短期肠外营养支持加化疗对结直肠癌细胞动力学和凋亡的影响

目的:了解术前短期肠外营养加化疗对结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:治疗前经肠镜活检证实为结直肠癌的66例病人随机分为4组,即对照组18例(CO),肠外营养组(PN)16例,术前单纯化疗组(CT)16例,肠外营养加化疗支持组(PC)16例,用流式细胞计数仪检测手术所获标本的增殖情况,包括DNA指数和细胞周期G_0/G_1、S、G_2+M(％);Ki67免疫组织化学染色检测术前肠镜标本和手术所获标本的Ki67指数及细胞凋亡指数(TUNEL方法)。采用SPSS 8.0统计软件包进行统计处理。结果:经1周营养支持后,PN组细胞增殖指标S、G_2+M比率、Ki67阳性细胞数有显著增加(P<0.05);CT组的肿瘤细胞凋亡指数为(19.3±7.2)％,PC组细胞凋亡指数可达(31.9±10.1)％,与其他组相比差异有显著性意义(P<0.01)。结论:术前短期肠外营养可能会刺激肿瘤的生长、增殖,但亦可能有利于发挥周期特异性化疗药物的作用而增加其疗效。     

FHIT mRNA在结直肠癌中的表达及其与细胞凋亡的相关性

目的研究脆性组氨酸三联体基因(FHIT mRNA)在结直肠癌组织中的表达以及与结直肠癌细胞凋亡的相关性。方法应用组织芯片技术制作正常直肠痔组织、腺瘤组织标本各16例及结直肠癌80例石蜡标本,采用原位分子杂交检测FHIT mRNA,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术(TUNEL)检测结直肠癌细胞的凋亡指数。结果(1)正常直肠组织平均FHIT mRNA阳性细胞率为45.67%±9.39%,腺瘤组织平均阳性细胞率为23.45%±5.06%,结直肠癌组织平均阳性细胞率为15.1%±4.11%,三者比较,差异有统计学意义(P<0.01),结直肠癌患者不同年龄、性别、肿瘤部位、大小、血清CEA水平、组织学类型的FHIT mRNA阳性细胞率无统计学差异(P>0.05);不同分化程度、病理分期、淋巴转移的FHIT mRNA阳性细胞率有统计学差异(P<0.05);(2)FHIT mRNA表达程度不同的结直肠癌细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)间存在显著性差异(P<0.01);(3)FHIT mRNA阳性细胞率高患者平均生存期为42.7个月,阳性细胞率低患者为29.8个月,前者的年累计生存率(88.10%,37/42)显著低于阳性细胞率低者(74.19%,23/31)(P<0.01)。结论FHIT基因可能参与结直肠癌细胞凋亡的调节,FHIT基因表达下降可能与结直肠癌的发生密切相关。     

阿司匹林对胃癌细胞株细胞凋亡的影响

本研究旨在研究阿司匹林对不同分化程度的胃腺癌细胞株的细胞毒作用及诱导其发生凋亡的作用 ,为临床应用阿司匹林治疗胃癌提供实验依据。材料与方法　　 1 .材料　　阿司匹林为Ｓｉｇｍａ公司产品 ;羟基喜树碱注射液(ＨＣＰＴ)为湖北黄石市第二制药厂产品 ;ＲＰＭＩ- 1 640培养基为ＧＩＢＣＯ公司产品 ;胃癌细胞株ＳＧＣ790 1 (中分化腺癌 )及ＭＫＮ2 8(高分化腺癌 )由上海消化外科研究所惠赠。细胞凋亡原位检测试剂盒为ＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒＭａｎｎｈｅｉｍ公司产品 ;三联溶解液为 1 0 %十二烷基磺酸钠 (Ｓｏｄｉｕｍｄｏｄｅｃｙｌｓａｌ…     

热化疗对人结直肠癌细胞凋亡和bcl—2表达的影响

运用流式细胞仪（FCM）技术及免疫组化方法,对热化疗在诱导人结直肠癌细胞凋亡和bcl－２基因表达中的作用进行研究,并初步探讨其作用机制。１．材料与方法：LOVO细胞（第一军医大学病理教研室提供）常规贴壁于３７℃、５％CO２孵箱培养、传代,将处于指数生长期的细胞,进行如下分组处理：（１）对照组（A组）：不作任何处理;（２）单纯化疗：丝裂霉素C（MMC）浓度为０．０１mg／ml（B组）、０．０２mg／ml（C组）,在３７℃孵箱中培养;（３）单纯热疗（D组）：在４３℃（精度±０．５℃）电热恒温水浴箱作用３０min,然后继续培…     

男性服用阿司匹林的剂量和时间以及患结直肠癌的危险性

Chan AT，Giovannucci EL，Meyerhardt JA等人通过一项纳入47363例年龄在40～75岁的从事卫生职业的健康成年男性的前瞻性研究，随访18年，每2年收集1次数据。结果显示，长期、规律地服用阿司匹林可以减少男性患结直肠癌的危险。     

FasL基因表达对结直肠癌细胞肝转移影响的研究

目的　探讨FasL基因表达对结直肠癌细胞生物学行为的影响及在肝转移中的作用。方法　采用RT PCR方法检测大肠癌原发灶、癌旁肠黏膜、肝转移灶中FasL基因表达。用细胞转染方法 ,将FasLcDNA转染人直肠癌细胞HR 8348,采用四唑蓝法观测FasL表达对癌细胞生长抑制率及对5 FU、卡铂杀伤作用的影响。　结果　结直肠癌原发灶 (5 8例 )、癌旁肠黏膜 (5 8例 )、肝转移灶 (2 8例 )中FasL基因表达阳性率分别为 2 4 % (14 /5 8)、14 % (8/5 8)、10 0 % (2 8/2 8)。肝转移灶中FasL表达阳性率高于癌原发灶 (χ2 =4 3 4 9,P <0 0 1)和癌旁肠黏膜组织 (χ2 =5 7 6 6 ,P <0 0 1)。肝转移组原发灶FasL表达阳性率高于无肝转移组 (χ2 =3 96 ,P <0 0 5 )。转染HR 8348细胞FasL表达为阳性。用 5 FU、卡铂杀伤FasL转染细胞和未转染细胞 ,2组癌细胞生长抑制率有显著性差异 (t=9 0 2、t=11 93,P <0 0 1)。在相同化疗药物浓度下 ,FasL阳性HR 8348细胞存活率高于对照组癌细胞。　结论　FasL阳性癌细胞对化疗药物有较强的耐受性。FasL基因表达能使癌细胞逃避免疫监视和杀伤并对化疗药物产生抗性 ,促进结直肠癌发生肝转移。     

结直肠癌中CAR-T细胞免疫治疗的研究现状及展望

嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞免疫疗法是一种通过基因工程修饰来招募T细胞对抗肿瘤的新方法。CAR-T细胞免疫疗法在血液系统恶性肿瘤中已取得巨大的进展,因此,许多研究者提出将其用于诸如结直肠癌(CRC)这类实体肿瘤。但是,由于肿瘤特异抗原的缺乏,肿瘤细胞间的紧密连接和免疫抑制性的肿瘤微环境,以及治疗不良反应等问题,限制...     

阿司匹林对大鼠脊髓损伤细胞凋亡的保护作用

目的 观察阿司匹林对大鼠慢性压迫性脊髓损伤后神经细胞凋亡及神经功能恢复的影响。方法选择65只体重为220～250g的Wistar大鼠（雌雄不限），于T10部位置入后路渐进式压迫装置，制作成慢性压迫性脊髓损伤模型。随机分为阿司匹林治疗组（A组，30只）、生理盐水对照组（B组，30只）和假手术组（C组，5只）。应用原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导dUTP标记技术，分别于慢性压迫性脊髓损伤后1、3、7、14、28d做行为学评价，并取材对脊髓损伤区进行细胞凋亡检测。结果A、B组均发现细胞凋亡，A组与B组细胞凋亡率相比差异有显著性（P〈0．05），A组与B组行为学评价相比差异有显著性（P〈0．05），神经细胞凋亡情况与运动功能改变具有相关性。结论 阿司匹林对慢性脊髓压迫损伤后所导致的神经细胞凋亡产生抑制作用。     

结直肠癌流行病学与预防

直肠癌是常见病和多发病,全世界每年新诊断病例接近600000例。近年来,有关直肠癌的基础研究和临床诊治,取得一些实质性进展。在过去20年,总的5年生存率从1970年的33%提高到1990年的55.3%,最近大约达到60%～68%。局部复发率下降到3%～12%。为了交流经验,进一步提高诊治水平,本刊编委会特邀请国内外5所大学的6位专家就直肠癌的一些热点问题,结合临床实践,系统介绍国内外在这一领域的新理论、新技术和最新进展。内容详实,观点新颖,实用,可供读者一阅。在此,对参加本次论坛的各位专家和编辑部的全体同仁付出的辛勤劳动致以衷心感谢。     

吸烟对结直肠癌危险性的影响

最近观察到结直肠癌解剖位置的右向转移。本研究旨在分析吸烟对结直肠癌发病部位的影响。　　作者对加拿大蒙特利尔多个地区进行人群为基础病例对照研究。研究对象包括结直肠癌、其他癌以及对照人群。本文分析其中 5 85例组织学证实的结直肠腺癌患者。均为男性 35～ 70岁 ,行面对面访问并收集足够的吸烟史。其中近侧结肠癌 (阑尾、盲肠、升结肠、横结肠、结肠肝曲、横结肠及结肠脾曲 ) 1 76例 ;远侧结肠癌 (降结肠、乙状结肠 ) 1 79例 ;直肠癌 2 30例。同时选取 40 5例公认与吸烟无关的癌作为人群对照。吸烟种类为低烟、雪茄及烟管。吸烟程…     

三氧化二砷诱导乳腺癌细胞系MCF-7凋亡的实验研究

目的观察不同浓度的三氧化二砷(As2O3)作用不同时间后对乳腺癌细胞系MCF-7的影响及其作用机理。方法应用不同浓度的As2O3作用于乳腺癌细胞后,观察As2O3对乳腺癌细胞生长状态的影响;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察其对MCF-7细胞增殖的影响;应用琼脂糖凝胶电泳和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测As2O3对MCF-7细胞凋亡的诱导作用。结果不同浓度的As2O3作用于乳腺癌细胞有明显的时间和剂量依赖性,As2O3作用后细胞生长明显受抑制,并出现明显的凋亡特征性改变(细胞膜完整、染色质固缩、核碎裂、凋亡小体形成);经1、2、4及8μmol/L4个剂量的As2O3处理48h后,琼脂糖凝胶电泳检测到细胞发生凋亡时DNA降解形成梯形分子条带;4μmol/LAs2O3作用24、48及72h后TUNEL法可检测到细胞凋亡水平显著性升高。结论As2O3可明显抑制乳腺癌细胞的生长,其机理主要是诱导乳腺癌细胞凋亡。     

肽核酸对大肠癌细胞生长影响的实验研究

研究肽核酸（PNA）对大肠癌细胞端粒酶活性的抑制作用及其对大肠癌细胞生长的影响,探索大肠癌治疗新方法。（1）检测不同浓度PNA对大肠癌LS-174T细胞端粒酶活性的影响;（2）应用脂质体Lipfectamine^TM介导不同浓度PNA-DNA杂交混合物转染LS-174T细胞,观察细胞克隆生长抑制结果,确定PNA对细胞生长的最佳抑制剂量;（3）选用最佳抑制剂量PNA转染LS-174T细胞、Lipfectamine^TM组和空白对照组,并观察其克隆形成率、细胞形态及群体生长差异。结果显示：（1）不同浓度PNA对大肠癌细胞端粒酶活性均有抑制作用,且与PNA浓度呈正相关;（2）细胞克隆形成抑制实验中PNA对LS-174T细胞最佳抑制浓度为200nmol／L;（3）PNA实验组端粒酶活性明显低于脂质体组和空白对照组。结果表明,PNA抑制大肠癌细胞端粒酶活性对大肠癌LS-174T细胞生长具有明显抑制作用,为大肠癌早期诊断与治疗开辟新途径。     

尼美舒利对结肠腺癌细胞MMP-2表达的影响

目的 探讨选择性环氧合酶-2（COX-2）抑制剂——尼美舒利对体外培养的结肠癌细胞的生长及对基质金属蛋白酶-2（MMP-2）表达的影响。方法实验分为尼美舒利组、二甲亚砜（DMSO）对照组及不接种细胞的空白对照组，采用MTT法检测不同浓度的尼美舒利对人结肠癌细胞株HT-29（COX-2高表达）及HCT-116（COX-2低表达）增殖的抑制效应；采用改良明胶酶谱分析法检测MMP-2的表达。结果尼美舒利对人结肠癌细胞株HT-29和HCT-116生长的抑制作用呈时间、剂量依赖性，且对HT-29细胞的抑制作用强于HCT-116细胞；尼美舒利抑制了HT-29细胞的MMP-2表达，而对HCT-116细胞MMP-2的表达的抑制作用不明显。结论尼美舒利可明显抑制COX-2高表达的结肠癌细胞株HT-29的增殖和生长，提示尼美舒利可能通过抑制COX-2活性而降低细胞MMP-2的表达。     

奥曲肽对前列腺癌细胞株PC-3的抑制作用及对VEGF表达的影响

目的：探讨奥曲肽（生长抑素类似物）对雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3的抑制作用及对其血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响.方法：分别用浓度为0.1、0.3、1.0、3.0 mg/L奥曲肽对体外培养的人前列腺癌PC-3细胞进行处理,24 h、48 h、72 h后采用MTT法检测细胞生长活性,行Hoechst33258染色,用荧光显微镜观察细胞凋亡的形态学改变;用RT-PCR法测定细胞半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）及VEGF的表达.结果：奥曲肽能以剂量与时间依赖性的方式抑制PC-3细胞的生长,促进其凋亡;0.1、0.3、1.0、3.0 mg/L奥曲肽作用PC-3细胞24 h后的存活率分别为（0.971±0.016）%、（0.853±0.015）%、（0.717±0.031）%、（0.743±0.029）%,作用48 h后的存活率分别为（0.918±0.015）%、（0.835±0.015）%、（0.682±0.018）%、（0.727±0.014）%,作用72 h后的存活率分别为（0.922±0.017）%、（0.841±0.013）%、（0.717±0.017）%、（0.739±0.003）%,差别有统计学意义（P〈0.01）;Caspase-3表达较对照组明显升高;而VEGF则明显降低.结论：奥曲肽能显著抑制PC-3细胞的体外生长,促进其凋亡;VEGF可能是其中的一条途径.     

siRNA端粒酶催化亚单位诱导人膀胱癌BIU-87细胞凋亡的研究

目的：研究siRNA（small interference RNA）对人膀胱癌BIU-87细胞凋亡和端粒酶催化亚单位（hTERT）基因表达的影响。方法：设计并体外转录合成针对hTERT基因的3个特异性siRNA,通过脂质体将siRNA转入BIU-87细胞,分别采用MTT和DNA原位末端标记（TUNEL）法检测siRNA对BIU-87细胞生长抑制率（IR％）和凋亡指数（A100）的影响,半定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和Western Blotting检测siRNA对hTERT mRNA及其蛋白表达的影响。结果：转染后的siRNA 1～3组的B1U-87细胞的IR（34．62％、62．19％、57．43％）和AI（30．62％、54．26％、51．50％）均分别显著高于正常对照组（3．46％和5．03％）（均P〈0．05）,hTERT mRNA及其蛋白表达水平均显著低于对照组;其中siRNA2～3对BIU-87细胞的IR、AI和hTERT表达的抑制作用均显著高于siRNA1。结论：体外转录合成的siRNA可抑制BIU-87细胞hTERT的表达,诱导BIU-87细胞凋亡,从而抑制BIU-87细胞生长,为siRNA介导的膀胱肿瘤基因沉默提供实验依据。     

HGF/SF对姜黄素诱导大肠癌细胞凋亡的作用

目的 观察肝细胞生长因子／离散因子（HGF／SF）在姜黄素诱导的大肠癌细胞凋亡中的作用。方法 采用MTT法分析姜黄素对大肠癌细胞的抑制作用；流式细胞术评价HGF抗凋亡作用。结果不同浓度姜黄素作用Caco2细胞后发现，只在64μg／ml浓度发挥作用，即抑制细胞增殖；而同时加入不同浓度的HGF后可以拮抗姜黄素引起的Caco-2细胞生长的抑制作用，但HGF发挥作用无浓度依赖关系。流式细胞术检测结果发现，姜黄素只在64μg／ml浓度下诱导Caco-2细胞凋亡，在加入不同浓度HGF后，凋亡明显减少，但并无剂量依赖关系。MAPK途径在HGF拮抗姜黄素诱导的Caco-2细胞凋亡中的作用发现，阻断p42／p44MAPK和p38MAPK后，并不影响HGF对Caco-2细胞凋亡的保护作用。结论 HGF拈抗姜黄素诱导的Caco-2细胞凋亡，MAPK信号传导途径可能不参与此过程。     

高压氧对人前列腺癌LNCaP细胞株小鼠荷瘤模型作用的研究

目的:评估应用高压氧治疗前列腺癌放疗后出血性膀胱炎的安全性,探讨高压氧对体内前列腺癌细胞生长的影响。方法:采用人前列腺癌LNCaP细胞株皮下接种构建小鼠荷瘤模型(n=30),随机分为对照组(n=15)和实验组(n=15)。对照组常压常氧条件下饲养,实验组每周进行5次0.2MPa高压氧暴露,共计20次。连续观察4周两组移植瘤生长体积的变化,应用免疫组化法比较两组瘤体组织相关病理学特征指标:瘤体微血管密度(CD34)、瘤细胞增殖(Ki-67蛋白)以及瘤细胞凋亡(p53、p27蛋白)。结果:肿瘤接种后第28天,对照组移植瘤体积为(122.0±8.2)mm3,实验组为(120.0±7.9)mm3,两组差异无显著性(P>0.05);对照组移植瘤CD34及Ki-67、p53、p27蛋白表达的阳性细胞率分别为(36.2±4.9)%、(75.3±8.4)%、(44.2±5.7)%、(61.5±5.5)%,实验组分别为(39.3±5.2)%、(78.1±7.6)%、(40.4±6.2)%、(63.7±5.1)%,病理学特征均无显著性差异(P>0.05)。结论:高压氧对小鼠荷瘤模型前列腺癌细胞生长无促进作用,对前列腺癌中新生血管也无明显影响。     

蛋白酶体抑制剂MG-132对胃癌细胞株作用的实验研究

目的:探讨蛋白酶体抑制剂MG-132阻断泛素-蛋白酶体通路(ubiquitin-proteasome pathway,UPP)对体外胃癌细胞增殖的抑制作用及其相关机制。方法:将不同浓度的MG-132加入胃癌细胞株SGC-7901中,观察细胞形态变化,并应用MTT法测定细胞抑制效应,流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫组化法检测P27kip1的表达。结果:MG-132对胃癌细胞增殖具有显著的抑制作用,瑞氏染色显微镜观察MG-132作用于胃癌细胞后,可见细胞出现细胞质、核仁消失,染色质固缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割及大量凋亡小体。5.0μmol/L的MG-132作用24、48h后的凋亡率分别为(16.7±5.1)%和(72.8±16.4)%。免疫组化显示,胃癌细胞在5.0μmol/L的MG-132作用48h后明显表达P27kip-1。结论:MG-132能显著抑制胃癌细胞的增殖,诱导其凋亡。其机制可能为通过上调抑癌蛋白P27kip-1水平而起到抗肿瘤作用。     

PTD-BCR/ABL SH3融合蛋白对肝癌细胞株SMMC-7721的杀伤作用

目的：探讨PTD-BCR／ABL SH3融合蛋白对肝癌细胞株SMMC-7721的体外杀伤活性。方法：通过将PTD-BCR／ABL SH3融合蛋白与SMMC-7721细胞共培养，用免疫细胞化学染色的方法观察和检测PTD-BCR／ABL SH3融合蛋白进入细胞后的定位，MTT法检测蛋白对肝癌细胞的杀伤活性，电镜观察SMMC-7721肝癌细胞与PTD-BCR／ABL SH3融合蛋白共培养后超微结构变化。结果：PTD-BCR／ABL SH3融合蛋白进入SMMC-7721细胞株后主要分布在细胞核，少量分布于胞浆。融合蛋白对SMMC-7721细胞株的杀伤作用呈浓度依赖性，在所选蛋白浓度和观察时限内．当蛋白浓度≥0．14mg／ml、共培养4h后，SMMC-7721细胞形态就出现改变，8h后出现死亡细胞。电镜显示，PTD-BCR／ABL SH3融合蛋白促使SMMC-7721细胞株凋亡。结论：PTD-BCR／ABL SH3融合蛋白能抑制SMMC-7721细胞株增殖，促进其凋亡，并改变其骨架结构。