γ—谷氨酰转肽酶同工酶放射免疫测定对原发性肝癌诊断的研究

用从人肝癌组织中提取、纯化的γ－谷氨酰转肽酶同工酶（ｒ－ＧＴ同工酶）免疫新西兰兔制备抗血清，我们建立了ｒ－ＧＴ同工酶放射免疫测定方法。经测定２１６例血清，结果原发性肝癌的ｒ－ＧＴ同工酶阳性率为７２．７％，特异性为９３．２％正常人４０例没有发现阳性。慢性肝炎、肝硬化和其他肿瘤的假阳性率为１０．４％。结果表明ｒ－ＧＴ同工酶放射免疫测定对原发性肝癌有较大的诊断价值，同时还具有操作简单，可以定量、节省测定     

碱性脂肪酶同工酶的分离纯化

对经疏水层析 (PhenylSepharoseCL 4L)和阴离子交换层析 (DEAE FastFlow)等部分纯化的样品 ,采用制备型聚丙烯酰胺凝胶电泳进一步将其分离纯化 ,获得了PG3 7碱性脂肪酶的 3种同工酶LipaseⅠ、LipaseⅡ和LipaseⅢ .用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳和SephadexG 1 50凝胶色谱法分别测得同工酶的相对分子质量为 2 750 0和 2 90 0 0 .测定了LipaseⅠ的等电点为 5.4 ,动力学常数Km 和Vmax分别为 4 .54g/dL和 5.56μmol/ (min·μg) .     

尿LDH及其同工酶对上尿路梗阻病人肾功能的估价

为了了解尿乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）及其同工酶对上尿路梗阻病人肾功能判定的意义，对３１例单侧上尿路梗阻病人，采用比色法测定ＬＤＨ活性，电泳法测定尿ＬＤＨ同工酶。结果：轻、中、重度肾积水组和对照组ＬＤＨ活性分别为２８．２±１７．３、６８．９±３１．７、２２６．１±６６．３、２６．１±１６２ＩＵ／Ｌ，轻度肾积水组与对照组比较无显著性差异，中、重度组之间差异有显著性。轻度组和对照组ＬＤＨ同工酶均正常，中度组３例异常，重度组均异常，且梗阻解除后ＬＤＨ_１、ＬＤＨ_２相对量增加，尤以ＬＤＨ_１增加更明显，ＬＤＨ_４、ＬＤＨ_５有所下降。结果认为：尿ＬＤＨ及其同工酶测定可反映肾实质损害程度，并能估价肾功能恢复情况，可能成为肾功能可复性判定的重要指标之一。     

人胚胎嗅球嗅鞘细胞的体外培养

目的探讨人胚胎嗅球嗅鞘细胞的分离和培养方法。方法：选取家属同意下引产的4-5月胎儿，分离原代嗅球成鞘细胞，利用差速贴壁法结合无血清饥饿培养法对细胞进行纯化，计算其纯度。结果通过差速贴壁法结合无血清饥饿培养法，可获得纯度70％-80％嗅鞘细胞．显微镜下观察细胞形态，以双极和三极细胞为主，亦有少许多极及梭形细胞。结论应用差速贴壁法与无血清饥饿培养法分离培养人胚嗅球成鞘细胞是一种较为稳定可靠的方法。     

美洲商陆细胞株系的选择和蛋白质产生情况比较

美洲商陆抗病毒蛋白（ＰＡＰ）是由多基因转译的，在不同细胞株系中这些基因的表达情况有所区别，在商陆愈伤组织培养中分离获得数株色泽有区别的株系，分析其过氧化物同工酶酶谱表明，这些株系在遗传上有区别。同时，这些株系在生长速度，总蛋白质含量、蛋白质组成及部分区域的蛋白质比例上存在较大的差别，其中白色株系具有较明显的优点，对其培养条件进行优化又使总蛋白质含量提高７０％，从而用于进一步的研究。     

三种软骨细胞分离培养方法对细胞骨架的影响比较

目的 比较分离培养人类软骨细胞的3种方法，探讨各种方法的特点及对细胞骨架的影响。方法 分别采用酶消化法、组织贴块法、酶消化结合组织贴块法分离软骨细胞，测量每种方法分离的软骨细胞瓶底汇合形成单层时间，进行比较，以甲苯氨蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学评价细胞的生物特性，并用磁驱动原子力显微镜（MAC mode AFM）对二代细胞表面形态及细胞骨架特性进行检测。结果 MAC mode AFM检测显示，酶消化结合组织贴块法分离软骨细胞表面形态、细胞骨架分布更接近生理状态，甲苯氨蓝、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色显示强阳性，进行方差分析及q检验，3种方法分离的软骨细胞瓶底汇合形成单层时间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 酶消化结合组织贴块法细胞分离效率高、生长速度快、细胞骨架特性保持更好、细胞纯度高，在细胞骨架研究中可优先选用。     

精索静脉曲张不育患者乳酸脱氢酶同工酶X的研究进展

乳酸脱氢酶同工酶X（LDH—X）是精子特有的乳酸脱氢酶同功酶，与糖的酵解活动密切相关，它对精子的发生和成熟起着重要作用。近年来有关LDH—X的实验研究均提示：LDH—X与精液参数、精子受精能力具有较强的相关性。本文就精索静脉曲张不育患者乳酸脱氢酶同工酶X研究进展作一综述。     

少精子症患者精液沉淀物乳酸脱氢酶同工酶凝胶电泳分析

本文运用乳酸脱氢酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳分析法，分析比较了少精子症、弱精子症、精液正常者的精液沉淀物乳酸脱氢酶同工酶百分比活性。结果显示：少精子症患者的ＬＤＨ－Ｃ４同工酶百分比活性４６％显著低于精液正常者的７１％（Ｐ＜０．０１）及弱精子症患者的６７％（Ｐ＜０．０１）；相对的，少精子症的ＬＤＨ５同工酶百分比活性１６％显著高于精液正常者的４．８％（Ｐ＜０．０１）和弱精子症的６．３％（Ｐ＜０．０１）。本文认为少精子症者精液沉淀物ＬＤＨＣ４活性降低与其精液中的各类细胞诸如未成熟的精子细胞、白细胞及一些微生物的相对增加有关     

少精子症患者精液沉淀物乳酸脱氢酶同工酶凝胶电泳分析

本文运用乳酸脱氢同工酶聚丙酰胺凝胶电泳分析法，分析比较了少精子症、弱精子症、精液正常者的精液沉淀物乳腺脱氢酶工酶百分比活性。结果显示：少精子症咭物ＬＤＨ－Ｃ４同工酶百分比活性４６％显著低于精液正常者的７１％及弱精子症患者的６７％；相对的、少精子症的ＬＤＨ５同工酶百分比活性１６％显著高于精液正常者的４．８％，和弱了症的６．３％，本文认为少精子症症者精液沉淀物ＬＤＨＣ４活性降低与其精液中的各灰细胞诸如     

r-谷氨酰转肽酶同工酶放射免疫测定对原发性肝癌诊断的研究

用从人肝癌组织中提取、纯化的r-谷氨酰转肽酶同工酶(r-GT同工酶)免疫新西兰兔制备抗血清,我们建立了r-GT同工酶放射免疫测定方法。经测定216例血清,结果原发性肝癌的r-GT同工酶阳性率为72.7％,特异性为93.2％。正常人40例没有发现假阳性。慢性肝炎、肝硬化和其他肿瘤的假阳性率为10.4％。结果表明r-GT同工酶放射免疫测定对原发性肝癌有较大的诊断价值,同时还具有操作简单,可以定量、节省测定时间、易于推广应用等优点。     

抗生素和血清制剂治疗小鼠脓毒症时对血浆内毒素和细胞因子的影响

目的通过观察脓毒症小鼠的治疗过程,研究抗生素和血清制剂对血中内毒素脂多糖（ＬＰＳ）和细胞因子的影响。方法脓毒症模型采用ＮＨ１小鼠,腹腔大肠杆菌。治疗分３组,先锋霉素５（ＣＥＦ）,新生小牛血清（ＮＢＳ）,生理盐水（ＮＳ）。结果ＮＢＳ组的７２小时生存率明显高于ＮＳ组（Ｐ＜０．０５）。ＣＥＦ组３小时白细胞计数低于ＮＳ组（Ｐ＜０．０５）。ＮＢＳ组的１、３小时ＬＰＳ水平低于ＮＳ对照组（Ｐ＜０．０５）,血ＩＬ１和ＴＮＦ低于ＮＳ组（Ｐ＜０．０５）。结论抗生素对抑制白细胞升高起主导作用,对ＬＰＳ和细胞因子活性无明显抑制作用。血清制剂可能同时具有抗休克和抗炎症的双重作用,对提高早期生存率起重要作用。     

入肝血流阻断对阻塞性黄疸大鼠肝脏能量代谢的影响

目的 探讨阻塞性黄疸大鼠肝脏缺血后能量代谢变化的病理特征及其与动物耐受性的关系。方法 大鼠胆管结扎后１周,在门静脉转流入阻断入肝血流不同时程后观察动物存活率、肝细胞线粒体呼吸活性、肝组织ＡＴＰ含量及动脉血酮体比值。结果 阻断入肝血流３０、６０及９０分钟后１０天动物存活率分别为１００％、１００％及４０％;缺血后肝脏能量代谢功能明显受损,在再灌注后２４小时,阻断入肝血流３０及６０分钟两组动物肝脏能量代谢功能已有明显恢复,而阻断入肝血流９０分钟组肝脏能量代谢功能仍维持在显著低水平。结论 胆道梗阻后１周,大鼠门静脉转流下入肝血流阻断６０分钟以内肝脏能量代谢功能损害可逆,动物安全耐受;而阻断入肝血流９０分钟引起肝脏能量代谢功能不可逆性损害,动物难以安全耐受。     

大鼠胰岛移植物制备与异种移植

增加胰岛收获量，提高胰岛纯度一直是胰岛移植中面临的重要问题，本实验经胰管注射胶原酶，胰静止消化分离成年大鼠胰岛纯度一直是胰岛葡聚糖离心纯化。纯化后胰岛收获量为６１０－８２０个／胰纯度达９２％；胰岛形态结构完整，内分泌细胞超微结构保持良好，对葡萄糖刺激反应胰岛素释放量是基本分泌水平的８倍；异种移植可逆转实验性糖尿病小鼠的高血糖达一周。     

Rxa对L02细胞增殖的细胞周期分析和对Ki-67、CyclinD1、PCNA蛋白表达的影响

目的　探讨丹参提取物Ｒｘａ 对正常肝细胞（Ｌ０２ 细胞） 增殖速率的影响。方法　应用流式细胞术（ＦＣＭ）分别测定Ｌ０２ 细胞Ｒｘａ 处理组（Ｌａ 组） 和未处理组（Ｌ组）０、２、４、８、１２ 小时Ｇ０Ｇ１ 、Ｓ、Ｇ２Ｍ 期细胞指数,同步进行Ｋｉ６７、Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１ 、ＰＣＮＡ 蛋白表达的免疫组化分析。结果　Ｌａ 组细胞增殖速率较快,Ｋｉ６７ 抗原表达相对较强,ＣｙｃｌｉｎＤ１、ＰＣＮＡ 表达相对提前。结论　Ｒｘａ 可能促进Ｌ０２ 细胞增殖。     

Ki-67抗原在胆囊良恶性肿瘤中的表达

目的 观察Ｋｉ－６７抗原在胆囊良恶性肿瘤中的表达强度与肿瘤的分级分期、治疗效果和预后的关系。方法 采用免疫组织化学（ＡＰＡＡＰ）方法,用抗人Ｋｉ－６７抗原的等８效抗体ＭＩＢ－１比较研究Ｋｉ６７蛋白在良恶性胆囊肿瘤和正常胆囊组织中的表达情况,对比较不同胆囊组织中细胞增殖的情况。结果 Ｋｉ－６７蛋白在胆囊癌组织中表达的阳性指数率显著高于胆囊良性肿瘤及正常胆囊组织（Ｐ〈０．０５）。但Ｋｉ－６７蛋白的表达     

高张氯化钠右旋糖酐液在犬烧伤休克延迟复苏中的作用

目的从血流动力学、心肌力学及代谢等方面探讨高张氯化钠右旋糖酐液（７．５％氯化钠＋６％右旋糖酐７０，ＨＳＤ）在烧伤休克延迟复苏中的作用。方法采用犬３５％ＴＢＳＡⅢ度烧伤模型，伤后６ｈ分别用乳酸林格液及ＨＳＤ进行复苏，并以每ｈ尿量为１０ｍｌ／ｋｇ及心输出量为伤前值的７０％～８０％来调整输液速度及输液量，观察ＨＳＤ在复苏中容量负荷、左心室等容收缩期最大压力变化速率及左心室舒张期压力下降最大变化速率（±ｄｐ／ｄｔｍａｘ）、心脏指数（ＣＩ）、氧供给（ＤＯ２）及氧消耗（ＶＯ２）等的变化。结果ＨＳＤ在烧伤休克延迟复苏伤后第一个２４ｈ输液量比乳酸林格液复苏少３０５６％，其中复苏后４ｈ的输液量比乳酸林格液少５９５０％，在复苏后０５～２ｈ，＋ｄｐ／ｄｔｍａｘ、ＣＩ、ＤＯ２及ＶＯ２的增加幅度明显高于乳酸林格液复苏。结论ＨＳＤ在烧伤休克延迟复苏中具有容量负荷小、改善心肌功能及促进组织代谢等作用。     

上腹部多器官联合切取的实验研究及临床应用

以美国迪卡猪为模型，进行了１４次动物及３次人体上腹部多器官联合切取的研究。结果表明：原位灌注、整块切除法是获取上腹部多器官的最佳方法之一；防止损伤血供或漏扎血管，良好的灌注和保存是提高移植物质量的关键。基于实验的结果，于１９９６年６月为１例肝癌患者施行了多器官联合移植，手术后移植物功能恢复良好。     

大鼠肝切除后肝再生期间细胞周期调控下细胞增殖与凋亡的关系

目的探讨正常组织增生过程中,细胞周期调控下细胞增殖与凋亡之间的关系。方法以大鼠肝切除后肝再生为模型,以Ｋｉ６７抗原的检测和ＳｕｂＧ１法分别为细胞增殖与细胞凋亡的定量分析方法。结果肝切除术后３６小时,Ｋｉ６７阳性细胞比例（Ｋｉ）达峰值;术后２４小时,凋亡细胞比例（Ａｐ）达峰值;各实验组的Ａｐ／Ｋｉ比值与对照组相比差异有显著性（Ｐ＜０．０１）,其峰值位于术后１２小时。结论（１）正常组织增生中,细胞凋亡不但存在,而且和细胞增殖一样重要。机体通过细胞周期,以细胞凋亡形式,调控着组织增生的速度和规模;（２）应以Ａｐ／Ｋｉ衡量细胞凋亡在各时期所具作用之重要性;（３）细胞凋亡所具作用相对最大时,是在组织增生开始后的早期,先于细胞增殖最活跃期,表明机体对组织增生的反应谨慎而严格。     

正常皮肤、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩成纤维细胞培养、生物学特征及超微结构的比较研究

目的探讨正常皮肤、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩成纤维细胞的体外培养、生物学特征及超微结构，阐明其应用价值。方法采用成纤维细胞体外培养技术，从正常皮肤成纤维细胞与增生性瘢痕、瘢痕疙瘩成纤维细胞在细胞增殖、细胞形态、细胞遗传学特征及细胞超微结构方面进行比较研究。结果体外培养的正常皮肤成纤维细胞与增生性瘢痕、瘢痕疙瘩成纤维细胞生长率和形态学相同，细胞遗传学特征和超微结构相似。结论据此结果和其他学者的观点，认为建立体外培养的正常皮肤成纤维细胞的细胞实验模型，可用于瘢痕防治的研究。     

雌激素缺乏脊柱神经肽P物质变化的实验研究

目的阐明雌激素缺乏时椎体、椎间盘及小关节等部位ＳＰ免疫反应阳性神经纤维的变化规律。方法选用健康２月龄雌性ＳＤ大鼠９６只,随机分为卵巢切除（Ｏｖａｒｉｅｃｔｏｍｙ,ＯＶＸ）和假手术（Ｓｈａｍ－ｏｐｅｒａｔｅｄ,Ｓｈａｍ－Ｏ）两组。ＯＶＸ组行双侧卵巢切除术,Ｓｈａｍ－Ｏ组行假手术。分别于术后１５天、１、２、３、６、９月时每组各处死８只动物,切取Ｌ３～５脊柱小关节、棘上韧带、椎体和椎间盘。免疫组织化学Ｓ－Ｐ法观察各部位ＳＰ免疫反应阳性神经纤维分布。结果①ＯＶＸ后骨小梁及小梁膜上ＳＰ免疫反应阳性神经纤维增多,增粗。②软骨组织内ＳＰ反应阳性纤维增多;２月时椎间盘ＳＰ阳性反应物增加,分布至纤维环中带,３月时观察到纤维环内带,６月在纤维环髓核中观察到ＳＰ免疫反应阳性神经纤维。结论雌激素缺乏时大鼠腰椎椎体、椎间盘、小关节ＳＰ阳性反应神经纤维增多,与骨质疏松性腰背疼痛有密切关系。