吲哚美辛体外干预研究胃癌Wnt/β-Catenin信号途径与Caspase-3及Bcl-2关系

目的:研究人胃癌细胞系SGC7901中β-连环蛋白(β-Catenin)与Caspase-3凋亡基因及与Bcl-2原癌基因表达的关系,初步探索肿瘤发生过程中Wnt/β-Catenin通路对细胞凋亡的调节机制.方法:(1)MTT方法检测吲哚美辛抗肿瘤效应;(2)RT-PCR分别检测人胃癌细胞系SGC7901受吲哚美辛干预组和未受干预组中的β-Catenin与Caspase-3及Bcl-2mRNA的表达.结果:吲哚美辛在浓度为50μmol/L时作用24h对人胃癌SGC7901细胞抑制效果不明显,而作用48、72h及浓度为100和200μmol/L时作用24、48、72h的凋亡诱导作用明显,且抑制率呈浓度和时间依赖性;吲哚美辛干预组较未受干预组表现为伴随β-Catenin表达水平降低,Bcl-2表达下调.而Caspase-3的表达上调.结论:人胃癌细胞系SGC7901可能通过Wnt/β-Catenin通路激活Bcl-2原癌基因蛋白表达促进细胞增殖,同时抑制Caspase-3凋亡基因的蛋白表达抑制细胞凋亡,使细胞增殖与凋亡失衡.     

干细胞因子SOX2调控Wnt／β-Catenin信号通路在脑胶质母细胞瘤发生中的机制研究

目的通过检测脑胶质母细胞瘤（GBM）组织中干细胞因子SOX2及β-Catenin蛋白的表达,探讨SOX2及Wnt／β-Catenin信号通路在GBM发生中的作用机制。方法脑立体定向仪定向注射C6细胞至70只SD大鼠脑尾状核建立GBM动物模型,处死大鼠取脑肿瘤组织分离、鉴定GBM干细胞将其传代培养,20只正常SD大鼠脑组织作为对照,应用SP免疫法检测模型组GBM干细胞组织和正常组脑组织大鼠SOX2、β-Catenin蛋白的表达。结果GBM干细胞组织中SOX2和β-Catenin的表达均显著高于正常脑组织（P〈0．01）,二者在GBM干细胞中的表达呈正相关（r=0．372,P〈0．05）。结论干细胞因子SOX可能通过调控Wnt／β-Catenin信号通路,在GBM的发生发展过程中发挥重要作用,为针对GBM干细胞治疗该病提供了新靶点。     

Wnt/β-catenin信号与胃癌防治研究进展

胃癌的发生、发展机制复杂,细胞信号通路异常活化在其中起着至关重要的作用。Wnt/β-catenin信号参与胃癌细胞的增
殖、侵袭和转移,并有效诱导胃癌的耐药和再生,是介导胃组织癌变的关键信号;靶向抑制Wnt/β-catenin能够抑制胃癌的生长、
侵袭转移,增加化疗药物的敏感性。本文对Wnt/β-catenin在胃癌发生和发展中的作用和干扰Wnt/β-catenin治疗胃癌的最新研
究进展进行综述,期望为胃癌的防治提供新的思路。
     

β-咔啉类生物碱诱导人胃癌细胞株SGC-7901细胞凋亡的研究

目的观察β-咔啉类生物碱诱导人胃癌细胞株SGC-7901细胞凋亡的形态学改变,探讨其作用机制。方法将β-咔啉类生物碱设定为浓度0、5、10、20、40μg/mL,分别用其处理人胃癌细胞株SGC-7901 48h,透射电镜观察其对SGC-7901细胞超微结构的影响;荧光显微镜观察其对SGC-7901细胞凋亡形态的影响。结果透射电镜结果可见SGC-7901细胞超微结构改变,提示其可诱导细胞凋亡;Hoechst 33258荧光染色分析,在不同浓度β-咔啉类生物碱（0、5、10、20、40μg/mL）作用下,SGC-7901细胞凋亡率分别为（3.25±0.25）%、（6.30±0.39）%、（9.34±0.54）%、（11.33±0.37）%、（19.86±0.55）%,0μg/mL组分别与其他药物浓度组比较,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论β-咔啉类生物碱可诱导人胃癌SGC-7901细胞株发生凋亡。     

β-Catenin的表达与胃癌组织分化程度及转移的关系

目的：通过研究β-连环蛋白(β-catenin)与胃癌组织分化程度及转移的关系,探讨β-catenin在胃癌发生及其转移的病理过程中的作用机理。方法应用Western Blot技术及免疫组化方法分析β-catenin在非恶性胃部组织、胃癌原发灶及转移灶组织中的表达,并对其进行比较。结果 Western Blot技术发现β-catenin在胃癌和非恶性胃部组织之间在表达的定量方面没有显著差异。免疫组化技术发现在163例原发性胃癌组织标本中,有79例β-catenin在细胞膜或者细胞浆阳性表达。β-catenin在低分化胃癌中表达水平显著降低(P<0.01)。41例转移性胃癌组织标本中有2例表达β-catenin,与原发性胃癌组织相比,表达水平显著降低(P<0.01)。结论β-catenin在部分原发性胃癌中表达缺失,在低分化胃癌及转移中表达缺失更为常见。     

脑络欣通对气虚血瘀型中脑动脉阻塞再灌注大鼠海马及额顶叶皮质Wnt3a、Wnt5a和β-Catenin表达的影响

目的 探讨益气活血通络法代表方脑络欣通对气虚血瘀型中脑动脉阻塞再灌注（middle cerebral artery occlusion-reperfusion,MCAO/R）模型大鼠的保护机制。方法 采用随机数字表法将雄性SD大鼠分成正常组、模型组、脑络欣通组和通心络组,每组18只。按随机数字表法将各组再分成1、3、7 d组,每时间节点组6只。气虚血瘀证采用饥饿、疲劳、缺氧及高脂饮食等多因素模拟,线栓法制作MCAO/R模型参照改良后的LONGA法。脑络欣通配制成浓度为0.26 g/mL的溶液,通心络配制成浓度为0.02 g/mL的溶液。按每日10 mL/kg灌胃给药。正常组及模型组按等容量生理盐水灌胃。利用RT-PCR检测各组大鼠海马及额顶叶皮质Wnt3a、Wnt5a和β-Catenin的表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠缺血侧海马和额顶叶皮质Wnt3a、Wnt5a、β-Catenin在1、3、7 d表达水平显著上调（P＜0.05）;与模型组比较,通心络组、脑络欣通组大鼠缺血侧海马和额顶叶皮质Wnt3a、Wnt5a和β-Catenin在1、3、7 d表达水平显著上调（P＜0.05）;与通心络组比较,脑络欣通组大鼠缺血侧海马和额顶叶皮质Wnt3a、Wnt5a和β-Catenin在1、3、7 d表达水平显著上调（P＜0.05）。结论 脑络欣通可能通过上调Wnt3a、Wnt5a以及β-Catenin的表达调节脑缺血后神经干细胞的增殖分化。     

加味小陷胸汤对接种人胃癌SGC- 7901裸鼠移植瘤生长及Wnt/β- catenin信号通路相关蛋白表达的影响

目的 观察加味小陷胸汤抑制人胃癌细胞株SGC- 7901裸鼠皮下移植瘤生长作用,以及对Wnt/β- catenin信号通路相关蛋白和基因表达的影响,探讨加味小陷胸汤抗胃癌侵袭转移作用的分子机制。方法 构建人胃癌细胞SGC- 7901裸鼠皮下移植瘤模型。药物连续干预4周动态观察移植瘤体积变化,4周后剖取瘤组织称质量,采用Western blot法检测瘤组织β- 连环蛋白（β- catenin）、糖原合成酶激酶- 3（glycogen synthase kinase- 3,GSK- 3β）、原癌基因蛋白（cellular- myelocytomatosis viral oncogene,c- Myc）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）蛋白表达水平;采用RT- qPCR检测β- catenin、GSK- 3β mRNA表达水平。结果 与模型组比较,加味小陷胸汤各剂量组可显著降低SGC- 7901胃癌移植瘤模型裸鼠皮下移植瘤体积和质量（P<0.05）,能显著抑制移植瘤组织β- catenin、c- Myc、VEGF蛋白和β- catenin mRNA表达（P<0.05）,上调GSK- 3β蛋白和mRNA的表达水平（P<0.05）,降低基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）- 2、MMP- 9含量（P<0.05）。结论 加味小陷胸汤能够有效抑制人胃癌细胞SGC- 7901裸鼠皮下移植瘤的生长,并且可以调控与胃癌侵袭转移密切相关Wnt/β- catenin通路的过度激活。     

榄香烯对胃癌SGC-7901细胞株ERK1/2通路的影响

目的 探讨榄香烯对人胃癌SGC-7901 细胞株增殖以及对细胞外信号调节激酶(ERK1/2)信号通路的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 用不同浓度榄香烯(0.01、0.02、0.04mg/ml)处理胃癌SGC-7901细胞,然后用CCK -8法观察细胞增殖抑制作用,光镜和透射电镜观察细胞形态学改变,Western-blot 法检测磷酸化ERK1/2 的表达水平.结果 榄香烯可抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖,呈浓度和时间依赖性;光镜和透射电镜下可以观察到典型的细胞凋亡形态学改变;榄香烯作用48h后胃癌SGC-7901细胞磷酸化ERK1/2表达水平受到明显抑制,并呈浓度依赖性,各浓度组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论 榄香烯可以抑制胃癌SGC-7901 细胞的增殖,诱发其凋亡,作用机制可能为抑制了细胞的ERK1/2 信号通路.     

Lgr4和Wnt信号通路与胃癌关系的研究进展

胃癌是中国最常见的恶性肿瘤之一,其发病率占各类恶性肿瘤的第3位,大多数患者初次就诊时已是晚期。晚期胃癌的临床预后差,病死率占所有癌种相关死亡的第3位。Lgr4属于G蛋白偶联受体家族,它是Wnt信号通路的靶基因,在胃癌和胃的非肿瘤组织间存在差异性表达。因Lgr4与胃癌的发生、发展密切相关,故其可能作为胃癌患者的潜在预后因子及个体化药物治疗靶点。目前,关于Lgr4与胃癌关系的研究尚无定论,但随着基因科技的不断进步,相信Lgr4的研究会在胃癌的靶向治疗方面取得巨大突破。     

Wnt／β-catenin信号传导通路与脑膜瘤研究进展

脑膜瘤（Meningioma）是中枢神经系统最常见的肿瘤之一,占颅内原发肿瘤的13%-26%,仅次于胶质瘤[1]。脑膜瘤起源于脑膜及脑膜间隙的衍生物,大多来自蛛网膜帽细胞,大多数脑膜瘤生长缓慢,属于良性肿瘤,但仍有部分呈恶性生长。有学者在小鼠乳腺癌组织中发现了Intl基因,随后发现Intl基因在小鼠正常胚胎的发育中起重要作用,并与果蝇的无翅基因Wingless相类似,大量研究提示Intl基因在神经系统胚胎发育中起重要作用,并将Wingless与Intl合并成为Wnt基因[2]。     

中医药靶向干预Wnt/β-catenin信号通路治疗胃癌的研究进展

该文从中药单体、中药复方两方面对中医药将Wnt/β-catenin信号通路作为胃癌治疗靶点的相关理论及研究进展作一综述,并就现阶段Wnt/β-catenin信号通路治疗胃癌的中医药研究现状提出问题与思考,以期为中医药靶向干预该信号通路治疗胃癌的科研工作提供一定启发,并为临床抗胃癌中医药的应用提供参考依据。      

Oct4及Wnt/β-Catenin在肝癌中的表达及相互作用

目的 探讨干细胞相关基因Oct4与Wnt/β-Catenin信号转导通路在人肝癌组织及肝癌细胞系中的表达及相互作用.方法 选取肝癌组织、癌旁组织及正常肝组织,采用免疫组化SP法检测其Oct4的表达;RT-PCR法及实时荧光定量PCR检测Oct4、Wnt5b、β-Catenin的mRNA表达.SiRNA-Oct4 沉默人肝癌HepG2细胞Oct4的表达后,以实时荧光定量PCR检测Oct4、Sox2、Nanog、β-Catenin等干细胞相关基因的表达变化.结果 Oct4在肝癌组织和癌旁组织中均有表达,正常肝脏组织几乎未发现明显的Oct4表达;实时荧光定量PCR发现Oct4和β-Catenin在癌组织内表达最高,癌旁次之,正常肝最低,而Wnt5b却相反.使用SiRNA-Oct4 沉默人肝癌HepG2细胞Oct4后,Oct4表达明显下调,β-Catenin、Sox2、Nanog表达亦下调,与Oct4呈正相关关系,而Wnt5b表达却上调,与Oct4呈负相关关系.结论 Oct4在肝癌组织中高表达,且为肝癌发生过程的早期事件;Oct4及Wnt/β-Catenin在肝癌中存在一定的相互作用.     

Wnt/β-catenin信号通路拮抗剂与骨质疏松

Wnt/β-catenin信号通路是重要的细胞信号转导途径,在细胞的增殖、分化中发挥重要作用。目前的研究表明Wnt/β-catenin信号通路在骨代谢中发挥重要作用,该通路的异常与骨质疏松的发生有关。Wnt/β-catenin拮抗剂可以抑制Wnt/β-catenin信号通路,导致通路表达异常,进一步研究Wnt/β-catenin信号通路拮抗剂,设计出阻断该通路拮抗剂的物质,可为骨质疏松的治疗提供一种新的途径。     

FHIT、β-Catenin在胃癌中表达及其相关性研究

目的 探讨胃癌中FHIT和β-Catenin的表达相关性及其与胃癌发展之间的关系.方法 应用免疫组化法检测50例胃癌组织、10例胃良性病变组织标本中FHIT和β-Catenin表达.结果 胃癌组织FHIT和β-Catenin的阳性表达率分别为22.00%和78.00%.FHIT在胃癌组织中表达缺失,与浸润深度和淋巴结转移关系密切(P<0.05),与患者的性别、年龄、肿瘤大小及分化程度无关(P>0.05).β-Catenin在胃癌组织中高表达与浸润深度、肿瘤大小及分化程度和淋巴结转移关系密切(P<0.05),与患者的性别、年龄无关(P>0.05).癌组织中FHIT和β-Catenin的表达呈负相关(r=-0.358,P=0.011).结论 FHIT和β-Catenin在胃癌中表达成显著负相关,提示两者在胃癌的发生发展中可能存在重要的协同作用.     

大鼠神经干细胞通过Wnt/β-catenin途径抑制神经胶质瘤生长

[摘要]目的探讨大鼠神经干细胞对C6成胶质细胞瘤细胞生长的影响,并探讨可能的作用机制。方法采用0.4 μm孔径的Transwell小室将C6成胶质细胞瘤细胞和大鼠神经干细胞(NSCs)按不同比例[(C6NSCs):51(2×1054×104)、11(2×1052×105)、15(4×1042×105)]在无血清培养基中共培养7 d作为实验组,以单独培养的C6成胶质细胞瘤细胞作为对照组。采用SCID荷瘤动物模型观察共培养体系中C6成胶质细胞瘤细胞的成瘤能力;利用半定量RT-PCR及蛋白质印迹等方法分析在共培养体系中C6成胶质细胞瘤细胞凋亡相关基因(BMP2、c-Myc、Bcl-2、p53 mRNA)及Wnt信号分子蛋白(β-catenin、survivin)的表达。结果与实验组相比,对照组的组织切片中肿瘤细胞恶性程度高,有较多的核分裂像,核/质比例高;大片区域出现单核或多核瘤巨细胞。在实验组中,随着共培养体系中起始神经干细胞比例增高,肿瘤细胞异型性逐步降低。随着共培养体系中起始神经干细胞比例增高,C6成胶质细胞瘤细胞p53 mRNA的表达水平逐步增高,BMP2、c-Myc、Bcl-2 mRNA表达水平则逐步降低(P<0.05),β-catenin、survivin蛋白表达水平逐步降低(P<0.05)。结论大鼠神经干细胞在胶质瘤微环境中可能通过Wnt/β-catenin途径促进神经胶质瘤细胞凋亡进而抑制神经胶质瘤生长。     

二甲双胍通过抑制Wnt/β-catenin信号通路对胃癌干细胞增殖和凋亡的研究

目的:探讨二甲双胍通过抑制Wnt/β-catenin信号通路对胃癌干细胞增殖和凋亡的影响.方法:常规培养胃癌MKN-45细胞,并分选其干细胞,采用免疫荧光法观察分选前后MKN-45细胞中CD44+表达情况,通过流式细胞术检测分选前、后MKN-45细胞中CD44+比例,并通过免疫印迹法检测悬浮MKN-45肿瘤细胞球和贴壁细胞中性别决定区Y框蛋白2(SOX2)、八聚体结合转录因子4(OCT4)、同源域蛋白(Nanog)的蛋白表达.采用不同剂量二甲双胍(0,1,5,10 mmol/L)处理MKN-45干细胞24～72 h,RT-qPCR检测MKN-45干细胞Wnt/β-catenin信号通路基因表达情况,CCK-8法检测各组细胞增殖活力,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况.结果:与胃癌干细胞分选前相比,分选后CD44+比例在MKN-45细胞中由5.70％富集至89.32％;悬浮MKN-45肿瘤细胞球中肿瘤干细胞标志物SOX2、OCT4、Nanog蛋白高于贴壁细胞(P<0.05),提示胃癌干细胞分离成功.随着二甲双胍剂量的增加及处理时间的延长,MKN-45干细胞增殖活性、β-连环蛋白(β-catenin)呈下调趋势,其细胞凋亡率、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)呈上调趋势(P<0.05).结论:随着二甲双胍浓度增加及作用时间延长,胃癌干细胞增殖活性增强,凋亡率降低,其作用原因可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活有关.     

Wnt/β-catenin信号通路与孤独症关系的研究进展

孤独症谱系障碍是一种神经发育性疾病,其发病机制尚无定论。临床病例分析和动物模型研究表明,大量基因和信号通路与孤独症相关,遗传因素在发病中的作用逐渐被认可。Wnt/β联蛋白(β-catenin)信号通路是控制神经元分裂与分化的重要通路,该通路的异常表达在许多孤独症患者中被检测到,包括通路内部成分发生的异常或通路外的突变间接地改变通路中的成分而导致疾病的发生。Wnt/β-catenin信号通路变异可导致神经元增殖异常,兴奋/抑制性突触数目平衡和突触间冲动传递改变等。     

积雪草苷抗人胃癌细胞株SGC-7901作用的研究

目的:观察积雪草苷对人胃癌细胞株SGC-7901的作用;初步探讨积雪草作用于胃癌SGC-7901细胞的机制。方法:采用MTT法观察积雪草对胃癌细胞增值抑制的作用,流式细胞术检测积雪草苷对胃癌细胞凋亡的诱导作用,透射电镜观察SGC-7901凋亡细胞的超微结构。结果:积雪草苷作用的胃癌细胞增值被抑制;促进了胃癌细胞株SGC-7901的凋亡,并存在量效关系。透射电镜观察显示胞质浓缩,核固缩,并可见凋亡小体。结论:积雪草苷可抑制人胃癌细胞SGC-7901的增值并诱导其凋亡。