癌裸鼠原位移植瘤模型,各组实验裸鼠体重下降明显低于对照组,各组抑瘤率分别为:5-FU组55.99%,豆蔻提取物组42.81%,联合用药组67.36%,联合用药组瘤体中COX-2和VEGF的表达明显下调。结论豆蔻提取物可抑制胃癌原位移植瘤的生长,豆蔻提取物联合5-FU可显著抑制胃癌原位移植瘤的生长,2组具有协同作用,其抑制人胃癌裸鼠原位移植瘤生长和转移的作用机制可能与下调COX-2和VEGF的表达有关。     

17 DMAG对人结直肠癌裸鼠移植瘤微血管形成的抑制作用

目的探讨17-二甲基胺乙基-17-去甲氧基格尔德霉素（17-DMAG）对结直肠癌微血管生成的抑制作用。方法24只BALB／C-nu／nu裸鼠用于建立裸鼠结直肠癌移植瘤模型,并将其随机分为17-DMAG、5-氟尿嘧啶（5-Fu）及对照组各8只,分别腹腔注射17-DMAG、5-Fu、生理盐水,4周后测量裸鼠移植瘤体质量、体积,采用免疫组织化学染色法检测肿瘤组织中微血管密度（MVD）和血管内皮生长因子（VEGF）,采用蛋白免疫印迹法检测VEGF。比较3组结果。结果17-DMAG组、5-FU组移植瘤体质量、体积与对照组比较差异均有统计学意义（P均〈0．05）;17-DMAG组MVD、VEGF水平均低于5-Fu组与对照组（P均〈0．05）,而5-FU组与对照组的MVD、VEGF水平比较差异无统计学意义（P均〉0．05）。结论17-DMAG可通过下调VEGF的表达减少结直肠癌组织中新生血管的生成进而抑制肿瘤的生长。     

血管生成抑制剂联合分化诱导剂对结肠癌细胞凋亡的影响

目的通过建立人LOVO细胞结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,研究血管生成抑制剂(TNP-470)联合分化诱导剂(RA)对结肠癌细胞凋亡的影响。方法建立人LOVO细胞结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为4组。模型建立后分组治疗,至治疗结束时处死裸鼠,检测肿瘤组织结肠癌细胞凋亡指数(AI)。结果治疗组与对照组癌细胞AI相比,差异有统计学意义(P<0.05);且RA+TNP-470组与RA组和TNP-470组癌细胞的AI相比,差异也有统计学意义(P<0.05)。联合用药组肿瘤组织中可见较多的凋亡细胞。结论血管生成抑制剂TNP-470与分化诱导剂RA联合治疗结肠癌裸鼠皮下移植瘤比TNP-470或RA单药治疗具有更强的抑瘤作用,肿瘤组织结肠癌凋亡细胞明显增加。     

血管紧张素Ⅱ受体1在人胃癌细胞中的表达及其拮抗剂对胃癌荷瘤裸鼠生长的抑制作用

目的：检测血管紧张素Ⅱ受体1（AT1R）在人胃癌细胞株中的表达及其拮抗剂对人胃癌荷瘤裸鼠生长的抑制作用。方法：采用实时定量PCR和蛋白印迹分析法检测AT1R在胃癌细胞株中的表达。建立人胃癌裸鼠移植瘤模型,分别以2mg/kg和5mg/kgTCV-116（AT1R拮抗剂）每日给荷瘤裸鼠灌胃,观察肿瘤体积的变化并绘制肿瘤生长曲线;以免疫组织化学染色观察胃癌裸鼠移植瘤的微血管密度（MVD）和血管内皮生长因子（VEGF）表达。结果：AT1R在人胃癌细胞株中有较高水平的表达。经TCV-116处理的胃癌荷瘤裸鼠移植瘤体积较对照组显著减小,且TCV-116处理组的MVD和VEGF表达水平也较对照组显著降低。结论：选择性AT1R拮抗剂对人胃癌裸鼠移植瘤的生长具抑制作用,其可能是通过抑制肿瘤血管生成的途径产生抑制作用;故阻断血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）可能是治疗胃癌的一种新方法。     

抑制Smac基因表达对胰腺癌裸鼠移植瘤生长影响的研究

[目的]探讨Smac基因对人胰腺癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用.[方法]于裸鼠腋下接种200 μL 107/mL的PANC-1细胞悬液,建立人胰腺癌裸鼠移植瘤模型,将其分为三组：注射PBS液（A组）、转染空载体（B组）、转染Smac基因（C组）,比较三组移植瘤的大小、移植瘤细胞的凋亡率,移植瘤中Smac蛋白表达和微血管密度（MVD）.[结果]与A、B组比较,C组裸鼠移植瘤体积、质量和MVD显著减小;移植瘤细胞的凋亡指数和Smac蛋白的表达率均明显增高,其差异均有统计学意义（P〈0.05）.[结论]脂质体转染Smac基因能抑制人胰腺癌裸鼠移植瘤的生长,可能与该基因诱导胰腺癌细胞凋亡和抑制肿瘤血管形成有关.     

小剂量奥沙利铂抗肿瘤血管生成作用的体内实验研究

目的观察小剂量奥沙利铂（L-OHP）对小鼠移植瘤生长的抑制作用及对血管内皮生长因子（VEGF）的表达和微血管密度（MVD）的影响。方法建立肝癌H22小鼠模型后,将小鼠随机分组4组,5％葡萄糖20mL／kg阴性对照组、环磷酰胺20mg／kg阳性对照组、奥沙利铂0．75mg／k和1．5mg／kg组,腹腔等容积注射给药,连续10d。第11天处死小鼠,计算瘤重抑制率,用免疫组化方法测定肿瘤组织中的VEGF和CD34的表达。结果1．5mg／kg奥沙利铂组的瘤重明显低于阴性对照组（P〈0．01）,而且肿瘤组织中的VEGF和CD34的表达也明显低于阴性对照组（P〈0．01）。结论小剂量奥沙利铂对H22肝癌荷瘤小鼠抑瘤作用明显,能抑制肿瘤组织中VEGF和MVD的表达;小剂量奥沙利铂在体内可能具有抑制肿瘤组织血管生成的作用。     

BAY11-7082抑制人卵巢癌裸鼠移植瘤生长及其机制

目的 初步探讨IκBα磷酸化抑制剂BAY11-7082对人卵巢癌裸鼠移植瘤生长及血管生成的影响。方法 建立人卵巢癌细胞系COC1裸鼠皮下移植瘤模型,腹腔注射BAY11-7082,测量移植瘤的质量,并用TUNEL法检测移植瘤细胞凋亡情况。同时应用免疫组化染色,检测瘤组织内的NF-κB p65、血管内皮生长因子（VEGF）和FⅧ蛋白表达,并计数微血管密度（MVD）。结果 BAY11-7082组移植瘤质量显著低于阴性对照组（P〈0.05）,抑制率为47.60%;BAY11-7082组AI值高于对照组（P〈0.05）;PI值小于对照组（P〈0.05）,BAY11-7082组NF-κB p65、VEGF与MVD均显著低于对照组（P〈0.05）。结论 BAY11-7082可能通过降低VEGF表达,抑制卵巢癌COC1裸鼠移植瘤生长。     

COX-2和VEGF在胃癌组织中的表达及与血管发生的关系

目的探讨COX-2、VEGF在胃癌中的表达及与血管发生的关系。方法采用免疫组织化学S-P法检测56例胃癌和28例正常胃黏膜组织中COX-2、VEGF的表达，计算MVD值，并进行统计学分析。结果56例胃癌中COX-2、VEGF的阳性率分别为67．86％（38／56）和69．64％（39／56），与正常胃黏膜表达相比有统计学差异（P〈0．05）。胃癌中MVD的表达量（51．04±13．26）高于正常胃黏膜表达量（18．34±8．26），有统计学差异（P〈0．05）。胃癌中COX-2、VEGF的表达在不同临床分期、淋巴结转移状态有统计学差异（P〈0．05）。COX-2、VEGF与MVD表达呈正相关（r=0．763，P〈0．01；r=0．825，P〈0．01），COX-2与VEGF的表达也呈正相关（r=0．621，P〈0．01）。结论COX-2、VEGF在胃癌的发生、发展中起着重要作用，对胃癌的血管新生和发生发展有促进作用     

反义微小RNA-21基因治疗改善膀胱癌化疗敏感性的实验研究及临床应用前景

目的建立裸鼠原位膀胱癌移植瘤模型,探讨反义微小RNA-21（miRNA-21）腺病毒载体＋化疗药物丝裂霉素C（mitomycinC.MMC）对裸鼠膀胱癌发生、发展及转移的作用,为评价基因治疗改善膀胱癌化疗耐药性的策略提供实验依据。方法分别用携带反义miRNA-21载体＋MMC和单独使用携带反义miRNA-21载体或MMC经尿道膀胱灌注治疗成瘤裸鼠,观察肿瘤生长及盆腔淋巴结转移情况,同时应用二苯基溴化四氮唑蓝（MTT）法检测瘤细胞的增殖,原位末端标记（TUNEL）法测定瘤细胞的凋亡。结果 MTT法检测结果显示,联合用药组,反义miRNA-21组和MMC组细胞的增殖率分别是25.6%±6.9%,50.4%±8.3%,37.9%±2.8%,组间比较,差异具有统计学意义（P〈0.05）。TUNEL法测定结果提示：瘤细胞凋亡率依次为：联合用药组（81.5%±6.1%）,反义miRNA-21组（49.5%±7.3%）,MMC组（56.8%±3.9%）,组间比较P〈0.05。联合用药组10只成瘤裸鼠中无一只出现盆腔淋巴结转移,转移率为零,而单独应用载体或化疗组各发生4只转移,转移率为40%（4/10）,组间差异具有统计学意义（P〈0.01）。结论基因治疗＋化疗联合治疗人膀胱癌裸鼠原位移植瘤的策略明显优于只用基因或化疗的单一治疗方法。     

槐耳清膏对结肠癌SW480细胞生长抑制作用及机制研究

目的:探讨槐耳清膏对体外培养人结肠癌SW480细胞生长抑制作用及其作用机制。方法:采用甲基噻唑基四唑(MTT)比色法检测槐耳清膏对SW480生长抑制作用并探求最佳作用浓度;体外培养SW480细胞48 h,随机分为常氧组(NC组)、低氧组(HC组)和低氧槐耳组(HH组)。半定量RT-PCR检测SW480细胞血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达水平,Western blot检测蛋白表达水平。结果:槐耳清膏对SW480细胞抑制率随药物浓度增加而上升,1mg/ml时抑制率最大(66.7%),与5-FU组(浓度为10μg/ml)相比无统计学意义。HH组和HC组VEGF mRNA表达均显著高于NC组4.71±0.07,4.54±0.02和1.19±0.03(P0.05),但HH组与HC组比较差异无统计学意义。HC组VEGF蛋白表达显著高于NC组0.66±0.03和0.38±0.02(P0.05),HH组较HC组VEGF蛋白表达均显著下降0.37±0.03和0.66±0.03(P0.05)。结论:槐耳清膏可抑制SW480细胞生长,1 mg/ml时抑制率最大。机制为槐耳清膏下调SW480细胞内VEGF蛋白表达抑制肿瘤。     

罗哌卡因复合小剂量舒芬太尼蛛网膜下腔注射应用于择期剖宫产术的临床研究

目的观察罗哌卡因复合小剂量舒芬太尼蛛网膜下腔注射应用于择期剖宫产术的麻醉效果，探索两药联合应用的合理配伍剂量。方法将择期120例腰硬联合麻醉下剖宫产孕妇随机分成四组，Ⅰ组：1．5ml 0．75％罗哌卡因＋1 ml 10％葡萄糖＋0．5ml舒芬太尼5μg；Ⅱ组：1．5ml 0．75％罗哌卡因＋1ml 10％葡萄糖＋0．5ml舒芬太尼7．5μg；Ⅲ组：1．5ml 0．75％罗哌卡因＋1ml 10％葡萄糖＋0．5ml舒芬太尼10．0μg；Ⅳ组：2．0ml 0．75％罗哌卡因＋1ml 10％葡萄糖，每组30例。比较各组产妇椎管内阻滞的效果、术中牵拉反应的抑制程度、围术期并发症的发生率及新生儿脐带血气、Apgar评分的统计学差异。结果Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组较Ⅰ组术中硬膜外追加局麻药量减少（X^2=10．23，P均〈0．05）；Ⅳ组的寒战和低血压的发生率低（X^2分别=12．38、14．20，P均〈0．05）；Ⅰ、Ⅱ组与Ⅲ组比较．围术期瘙痒的发生率降低（X^2=13．45，P均〈0．05）。Ⅰ、Ⅱ组与Ⅲ、Ⅳ纽相比恶心、呕吐的发生率偏低（X^2分别=9．87、10．05，P均〈O．05）。新生儿娩出后的Apgar评分（胎儿娩出即刻、娩出后10min）、从切皮至娩出时间及新生儿脐带血气分析结果（pH、PCO2、PO2、SBE）的比较均无明显统计学差异（X^2分别=2．05、2．19、3．32、2．49、1．96、2．97、1．78，P均〉0．05）。各组感觉麻醉平面、产妇呼吸抑制、术后头痛发生率及Bromage评分〉3的发生率也同样无统计学差异（X^2分别=2．59、3．42、2．45、1．87，P均〈0．05）。结论罗哌卡因复合舒芬太尼蛛网膜下腔注射麻醉效果确切。可安全应用于剖宫产术。舒芬太尼7．5μg（H组）复合11．25mg罗哌卡因蛛网膜下腔注射行择期剖宫产术的围术期并发症相对较少，该配伍相对更合理。     

三维组织培养药物敏感性检测技术在胃癌术后个体化化疗中的应用研究

目的 研究三维组织培养药物敏感性检测（three—dimensional histocuhure drugresponseassay。TDHDRA）技术在指导胃癌术后个体化化疗中的临床价值。方法将147例胃癌患者随机分为肿瘤药敏组和经验化疗组。肿瘤药敏组应用TDHDRA技术,检测5-氟尿嘧啶（5-FU）、多西他赛（DTX）、顺铂（DDP）、紫杉醇（TXT）、奥沙利铂（OXA）、表阿霉素（EADM）、伊立替康（CPT-11）这7种单药和DTx＋DDPI＋（5-FU）、EADM＋DDP＋（5-FU）、DDP＋（5-FU）、OXA＋（5-FU）、CPT-11＋（5-FU）这5组联合用药对胃癌组织的抑制率,计算胃癌组织对药物的敏感率,并通过随访,记录两组的无进展生存期（progressionfreesurvival。PFS）和总生存期（overallsurvival,os）,比较两组的化疗效果。结果单药中5-FU对胃癌组织的抑制率和敏感率最高,分别为（44．8±12．1）％和57．9％;联合用药中DTX＋DDP＋（5-FU）组合对胃癌组织的抑制率、敏感率最高,分别为（64．3±15．6）％、75.4％。经验化疗组与肿瘤药敏组分别有16例、7例出现复发转移;肿瘤药敏组中位PFS（162d）显著高于经验化疗组（84d）,且差异有统计学意义（P〈0．05）;肿瘤药敏组OS（476d）虽高于经验化疗组（392d）,但两组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论TDHDRA技术检测结果符合临床实际,在指导胃癌术后个体化化疗中有很好的临床价值。     

槐耳清膏对结肠癌SW480细胞增殖能力影响及其机制探讨

目的：探索槐耳清膏对体结肠癌SW480细胞增殖能力影响及其机制。方法：采用噻唑蓝（MTT）比色法检测槐耳清膏对SW480细胞增殖能力的作用,并探求最佳作用浓度;将体外培养细胞随机分为常氧组（NC组）、低氧组（HC组）和低氧槐耳组（HH组）,逆转录聚合酶链反应（RT PCR）检测各组血管内皮生长因子（VEGF）mRNA表达水平,Western blot检测蛋白表达水平。结果：槐耳清膏对SW480细胞抑制率随药物浓度增加而上升,1 mg/mL时抑制率最大（66.7%）,与氟尿嘧啶组（浓度为10μg/mL）相比无统计学意义。HH组和HC组VEGF mRNA表达均显著高于NC组,分别为4.71±0.07,4.54±0.02和1.19±0.03（P〈0.05）,但HH组与HC组比较差异无统计学意义。HC组VEGF蛋白表达显著高于NC组,分别为0.66±0.03和0.38±0.02（P〈0.05）,HH组较HC组VEGF蛋白表达均显著下降,分别为0.37±0.03和0.66±0.03（P〈0.05）。结论：槐耳清膏可抑制SW480细胞增殖,1 mg/mL时抑制率最大。其机制为槐耳清膏下调细胞内VEGF蛋白表达,从而抑制肿瘤生长。     

小肾癌4D THRIVE动态增强扫描参数与肿瘤血管生成的相关性研究

目的：探讨小肾癌4D THRIVE动态增强扫描参数与肿瘤血管生成的关系。方法：对30例临床疑似小肾癌患者进行4D THRIVE动态增强扫描,分别计算肿瘤感兴趣区（ROI）及瘤周正常肾组织的动态增强参数：最大增强斜率（Smax）、增强峰值（PH）及峰值时间（Tpeak）。病理标本进行免疫组织化学染色,测定微血管密度（MVD）计数和血管内皮生长因子（VEGF）表达,评价小肾癌各动态增强参数与MVD、VEGF的相关性。结果：小肾癌动态增强参数Smax（r=0.707,P＜0.01）、PH（r=0.687,P＜0.01）与MVD表达呈正相关,Tpeak（r=-0.413,P＜0.05）与MVD表达呈负相关。小肾癌MVD计数（63.07±14.73）个/视野,高于瘤周正常肾组织（P=0.002）;67％（20/30）的小肾癌VEGF表达阳性,高于瘤周正常肾组织（P=0.001）。结论：小肾癌4D THRIVE动态增强扫描部分参数与MVD、VEGF相关,在评价小肾癌血管生成方面有重要价值。     

塞来昔布/希罗达节拍化疗治疗老年晚期胃癌的临床研究

目的：评价塞来昔布（Celecoxib）联合希罗达（Xeloda）节拍化疗（metronomic chemotherapy）治疗老年晚期胃癌的客观疗效及毒副反应,探讨老年晚期胃癌高缓解率、低毒性的治疗方法。方法：45例患者随机分为两组。治疗组23例,采用塞来昔布与希罗达节拍化疗,Celecoxib 200 mg Bid,Xeloda 500 mg Bid,连续服药,直至病情进展。4周为一周期,至少1周期后评定疗效。对照组22例,采用FOLFOX4方案化疗：L-OHP 85 mg/m2 iv gtt 2 h d1,CF 200mg/m2 iv gtt 2 h d1、d2,5-FU400 mg/m2 iv bolus d1、d2,5-FU600 mg/m2 civ 22 h d1、d2。每2周重复,4周为1周期,至少1周期后评定疗效。结果：45例患者均获得随访。治疗组与对照组总有效率（RR）、疾病控制率（DCR）、生活质量改善率（QOL）分别为47.8%（11/23）、50.0%（11/22）;91.3%（21/23）、63.6%（14/22）;82.6%（19/23）、54.5%（12/22）。两组患者中位疾病进展时间（mTTP）、中位生存期（MST）分别为9.5个月、5.5个月;13.5个月、9个月。治疗组与对照组1年生存率分别为56.5%（13/23）、27.3%（6/22）。两组总有效率差异无统计学意义（P〉0.05）,生活质量改善率、疾病控制率、1年生存率差异有统计学意义（P〈0.05）。治疗组毒副反应轻微。结论：塞来昔布联合希罗达节拍化疗治疗老年晚期胃癌安全、有效,患者得到生存受益,依从性好,效价比高,值得临床进一步研究。     

环氧化酶-2在白血病患者骨髓细胞中表达及与血管新生的关系

本研究探讨环氧化酶-2（COX-2）在白血病骨髓血管新生中的作用。取初发白血病患者（51例）和正常对照组（18例）骨髓液及骨髓活检组织,采用免疫组织化学方法测定骨髓微血管密度（MVD）,ELISA法测定骨髓血清血管内皮生长因子（VEGF）含量,流式细胞术（FCM）检测骨髓细胞内COX-2的表达。结果表明：白血病患者骨髓MVD、VEGF含量、骨髓细胞COX-2阳性率与对照组相比均明显增高,p〈0．05。MVD、VEGF、COX-2阳性率三者相关系数分别为0．614,0．423,0．577（P〈0．05）。结论：白血病可能同实体瘤一样也是一种血管新生依赖性恶性肿瘤,COX-2可能与VEGF协同促进白血病骨髓血管新生     

抵抗素样分子α在胃癌中的表达及其与微血管形成相关性的研究

目的:检测抵抗素样分子α(resistin-like moleculeα,RELM-α)在胃癌中的表达情况,研究其在胃癌预后判断中的作用及其可能的相关机制,为疾病的治疗提供依据。方法:收集92例胃癌组织及相应的癌旁组织标本,行免疫组织化学染色,定量检测其中RELM-α和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达情况,并分析其与患者的性别、年龄、疾病的分期、肿瘤直径、组织分化、大体分型间的关系。同时,测定2种标本中的CD34表达情况,分析肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD),探讨RELM-α水平与肿瘤微血管生成间的关系。结果:RELM-α及VEGF在胃癌组织中的阳性表达率分别为64.1%和83.6%,而在癌旁组织中的阳性表达率分别为16.3%和27.1%,MVD在胃癌组织中的测定值(17.23±8.94)高于癌旁组织(6.58±2.32),差异有统计学意义(P<0.05)。不同性别、年龄、组织分化、大体分型的胃癌患者间的RELM-α表达水平差异无统计学意义,但在不同肿瘤的直径及分期的患者间差异有统计学意义(P<0.05),同时统计学分析显示RELM-α的表达与MVD、VEGF的表达密切相关。结论:RELM-α在胃癌组织中高表达,可能成为评估疾病预后的客观指标之一,且其在疾病进展中参与了微血管的形成。