双炔失碳酯a、b单体体外抗前列腺癌作用比较

目的 比较双炔失碳酯(ANO)的两个差向异构体a、b-ANO体外抗前列腺癌作用的差别。方法 氧化铝柱层析法分离纯化a、b单体,薄层分析法定性检测所分离的产物;在常规培养液中,以4~32 mmol·L^-1的a、b-ANO分别作用于人前列腺癌非激素依赖型细胞DU145、PC-3和激素依赖型细胞L1A、LNCaP、RV1,作用时间分别为3 d,5 d,SRB法测细胞生存率;在去除激素培养液中,以不同浓度的a、b-ANO分别作用于激素依赖型细胞,同时加入雄激素拟似剂(R1881),SRB法测细胞生存率;以32 mmol·L^-1的a、b-ANO分别作用于LNCaP、DU145细胞,相差显微镜观察细胞形态和数量的变化。结果 对于非激素依赖型和激素依赖型细胞,a-ANO作用均强于b-ANO,且二者作用差距具有时间和剂量依赖性;a-ANO对抗雄激素的促细胞生长作用强于b-ANO,具有时间和剂量依赖性;相差显微镜观察结果表明,a-ANO作用后,细胞形态及数量变化较之b-ANO更为显著。结论 a-ANO体外抗前列腺癌作用强于b-ANO。     

雄激素对前列腺癌细胞系泌乳素相关蛋白表达的影响

目的:探讨泌乳素相关蛋白(PIP)在前列腺癌不同细胞系中的表达情况,以及雄激素对其表达的影响.方法:应用不同浓度(0、0.1、1、10、100 nmol/L)双氢睾酮(Dihydrotestosterone,DHT)或睾酮(Testosterone,T)及不同时间(6、24和48 h)对前列腺癌细胞系(LNCaP、PC-3、DU145)及人乳腺癌细胞系T47D进行处理,通过RT-PCR及实时荧光定量PCR法检测PIP及雄激素受体(AR) mRNA表达情况.通过Western blot法检测各细胞系(LNCaP、PC-3、DU145、T47D)中PIP蛋白表达情况.结果:雄激素依赖性前列腺癌细胞系LNCaP中有PIP mRNA及蛋白表达,PIPmRNA的表达随DHT或T浓度增加而增加,且于10 nmol/L浓度DHT或T时达到最大峰值.而AR mRNA的表达差异无统计学意义.雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC-3与DU145中无PIP mRNA及蛋白表达,并且AR表达较少或无AR表达.结论:PIP在前列腺癌发生发展机制中,以及鉴别前列腺癌是否具有雄激素依赖性方面有一定作用.     

雄激素对前列腺癌细胞系PIP表达的影响

目的：探讨PIP在前列腺癌不同细胞系中的表达情况,以及雄激素对其表达的影响。方法：应用不同浓度（0、0.1、1、10、100 nmol/L）双氢睾酮（Dihydrotestosterone,DHT）或睾酮（Testosterone,T）及不同时间（6、24和48 h）对前列腺癌细胞系（LNCaP、PC-3、DU145）进行处理,通过RT-PCR及实时荧光定量PCR法检测PIP 及AR mRNA表达情况。通过Western blot法检测各细胞系（LNCaP、PC-3、DU145、T47D）中PIP蛋白表达情况。结果：实时荧光定量RT-PCR法与Western blot结果显示,雄激素依赖性前列腺癌细胞系LNCaP中有PIP mRNA及蛋白表达,PIP mRNA的表达随DHT或T浓度增加而增加,且于10 nmol/L浓度DHT或T时达到最大峰值。而AR mRNA的表达差异无统计学意义。雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC-3与DU145中无PIP mRNA及蛋白表达,并且AR表达较少或无AR表达。结论：PIP或许在前列腺癌发生发展中,以及鉴别前列腺癌是否具有雄激素依赖性方面有一定作用。     

蛇床子素体外对人前列腺癌DU145细胞增殖的抑制作用及机制

目的观察天然化合物蛇床子素对人前列腺癌DU145细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用,为临床应用提供实验基础。方法用不同浓度的蛇床子素作用于DU145细胞,用四甲基偶氮噻蓝(MTT)法检测细胞增殖;用流式细胞仪AnnexinV/PI双染法检测蛇床子素诱导DU145细胞凋亡;用荧光显微镜观察蛇床子素作用于DU145细胞后细胞核的形态变化。结果 MTT法显示,蛇床子素对DU145细胞的增殖有明显的抑制作用(P<0.05),并呈现明显的时间浓度依赖性;流式细胞仪法显示,蛇床子素可诱导DU145细胞凋亡,且呈浓度依赖性;荧光显微镜下观察到蛇床子素处理组可见核固缩、核碎裂等典型的凋亡改变。结论蛇床子素对人前列腺癌DU145细胞的增殖具有抑制作用,机制与其诱导细胞凋亡有关。     

前列腺癌的药物治疗综述

前列腺癌的发展分为先期激素依赖性肿瘤细胞为主和后期激素抵抗性肿瘤细胞为主的两个阶段,所以前列腺癌的药物治疗也分为两个阶段,前一阶段的药物治疗主要包括雌激素及其类似物、黄体生成素释放激素药物的去势治疗、甾类及非甾类的抗雄激素药物治疗、最大雄激素阻断治疗和间歇性内分泌治疗;后一阶段的药物治疗主要包括化疗、免疫治疗、抗雄激素新药治疗、分子靶向治疗等。     

异黄酮对前列腺癌细胞及PTEN基因的影响

目的 通过大豆异黄酮抑制前列腺癌PC-3和LNCaP细胞生长和相关基因表达的影响，探讨大豆异黄酮类抑制前列腺癌的机制。方法 对染料木黄酮和大豆甙元作用后的雄激素非依赖型前列腺癌(PC-3)、雄激素依赖型前列腺癌LNCaP细胞的存活率、细胞毒作用、细胞周期和PTEN基因的mRNA表达等进行了研究。结果 染料木黄酮和大豆甙元对PC-3、LNCaP细胞抑制效应具有时间和剂量依赖性，具有诱导凋亡和引起坏死效应；染料木黄酮能诱导PC-3和LNCaP细胞的(PTEN)表达，而大豆甙元只能诱导LNCaP细胞PTEN表达。结论 PTEN基因表达的变化可能在染料木黄酮和大豆甙元抑制PC-3和LNCaP细胞中具有重要的意义。染料木黄酮和大豆甙元抑制PC-3和LNCaP细胞可能存在多种作用途径。     

前列腺癌的药物治疗

前列腺癌分为激素依赖型和激素非依赖型,前者对雄激素敏感,去除雄激素后细胞发生凋亡;而后者对去除雄激素无反应,发生转移后对常规肿瘤化疗药物治疗不敏感,死亡率高。对于不同类型的前列腺癌,常采用不同的药物进行治疗。     

番茄红素对人前列腺癌细胞（DU145）生长抑制的离体和整体水平研究

目的：研究番茄红素对人前列腺癌细胞DU145的影响。方法：体外培养的人前列腺癌细胞DU145经番茄红素作用后用苔盼蓝色进行活细胞计数,绘制生长曲线并计算抑制率;应用流式细胞仪分析番茄红素对DU145细胞周期和凋亡的影响。制作裸鼠人前列腺癌模型,观察番茄红素在整体动物上的作用。结果：番茄红素可以明显抑制DU145细胞的生长,且呈剂量－效应和时间－效应关系。10、20、40μmol/L处理细胞7d后,细胞增长的抑制率分别为10．76％、92．90％99．11％（P＜0．01）。裸鼠人前列腺癌模型上的研究显示,6％番茄红素油树脂可显著抑制腺瘤的生长、300mg/kg剂量组腺癌抑制率可达到75．76％（P＜0．05）。用经番茄红素处理过的细胞致瘤力消失。流式细胞仪分析显示番茄红素影响该细胞周期并引起细胞凋亡,凋亡率高达42．42％。结论：番茄红素可以在离体细胞和整体动物水平明显抑制雄激素非依赖型人前列腺癌DU145,其抑制机制可能是通过影响人前列腺癌细胞的生长周期和诱导其凋亡而实现。     

姜黄中姜黄素类化合物抗前列腺癌及对15-脂氧合酶抑制活性的初步研究

摘 要 目的：研究姜黄中姜黄素类化合物对前列腺癌细胞PC3, DU145, LNCaP增殖及对15 脂氧合酶（15 LOX）抑制作用,并考察两者相关性。方法: 应用四甲基偶氮唑比色法（MTT）测定姜黄乙酸乙酯部位、总姜黄素、姜黄素、单去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素对前列腺癌细胞PC3, DU145, LNCaP增殖抑制;应用脂氧合酶抑制药筛选试剂盒测定对15 LOX抑制活性,分析两者的相关性。结果: 姜黄素对15 LOX抑制活性最好,在6 μmol·L^-1时,姜黄素抑制率为63.1%,且其对前列腺癌细胞PC3, DU145, LNCaP抑制活性也较好,IC₅₀分别为(14.75±2.37), (18.99±3.43), (19.02±2.52) μmol·L^-1;天然姜黄素类化合对前列腺癌细胞增殖的抑制活性与对15 LOX抑制活性呈一定的相关性（P<0.05）。结论:天然姜黄素类化合物抗前列腺癌作用与对脂氧合酶的抑制作用具有一定相关性,脂氧合酶可能是天然姜黄素作用于前列腺癌的靶标之一。     

人前列腺癌细胞中肝X受体特异性激动剂GW3965对核受体结合蛋白1的影响

目的探讨人前列腺癌细胞系DU145细胞中肝X受体(liver X receptor,LXR)特异性激动剂GW3965对核受体结合蛋白1(nuclear receptor binding protein 1,NRBP1)的表达调控作用。方法采用MTT法检测不同浓度GW3965(浓度分别为0.5、5、10μmol/L)作用24 h后对DU145细胞增殖的影响。在人前列腺癌DU145细胞中用LXR的特异性激动剂GW3965处理24 h后,经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测LXR特异性靶基因三磷腺苷结合A1(ATP-bindingcassette A1,ABCA1)转录水平的表达情况;随后在转录水平和翻译水平检测NRBP1的表达。结果 LXR特异性激动剂GW3965各实验组对细胞的活性和增殖无影响(P>0.05)。GW3965作用于DU145细胞后,ABCA1转录水平呈剂量依赖性升高,表明LXR在DU145细胞中具有功能活性。LXR经过活化后在转录和翻译水平对NRBP1的抑制作用呈剂量依赖性降低。结论 LXR在DU145细胞中可抑制NRBP1的表达。     

Suppressive effects of<Emphasis Type="Italic">Platycodon grandiflorum</Emphasis> on the progress of carbon tetrachloride-lnduced hepatic fibrosis

The suppressive effects of Platycodi Radix (Changkil: CK), the root of Platycodon grandiflorum A. DC (Campanulaceae), on the progress of acute carbon tetrachloride (CCl4)-induced hepatic fibrosis were investigated in the rat. CK significantly suppressed CCl4-induced hepatic necrosis and inflammation, as determined by the serum enzymatic activities of alanine and aspartate aminotransferase and serum tumor necrosis factor-alpha levels, in dose-dependent manners. In addition, the increased hepatic fibrosis after acute CCl4 treatment was suppressed by the administration of CK. CK also significantly prevented the elevation of hepatic alpha1 (I) procollagen (type I collagen) mRNA and alpha-smooth muscle actin (alpha-SMA) expressions in the liver of CCl4-intoxicated rats and also suppressed the induction of alpha-SMA and type I collagen in cultured hepatic stellate cells, in dose-dependent manners. These results suggest that the suppressive effects of CK against the progress of acute CCl4-induced hepatic fibrosis possibly involve mechanisms related to its ability to block both hepatic inflammation and the activation of hepatic stellate cells.     

当归对CCl4致大鼠肝纤维化胶原蛋白含量的影响

目的：本实验的目的是观察当归对四氯化碳(CCl4)致大鼠肝纤维化肝胜胶原蛋白含量的影响。方法：通过灌胃给当归于CCl4诱导的肝纤维化大鼠模型，相当于原生药的6g／kg、4g/kg和2g/kg,10周后，观察当归对肝脏胶原蛋白含量及肝胖组织病理学的影响。结果：当归组的胶原蛋白含量低于模型组，组织病理学也显示当归能减轻肝纤维化。结论：当归可抵抗肝纤维化，其机理可能与其抑制成纤维细胞的增殖和减少胶原纤维合成有关。     

苦参素对肝纤维化大鼠肝组织TNF-α表达的影响

目的:观察苦参素对肝纤维化模型大鼠肝组织中TNF-α含量变化的影响,探讨苦参素对肝纤维化的保护机制。方法:采用皮下注射CCl4制备大鼠肝纤维化模型,将30只成年雄性Sprague-Darley大鼠随机分为正常组、模型组和苦参素组,于实验的第12周末处死大鼠,采用ELISA法检测各组大鼠血中TNF-α的含量,半定量RT-PCR法检测各组大鼠肝组织中TNF-αmRNA的变化。结果:与模型组相比,苦参素组TNF-α的表达水平明显下调。结论:苦参素对肝纤维化的治疗作用,其作用机制可能与降低TNF-α的表达有关。     

坎地沙坦对肝纤维化大鼠血管紧张素转化酶2表达的影响

目的旨在观察血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂(ARB)坎地沙坦对四氯化碳(CCl4)大鼠肝纤维化模型的疗效及大鼠肝组织血管紧张素转化酶2(ACE2)表达的影响。方法 42只雄性Wistar大鼠随机分为3组,正常对照组12只,模型组15只,坎地沙坦治疗组15只。除对照组外,给予大鼠首次皮下注射40%CCl4油剂5mL/kg,以后每次皮下注射40%CCL42mL/kg,每周2次。正常对照组给予相同剂量的油剂皮下注射。预防治疗组从实验第1天开始给予坎地沙坦(4mg.kg-1.d-1)灌胃,直至实验结束,共8周。分别于42d(6周)及56d(8周)时,测定各组体质量和门脉压力后,分别杀死6只大鼠,留取血及肝组织标本备用。分离血清测丙氨酸氨基转移酶(ALT),通过苏木素-伊红(HE)及Masson染色观察各组肝纤维化的程度,采用免疫组织化学染色测定ACE2表达情况。结果与对照组相比,模型组体质量降低(P<0.05),血清ALT升高(P<0.05),而预防治疗组体质量增加,ALT水平下降,差异有统计学意义(P<0.05),模型组门脉压力升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),治疗组的门脉压力下降(P<0.05)。ACE2免疫组织化学结果表明:与正常对照组相比,模型组肝组织中ACE2阳性表达增强(P<0.05),坎地沙坦治疗组ACE2表达较模型组明显增高(P<0.05)。结论血管紧张素(Ang)Ⅱ1型受体拮抗剂坎地沙坦具有良好的抗肝纤维化作用,其机制是坎地沙坦可增加肝组织ACE2表达,激活ACE2-Ang-(1-7)-Mas轴,促进Ang-(1-7)的生成增多,从而发挥其抗肝纤维化的作用。     

山芝麻提取物对肝纤维化大鼠肝组织ColⅠmRNA和ColⅠ蛋白表达的影响

目的:研究山芝麻提取物对肝纤维化大鼠肝组织Ⅰ型胶原(ColⅠ)mRNA和ColⅠ蛋白表达的影响。方法:采用CCl4灌胃复制大鼠肝纤维化模型,6周末用荧光定量PCR法测定山芝麻提取物对大鼠肝组织ColⅠmRNA的相对表达值,用免疫组化法检测ColⅠ蛋白的表达量。结果:山芝麻提取物可显著降低肝纤维化大鼠肝组织ColⅠmRNA和ColⅠ蛋白的表达(P<0.01或P<0.05),且随着药物浓度的增加,其作用逐渐增强,呈现量效反应关系。结论:山芝麻提取物能显著改善肝纤维化大鼠的肝脏组织结构,减轻肝纤维化。其抗肝纤维化的机制可能与抑制ColⅠ有关。     

CCl4诱导大鼠肝纤维化模型的建立

目的：构建肝纤维化大鼠动物模型。方法：取雄性Sprague—Dawley（SD）大鼠80只,通过腹腔注射以橄榄油稀释10N的四氟化碳．1mL／kg．每周1次．共8周．建立大鼠肝纤维化动物模型。造模结束时处死动物。酶联免疫吸附法检测血清ALT、AST水平．HE染色及免疫荧光法观察大鼠肝组织病理学变化和胶原沉积。分别观察在造模第5、6、7、8周时各项指标的变化。结果：建模第5周即可见肝功异常．血清AL丁和AST明显升高（P〈0．05）。第6周肝脏假小叶形成。大鼠肝脏有明显的纤维化病灶。于第7周始最为典型。大鼠HE染色中可见肝组织病变区域多,面积大,正常肝小叶结构破坏．肝细胞索排列紊乱．胶原纤维明显增生。呈较宽的务索状分隔肝小叶,弥漫分布,形成假小叶。建模成功率高达80．0％。结论：CCL诱导可成功建立大鼠肝纤维化模型。     

四氯化碳致大鼠肝纤维化模型血液流变学性质的研究

目的：研究大鼠肝纤维化时血液流变学性质的变化特征。方法：以四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型,检测血液粘度、血浆粘度、红细胞压积、红细胞特性指数等血液流变学参数,分析其变化特征。结果：与正常组比较,模型组大鼠全血粘度、全血还原粘度、红细胞压积、红细胞聚集 数及红细胞刚性指数明显增高。结论：大鼠肝纤维化时血液粘增大,红细胞流变性能减弱,易引发微循环障碍,加重肝纤维化的发展。     

Inhibition of hepatic stellate cell collagen synthesis by N-(methylamino)isobutyric acid

The increased deposition of extracellular matrix by hepatic stellate cells following liver injury, in a process known as activation, is considered a key mechanism for increased collagen content of liver during the development of liver fibrosis. We report that N-(methylamino)isobutyric acid (MeAIB), a specific inhibitor of System A-mediated amino acid uptake, reduces the accumulation of collagen in CFSC-2G hepatic stellate cell cultures and in a rat model of liver injury and fibrosis. Rat CFSC-2G cells were cultured in 0-5mM MeAIB, and the accumulation and synthesis of collagen were measured by binding to Sirius red F3B and pulse-labeling with [3H]-proline, respectively. The effect of MeAIB on collagen accumulation in vivo was evaluated utilizing a rat model of hepatic fibrosis. MeAIB inhibited collagen accumulation in CFSC-2G cultures in a concentration-dependent manner with 5mM MeAIB reducing collagen 44.6+/-1.2% compared with the control. In CFSC-2G cultures, MeAIB selectively inhibited the incorporation of proline into cellular macromolecules by 43+/-4%, while the synthesis of proteins containing leucine was not affected. In vivo, oral administration of 160mg MeAIB/kg body weight per day to rats significantly reduced the hepatic collagen accumulation in response to 1 week of CCl(4)-induced liver injury. MeAIB reduces the accumulation of collagen in CFSC-2G hepatic stellate cell cultures and in a CCl(4)-induced rat model of liver injury and fibrosis.     

茵陈蒿汤对实验性肝纤维化大鼠肝细胞的保护作用及超微结构观察

目的 :观察茵陈蒿汤对实验性肝纤维化大鼠肝细胞损伤的保护作用及超微结构变化。方法 :Wistar大鼠被随机分为 4组 :正常对照组、CCl4 模型组、秋水仙碱组、茵陈蒿汤组。采用 4 0 % CCl4 皮下注射制备大鼠实验性肝纤维化模型 ,观察茵陈蒿汤对肝功能、肝脏组织病理变化和超微结构变化的影响。结果 :茵陈蒿汤能明显改善实验性肝纤维化大鼠的肝功能、肝脏组织病理变化和超微结构变化 ,与 CCl4 组比较差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结论 :茵陈蒿汤对 CCl4 损伤性肝细胞有保护作用 ,可改善肝功能 ,对线粒体等细胞器的损伤具有保护作用     

Expression of cytokeratins 8 and 18 on Mallory body and oval cell in rats during hepatic fibrosis

BACKGROUND: The aim of this study was to determine the induction and distribution of Mallory body (MB) and oval cells in carbon-tetrachloride (CCl4)-induced rat liver fibrosis. MATERIALS AND METHODS: MBs and oval cells expressing cytokeratins (CKs) 8 and 18 were monitored by immuno-histochemistry and immunoblotting. RESULTS: MBs were mainly detected within hepatocytes near the fibrotic areas, and oval cells were located along or in the fibrotic areas. Both MBs and oval cells increased in size and number in the development of fibrosis. At cirrhotic liver, most of the oval cells were located in the fibrous septa and around newly formed bile ductules. Moreover, as hepatic injuries developed into fibrosis, a much more prominent single band of CK18 was detected. CONCLUSION: The occurrence and distribution of MB and oval cells in CCl4-induced rat liver fibrosis are reported. This represents the first CCl4 experimental in vivo model of MB induction, which will be useful for further investigations on the pathogenesis of MB.