拉米夫定治疗中乙肝病毒多聚酶YMDD变异对患者临床经过的影响

目的：研究乙肝病毒（HBV）多聚酶YMDD变异后HBV DNA复现对慢性HBV感染患者临床经过的影响。方法：用mp PCR-RFLP技术检测24例拉米夫定治疗过程中出现HBV DNA复现的患者血清,对YMDD变异者的系列临床资料,应用SAS软件进行统计学分析。结果：检出YMDD变异18例;YMDD变后转氨酶水平较HBV DNA转阴时有显著升高,并反跳至治疗前水平。结论：YMDD变异后,部分病例可有类似肝炎发作、甚至肝脏失代偿的表现。     

乙型肝炎YMDD变异与丙氨酸转氨酶乙型肝炎病毒e抗原及乙型肝炎病毒DNA的关系探讨

目的探讨拉米夫定治疗慢性乙型肝炎期间乙型肝炎病毒(HBV)YMDD变异的情况及其与临床的关系。方法采用通用模板信号扩增(UT-PCR)方法,对拉米夫定治疗过程中血清出现HBV DNA由阴转阳的52例慢性乙型肝炎患者进行HBVYMDD变异检测,并结合患者治疗前HBV DNA载量、丙氨酸转氨酶(ALT)水平、免疫标志物及YMDD变异后HBV DNA载量等临床信息进行结果分析。结果YMDD变异的检出率为53.85%,52例患者中,28例发生了YMDD变异,其中YIDD17例,YVDD7例,YIDD和YVDD混合变异4例。发生YIDD变异的患者较治疗前HBV DNA水平显著降低(P<0.05),发生YVDD变异的患者较治疗前HBV DNA水平差异无统计学意义(P>0.05)。YVDD变异后的HBVDNA水平与YIDD变异后HBV DNA水平差异无统计学意义(P>0.05)。YMDD变异组治疗前的ALT基础水平高于YMDD野生组治疗前水平(P<0.01),治疗前HBVDNA水平及HBeAg阳性率在变异组和野生组中差异无统计学意义(P>0.05)。结论拉米夫定治疗前ALT基础水平高可能是YMDD变异的一个易发因素。密切监控慢性乙型肝炎患者的HBV DNA及ALT水平,有利于及时发现YMDD是否发生变异。     

214例慢性乙肝患者HBV YMDD变异检测及临床意义

目的：了解口服拉米夫定的慢性乙型肝炎患者HBV P区发生YMDD变异的情况,并探讨其相关影响因素。方法：应用实时荧光PCR法检测HBV YMDD变异株的方法,对214例用拉米夫定进行抗乙肝病毒治疗的慢性乙肝（CHB）患者血清进行HBV P区YMDD变异检测分析。结果：214例慢性乙肝患者YMDD变异率为32.7%,其中YIDD变异34例,YVDD变异30例,混合变异6例。YMDD未变异组治疗前谷丙转氨酶（ALT）水平显著高于变异组;而YMDD变异组治疗前HBV DNA含量显著高于未变异组;YMDD未变异组与变异组之间治疗前的患者性别、年龄和HBeAg状态等方面差异无统计学意义。结论：HBV YMDD变异可能与患者治疗前ALT水平和HBVDNA含量有一定关系,而与患者的性别、年龄和血清HBeAg状态无关。     

214例慢性乙肝患者HBV YMDD变异检测

目的:了解口服拉米夫定的慢性乙型肝炎患者HBV P区发生YMDD 变异的情况,并探讨其相关影响因素.方法:应用实时荧光PCR法检测HBV YMDD变异株的方法,对214 例用拉米夫定进行抗乙肝病毒治疗的慢性乙肝(CHB)患者血清进行HBV P区YMDD变异检测分析.结果:214 例慢性乙肝患者 YMDD 变异率为 32.7 %,其中 YIDD 变异 34例,YVDD 变异30例,混合变异6例.YMDD 未变异组治疗前谷丙转氨酶(ALT) 水平显著高于变异组;而 YMDD 变异组治疗前 HBV DNA 含量显著高于未变异组;YMDD 未变异组与变异组之间治疗前的患者性别、年龄和 HBeAg 状态等方面差异无统计学意义.结论:HBV YMDD 变异可能与患者治疗前 ALT 水平和 HBVDNA 含量有一定关系,而与患者的性别、年龄和血清 HBeAg 状态无关.     

乙肝拉米夫定治疗前后YMDD变异与DNA载量的关系

目的探讨原发性肝癌患者拉米夫定治疗前后HBV YMDD变异与HBV DNA复制水平的相关性,为临床治疗提供依据。方法应用实时荧光聚合酶链反应（PCR）技术检测72例原发性肝癌患者未服用拉米夫定治疗前血清HBV DNA载量以及服用拉米夫定治疗12个月血清中YMDD突变情况。结果 72例原发性肝癌患者中,出现YMDD变异者35例（48.6%）,其中YIDD变异者28例,YVDD变异者4例,YIDD和YVDD混合变异者3例。治疗后YMDD突变组HBV DNA载量显著高于YMDD野生组,拉米夫定治疗后YIDD及YIDD＋YVDD杂合型的突变率明显增加,而对YVDD的突变率则有所降低。结论拉米夫定对原发性肝癌患者治疗前后HBV DNA复制水平无显著影响,而拉米夫定治疗后HBV DNA复制水平与YMDD突变具有相关性,可作为早期监测原发性肝癌HBV YMDD突变的观察指标之一。     

荧光定量PCR技术联合检测乙肝病毒DNA及YMDD变异的临床应用

目的：采用荧光定量PCR技术对慢性乙肝患者用拉米夫定治疗1年后，患者血清中HBVDNA水平变化及YMDD基因变异的检测，并对其临床应用进行评价。方法：选取82例乙肝患者经拉米夫定治疗1年前、后其血清采用荧光定量PCR技术联合检测HBVDNA及YMDD变异，回顾性对YMDD野生型组和YMDD变异型组进行统计学分析。结果：拉米夫定治疗前HBVDNA的载量，两组相比差异没有统计学意义，1年后YMDD的变异率为15．86％，YMDD变异型组HBVDNA无1例阴转。YMDD野生型组HBVDNA阴转率为82．60％，差异有统计学意义。结论：荧光定量PCR技术联合检测HBVDNA及YMDD变异具有很好的临床应用前景。     

未经拉米夫定治疗HBV YMDD变异的临床分析

目的分析未经拉米夫定治疗的HBV病毒YMDD变异出现的情况,探讨HBV病毒YMDD变异出现可能的机理,了解以YMDD自然变异的慢性HBV感染患者的肝损害情况。方法对140例HBVDNA阳性,未经拉米夫定治疗的慢性HBV感染者进行YMDD检测,同时检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血清总胆红素(TBIL)、白蛋白(ALB)、发病年龄、HBeAg与抗HBe等临床相关指标。结果140例未经拉米夫定治疗的慢性乙肝病毒感染者中20例自然发生YMDD变异,YMDD变异组与未变异组引起的肝损害无显著性差异(P>0.05)。YMDD变异与HBeAg与抗HBe的阳性表达无明显差异(P>0.05)。结论HBV病毒YMDD变异株作为一个准种与野毒株同时存在感染个体,YMDD变异对肝损害严重性无关,YMDD变异与HBeAg阳性率与抗HBe阳性率无明显差异。     

非抗病毒治疗相关的慢性乙型肝炎患者YMDD变异研究

目的：了解未经抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患乙型肝炎病毒基因YMDD变异及其与前C区变异、HBV基因型的相关性，HBV DNA水平与变异发生的关系。方法：从126例均未接受拉米夫定治疗和近一年内未经任何抗病毒治疗的慢性乙肝患随机抽取25例为研究对象。血清YMDD变异检测运用微板核酸杂交—核酸定量法，HBV基因型采用PCR微板核酸杂交—ELISA技术，HBVDNA定量采用荧光定量PCR分析系统，HBV—M采用ELISA法。结果：7例存在YMDD变异，变异HBeAg全部阳性，不同的HBV基因型形式存在不同的YMDD变异率，HBVDNA水平与YMDD变异的发生不呈正相关。结论：HBV存在YMDD野生变异株，并非完全由抗病毒治疗引起，变异株与前C区变异和HBV基因型的相关性以及HBV DNA水平和变异发生的关系有待进一步研究。     

恩施地区乙型肝炎患者HBV DNA YMDD变异的检测

目的了解恩施地区慢性乙型肝炎（乙肝）患者HBV DNA YMDD变异的情况。方法检测该地区100例乙肝患者ALT水平、HBV DNA载量、HBV YMDD变异,对其HBV DNA YMDD变异情况进行分析。结果 100例乙肝患者中检出HBV DNA YMDD变异共15例（阳性率15%）,已服用拉米夫定者60例,检出YMDD变异12例（阳性率20%）,未服用拉米夫定患者40例,检出YMDD变异3例（阳性率7.5%）。15例YMDD变异患者HBV DNA在5.21×10^4-1.34×10^8copies/ml,ALT水平在38-1100U/L。结论恩施地区乙肝患者YMDD变异可在拉米夫定治疗过程中出现,也可天然存在;尚未发现恩施地区乙肝患者性别、年龄、HBV DNA载量、ALT水平对YMDD变异检出率有显著影响     

拉米夫定治疗中乙肝病毒聚合酶YMDD变异的早期预测因子研究

目的：建立HBV多聚酶YMDD变异的快速检测方法，并藉此进行临床流行病学研究，以了解应用拉米夫定治疗乙肝过程中YMDD变异的发生率及其早期预测因子。方法：收集91例应用拉米夫定治疗的慢性HBV感染者临床资料及系列血清。应用mpPCR-RFLP技术检测治疗过程中HBV DNA复现患者的YMDD变异情况，并采用SPSS软件进行统计学分析。结果：检出YMDD变异35例（38．5％），其累计发生率在治疗12和18个月时分别为20．48％、53．46％。拉米夫定治疗前诊断为肝硬变者YMDD变异出现较早（P=0.0279)，在慢性肝炎中HBeAg阳性者YMDD出现较早（P=0.0296)。Cox比例风险模型显示：肝硬变（P=0.0092)和HBeAg阳性（P=0.0778)与YMDD变异有关。结论：慢性肝炎中HBeAg阳性和肝炎肝硬变可作为拉米夫定治疗过程中YMDD变异的早期预测因子。     

HBV YMDD变异与HBV-DNA水平的关系

目的 观察拉米夫定治疗慢性乙型肝炎病毒YMDD变异的产生与血清HBV-DVA水平的关系.方法 拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者106例,平均疗程32月(12～48月),治疗前及治疗中每4～6月采血,用荧光实时PCR定量检测HBV-DNA,采用错配聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析的方法检测HBVYMDD变异.分析出现YMDD变异组与非变异组治疗前HBV DNA水平差异.结果 YMDD变异组治疗前血清HBV DNA定量水平显著高于未产生YMDD变异(P＜0.01).结论 慢性乙型肝炎患者治疗前血清病毒载量水平越高,应用拉米夫定治疗越容易产生YMDD变异,且产生时间越早.血清病毒载量可作为应用拉米夫定治疗YMDD变异产生的早期预测指标.     

EFFECTS OF MUTATIONS IN THE POLYMERASE GENE OF HEPATITIS B VIRUS GENOME ON LAMIVUDINE THERAPY

ffeStnn Objectif Wr les effets des mutations du motif YMDD (twineme thionineaSperticachoagurtic acid) de Ia --se dans le tw du virus d' optite B (HBV) sur Ie traitement antiviraI dlamivudine. mebo he mpnt d 'ADN du HBV contenant le nzotif me dens le gdne Pht obtenu mrM d pertir des 19 matw chroniques d' mptite B avec lerum ADN HBV witi f d la 48for rtins dutraitement d lamivudine. L' 8chantillon etait SUkt d I' analyse sdquentielle automatique. te infiuences desvarinbles des mutati…     

HBeAg阳性B、C基因型乙肝患者使用拉米夫定治疗的病毒抑制效应对比分析

目的探讨拉米夫定对B、C基因型乙型肝炎（乙肝）患者治疗作用。方法观察未用、使用拉米夫定治疗的慢性乙肝患者随时间延长血清病毒标志物HBV DNA水平、HBeAg血清转换率及随拉米夫定疗程延长乙肝病毒聚合酶及转录酶区酪氨酸-蛋氨酸-门冬氨酸-门冬氨酸基序（HBV YMDD）耐药变异率等的变化,对比分析拉米夫定抗病毒治疗对B、C基因型乙肝患者的病毒抑制效应。结果（1）未用拉米夫定治疗的乙肝患者, B基因型者HBV DNA水平低于C基因型者,而自发HBeAg血清转换率高于C基因型者。（2）使用拉米夫定治疗的乙肝患者,B、C基因型者之间HBV DNA水平、HBeAg血清转换率及YMDD变异率没有明显差异。（3） B、C基因型患者均随拉米夫定疗程延长HBV DNA水平下降,HBeAg血清转换率增加,但YMDD变异率也增加。结论（1）未用拉米夫定治疗的自然状况下C基因型乙肝患者携带的乙肝病毒复制能力强于B基因型患者者且不易清除。（2）使用拉米夫定疗程相同时B、C基因型患者之间拉米夫定的病毒抑制效应及HBV YMDD耐药变异率相似。（3）C基因型HBV感染的乙肝患者及早使用拉米夫定抗病毒治疗意义更大。     

拉米夫定治疗e抗原阴性慢性乙型肝炎疗效观察

目的观察拉米夫定治疗e抗原阴性慢性乙型肝炎的疗效。方法对32例e抗原阴性慢性乙型肝炎患者用拉米夫定治疗，4l例患者用护肝药作对照，疗程2年以上，疗效评估包括肝功能和HBV复制指标。结果拉米夫定治疗24个月后，肝功能的复常率明显优于护肝治疗组（84．3％对58．54％，P〈0．05），HBV DNA转阴率显著优于护肝治疗组（81．25％对14．63％，P〈0．01）。拉米夫定治疗9个月开始出现YMDD变异，24个月时YMDD变异率为15．63％，YMDD变异后2例肝功能再次出现异常。护肝治疗组3个月后，随着疗程的延长肝功能的复常率无明显增加。结论拉米夫定对e抗原阴性慢性乙型肝炎有较好的治疗作用，出现变异耐药后需要更换其他抗病毒药物。护肝治疗3个月无效者需要进行抗病毒治疗。     

拉米夫定对乙型肝炎病毒DNA复制及基因变异的影响

目的:研究拉米夫定治疗慢性乙型肝炎(CHB)的疗效、乙型肝炎病毒(HBV)DNA P基因变异特点及编码蛋白质的二级结构.方法:提取HBV DNA后,半巢式聚合酶链反应(PCR)扩增,PCR产物自动测序.总结拉米夫定的疗效、P基因变异出现的时间,用SAS软件分析影响疗效的因素.用DNA STAR软件的CLUSTAL V方法对HBV DNA P基因片段的核苷酸和氨基酸差异、变异类型进行分析.用DNAclub,DNAsis软件分析出现P基因变异前后所编码的蛋白质的二级结构的差异.结果:在治疗后6个月血清标本中未发现YMDD变异,在治疗后12个月血清标本中发现2例YMDD变异.在对照组中发现了1例L528M变异;在治疗后12个月发现了2例YVDD变异,2例只有L528M的变异.在发生变异后,YMDD的转角结构变为折叠,L528M的转角结构没变.结论:1年的拉米夫定治疗可以有效抑制HBV DNA的复制.YMDD变异发生在拉米夫定治疗6个月之后,L528M变异可单独在体内存在,未接受抗病毒治疗的慢性HBV携带者可发生L528M变异.发生YMDD变异的P基因编码的蛋白质二级结构由转角变为折叠.L528M变异不影响蛋白质二级结构.     

基因芯片检测乙肝病毒YMDD变异及其临床意义

目的 检测拉米呋啶治疗慢性乙肝病人YMDD变异情况与血清HBV DNA、ALT水平等指标的关系。方法 利用基因芯片、ELISA及生化检测技术检测180例慢性乙肝患者服用拉米呋啶6～24个月后YMDD变异、HBV DNA及ALT水平变化。结果 180例患者中，168例HBV DNA、ALT不同程度下降，随用药时间的延长，部分患者（2g例）的YMDD出现变异，同时HBV DNA及ALT水平出现反跳。结论服用拉米呋啶的慢性乙肝患者的YMDD发生率与时间长短有关，血清HBV DNA及ALT与YMDD相关，由此可以预测拉米呋啶治疗的乙肝病人的YMDD发生率。     

An extended two-year trial of lamivudine in Chinese patients with chronic hepatitis B

目的：评价拉米夫定治疗慢性乙型肝炎的长期疗效和安全性以及YMDD变异对临床的影响。方法;这是一项多中心、随机双盲、安慰剂对照临床试验,始于1996年。429例HBsAg、HbeAg和HBV DNA阳性病人进行本研究。病人以３：１的比例随机接受拉米夫定（100毫克／日,n=322）或安慰剂（n=107）治疗１２周。随后所有病人接受拉米夫定开放治疗,每４周随访一次,共１０４周。结果：治疗一年后72.7%病人（285/392）持续HBV DNA阴转。除外YMDD变异病人,病毒DNA在第二年持续受到抑制。YMDD变异病人血清HBV DNA的平均水平上升至86Meq/ml(bDNA分析),但远低于年持续受到抑制。拉米夫定治疗可促进HbeAg消失和HbeAg/抗－Hbe血清转换,二均与治疗前ALT水平和治疗时间有关。第二年HbeAg消失率在治疗前ALT水平高于正常一倍的病人中26.8%,在治疗前ALT水平高于正常二倍、五倍的病人中分别为３５.６％和５５.６％。HbeAg血清转换率分别为17.4%、22.2%,33.3％。二年后,50.3%治疗前ALT异常的病人ALT保持正常。83%治疗前ALT正常的病人仍保持正常。YMDD变异发生率为49.7%。其血清HBV DNA中位数水平轻度升高至86Meq/ml,其中１５％病人ALT高于治疗前水平。4例病人临床症状出现反复停药后恢复。拉米夫定的不良反应为轻、中度,仅二例病人报告出现药物相关的严重不良反应。     

应用错配PCR和限制性片段长度多态性分析技术检测HBV YMDD变异株

目的：建立简便易行的检测乙型肝炎病毒（HBV）多聚酶基因（P基因）上YMDD变异株的方法，评价运用拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患对此变异的影响，方法：采用套式／错配聚合酶链反应（PCR）结合限制性片段长度多态性（RFLP）分析技术对108例治疗前HBV DNA（PCR）阳性正在拉米夫定治疗中的慢性乙型肝炎患者的HBV YMDD变异情况进行检测。结果：运用上述技术能有效区分HBV YMDD野生株和变异株，上述108例患者经拉米夫定治疗后，HBV DNA阴转者63例（58．3％），HBV YMDD野生株和变异株分别为23例（21．3％）和22例（20．4％），结论：建立的套式／错配PCR－RFLP分析技术可用于HBV YMDD变异株的临床监测，拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者可导致部分患者的HBV多聚酶基因上YMDD发生变异。     

拉米夫定治疗慢性乙型病毒性肝炎患者YMDD变异及影响因素

目的：探讨慢性乙型病毒性肝炎患者应用拉米夫定治疗后YMDD变异发生率及其影响因素。方法将90例慢性乙肝患者根据治疗方法的不同分为观察组和对照组,对照组应用拉米夫定,观察组应用拉米夫定及干扰素,测定并观察患者治疗前、治疗过程中的HBV DNA载量,血清ALT水平,并分析ALT水平与HBV DNA载量与YMDD变异率的相关性。结果①单用拉米夫定治疗的患者在治疗6个月后YMDD变异的累计发生率明显高于拉米夫定联合干扰素治疗的患者（P〈0.05）;②未联合应用干扰素、ALT水平〈80 U/L、HBV DNA载量〉1.0×10^3 copy/ml是影响YMDD变异的独立危险因素（P〈0.05）;③ALT水平与YMDD变异率呈负相关（r=-0.62,P〈0.05）,HBV DNA水平与YMDD变异率呈正相关（r=0.85,P〈0.05）。结论未联合应用干扰素、ALT水平低以及HBV DNA载量高是慢性乙型病毒性肝炎患者YMDD变异的影响因素,并且ALT水平及HBV DNA载量与YMDD变异率成相关性;临床医师应当通过ALT水平及HBV DNA载量进行指导用药。