自身免疫性内耳病动物模型的抗内耳特异性抗体谱系分析

目的 为明确哪几种膜迷路蛋白成分参与了实验性自身免疫性内耳病（ａｕｔｏｍｍｕｎｅｉｎｎｅｒ－ｅａｒ ｄｉｓｅａｓｅ，ＡＩＥＤ）的形成。方法 以同种内耳组织抗原免疫豚鼠，建立自身免疫性内耳病动物模型。用免疫转印迹技术（Ｗｅｓｔ－ｅｒｎ ｂｌｏｔ）检测动物血液中抗膜迷路蛋白抗体。结果 豚鼠膜迷路蛋白成分复杂，ＳＤＳ－ＡＰＧＥ电泳至少可分出５种，但免疫后大多数动物（１５／２０）体内仅产生了抗６８ｋＤ和１     

酶联免疫吸附试验检测抗耳蜗及蜗神经组织相关抗体的应用

自制牛耳蜗抗原（ＣＣＡｇ）及牛蜗神经抗原（ＣＣＮＡｇ）采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对５２例（８９侧）不明原因感音神经性聋患者及对照组２０例无耳疾和免疫性疾病的患者进行了检测，结果抗ＣＣＡｇ抗体水平对照组为０．３８１１±０．０７４３，（吸光度Ａ值，ｘ±ｓ，下同），实验组为０．９４２１±０．２４０８，两组差异有高度显著性（Ｐ＜０．０１），以对照组抗ＣＣＡｇ抗体Ａ值的ｘ＋２ｓ判断，实验组２４例抗ＣＣＡＧ抗体阳性，阳性率为４６％。抗ＣＣＮＡｇ抗体水平对照组为０．２２５４±０．０３８２，实验组为０．２３３１±０．０６５６，两组差异无显著性，以ｘ＋２ｓ判断，实验组６例抗ＣＣＮＡｇ抗体阳性，阳性率为１１．５％。认为ＥＬＩＳＡ检测法程序简便，可动态观察患者抗体水平，并能定量分析，配合免疫组织化学方法或免疫转印法可用于内耳自身免疫病的诊断。用ＥＬＩＳＡ法检测到抗ＣＣＮＡｇ抗体，证实了国内外学者的推断，即内耳自身免疫病存在蜗后起源的可能性。     

自身免疫性内耳病抗内耳组织相关抗体检测及…

按ＭｃＣａｂｅ诊断标准筛选出疑为自身免疫性内耳病患者４１例，进行临床听力学检查及有关免疫学检查，并采用免疫细胞化学（ＡＢＣ）方法，对４１例患者的血清进行抗内耳组织相关抗体的检测，发现４例有明显的阳性反应。结果表明部分自身免疫性内耳病患者血清中可能存在有抗内耳组织的特异性抗体，结果还显示免疫介导的内耳病可能是耳蜗或蜗后起源的。对自身免疫性内耳病的临床检测方法、诊断标准和治疗原则进行讨论。     

耳廓假性囊肿免疫学病因的初步探讨

目的　探讨耳廓假性囊肿发病与全身免疫功能及局部免疫状态的关系。方法　采集４４ 例耳廓假性囊肿患者的囊液和外周静脉血标本，用免疫单扩散法分别检测囊液和血清中的抗体ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ 和补体Ｃ３ 水平；用聚乙二醇比浊法分别检测囊液和患者血清中的免疫复合物含量；用聚合酶链反应检测囊液中巨细胞病毒ＤＮＡ；用免疫荧光技术检测囊液和血清中的抗核抗体，用间接荧光抗体检测法（ｉｎｄｉｒｅｃｔｉｍｍｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅ ａｓｓａｙ，ＩＦＡ） 检查囊液和患者血清与健康小鼠耳廓冰冻组织切片的反应情况。结果　耳廓假性囊肿患者囊液中抗体ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ 和补体Ｃ３ 水平均明显低于血清中者（ Ｐ＜ ０．０１），囊液和患者血清中均未检出免疫复合物，囊液中也未检测出巨细胞病毒ＤＮＡ；但在部分（３／１０） 患者囊液中发现了抗核抗体，在小鼠冰冻切片中发现了位于软骨组织上的抗原抗体复合物。结论　耳廓假性囊肿中部分患者可能是局限于耳廓的自身免疫性疾病，可能是由于自身抗体与耳廓组织发生自身免疫反应导致反应性渗出液在局部聚集形成囊肿。     

免疫介导性疾病和特发性突聋的关系

特发性突聋的病因尚不明确，可能与遗传倾向或获得性疾病如感染等有关。各种免疫性疾病都可能参与特发性突聋的发病，包括一系列免疫介导的疾病，如免疫复合体、内耳蛋白抗体、抗心磷脂抗体和细胞间的免疫缺陷。本主要研究特发性突聋和各种自身抗体的关系，同时了解抗心磷脂抗体和抗β2微球蛋白抗体持续的时间。实验分为两组，一组为特发性突聋的患，共51例；     

三种原因不明内耳病抗内耳组织自身抗体的检测

提取，制备豚鼠内耳膜迷路抗原，成功地建立了免疫转印法，对３３例不明原因内耳病（不明原因进行性感音性聋１０例、突发性聋１５例、Ｍｅｎｉｅｒ病８例）进行分析，发现１０例（３０．３％）患者血清中存在抗内耳组织自身抗体，提示自身免疫反应可能参与部分原因不明内耳病的发病过程，本研究表明，应用免疫转印技术检测抗内耳组织自身抗体，对进一步认识和探讨自身免疫因素在原因不明内耳病的发病机制中的作用有重要价值。     

三种原因不明内耳病抗内耳组织自身抗体的检测

提取、制备豚鼠内耳膜迷路抗原，成功地建立了免疫转印法（ｉｍｍｕｎｏｂｌｏｔｔｉｎｇ），对３３例不明原因内耳病（不明原因进行性感音性聋１０例、突发性聋１５例、Ｍｅｎｉｅｒ病８例）进行分析，发现１０例（３０．３％）患者血清中存在抗内耳组织自身抗体，提示自身免疫反应可能参与部分原因不明内耳病的发病过程。本研究表明：应用免疫转印技术检测抗内耳组织自身抗体，对进一步认识和探讨自身免疫因素在原因不明内耳病的发病机制中的作用有重要价值。     

热休克蛋白70及其抗体与实验性自身免疫性内耳病

目的 了解抗原免疫对热休克蛋白７０（ｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎ，７０，ＨＳＰ７０）在豚鼠耳蜗中表达的影响。方法 以同种异体内耳组织为抗原免疫豚鼠，用免疫组织化学方法检测豚鼠耳蜗中ＨＳＰ７０的表达并进行计算机图像处理，对豚鼠膜迷路组织进行免疫转印分析以测定ＨＳＰ７１；以纯化的人类重组ＨＳＰ７１为抗原，用免疫转印技术（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ）检测动物血浆中ＨＳＰ７１抗体。结果 ＨＳＰ７０在正常豚     

人体抗内耳组织自身抗体的检测方法

相关研究^[1]表明某些感音神经性聋患者血清中存在各种类型的抗内耳组织自身抗体。为了对临床上此类疾病的诊断提供客观依据，我们参考了临床上其它学科诊断自身免疫性疾病自身抗体的检测方法，用豚鼠内耳石蜡切片，采用免疫荧光法检测此类耳聋患者血清中的抗内耳组织自身抗体，具体方法如下。     

系统性红斑狼疮患者血清中抗内耳组织自身抗体的免疫转印…

为了解系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者血清中是否存在在抗内耳组织交叉反应性自身抗体，提取制备豚鼠内耳膜迷路抗原、应用免疫转印技术，对１８例尚无听力下降的ＳＬＥ患者进行分析。结果发现：１６例（占８８．９％）患者血清中存在着抗内耳组织交叉反应性自身抗体，而１１例正常照血清全部为阴性。提示内耳也可能是ＳＬＥ多器官受损的靶器官之一。     

自身免疫性内耳病的实验研究现状

以标准的临床免疫学方法研究人的内耳非常困难，至今我们对内耳免疫学的了解绝大部分来自动物实验。自身抗体的检测是自身免疫疾病诊断的重要指标，自身抗原的确定是该病确实存在的最有力的证据。对自身免疫性内耳病，尚未确定免疫系统攻击的内耳特异性抗原。本文对近年有关动物模型及内耳自身抗原、抗体方面的研究进展作一综述。     

系统性红斑狼疮患者血清中抗内耳组织自身抗体的免疫转印分析

为了解系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者血清中是否存在抗内耳组织交叉反应性自身抗体，提取制备豚鼠内耳膜迷路抗原，应用免疫转印技术，对１８例尚无听力下降的ＳＬＥ患者进行分析。结果发现：１６例（占８８．９％）患者血清中存在着抗内耳组织交叉反应性自身抗体，而１１例正常对照血清全部为阴性。提示内耳也可能是ＳＬＥ多器官受损的靶器官之一。     

体外基因扩增技术检测上呼吸道炎症局部脱落细胞中肺炎衣原体DNA

为快捷诊断上呼吸道肺炎衣原体感染，用肺炎衣原体ＰｓｔＩ４７４片段特异性聚合酶链式反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）法检测了急性上呼吸道炎症患者局部拭子标本。同时以微量免疫荧光法检测了血清中肺炎衣原体特异性抗体。结果在１７５例患者拭子标本中，ＰＣＲ阳性４９例，阳性率２８％；荧光抗体阳性４５例，阳性率２５．７％。两者相符率９１．８％。表明肺炎衣原体ＰｓｔⅠ４７４片段特异性ＰＣＲ法检测鼻咽喉部肺炎衣原体感染是一个较敏感和特异的方法     

人体抗内耳组织自身抗体的检测方法

相关研究表明某些感音神经性聋患者血清中存在各种类型的抗内耳组织自身抗体。为了对临床上此类疾病的诊断提供客观依据,我们参考了临床上其它学科诊断自身免疫性疾病自身抗体的检测方法,用豚鼠内耳石蜡切片,采用免疫荧光法检测此类耳聋患者血清中的抗内耳组织自身抗体,具体方法如下。     

制备性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离与纯化豚鼠内耳抗原

粗制内耳抗原 (ｃｒｕｄｅｉｎｎｅｒｅａｒａｎｔｉｇｅｎ ,ＣＩＥＡｇ)广泛用于自身免疫性内耳病 (ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｉｎｎｅｒｅａｒｄｉｓｅａｓｅ ,ＡＩＥＤ)的研究 ,包括建立动物模型和作为抗原检测ＡＩＥＤ患者血清自身抗体[1,2 ] 。但ＣＩＥＡｇ成分复杂 ,其中何种亚组份起关键作用尚不清楚。我们通过制备性聚丙烯酰胺凝胶电泳 (ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅｐｏｌｙａｃｒｙ ｌａｍｉｄｅｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ,简称制备性ＰＡＧＥ)分离纯化豚鼠ＣＩＥＡｇ的主要亚组份 ,为深入研究ＡＩＥＤ的发病机制和寻找内耳特异…     

实验性自身免疫性内耳病耳蜗热休克蛋白70的表达

目的 探讨自身免疫性内耳病模型动物耳蜗热休克蛋白的表达。方法 利用同种异体内耳抗原免疫豚鼠,以建立自身免疫性内耳病（ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｉｎｎｅｒ ｅａｒ ｄｉｓｅａｓｅ,ＡＩＥＤ）动物模型,并应用免疫组织化学及原位杂位技术,研究热休克蛋白（ｈｅａｔ ｓｈｏｃｋ ｐｍｔｅｉｎ,ｈｓｐ）７０在正常对照组及ＡＩＥＤ模型动物实验组耳蜗中的表达情况。结果 对照组豚鼠螺旋神经节细胞中存在ｈｓｐ７０样蛋白基     

以咽喉溃疡为表现的自身免疫性疾病

自身免疫性疾病是指由机体自身产生的抗体或致敏淋巴细胞破坏、损伤自身的组织和细胞成分,导致组织损害和器官功能障碍的原发性免疫性疾病。大多数原因不明,可能和遗传、感染、药物及环境等因素有关。临床表现涉及各科,极其复杂,单纯表现为咽喉部溃疡者较少,易误诊。笔者收治11例以咽喉溃疡为表现的自身免疫性疾病患者,现报告如下。     

强直性脊柱炎患者的听力学及抗膜迷路蛋白抗体的检测

目的 对强直性脊柱炎（ａｎｋｙｌｏｓｉｎｇ ｓｐｏｎｄｙｌｉｔｉｓ,ＡＳ）患者进行听力学检测并分析听力减退的特点。方法 采用问卷调查、临床耳鼻咽喉科检查、听力学测试、抗膜迷路抗体检查、血清免疫学检查方法,对确诊为ＡＳ的３４例（６８耳）患者的临床资料加以分析。结果 ３４例中主诉听力减退１１例,纯音测听发现听力减退２４例（４１耳）,占６０．３％（４１／６８）,２耳见鼓膜穿孔为混合性聋,３９耳为感生聋,     

抗人喉癌双功能抗体免疫电镜的定位研究

双功能抗体 (ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃａｎｔｉｂｏｄｙ ,ＢｓＡｂ)是一种含有两个结合抗原的功能区 ,能同时识别两个不同的抗原决定簇 ,其已在生物学的多种领域得到应用 ,并成为肿瘤的生物治疗的热点。本文旨在应用抗人喉癌双功能抗体对喉癌相关抗原的免疫定位 ,采用免疫组织化学染色法和免疫电镜前染色法观察喉癌抗原的表达部位。1　材料与方法1 .1 　 材料来源60例喉癌标本均取自我科住院患者术后标本。喉癌组 :经病理诊断为喉鳞状细胞癌 ,Ⅰ级 1 4例 ,Ⅱ级 2 5例 ,Ⅲ级 2 1例。喉癌前病组 :喉乳头状瘤 5例 ,喉角化症和喉白斑各 2例 ,喉重度…     

喉癌病人血清可溶性白细胞介素Ⅱ受体的实验性研究及临床意义

应用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法测定６７例喉癌，１９例声带息肉患者及３５例正常人血清可溶性白细胞介素Ⅱ受体（ｓＩＬ－２Ｒ水平、结果表明：喉癌患者的血清ｓＩＬ－２Ｒ水平明显高于声带息肉患者和正常人（Ｐ＜０．０１）。且喉癌病人的血清ｓＩＬ－２Ｒ水平与喉癌的病理分化程度、临床分型、分期及手术前后均具有明显的相关趋势。提示血清ｓＩＬ－２Ｒ水平的检测可作为喉癌患者临床监测指标之一。