芒果苷对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及机制

目的 研究芒果苷对糖尿病大鼠肾损伤的保护作用及机制.方法 利用腹腔注射链脲佐菌素诱导建立糖尿病大鼠模型,并进行随机分组:正常对照组、糖尿病模型组及低 [15 mg/(kg·d)]、中[30 mg/(kg·d)]和高剂量[60 mg/(kg·d)]芒果苷组.12周时,检测肾重、肾脏肥大指数、血糖、24 h尿蛋白量,观察肾组织形态改变,免疫组织化学法和Western Blotting法测定肾组织转化生长因子β、基质金属蛋白酶2和组织型金属蛋白酶抑制剂2的表达.结果 与正常对照组大鼠相比,糖尿病组肾脏肥大指数、24 h 尿蛋白量显著上升;肾组织中转化生长因子β和组织型金属蛋白酶抑制剂2表达均明显增加,而基质金属蛋白酶2表达则明显降低.与糖尿病组相比,芒果苷治疗组肾脏肥大指数、24 h 尿蛋白量显著下降(P<0.01);肾组织中转化生长因子β和组织型金属蛋白酶抑制剂2表达均明显减少(P<0.05或P<0.01),而基质金属蛋白酶2表达明显升高(P<0.05或P<0.01).结论 芒果苷对链脲佐菌素诱导的糖尿病肾损伤具有明显的保护作用,其机制可能与调节糖尿病肾病发病中的细胞外基质组成有关,其中转化生长因子β、组织型金属蛋白酶抑制剂2和基质金属蛋白酶2在糖尿病肾病变发生、发展中具有重要作用.     

血管内皮细胞生长因子和内抑素在糖尿病大鼠肾脏中的表达及意义

目的研究血管内皮细胞生长因子（VEGF）和内抑素在糖尿病大鼠肾脏中的表达及意义。方法应用链脲佐菌素诱导制作2型糖尿病大鼠肾病模型,设正常对照组和模型组,分别于2、4、8、12周测血生化和24h尿蛋白定量,采用RT-PCR方法观察大鼠肾脏VEGF和内抑素mRNA的表达,并进行相关性分析。结果VEGF和内抑素2周时模型组即明显上调（P〈0．05）,第4、8、12周较对照组同期明显上调（P〈0．01）;Spearman相关分析表明,VEGF与内抑素的表达呈正相关。结论VEGF和内抑素在糖尿病肾病中的表达均上调,可能与糖尿病肾脏微血管病变有关。     

糖尿病大鼠组织非酶糖化、细胞凋亡与糖尿病肾病的关系

目的 探讨非酶糖化、凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax与糖尿病肾病(DN)的关系.方法 雄性Wistar大鼠30只,随机平均分为3组,正常对照组、DN组、糖尿病氨基胍(10mg·kg<'-1>·d<'-1>)治疗组,腹腔注射链脲佐菌素(60 mg/kg)诱发糖尿病.16 w后,处死大鼠,分离肾脏,测定组织非酶糖化,观察Bcl-2、Bax的表达,取部分肾皮质电镜细胞计量、观察细胞凋亡的形态学变化.结果 ①与正常对照组相比,DN组肾脏皮质非酶糖化明显升高(P<0.001),氨基胍治疗组非酶糖化明显较DN组降低(P<0.01),而血糖无明显变化.②DN组肾脏Bcl-2蛋白表达减少、Bax蛋白表达增加,治疗组的Bcl-2蛋白表达较DN组增多,而Bax蛋白表达较DN组减少.③透射电镜下见DN组肾脏肾小管上皮细胞呈典型的凋亡形态学改变,治疗组大鼠肾组织细胞凋亡改变明显减轻.④DN组肾小球基底膜增厚,系膜区域扩大,治疗组病变减轻.结论 ①非酶糖化通过调节Bcl-2,Bax蛋白的表达诱导细胞凋亡,而参与DN的发生与发展.②非酶糖化抑制剂可调节Bax,Bcl-2的表达抑制细胞凋亡,明显改善糖尿病大鼠肾脏结构与功能,延缓DN的发展.     

内质网应激相关的凋亡在糖尿病大鼠肾脏组织中的作用

目的探讨内质网应激相关的凋亡在糖尿病大鼠肾脏组织中的作用和机制。方法雄性SD大鼠随机分为3组:链脲佐菌素(STZ)致糖尿病大鼠6周、12周模型组及正常对照组。采用腹腔注射STZ 60 mg/kg制备大鼠糖尿病模型,分批处死,处死前测量大鼠24 h尿蛋白排泄量,取每只大鼠右肾用免疫组织化学法及半定量RT-PCR方法检测肾脏组织中GRP78、Caspase12蛋白及mRNA的表达;应用TUNNEL法检测肾脏细胞凋亡情况。结果GRP78、Caspase12在正常大鼠肾脏组织中少量表达,主要分布于肾脏内肾小球及肾小管细胞,糖尿病6周组GRP78、Caspase12在肾脏肾小球及肾小管细胞的表达量升高,糖尿病12周组表达量更高。结论内质网应激参与了糖尿病肾病的发病机制,肾脏细胞的内质网应激能力及相应的细胞凋亡随糖尿病病程延长而增强。     

棉酚对糖尿病大鼠肾脏转化生长因子β1和纤维连接蛋白及11β类固醇脱氢酶表达的影响

目的 观察棉酚对2型糖尿病大鼠肾脏病理变化影响,并探讨其作用机制. 方法 雄性SD大鼠随机分成正常组、糖尿肾病组及棉酚干预组.检测各组的血糖、胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平;用光镜及电镜观察大鼠肾脏的组织形态学改变;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肾脏组织转化生长因子β1(TGF-β1)、纤维连接蛋白(FN)、11β类固醇脱氢酶(11β-HSD1)、11β-HSD2mRNA含量;免疫组织化学法测定大鼠肾脏TGF-β1、FN表达水平. 结果 糖尿病组大鼠血糖、胆固醇、血低密度脂蛋白胆固醇水平高于正常组(P<0.01),肾小球体积增大,肾小球毛细血管基底膜不规则增厚,足细胞突起、肿胀,可见足突融合,阳性基质增多.肾组织TGF-β1、FN基因mRNA表达及蛋白表达高于正常组(P<0.01),11β-HSD2mRNA表达低于正常组(P<0.05);棉酚干预组血糖低于糖尿病组(P<0.01),血胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平有下降趋势;肾脏组织病理改变减轻,TGF-β1、FNmRNA表达及蛋白低于糖尿病组(0.16±0.02、0.22±0.05和0.24±0.06、0.33±0.07,P<0.05),11β-HSD1、11β-HSD2mRNA表达与糖尿病组比较无明显改变. 结论 棉酚可改善2型糖尿病大鼠肾脏的病理改变,其作用机制与降血糖,进而抑制糖尿病大鼠肾脏TGF-β1、FN表达,阻止细胞外基质的堆积有关.     

银杏达莫注射液对实验性2型糖尿病大鼠肾脏TGF-β1表达的影响

目的 探讨银杏达莫注射液对2型糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏转化生长因子(TGF)-β1表达的影响,从而探讨银杏达莫注射液对DN的治疗作用.方法 选取实验大鼠60只,以高热量饲料加小剂量链脲佐菌素(STZ)建立DN大鼠模型,将大鼠随机分为正常组、DN组和治疗组(每组各10只),观察各组大鼠一般情况及24 h蛋白尿、血糖、肾脏病理改变;采用免疫组化法检测TGF-β1的表达.结果 糖尿病组表现为大量蛋白尿、肾组织病理损害、TGF-β1高表达,与正常组有显著差异;治疗组24 h尿蛋白与正常组相比显著增高,与DN组相比有显著降低,肾组织病理损害明显减轻,TGF-β1表达高于正常组,低于ND组,差异显著.结论 银杏达莫注射液可以通过降低TGF-β1表达对2型糖尿病DN大鼠肾脏起到保护作用,延缓DN发展.     

GPR39 mRNA在糖尿病大鼠不同组织中表达水平的差异

目的 研究GPR39 mRNA在正常大鼠及糖尿病大鼠不同组织中的表达水平差异,探讨其在糖尿病发生发展中的作用.方法 采用实时荧光定量PCR仪检测正常大鼠与糖尿病大鼠胰腺组织、胃组织及肾脏中GPR39 mRNA相对表达水平.结果 与正常组相比,GPR39 mRNA在糖尿病大鼠胰腺组织中表达上调(P<0.05),在胃组织表达下调(P<0.01),在肾脏中表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 GPR39可能与内分泌功能及代谢功能有关,并且在糖尿病的发展中起保护作用.     

苯那普利、缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏血管紧张素转换酶2表达的影响

目的观察糖尿病大鼠肾脏血管紧张素转换酶2(ACE2)的表达及苯那普利、缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏ACE2表达水平的影响,初步探讨ACE2在糖尿病肾病发病机制中的作用。方法3月龄的SD雄性大鼠,腹腔内注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,随机分为3组,每组7只,分别为糖尿病模型组、苯那普利治疗组[10mg/(kg.d)]、缬沙坦治疗组[10mg/(kg.d)],SD雄鼠7只作为正常对照组。给药3月后,处死动物、留取标本,反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定肾脏中ACE和ACE2 mRNA的表达水平,免疫组化法比较肾脏中ACE2蛋白的表达水平。结果与正常对照组相比,糖尿病模型组大鼠ACE、ACE2 mRNA表达分别下降30.7%、50.1%(P<0.05)。与糖尿病模型组比较,苯那普利组ACE mRNA的表达明显增加(P<0.01),ACE2 mRNA的表达无明显差异;缬沙坦组ACE mRNA的表达治疗后没有明显变化,而ACE2 mRNA和蛋白的表达均有明显增加,分别增加68.7%和69.8%(P<0.01)。结论1)肾脏局部ACE2表达水平的降低可能是糖尿病大鼠肾损害的发病机制之一;2)ARB可能是通过增加肾脏局部ACE2的表达而发挥肾脏保护作用。     

伊贝沙坦对糖尿病大鼠肾脏TIMP-2表达的影响

目的观察伊贝沙坦对糖尿病大鼠肾脏组织金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)表达的影响。方法SPF级成年雄性SD大鼠随机分为正常对照(N)组(11=8)、糖尿病肾病(DN)组(n=9)和伊贝沙坦(Irb)治疗(DNI)组(n=10)。8周后免疫组化法观察其在肾脏的表达。结果TIMP-2在N组大鼠有微弱表达，DN组的表达较N组明显增加，DNI组的表达较DN组减弱。结论TIMP-2在DN早期表达增加，Irb能够抑制其表达，减少细胞外基质(ECM)聚积，发挥肾脏保护作用。     

苯那普利、缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏紧张素转换酶2表达的影响

目的 观察糖尿病大鼠肾脏血管紧张素转换酶2(ACE2)的表达及苯那普利、缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏ACE2表达水平的影响,初步探讨ACE2在糖尿病肾病发病机制中的作用.方法 3月龄的SD雄性大鼠,腹腔内注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,随机分为3组,每组7只,分别为糖尿病模型组、苯那普利治疗组[10 mg/(kg·d)]、缬沙坦治疗组[10 mg/(kg·d)],SD雄鼠7只作为正常对照组.给药3月后,处死动物、留取标本,反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定肾脏中ACE和ACE2 mRNA的表达水平,免疫组化法比较肾脏中ACE2蛋白的表达水平.结果 与正常对照组相比,糖尿病模型组大鼠ACE、ACE2 mRNA表达分别下降30.7%、50.1%(P＜0.05).与糖尿病模型组比较,苯那普利组ACE mRNA的表达明显增加(P＜0.01),ACE2 mRNA的表达无明显差异;缬沙坦组ACE mRNA的表达治疗后没有明显变化,而ACE2 mRNA和蛋白的表达均有明显增加,分别增加68.7%和69.8%(P＜0.01).结论 1)肾脏局部ACE2表达水平的降低可能是糖尿病大鼠肾损害的发病机制之一;2)ARB可能是通过增加肾脏局部ACE2的表达而发挥肾脏保护作用.     

解聚复肾宁对糖尿病大鼠肾组织基质金属蛋白酶-9、金属蛋白酶组织抑制剂-1表达的影响

目的观察解聚复肾宁(JJFSN)对糖尿病(DM)大鼠肾组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)表达及肾脏保护作用机制。方法建立STZ诱导的DM SD大鼠模型,将成模DM大鼠随机分成4组:模型组、JJFSN组、厄贝沙坦组、JJFSN+厄贝沙坦组,同时设正常对照组。各组大鼠采用相应的干预措施处理12 w。检测各组大鼠第12周时肾重/体重、血糖、尿素氮、血肌酐、尿白蛋白排泄率(UAER),免疫组化法检测肾组织MMP-9、TIMP-1表达,透射电镜观察肾脏超微结构。结果模型组肾脏超微结构改变明显,血糖、UAER、尿素氮、血肌酐、肾重/体重显著增高。模型组大鼠肾组织TIMP-1的表达较正常对照组明显上调(P<0.01),JJFSN组、厄贝沙坦组、JJFSN+厄贝沙坦组肾组织TIMP-1表达明显下调(P<0.01),但仍高于正常对照组(P<0.01),JJFSN+厄贝沙坦组下调最明显(P<0.01)。DM模型组大鼠肾组织MMP-9的表达较正常对照组明显下调(P<0.01),解聚复肾宁组、厄贝沙坦组、解聚复肾宁+厄贝沙坦组肾组织MMP-9表达明显上调(P<0.01),但仍低于正常对照组(P<0.01),解聚复肾宁+厄贝沙坦组上调最明显(P<0.01)。结论 MMP-9、TIMP-l的表达变化与肾小球细胞外基质(ECM)降解减少相关,可能促进了糖尿病肾病(DN)的发生,JJFSN可能通过干预这种表达变化,减缓DN的发生和发展。     

环氧合酶-2在高糖刺激的系膜细胞和糖尿病肾病模型大鼠肾皮质的表达及意义

目的探讨环氧合酶-2(COX-2)与糖尿病肾脏病变的关系及在糖尿病肾病发病中的意义。方法Westernblot检测了STZ诱导的糖尿病肾病模型大鼠(DN模型组)肾皮质COX-2的表达,以正常大鼠(对照组)肾皮质做对照;并检测了高糖(HG组)及前列腺素E2(PGE2组)刺激的大鼠肾小球系膜细胞COX-2表达,同时还检测了HG组和PGE2组分别刺激及共同刺激(HG PGE2组)后肾小球系膜细胞的总蛋白量,以正常培养的大鼠肾小球系膜细胞(NG组)作为对照。结果HG组COX-2蛋白表达较NG组明显增加(P<0.01);PGE2也可诱导COX-2的表达增加(P<0.01)。STZ组大鼠肾脏COX-2表达均较CTR组增加(P<0.01);HG组和PGE2组细胞内总蛋白量均较NG组增高(P<0.05),HG PGE2组细胞内总蛋白量较NG组明显增加(P<0.01),HG PGE2组与单纯PGE2刺激组比较也增加(P<0.05)。结论COX-2在高糖和PGE2刺激的肾小球系膜细胞及糖尿病肾病大鼠肾皮质的表达增加,高糖和PGE2可导致肾小球系膜细胞肥大,COX-2可能是导致糖尿病早期肾脏肥大的主要因素之一。     

金属蛋白酶-2和金属蛋白酶组织抑制物-1与糖尿病肾病关系的实验研究

目的　观察链脲佐菌素 (STZ)实验性糖尿病大鼠肾脏基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )及金属蛋白酶组织抑制物 1(TIMP 1)蛋白的表达及功能、形态学改变 ,探讨MMP 2、TIMP 1在糖尿病肾病(DN)发生机制中的意义。　方法　 2 0只雄性Wistar大鼠随机分为糖尿病组和正常对照组 ,分别于第1、2、4、6、8周测定尿白蛋白排泄率 (UAER) ,第 9周用Western印迹方法检测MMP 2、TIMP 1蛋白表达水平 ,电镜观察肾小球基底膜厚度 (GBMT)。　结果　糖尿病组较正常组TIMP 1蛋白表达明显增加 ,MMP 2蛋白表达显著降低 (P <0 .0 1)。 4、6、8周UAER显著增加 ,GBMT明显增厚 (P <0 .0 1)。电镜发现糖尿病组肾小球基底膜弥慢性增厚 ,局部有系膜细胞插入和双轨征。　结论　持续高血糖可使大鼠肾脏MMP 2下降 ,TIMP 1增加。导致肾小球基底膜增厚 ,UAER增加。MMP 2、TIMP 1失衡可能对糖尿病肾病功能和形态学改变有重要意义。     

替米沙坦对糖尿病大鼠肾脏表达E-选择素的影响

目的 探讨替米沙坦对E-选择素(E-selectin)表达的影响和对糖尿病肾病(DN)的保护作用.方法 左肾切除后单次腹腔注射50 mg/kg链脲佐菌素制备糖尿病(DM)大鼠模型,随机分成DM组、替米沙坦组(5 mg· kg-1 ·d-1)和正常对照组.用免疫组化及Western印迹的方法检测12 w后大鼠肾脏E-selectin表达的改变.结果 与正常对照组相比,DM组及替米沙坦组E-selectin表达明显增加(P＜0.01);而替米沙坦组E-selectin表达显著低于DM组(P＜0.01).结论 替米沙坦可抑制DM大鼠肾脏E-selectin的表达,延缓DN发生、发展.     

非诺贝特对糖尿病大鼠肾组织NF-κB表达的影响及意义

目的观察非诺贝特对糖尿病大鼠肾组织核转录因子-κB（NF-κB）表达的影响。方法将36只健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、非诺贝特治疗组,模型组及治疗组以链脲佐菌素诱发糖尿病,治疗组予非诺贝特灌胃,第4、8周观察各组脂代谢、血肌酐（SCr）、24h尿蛋白定量,采用免疫组化染色检测肾组织NF-κB表达水平。结果模型组TC、TG、SCr、24h尿蛋白定量水平及NF-κB表达较同期正常组和治疗组均明显增加。结论非诺贝特可抑制NF-κB的活性从而发挥对糖尿病肾病的保护作用。     

益肾化湿颗粒治疗大鼠糖尿病肾病中ERK表达及意义

目的探讨益肾化湿颗粒在治疗大鼠糖尿病肾病中的ERK表达及其意义。方法将40只SD(Sprague-Dawley)大鼠随机分为正常对照组(N组)、糖尿病肾病组(DN组)、益肾化湿颗粒治疗组(DN+Y组)、贝那普利治疗组(DN+B组)。对照组用等量柠檬酸缓冲液腹腔注射,糖尿病肾病组和各治疗组制备糖尿病模型,取血检测血糖(GLU)、血清肌酐(SCr)、血清尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白定量,以免疫组化方法检测各组肾组织p-ERK1/2表达及其意义。结果治疗后8周,DN组大鼠血糖明显升高,血清肌酐(SCr)、血清尿素氮(BUN)、24h尿蛋白定量等指标与N组相比明显升高,二者差异有统计学意义(P0.05);DN组肾组织内p-ERK1/2的表达与N组相比明显增高,二者差异有统计学意义(P0.05);其他治疗组的血糖、SCr、BUN、24 h尿蛋白定量、p-ERK1/2表达等指标与DN组相比,差异无统计学意义(P0.05)。结论在糖尿病肾病的产生、发展过程中,ERK参与其中,其表达增加可能对DN的进一步发展造成影响;益肾化湿颗粒能够对DN大鼠肾皮质中ERK的活性予以有效限制,从而对DN肾脏起到一定的保护作用,这说明益肾化湿颗粒在糖尿病肾病的治疗中表达明显,具有较高的临床应用价值。     

黄芩苷对糖尿病大鼠组织醛糖还原酶活性及肾脏细胞凋亡的影响

目的研究醛糖还原酶(AR)、凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax与糖尿病肾病(DN)的关系,探讨醛糖还原酶抑制剂(ARIs)对DN的治疗作用。方法雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、糖尿病组、依帕司他组、黄芩苷组,每组10只。除正常对照组外,其余各组大鼠腹腔注射STZ(60mg/kg),72h后建立糖尿病大鼠模型。依帕司他组灌胃依帕司他10mg.kg-1.d-1,黄芩苷组灌胃黄芩苷150mg.kg-1.d-1。16w后处死大鼠,测定晶体、肾脏组织AR活性,观察Bcl-2、Bax的表达,取部分肾皮质病理观察、电镜观察细胞凋亡的形态学变化。结果与正常对照组相比,糖尿病组晶体、肾脏皮质AR活性明显升高(P<0.001),两治疗组AR活性明显较糖尿病组降低(P<0.01),而血糖无明显变化。糖尿病组肾脏Bcl-2、Bax蛋白表达增加,治疗组的Bcl-2蛋白表达较糖尿病组增多,而Bax蛋白表达较糖尿病组减少。透射电镜下见糖尿病组肾脏肾小管上皮细胞呈典型的凋亡形态学改变,治疗组大鼠肾组织细胞凋亡改变明显减轻。糖尿病组肾小球基底膜增厚,系膜区域扩大,治疗组病变减轻。结论ARIs通过抑制AR活性,调节Bax、Bcl-2的表达抑制细胞凋亡,延缓DN的发展。黄芩苷对AR抑制作用与依帕司他相似。     

血管生成素1和血栓调节蛋白1在STZ鼠肾脏中的表达及其意义

目的：探讨血管生成素1（angiopoietin-1,Ang-1）和血栓调节蛋白1（thrombomodulin-1,TM-1）在糖尿病鼠肾脏中的表达变化及其与肾脏微血管病变的关系. 方法：STZ诱导的糖尿病大鼠肾病模型,设正常对照和模型组,于2、4、8、12、16、20、24周,采用免疫组化观察肾脏Ang-1和TM-1表达变化以及RT-PCR观察肾脏Ang-1mRNA表达,并行相关性分析. 结果：糖尿病组4和8周时肾脏Ang-1mRNA表达显著上调, 24周时明显低于对照组;糖尿病组4～24周免疫组化显示肾小球Ang-1着染均显著高于对照组,峰值在4～8周,12周后逐渐下调;糖尿病组2～20周肾小球TM-1明显增强;Ang-1和TM-1呈正相关. 结论：糖尿病肾脏存在Ang-1和TM-1的异常改变,表现为早中期表达上调,后期表达下调,并且这种改变可能与糖尿病肾脏新生血管的生成有关.     

益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织血管内皮生长因子表达的影响

目的研究益肾胶囊对糖尿病肾病（DN）大鼠模型肾组织血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响,探讨益肾胶囊对DN的保护机制。方法将体重为200g～250g正常Wistar健康雄性大鼠24只随机分为正常对照组、模型组、益肾胶囊治疗组。模型组和治疗组分别用STZ诱导建立DN大鼠模型,成模2d后治疗组每天给予益肾胶囊625mg/（kg.d）灌胃,模型组和正常对照组每天仅给予等量生理盐水灌胃。监测血糖、体重、24h尿蛋白的变化,测定血生化,采用免疫组织化学方法 ,观察大鼠肾小球VEGF的分布及其强度变化。结果 2周、4周、8周末,模型组大鼠的体重明显低于对照组大鼠;治疗组大鼠的体重高于模型组大鼠,而低于对照组大鼠（P〈0.05）。模型组及治疗组大鼠的血糖、24h尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮均高于对照组大鼠（P〈0.05）。正常对照组大鼠VEGF主要分布于肾小球脏层上皮细胞,治疗组大鼠肾皮质VEGF表达比未治疗组明显减弱。结论模型组大鼠肾脏VEGF的表达较正常组大鼠表达明显增强,提示VEGF与DN的发生发展有关。益肾胶囊可抑制DN大鼠肾脏VEGF的过度表达。     

亚硒酸钠对糖尿病肾病大鼠肾脏脂联素和nephrin表达的影响

目的 探讨亚硒酸钠对糖尿病肾病大鼠肾脏脂联素和nephrin表达的影响及其相互间的关系,从而研究亚硒酸钠与脂联素、nephrin在糖尿病肾病中的作用机制.方法 通过链脲佐菌素法加高脂饮食诱导模拟大鼠糖尿病肾病模型,实验设完全空白对照组、糖尿病组、糖尿病药物干预组,药物干预组每日给予亚硒酸钠溶液灌胃,其它组给予等量盐水溶液灌胃.10周后处死大鼠,取血、尿标本测相关生化指标,取肾脏组织分别提取DNA和蛋白质标本,石蜡切片光镜观察病理改变及免疫组化分析蛋白表达定位,实时定量PCR法检测脂联素mRNA表达、RT-PCR法检测nephrin mRNA表达,Western印迹法检测脂联素和nephrin蛋白表达.结果 亚硒酸钠干预组大鼠生化指标较糖尿病组明显改善,光镜下观察亚硒酸钠干预组病理改变较糖尿病组明显减轻.免疫组化分析,亚硒酸钠干预组脂联素蛋白着色较糖尿病组明显增强,且肾小管、肾小球内均有着色;糖尿病组nephrin蛋白表达着色较空白对照组减少,亚硒酸钠干预组较糖尿病组着色明显增多.亚硒酸钠干预组脂联素mRNA和蛋白表达明显高于糖尿病组和正常对照组,差异有统计学意义(均P＜0.05).亚硒酸钠干预组nephrin mRNA和蛋白表达均较糖尿病组明显增加,但仍较空白对照组降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 亚硒酸钠能促进大鼠肾脏脂联素和nephrin表达,表明亚硒酸钠、脂联素和nephrin在延缓和防治糖尿病肾病的发生发展中可能起重要作用.