冻干同种异体骨粉与人淋巴细胞共培养时对细胞的影响

背景：同种异体骨材料一直存在着免疫原性方面的问题,目前关于其免疫原性的研究大多以临床疗效为依据,因此在实验室层面上对其免疫原性方面的研究及相关方法学的探讨有一定的意义。 目的：对冻干同种异体骨进行免疫原性分析。 设计、时间及地点：对比观察实验,于2008-05/12在南方医科大学附属南方医院临床医学实验研究中心完成。 材料：羟基磷灰石粉(200目)由北京京航生物有限公司提供;同种异体冻干骨粉(200目)由山西奥瑞生物材料有限公司提供。淋巴细胞来源10名健康青年志愿者,年龄23~26岁。 方法：实验分为阳性对照组（植物血球凝集素）,阴性对照组(羟基磷灰石)及实验组(冻干骨粉2,1,0.5 g/L),采用淋巴细胞转化实验Alamarblue法进行细胞与材料共培养,72 h后酶标仪570 nm,600 nm双波长下读取吸光度值计算各组淋巴细胞转化率。 主要观察指标：酶标仪检测淋巴细胞转化率。 结果：人冻干骨粉各组与羟基磷灰石组比较,差异无显著性意义(P > 0.05);与植物血球凝集素组比较,差异有显著性意义(P < 0.001);骨粉各组之间两两比较,差异无显著性意义(P > 0.05)。 结论：在本实验中冻干同种异体骨未出现对淋巴细胞刺激的免疫原性作用,不能对淋巴细胞的增殖产生影响。骨粉在0.5~ 2.0 g/L剂量内不存在量效关系。     

磷酸钙骨水泥复合不同比例同种异体微小颗粒骨修复兔桡骨缺损

背景：已证实同种异体微小颗粒骨复合磷酸钙骨水泥修复骨缺损的效果较好，但是二者复合的最佳比例还无定论。 目的：观察不同比例的同种异体微小颗粒骨与磷酸钙骨水泥复合物修复兔桡骨缺损的效果，寻找最合适的比例。 设计：随机对照动物体内实验。 材料：健康成年日本大耳白兔5只，取骨盆骨制成直径300~500 μm的同种异体微小颗粒骨作为供体。 方法：健康成年日本大耳白兔45只，建立兔双侧桡骨中段12 mm 骨缺损模型，然后随机分成5组，每组9只。均植入同种异体微小颗粒骨与磷酸钙骨水泥复合物，同种异体微小颗粒骨与磷酸钙骨水泥的比例分别为1∶1，2∶1，3∶1，4∶1，5∶1。 主要观察指标：观察同种异体微小颗粒骨与磷酸钙骨水泥混合后的形态；植入后4，8 周分别行X射线片观察缺损区骨连接及骨痂生长情况，组织学观察新生骨组织和骨愈合情况，并进行骨缺损修复血管化观察；植入后8 周测定各组桡骨标本的最大扭矩，以评价生物力学强度。 结果：同种异体微小颗粒骨与磷酸钙骨水泥的比例为3∶1时，二者混合后可任意塑形，其成骨性能最好，新生骨的组织学结构和血管化程度优于其他复合比例，生物力学强度高于其他复合比例(t=2.35,P < 0.05)。 结论：同种异体微小颗粒骨复合磷酸钙骨水泥的最适宜比例是3∶1。     

同种异体冻干骨加钛笼在颈前路减压融合术中的应用

目的观察同种异体冻干骨加钛笼结合动力型颈前路钢板在颈椎前路减压融合术后的融合情况。方法对122例颈椎病病人行颈前路减压、钛笼加同种异体冻干骨植骨结合动力型颈前路钢板内固定术。于术前、术后6个月进行日本骨科疗效(JOA)评分,观察神经功能恢复情况;术后6个月、1年观察钛笼植骨融合率及早期沉降率。结果术后对116例随访12~22个月,平均17个月。症状均明显缓解,脊髓功能明显改善;JOA评分由术前的8.6分改善至14.1分。根据Zdeblick标准,术后6、12个月钛笼植骨融合率分别达到92.0%和95.6%,而沉降出现率分别为16.0%和18.6%。无钢板和螺钉松动或断裂现象存在。结论同种异体冻干骨加钛笼作为颈椎前路减压融合手术中的支撑性植骨材料,融合率满意,沉降率低。     

前列腺素E2复合同种异体骨治疗实验性骨缺损

背景：前列腺素E2具有促进骨生长的作用,其与同种异体骨移植块复合能否加速骨缺损的修复有待进一步证实。 目的：观察复合前列腺素E2的同种异体冻干骨移植用于治疗兔实验性骨缺损的疗效,并探讨其作用机制。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2008-11/2009-03在华中科技大学同济医学院附属梨园医院老年病研究室完成。 材料：健康雄性新西兰大耳白兔46只,体质量(1.8±0.2) kg,其中6只新西兰大耳白兔取髂骨和肩胛骨以截取骨组织块,深低温冷冻干燥灭菌后经0.01 mg/L和0.1 mg/L前列腺素E2深低温冷冻干燥复合24 h。 方法：40只大耳白兔按数字表随机分为自体骨移植组,异体骨移植组,0.01 mg/L前列腺素E2骨移植组和0.1 mg/L前列腺素E2骨移植组,每组10只。无菌条件下切除桡骨中段1.5 cm骨干和骨膜建立骨缺损实验模型,后分别移植自体骨组织块,异体骨组织,0.01 mg/L前列腺素E2异体骨组织块和0.1 mg/L前列腺素E2异体骨组织块复合。 主要观察指标：术后4周进行患处的骨影像学、组织学检测,测定钙含量及骨形态发生蛋白2表达水平。 结果：前列腺素E2复合的异体骨组织块移植修复骨缺损明显优于未处理的异体骨组织块,局部钙含量和骨形态发生蛋白2表达明显增高,且这些作用呈浓度相关性。骨影像学显示自体骨的骨痂形成速度快于异体骨,而前列腺素E2骨移植组的骨痂形成速度较自体骨移植组快,并与前列腺素浓度呈正相关。组织学检测显示自体骨的骨小梁形成数目多于异体骨,而复合组除了骨小梁形成之外,还有大量的成骨细胞、骨细胞形成,且新生毛细血管丰富。 结论：前列腺素E2复合的异体骨组织块移植能促进骨缺损的愈合,其作用机制可能与增强骨形态发生蛋白2的表达有关。     

同种异体骨软骨柱移植治疗关节软骨缺损

背景：同种异体骨软骨移植修复关节软骨损伤可以解决自体骨软骨来源有限的问题,但存在免疫排斥问题。 目的：观察以深低温保护剂保护的同种异体骨软骨柱移植修复兔关节软骨缺损的效果,并与自体关节软骨移植作比较。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2008-05/10在武汉协和医院骨科实验室完成。 材料：24只成年健康新西兰兔中8只用于异体骨软骨柱的制备,16只随机分成同种异体移植组和自体移植组,每组8只。 方法：使用横穿钉套筒提取兔股骨内侧髁骨软骨柱,将骨软骨柱在4 ℃条件下放入盛有10%二甲基亚砜的冻存管中2 h,将冻存管移入程序冷冻仪内以1 ℃/min速率降至-75 ℃,放入-196 ℃液氮罐底部保存3周备用。用横穿钉钻头在兔左膝关节股骨内侧髁垂直于软骨面制造缺损,缺损深4 mm,直径4.45 mm,自体移植组取右膝关节内侧髁骨软骨柱植入到左侧膝关节相应缺损处,异体移植组将经过程序性深低温冷冻保存的同种异体骨软骨柱移植到相应缺损处。 主要观察指标：术后12周观察兔关节活动度、修复组织的质地等情况。以苏木精-伊红染色观察关节软骨组织的病理变化,以半定量改良Wakitani score法进行评估。以免疫组织化学染色观察Ⅱ型胶原分泌情况。 结果：两组实验动物关节活动度正常。异体移植组移植处关节软骨面较光整,与周围正常关节软骨高度一致,结合紧密,颜色接近,与自体移植组相似。两组移植后,兔关节缺损处被透明软骨覆盖,潮线整齐,细胞排列有序,分泌大量基质,异体移植组移植处软骨深层及软骨下骨处可见微小裂隙,未见淋巴细胞和浆细胞浸润。同种自体与异体骨软骨移植组Wakitani score评分结果无统计学差异,总分接近,修复软骨Ⅱ型胶原免疫组织化学染色均强阳性。 结论：冷冻同种异体骨软骨柱移植可修复全层小面积关节软骨缺损,术后近期软骨细胞存活,可分泌软骨基质,未见明显排斥反应,与自体骨软骨柱修复的兔关节软骨缺损在组织学上相近。     

同种异体骨修复良性骨肿瘤及瘤样病变骨缺损

背景：骨肿瘤及瘤样病变切刮后骨缺损取自体骨填充，由于取材量不能完全满足临床需要，且供骨区常遗有不同程度并发症，使其在临床应用中受到明显限制。异体骨以其结构及生物特性与自体骨相似、来源丰富、可以长期保存及使用方便等特点日益广泛地应用于临床。 目的：观察同种异体骨用于填充修复良性骨肿瘤及瘤样病变切、刮除术后骨缺损后的生物相容性表现及临床应用效果。 设计：回顾性分析。 单位：内蒙古医学院第二附属医院骨肿瘤科、骨盆外科。 对象：选择1999-12/2005-12在内蒙古医学院第二附属医院骨肿瘤科因良性骨肿瘤及瘤样病变行病灶刮除、高温灭活，冻干同种异体小块骨填充修复骨缺损的患者230例，男156例，女74例；年龄5~56岁。患者同意使用异体骨，并签订植入异体骨协议书；实验经医院伦理委员会批准。 方法：①使用由由山西奥瑞生物材料有限公司/山西省医用组织库提供的同种异体骨填充修复骨缺损。对良性骨肿瘤及骨囊肿和骨纤维结构不良等行囊内刮除术，用同种异体骨填塞空腔。②根据Mankin等对同种骨移植结果的评分标准评估疗效，分为满意和不满意两个层次。于术后3，6和12个月对手术部位拍摄X射线平片，并平均随访38个月以观察疗效。 主要观察指标：异体骨填充修复骨肿瘤骨缺损的组织相容性。 结果：患者230例全部进入主要结果分析。①同种骨生物相容性：少数患者术后有轻度排异反应。该植入材料生物相容性好，可与植入部位患者骨组织直接进行融合，不阻止骨细胞在其表面的正常活性或干扰自体骨细胞的自然替代过程，即无免疫排斥反应或很小。所有病例在术后6~18个月达到骨性愈合，平均6.5个月。并发症：34例切口渗出淡黄色液体，其中30例于2周后切口愈合（14.8%）；切口延期愈合4例（1.7%）。②疗效：满意196例（85.2%），不满意34例（14.8%）。 结论：同种异体小块骨具有良好的组织相容性及成骨作用，是骨移植术中良好的植骨材料。     

同种异体神经复合体修复兔周围神经缺损

背景：应用种植许旺细胞的去细胞同种异体神经复合体修复周围神经缺损,探索其对神经再生及功能恢复有更好的促进作用,并且免疫原性非常小。 目的：用种植胎兔许旺细胞的去细胞同种异体神经复合体修复兔缺损的坐骨神经,观察移植神经周围免疫细胞的变化及功能恢复。 　 方法：48只新西兰白兔随机分成实验组和对照组。两组动物均切除一段坐骨神经,造成2.0 cm长的缺损,实验组用种植胎兔许旺细胞的同种异体神经复合体修复坐骨神经;对照组仅用去细胞同种异体神经修复。移植后1,4,8周光镜观察移植段坐骨神经周围肌肉组织中免疫细胞的浸润情况,计数每个高倍视野免疫细胞的数量。移植后4,8,16周大体观察兔的足部溃疡形成及愈合情况,大体观察神经愈合情况;肌电图检查桥接段坐骨神经的传导速度。 结果与结论：手术区局部均未出现明显的排斥反应,实验组足部溃疡愈合情况优于对照组。移植后1周移植段坐骨神经周围肌肉组织中有大量淋巴细胞及巨噬细胞浸润,实验组明显多于对照组(P < 0.05);移植后4周,浸润的免疫细胞两组均较1周后明显减少,实验组减少更明显。移植后8周,浸润的免疫细胞更加减少,但两组间比较差异无显著性意义(P > 0.05)。移植后4周时,两组均未见明显的神经传导,8,16周神经传导速度实验组均优于对照组(P < 0.05)。提示,种植许旺细胞的去细胞同种异体神经复合体免疫原性非常小,对神经再生及功能恢复有更好的促进作用。     

同种异体DBM复合自体BMSCs修复兔关节软骨缺损的实验研究

摘要 背景：寻找理想的软骨组织工程支架为目前的研究热点之一,其中脱钙骨基质（Demineralized bone matrix,DBM）有望作为一种良好的支架材料,我们前期的研究观察看到不同脱钙时间对骨髓基质干细胞（Bone marrow stromal cells BMSCs）的增殖有影响,其中脱钙6h的DBM具有最好的细胞相容性,故本研究采用脱钙6h的DBM作为支架材料复合BMSCs移植修复关节软骨缺损。 目的 观察同种异体DBM复合自体BMSCs修复兔关节软骨缺损的效果。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2008年1月~5月在昆明医学院干细胞研究所完成。 材料：选用成年健康日本大耳白兔27只,建立膝关节软骨缺损模型,选用同种异体DBM块作为植入材料。 方法： 取兔自体BMSCs体外培养扩增鉴定后,与同种异体DBM材料复合培养8天后,植入兔膝关节软骨缺损模型中。选用健康日本大耳白兔27只,制造双侧膝关节软骨缺损,将实验兔分为三组：DBM/BMSCs修复组（实验组）、单纯DBM修复组（实验对照组）及空白缺损对照组。 主要观察指标：于术后4w、8w及12w各处死9只动物,取材对修复组织进行大体、组织学及免疫组化染色观察,根据Wakitani法对修复组织进行评分,数据输入SPSS11.5软件进行统计学分析,比较各组的评分差异是否具有统计学意义。 结果 ：术后12w,BMSCs/DBM实验组修复组织呈透明软骨样,表面光滑平坦,与周围软骨及软骨下骨结合良好;单纯DBM修复组有部分软骨样修复;而空白对照组仅有少量纤维性修复。 结论： 自体BMSCs复合同种异体DBM支架材料修复全层关节软骨缺损的效果良好。     

40001/大鼠掺锶冻干骨的制备及体内植入生物相容性研究

摘要 背景：同种异体冻干骨是良好的骨移植材料,但在制备过程,其天然活性成分有所丢失或部分失活,成骨活性下降。努力改善冻干骨成骨活性,希望研制出一种能克服上述缺点的新型材料运用于临床。 目的：观察掺锶冻干骨植入大鼠体内的生物学活性。 方法：按照标准的冻干骨加工程序制备大鼠股骨髁冻干骨材料,采用氯化锶溶液浸泡方法制备掺锶冻干骨。将27只健康成年SD大鼠随机分为3组,每组9只。SD大鼠钝性分离肌肉,造成股部肌袋,双侧均行手术。植入掺锶冻干骨作为实验组,同法植入未掺锶的普通冻干骨作为对照组。空白对照组双侧均不植入任何材料。分别于植入后4,8,12周处死各组动物3只,行大体观察、组织学观察,并依据炎性浸润及组织纤维化程度进行组织学评分。 结果与结论：采用氯化锶溶液浸泡方法制作掺锶冻干骨,锶相对钙元素掺入摩尔浓度为4.2%时在骨质内层锶元素浓度分布比较均匀。实验组和对照组植入材料周围均可见炎性细胞、肉芽组织和血管生成,并随着时间推移,炎性浸润程度明显降低,而周围纤维组织包绕增加。空白对照组炎性浸润程度轻,少量组织纤维化。实验组和对照组与空白对照组相比,炎性浸润程度及组织纤维化程度组织学评分差异有显著性意义(P < 0.05)。说明通过温和的锶-钙离子交换方法可以在冻干骨中有效的掺入锶元素,获得一种掺锶冻干骨材料;该掺锶冻干骨具有良好的生物组织相容性,与普通冻干骨比较无明显差异。 关键词：冻干骨;锶元素;制备;体内植入;大鼠;生物相容性 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2011.12.015     

同种异体下颌骨移植修复犬颞颌关节、下颌骨缺损的免疫学观察

背景：同种异体骨移植后的免疫排斥是异体骨移植必须面对的重要问题。目前关于大段同种异体下颌骨移植重建下颌骨缺损以及移植造成的免疫研究报道很少见。 目的：建立犬自体/同种异体下颌骨移植重建颞下颌关节、下颌骨缺损的动物模型，观察动物骨移植前后外周血白细胞介素2、白细胞介素4、白细胞介素6水平，了解异体下颌骨移植引起的免疫反应。 设计：动物模型建立为随机对照动物实验，白细胞介素水平测定为自身对照。实验于2004-03/2005-04在解放军总医院动物实验中心完成，检测工作在解放军总医院第二附属医院核医学科完成。 材料：健康杂种犬18只制作包括髁突在内的下颌骨升支部分缺损的杂种犬动物模型。健康成年比格供体犬头18具，随机分成2组，每组9块，分别进行冷冻和冻干处理。 方法：取杂种受体犬18只制作包括髁突在内的下颌骨升支部分缺损的杂种犬动物模型，随机分成3组：自体骨移植组、异体冷冻骨移植组、异体冻干骨移植组，每组6只。 主要观察指标：术前，术后2，4，8，16，24周检测外周血白细胞介素2，白细胞介素4、白细胞介素6水平。 结果：移植术后所有动物均顺利存活，伤口愈合良好。自体骨移植组术后2周的白细胞介素2水平明显高于术前(P < 0.05)；异体冷冻骨移植组术后2周的白细胞介素2、白细胞介素6水平明显高于术前(P < 0.05)，术后2，4，8周白细胞介素4水平明显低于术前(P < 0.05)；异体冻干骨移植组术后2周的白细胞介素2、白细胞介素6的水平明显高于术前(P < 0.05)，其余时间与术前无明显差别。 结论：犬冷冻/冻干异体下颌骨移植可以达到临床愈合，不会引起外周血白细胞介素水平的持续异常。     

复合骨髓间充质干细胞和富血小板血浆煅烧骨在大鼠下颌骨缺损修复中的

背景：用于修复骨缺损的方法有直接植入、复合细胞植入以及加入生长因子植入。近年来,复合细胞植入和加入生长因子植入的研究受到比较广泛的关注。 目的：观察复合骨髓间充质干细胞和富血小板血浆的煅烧骨修复颌骨缺损的作用。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2008-04在青岛大学医学院附属医院中心实验室及口腔研究室完成。 材料：取成年牛长骨骨骺端,经脱脂、脱蛋白、煅烧处理后制得煅烧骨。将第3代的骨髓间充质干细胞悬液加到煅烧骨上制备煅烧骨-骨髓间充质干细胞复合体。将富血小板血浆因子滴加到将要植入的煅烧骨-骨髓间充质干细胞复合体上,制得含富血小板血浆因子的煅烧骨-骨髓间充质干细胞复合体。 方法：用牙钻在Wistar大鼠左侧下颌骨下缘备出1.0 cm×0.8 cm大小缺损,将30只大鼠随机分为3组,每组10只。对照组：将煅烧骨直接植入大鼠下颌骨缺损中。复合骨髓间充质干细胞组：将煅烧骨-骨髓间充质干细胞复合体植入大鼠下颌骨缺损中。复合骨髓间充质干细胞+富血小板血浆组：将含富血小板血浆因子的煅烧骨-骨髓间充质干细胞复合体植入大鼠下颌骨缺损中。 主要观察指标：观察各组煅烧骨在4,8,12周的成骨情况。 结果：复合骨髓间充质干细胞+富血小板血浆组煅烧骨在4,8,12周3个时间点的成骨情况明显优于对照组煅烧骨及复合骨髓间充质干细胞组煅烧骨(P < 0.01),对照组和复合骨髓间充质干细胞组之间的成骨情况差异无显著性意义(P > 0.05)。 结论：复合骨髓间充质干细胞和富血小板血浆的煅烧骨可以促进下颌骨缺损修复,增加血管化与骨化。     

个性化钛模板作为外支架与组织工程化骨联合修复兔上槽嵴缺损：维持新骨塑形的可行性**

背景：在口腔组织工程学中,由于颌面骨形态复杂,不规则,而且颌骨支撑着颜面部,与容貌有很大的关联。这就提出了更高要求,不但要恢复功能而且要恢复原有形态,而且精密的修复形态将成为今后发展的趋势。 目的：探讨透明质酸钠与复合重组人骨形态发生蛋白2诱导兔骨髓基质干细胞体外构建组织工程化骨修复上颌骨牙槽嵴缺损,并覆盖个性化钛模板作为外支架维持新骨塑形的可能性。 方法：体外培兔骨髓基质干细胞,进行成骨诱导,复合透明质酸钠、重组人骨形态发生蛋白2构建组织工程化骨,植入自体牙槽嵴缺损处,外加个性化钛模板,术后4,8,12 周处死动物分别进行X射线、常规组织学检查,观测组织工程化骨在体内成骨作用。以缺损区植入回收自体骨屑者为对照组。 结果与结论：术后第4周,实验组与对照组新生骨灰度值差异有显著性意义(P < 0.05)。术后第8,12周其新骨灰度值差异无显著性意义(P > 0.05),术后4周与术后8周,术后8周与术后12周新生骨灰度值存在显著性差异(P < 0.05)。常规组织学染色显示,在术后4周时,实验组成骨作用逊色于对照组。当生长到第8周时,两组成骨基本无显著差异。说明此法构建的组织工程化骨在体内成骨效应显著,个性化钛模板起到屏障塑形作用,促进新骨按特定形状生成。 关键词：组织工程化骨;颌骨缺损;重组人骨形态发生蛋白2;骨髓间充质干细胞;个性化钛模板     

环孢素A影响脱钙骨基质诱导成骨的组织学观察

背景：脱钙骨可用于成骨细胞的支架材料,机体组织对脱钙骨有一定的免疫排斥反应。 目的：观察环孢素A影响脱钙骨诱导成骨的组织学变化,探讨脱钙骨成为理想的骨移植材料的可行性。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2007-03/2008-04在大连医科大学附属二院实验中心完成(国家分子生物学三级实验室)。 材料：用16只新西兰大白兔,分为4组,同种脱钙骨对照组和实验组,异种脱钙骨实验组和对照组,每组4只。环孢素注射液为北京诺华制药有限公司产品。 方法：制备脱钙骨,取自兔的脱钙骨命名为同种脱钙骨,取自犬的脱钙骨命名为异种脱钙骨。于兔的脊旁肌肉内植入相应脱钙骨制备物,每侧2处。实验组每天肌注含环孢素A的实验液2 mg/kg,对照组肌注对照液2 mg/kg,共4周。植入物标本进行苏木精-伊红染色,光镜观察。 主要观察指标：各组脱钙骨组织学观察结果。 结果：同种脱钙骨在所有动物中均引起了骨形成。环孢素A并没有改变同种脱钙骨诱导成骨的形态学。异种脱钙骨对照组在第4周时没有骨或软骨细胞生成。异种脱钙骨环孢素A实验组在第4周时有软骨、骨形成。 结论：环孢素A并没有改变同种脱钙骨诱导成骨的形态学。免疫反应抑制了异种脱钙骨的成骨,环孢素A可抵消这种抑制作用,环孢素A可提高异种脱钙骨治疗骨不连或骨缺损的成功率。     

自体微小颗粒骨复合几丁糖修复椎板缺损的有限元分析

背景：几丁糖具备良好的支架作用,不仅能够弥补自体微小颗粒骨结构松散的不足,防止其向植骨床外周扩散,减少骨流失,同时伴随颗粒骨的成骨过程几丁糖还可随之降解。 目的：探讨自体微小颗粒骨复合几丁糖修复椎板缺损的效果。 方法：健康成年杂种犬20只,均制备椎板缺损。随机分为 4组,复合组于椎板缺损区先充填一层几丁糖,再充填预制半干自体微小颗粒骨,后铺上一层几丁糖;自体微小颗粒骨组于椎板缺损区充填预制半干自体微小颗粒骨;几丁糖组于椎板缺损区充填几丁糖;空白组椎板缺损区不植入任何物质。术后8周,通过有限元方法对4 组模型的应力和位移变化进行比较。 结果与结论：关于位移值,几丁糖组>自体微小颗粒骨组>复合组,按照在一定载荷下位移越小刚度越大的理论,复合组模型刚度最大,自体微小颗粒骨组模型次之,几丁糖组模型刚度最小。提示几丁糖是微小颗粒骨的优良载体,自体微小颗粒骨复合几丁糖可有效修复椎板缺损,二者复合修复骨缺损的能力强于单纯微小颗粒骨。     

氧化铝羟基磷灰石修复兔桡骨节断性缺损的组织学观察

背景：前期的实验已经证明，氧化铝羟基磷灰石可以修复兔股骨腔隙性缺损，该材料具有良好的生物相容性和骨传导性。 目的：观察氧化铝羟基磷灰石修复兔桡骨节段性缺损的效果。 设计、时间及地点：随机对照动物实验。氧化铝羟基磷灰石复合陶瓷人工骨实验材料于2006-05在瑞典斯德哥尔摩大学阿伦尼乌斯实验室烧结成形。动物实验于2006-06/2007-06在宁夏医科大学中医学院实验室完成。 材料：放电等离子烧结技术制备氧化铝羟基磷灰石人工骨。 方法：新西兰兔12只，制备15 mm长的桡骨节段性骨缺损模型。随机分为3组，人工骨植入实验组6只植入氧化铝羟基磷灰石人工骨材料。空白对照组3只骨缺损处旷置，不植入材料。自体骨植入对照组3只截骨后，将截下的自体骨用生理盐水冲洗后，再植入原截骨处。于术后24周截取实验段桡骨。 主要观察指标：①大体解剖观察。②界面成骨观察。③材料被膜观察。 结果：人工骨植入实验组材料两端及材料尺骨面骨痂向材料中部延伸生长，骨组织将人工骨材料完全包绕，材料与周围骨组织完全修复骨缺损区。空白对照组有少量骨痂修复缺损区，但骨缺损仍然存在。自体骨植入对照组缺损区完全修复。人工骨植入实验组24周不脱钙骨磨片直接显微镜观察：材料与周围新生骨组织界面镶嵌样紧密结合，骨组织长入材料表面融合为一体。再将不脱钙骨磨片苏木精-伊红染色可见骨细胞呈层样排列，形成板层状骨，哈佛氏系统骨。材料两端界面骨脱钙片苏木精-伊红染色，冠切面与纵切面均见骨细胞呈环形排列骨单位形成。材料段冠切面脱钙片可见骨原细胞排列于材料表面，骨髓腔形成。材料被膜观察可见较多胶原纤维和骨原细胞。 结论：采用放电等离子烧结技术制备的氧化铝羟基磷灰石人工骨可以修复兔桡骨节段性缺损，其修复过程完全呈现了界面成骨过程。     

冻干韧带脱细胞支架材料的生物相容性及优势

背景：韧带脱细胞基质是通过各种脱细胞方法将韧带组织内的细胞成分清除，降低免疫原性，同时对纤维支架结构破坏轻微，保留了细胞外基质的机械性能。 目的：评价冻干兔髌韧带脱细胞支架的生物相容性及优势。 方法：取兔髌韧带，利用1%脱氧胆酸钠行脱细胞处理，制备冻干和未冻干脱细胞韧带支架。 结果与结论：冻干韧带脱细胞支架保持了冻干前的胶原结构与力学特征，无细胞残留，其浸提液对细胞生长无抑制作用，无全身急性毒性反应，无热原存在，且原发刺激指数为0分，皮内刺激实验阴性。体内埋植实验显示冻干韧带脱细胞支架表现为免疫原性小，炎症反应轻的特点。说明冻干韧带脱细胞支架具有较好的生物相容性，且制作简单，便于消毒、包装、保存。     

纳米级羟基磷灰石/骨形态发生蛋白复合物修复兔桡骨大段缺损及局部血管内皮细胞生长因子的表达

摘要 背景：研究发现,在小段骨缺损中植入骨或仿生骨组织,坏死组织逐渐被替换,移植骨中会长入有活性的血管肉芽组织,移植骨被吸收,新骨主动形成。但在大段骨缺损,这一过程发生较慢且不完全。 目的：观察纳米级羟基磷灰石材料复合骨形态发生蛋白后大段骨缺损修复能力及诱导生成血管能力。 方法：制作兔桡骨大段骨缺损模型,抽签随机分2组,选择一侧分别植入纳米级羟基磷灰石/骨形态发生蛋白、纳米级羟基磷灰石修复,均以另一侧为空白对照。植入后6个月行大体观察、X射线、组织形态学检查、组织切片碱性磷酸酶染色、成骨量分析、血管内皮细胞生长因子阳性细胞率及阳性血管数检测。 结果与结论：空白对照组基本无骨组织生成。纳米级羟基磷灰石植入后被新生骨组织分割成小块,材料原有结构破坏。纳米级羟基磷灰石/骨形态发生蛋白组较纳米级羟基磷灰石组残存材料更少,材料降解更为彻底。纳米级羟基磷灰石/骨形态发生蛋白组成骨量、血管内皮细胞生长因子表达及血管内皮细胞生长因子阳性血管数目均明显高于纳米级羟基磷灰石组(P < 0.001),且血管内皮细胞生长因子表达与血管内皮细胞生长因子阳性血管数目成正比关系。说明纳米级羟基磷灰石与骨形态发生蛋白复合后,骨修复能力进一步增强,诱导血管生成能力明显提高。 关键词：纳米级羟基磷灰石;血管内皮细胞生长因子;骨形态发生蛋白;血管生成;纳米生物材料 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2011.12.006     

个性化钛模板与纳米羟基磷灰石及自体骨修复兔上颌骨缺损

背景：自体骨、骨替代材料及骨诱导再生技术可修复颌骨缺损,但由于新骨形成周期长、骨替代材料及骨诱导再生膜吸收快,缺损区新骨的体积和塑形受到影响。 目的：探讨个性化钛模板与纳米羟基磷灰石及自体骨在兔上颌骨牙槽嵴缺损修复中的作用。 方法：18只日本大耳白兔,随机分为2组,制作长10 mm,高5 mm的上颌牙槽嵴骨缺损,实验组骨缺损区由自体髂骨颗粒及缺损区制作中产生的自体骨颗粒与纳米羟基磷灰石填充,表面覆盖个性化钛模板,并螺钉固定;对照组缺损区只覆盖个性化钛模板并螺钉固定,缺损区不充填任何骨移植材料。观察术后4,8,12周的新骨生成情况、X射线表现及苏木精-伊红染色组织学改变。 结果与结论：术后4周时,实验组新骨形成明显优于对照组;术后8及12周时,两组形成的新骨无明显区别。经配对t检验,实验组和对照组在术后4周时新骨密度差异有显著性意义(P < 0.01),而在术后8周和12周时,新骨灰度值差异无显著性意义(P > 0.05)。提示自体骨及纳米羟基磷灰石可很好地修复上颌牙槽嵴缺损;个性化钛模板可起到屏障膜和新骨形成外支架的作用,有利于新骨的塑形。 关键词：上颌骨缺损;自体骨;纳米羟基磷灰石;个性化钛模板;口腔生物材料 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.16.001     

纳米羟基磷灰石-聚羟基丁酸戊酯/聚乙二醇人工骨对骨缺损修复的作用*

背景：为改善羟基磷灰石强度低、韧性差的缺点，尝试将具有良好机械性能的聚羟基丁酸戊酯和高亲水性材料聚乙二醇与之共混制备复合材料。 目的：评价纳米羟基磷灰石-聚羟基丁酸戊酯/聚乙二醇（Nano-HA-PHBV/PEG）人工骨对骨缺损的修复作用，并与单纯纳米羟基磷灰石人工骨相比较。 设计、时间及地点：对比分析，体内动物实验，于2007-06/2008-05在南方医科大学珠江医院中心实验室及生物力学实验室完成。 材料：自制纳米羟基磷灰石人工骨和Nano-HA-PHBV/PEG人工骨。 方法：将30只新西兰兔双侧桡骨中段制成15 mm节段性骨缺损，左侧植入Nano-HA-PHBV/PEG人工骨为实验组，右侧植入纳米羟基磷灰石人工骨为对照组。 主要观察指标：X射线片观察骨缺损修复及材料降解情况；术后2，4，8，16，24周分别处死6只兔子取材，用骨密度测量仪测量缺损修复区骨密度；术后4，8，16，24周在骨密度测试结束后切取完整桡骨标本，行三点抗弯试验测量弯曲强度。 结果：X射线显示4周后两组骨缺损处植入材料均有不同程度的降解，骨缺损处均有新骨形成；实验组新骨密度在材料植入8周后开始高于对照组(P < 0.05)；16，24周时实验组桡骨弯曲强度高于对照组(P < 0.05)。 结论：Nano-HA-PHBV/PEG人工骨具有良好的成骨能力和生物相容性，其成骨能力优于单纯纳米羟基磷灰石人工骨。     

骨形态发生蛋白2复合异种脱蛋白骨支架材料修复山羊大段骨缺损

背景：单纯骨形态发生蛋白2修复骨缺损只有骨诱导性，单纯异种脱蛋白骨只有骨传导性。 目的：评估异种脱蛋白骨复合骨形态发生蛋白2修复山羊大段长骨缺损的效果。 设计、时间及地点：随机分组设计、动物对照观察实验，于2005-03/2007-02在解放军第三军医大学创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室完成。 材料：山羊24只用于制备大段长骨缺损模型。市售猪股骨用于制备脱蛋白骨。重组骨形态发生蛋白2为美国Biosource公司产品。 方法：山羊右侧胫骨中下段截除胫骨总长度20%制备节段性骨缺损模型。24只山羊按植入材料的不同分为3组，单纯异种脱蛋白骨组、自体骨组和异种脱蛋白骨+重组骨形态发生蛋白2组，每组8只。 主要观察指标：植入后4，8，12，16，20，24周X射线评估骨缺损情况。植入后24周取新生骨组织进行双能X射线、组织学、生物力学检测修复效果。 结果：植入后12，24周自体骨组和异种脱蛋白骨+重组骨形态发生蛋白2组X射线评分均高于单纯异种脱蛋白骨组，差异有显著性意义（P < 0.05）。植入后24周自体骨组和异种脱蛋白骨+重组骨形态发生蛋白2组骨密度和骨矿含量均高于单纯异种脱蛋白骨组，差异有显著性意义（P < 0.05）。自体骨组和异种脱蛋白骨+重组骨形态发生蛋白2组之间比较差异均无显著性意义（P > 0.05）。植入后24周生物力学测试表明，自体骨组>异种脱蛋白骨+重组骨形态发生蛋白2组>单纯异种脱蛋白骨组。植入后24周，自体骨组、异种脱蛋白骨+重组骨形态发生蛋白2组，新生骨与最初两断端连成一体，新生骨骨小梁排列整齐有序。单纯异种脱蛋白骨组，新生骨与最初两断端部分相连。 结论：重组骨形态发生蛋白2复合异种脱蛋白骨修复山羊胫骨大段缺损成骨能力与自体骨相当。