一种新型含硒化合物诱导PC-3前列腺癌细胞凋亡及其体内抑瘤作用的研究

目的　探讨新型含硒化合物BBSKE(1,2 [二 (1,2 苯并异硒唑 3(2H) 酮 ) ]乙烷 )对PC 3前列腺癌细胞的增殖及凋亡的影响 ,观察其对小鼠前列腺癌的体内抑瘤作用。方法　培养PC 3前列腺癌细胞 ,用MTT法检测了不同浓度的BBSKE对其增殖的影响 ,用荧光显微镜、DNA电泳和流式细胞仪观察BBSKE对细胞凋亡的诱导作用 ,并检测BBSKE对PC 3细胞bcl 2和bax蛋白表达水平及半胱氨蛋白水解酶 3活性的影响。用TRAMP C2小鼠前列腺癌细胞皮下注射C5 7BL/ 6小鼠 ,建立小鼠前列腺癌模型 ,观察BBSKE在小鼠体内的抗前列腺癌作用。结果　BBSKE可以显著抑制PC 3细胞的体外增殖 ,其 4 8h的IC50 值为 17 90 μmol/L ,而阳性对照组顺铂为 15 0 μmol/L。同时BBSKE可以诱导PC 3细胞凋亡 ,2 0 μmol/L的BBSKE作用PC 3细胞 4 8h凋亡发生率达 2 6 32 % ,显著高于未经处理的对照组的 1 75 % (P <0 0 1)。细胞中bcl 2表达减低 ,bax表达无明显变化 ,半胱氨蛋白水解酶 3活性显著增高。动物实验也表明其对小鼠体内前列腺癌的生长有抑制作用 ,抑瘤率达 4 0 % ,顺铂对照组为 4 8%。结论　新型含硒化合物BBSKE可以抑制PC 3细胞增殖并促进其凋亡 ,其作用可能是通过降低细胞内的bcl 2 ,增加半胱氨蛋白水解酶 3活性而实现的 ;在前列腺癌的动物模     

脑胶质瘤热休克蛋白抗原肽复合物抑瘤作用的研究

目的　提纯大鼠脑胶质瘤C6细胞热休克蛋白抗原肽复合物(HAC) ,免疫大鼠,观察HAC的抑瘤作用。方法　采用免疫亲和层析方法提纯鼠脑胶质瘤C6细胞HAC ,免疫2 0只大鼠为实验组,以另2 0只大鼠作为对照组,于免疫后一周,采用立体定向脑内接种方法,以C6细胞攻击两组大鼠,于肿瘤细胞攻击后第二周,进行外周静脉血淋巴细胞计数,和血清IFN、IL 2、TNF的浓度测定,并于正常对照。观察四周后动物的存活率。进行HE染色,并用免疫组化方法分析脑胶质瘤浸润区T淋巴细胞分布情况。结果　实验组大鼠外周血淋巴细胞计数和IFN、IL 2、TNF浓度均显著高…     

散结抗瘤方对荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究

目的：探讨散结抗瘤方体内抑瘤作用及机制。方法：本实验通过建立SRS－82瘤株荷瘤小鼠模型，用该复方煎剂给荷瘤小鼠灌胃，称瘤质量、计算抑瘤率、在电镜下观察瘤块切片，用琼脂糖凝胶电泳方法观察“梯状条带”。结果：中药治疗组与对照组相比瘤质量明显减轻，电镜观察和电泳均发现中药组出现较明显的凋亡特征性改变。结论：该复方在体内有明显的抑瘤效果，在诱导肿瘤细胞凋亡方面亦有明显的疗效。     

白术挥发油对小鼠S180的抑瘤作用及瘤组织凋亡相关基因bcl-2表达的影响

目的探讨白术挥发油对小鼠S180肉瘤的抑瘤作用及肿瘤凋亡相关基因bcl-2表达的影响;方法荧光免疫组织化学法,通过激光共聚焦显微镜观察并计数表达bcl-2基因的瘤细胞数。结果白术挥发油各剂量组对小鼠S180肉瘤组织具有抑制作用;白术挥发油各剂量组能明显降低小鼠S180肉瘤凋亡相关基因bcl-2的表达。结论白术挥发油可能通过调控肿瘤细胞凋亡相关基因bcl-2的表达而实现抑瘤作用。     

骨骼肌细胞条件培养液的抑瘤作用

关于骨骼肌转移瘤罕见性的机理,国内外研究不多,尚无一致结论,我们曾研究了骨骼肌微血管内皮细胞粘附分子(ＶＣＡＭ1)在肿瘤转移过程中的意义,发现ＶＣＡＭ1的变化不能解释骨骼肌转移瘤罕见性。现又进一步研究了骨骼肌细胞条件培养液(ｍｕｓｃｌｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄｍｅｄｉｕｍ,ＭＣＭ)体外对肿瘤细胞生长的影响,由此评价骨骼肌细胞在骨骼肌器官转移瘤罕见性中的意义。一、材料与方法1.新生鼠骨骼肌细胞培养:选用24～48小时新生Ｗｉｓｔａｒ大鼠,消毒,分离大腿骨骼肌,剪碎成1～2ｍｍ3组织块,以胰蛋白酶胶原酶混合液消化30分钟,过4号针…     

扶正抑瘤饮抑瘤作用的实验研究

目的 :观察扶正抑瘤饮对人胃癌细胞株体外增殖的影响 ,及其对小鼠移植性肉瘤的抑制作用 .方法 :应用MTT比色法 ,检测不同浓度扶正抑瘤饮 (简称中药ZY)对不同分化程度的 3株人胃癌细胞增殖的影响 .并以小鼠移植性肉瘤180为模型 ,随机分空白对照组 ,ELF化疗方案组 (ELF) ,扶正抑瘤饮组 (ZY) .观察其对小鼠移植性肉瘤的抑制作用 .结果 :中药对 3株胃癌细胞均呈现一定程度的抑制作用 ,但其对不同细胞株敏感性有差异 .中药浓度在 1× 10 -2 ～ 1× 10 3mg·L-1之间 ,对SGC 790 1,880 1细胞株增殖的抑制作用与剂量无明显相关 ,而对MGC 80 3细胞株增殖的抑制作用随浓度升高而增强 ,当浓度为 1× 10 3 mg·L-1时 ,抑制率最大 (4 1.1±5 .4 ) % .中药对小鼠移植性肉瘤 (91.0 % )与ELF组肿瘤生长抑制率 (93.1% ) ,ZY组平均瘤重 (0 .131± 0 .0 18)g与ELF组(0 .0 10± 0 .0 0 8)g相比 ,均无显著性差异 (P >0 .0 5 ) .ZY组小鼠体质量变化量 (6 .80± 0 .5 4 )g与空白对照组 (5 .5 0± 2 .2 7)g相比无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,但ELF组小鼠体质量变化量(0 .4 3± 0 .15 )g明显小于空白对照组和ZY组 (P <0 .0 5 ) .结论 :扶正抑瘤饮对人胃癌细胞株SGC 790 1,880 1的抑瘤作用与浓度无明显关系 ,但对MGC 80 3细胞株的抑     

Genistein体外抑瘤效应及其对不同细胞作用选择性的研究

目的：研究Genistein与放射是否具有协同抑瘤作用及其毒副作用如何。方法：利用MTTI地和集落计数研究Genistein对5种不同细胞的选择性抗增殖作用。在此基础上运用活细胞计数，3H－TdR掺入法，流式仪检测等技术分析Genistein和／或放射对肿瘤细胞增殖的影响及可能的机制。结果：与对造血等正常细胞比较，Genistein对肿瘤细胞有较好的选择性。Genistein照后给药可引起明显的G2／M细胞周期阻滞，并诱发大量细胞凋亡，其抑瘤作用大于两单一措施之和，并显著高于照前给药组。结论：Genistein对骨髓造血细胞有着突出的安全低毒的优点，其照后给药与γ射线具有协同抑瘤效应。     

TRAIL重组蛋白联合扶正抑瘤方诱导HepG2肝癌细胞凋亡的研究

目的:研究重组人可溶性TRAIL蛋白联合扶正抑瘤方诱导肝癌细胞HepG2凋亡的作用和意义。方法:HepG2细胞经重组人可溶性TRAIL蛋白及联合扶正抑瘤方处理后,以MTT法测定细胞存活率、流式细胞术检测细胞凋亡指数。结果:扶正抑瘤方对促进TRAIL蛋白诱导的HepG2的凋亡作用存在较好的量效和时效关系,其最佳作用剂量和最佳作用时间分别为105mg/ml和24小时。结论:扶正抑瘤方能加强TRAIL诱导HepG2肝癌细胞凋亡作用。     

扶正抑瘤颗粒对小鼠肝癌H22细胞凋亡率及线粒体膜电位的影响

目的:观察扶正抑瘤颗粒对小鼠肝癌H22细胞凋亡率及线粒体膜电位的影响。方法:48只荷瘤小鼠随机分为模型组、环磷酰胺治疗组、扶正抑瘤颗粒大剂量治疗组和扶正抑瘤颗粒小剂量治疗组,分别予以相应药物治疗14 d。碘化丙啶染色,流式细胞术检测各组小鼠肝癌H22细胞的凋亡率。采用荧光探针罗丹明123负载,激光扫描共聚焦显微镜下观察H22细胞的荧光强度,分析H22细胞线粒体膜电位的大小。结果:扶正抑瘤颗粒可以提高小鼠肝癌H22细胞的凋亡率,降低H22细胞的线粒体膜电位,与模型组比较,差异有统计学意义。结论:扶正抑瘤颗粒的抗肿瘤机制可能与降低肿瘤细胞线粒体膜电位,诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

嗜酸乳杆菌对小鼠U14移植瘤的抑瘤及凋亡诱导作用的研究

目的探讨嗜酸乳杆菌对小鼠宫颈鳞癌U14移植瘤的抑瘤及细胞凋亡的诱导作用.方法建立615近交系小鼠U14移植瘤动物模型,随机分组,检测各组的抑瘤率;应用HE染色法,观察小鼠U14移植瘤组织的病理组织学特征;应用末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法检测细胞凋亡指数AI.结果与对照组比较,LA对小鼠U14移植瘤具有非常显著抑瘤作用(P＜0.01);病理组织学观察,LA组移植瘤组织癌细胞周围有大量淋巴细胞和浆细胞浸润,对照组及顺铂组的癌细胞周围未见明显淋巴细胞和浆细胞浸润;对照组小鼠与LA及顺铂组小鼠之间,AI的差畀具有非常显著性(P＜0.01).结论嗜酸乳杆菌对小鼠U14移植瘤具有显著的抑瘤作用,诱导肿瘤细胞凋亡是其抑瘤机理之一.     

骨髓间质干细胞移植对大鼠脑缺血再灌注凋亡蛋白Caspase-3的影响

目的 研究静脉移植骨髓间充质干细胞 (MSCs) 对脑缺血再灌注模型大鼠神经功能及凋亡相关蛋白caspase-3的影响.方法体外培养及扩增 MSCs 后,用绿色荧光染料羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂 (CFSE) 标记,通过静脉途径移植给大脑中动脉缺血 2 h 再灌注的SD 大鼠,按不同时间点取材,荧光显微镜观察BMSCs在脑内的分布,免疫组织化学染色及RT-PCR检测大鼠脑内caspase-3蛋白表达情况.结果移植组在移植后第6天神经功能明显好于对照组 (P<0.05).移植组移植后3、 12、24、48、72 h caspase 3 免疫组化阳性目标面密度分别为 (1.34±0.31)%、(3.98±0.67)%、(5.58±0.92)%、(4.65±0.69)%、(3.51±0.63)%,对照组分别为 (2.09±0.19)%、(5.23±0.30)%、(6.89±0.57)%、(5.93±0.56)%、(4.39±0.57)%,移植组和对照组比较均 (P< 0.05).6 h 及 7 d 移植组 caspase 3 阳性目标面密度分别为 (2.81±0.35)%、(1.64±0.29)%,与对照组 (3.92±0.44)%,(2.29±0.21)% 比较差异显著 (P< 0.01).移植组相应时间点caspase-3的表达明显低于对照组 (P<0.05, P<0.01);移植组大鼠缺血侧皮层的caspase-3 mRNA相对量明显低于对照组 (P<0.01).结论经静脉注射骨髓间充质干细胞可明显改善神经功能.其可能通过下调caspase-3表达方式对脑缺血再灌注损伤起保护作用.     

复方丹参滴丸对血管性痴呆大鼠海马CA3区Bax、Caspase-3表达的影响

目的 观察复方丹参滴丸对血管性痴呆(VD)大鼠的学习记忆能力影响并探讨其作用的机制.方法 采用双侧颈总动脉结扎法制作血管性痴呆大鼠模型,用复方丹参滴丸治疗,Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力,HE染色观察海马的病理变化,免疫组织化学检测海马CA3区Bax和Caspase-3的表达.结果 复方丹参滴丸能明显改善VD...     

Survivin与Caspase-3在上皮性卵巢癌中的表达及化疗对其的影响

目的：研究Survivin和Caspase-3在上皮性卵巢癌中的表达和相互关系,以及化疗对其表达的影响。方法：运用免疫组织化学（S-P法）方法,检测Survivin和Caspase-3在99例卵巢组织中的表达。结果：Survivin在未化疗的上皮性卵巢癌中的表达率显著高于正常卵巢、良性囊腺瘤、交界性囊腺瘤（P均〈0．05）;而Caspase-3则相反（P均〈0．05）;Survivin与病理分级和临床分期均有关（P均〈0．05）;Caspase-3与临床分期有关（P〈0．05）;Survivin和Caspase-3在上皮性卵巢癌中的表达无相关性。结论：Survivin的表达与Caspase-3的缺表达可能参与了卵巢癌的发生发展过程,与卵巢癌的预后和耐药机制有关;Survivin有望成为卵巢癌早期诊断的筛查性标记物;针对Survivin和Caspase-3的靶向治疗有可能提高化疗效果和减少耐药。     

Caspase-3与Caspase-6蛋白在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨Caspase-3、Caspase-6蛋白在肾透明细胞癌（RCCC）的表达及与预后的关系。方法采用免疫组化（SP法）对75例RCCC及其癌旁组织、15例正常肾组织标本中的Caspase-3、Caspase-6蛋白的表达进行研究，分析与RCCC临床病理特征及其术后生存率的关系。结果Caspase-3蛋白在RCCC中阳性表达率低于癌旁对照组，差异有显著性（P〈0．01）；在病理分级中的阳性表达率G3低于G1；在临床分期中的阳性表达率Ⅲ～Ⅳ期低于Ⅰ期；在淋巴结转移阳性组中阳性表达率低于阴性组，差异均有显著性（P〈0．05）。Caspase-6蛋白在RCCC中阳性表达率低于癌旁对照组，差异有显著性（P〈0．05）；在不同病理分级和临床分期中阳性表达率差异均无显著性（P〉0．05）；在淋巴结转移阳性、阴性组中的阳性表达率差异无显著性（P〉0．05）。在RCCC中，统计学显示Caspase-3与Caspase-6蛋白表达无相关性（C=0．0921，P〉0．05）。在35例随访患者中，Caspase-3、Caspase-6蛋白表达阳性、阴性的术后3年死亡率差异均无显著性（P〉0．05）。结论Caspase-3蛋白在RCCC中的阳性表达率低于癌旁和正常肾组织，与临床分期、病理分级呈负相关，其低表达与淋巴转移有关。Caspase-6蛋白在RCCC中的阳性表达率低于癌旁和正常肾组织，但与临床分期、病理分级及淋巴转移无关。在RCCC中，Caspase-3蛋白的表达与Caspase-6蛋白的表达无相关性。     

Caspase-8及Caspase-3与细胞凋亡

细胞凋亡与多种疾病的发生、发展密切相关。Caspasec依赖的凋亡过程中caspase-8与caspase-3着关键作用。就Caspase-872．Caspase-3在细胞凋亡过程中的作用及其研究进展做一综述。     

Caspase-3蛋白在喉癌中的表达及其临床意义

目的研究喉癌中Caspase-3的表达与相关病理生物学行为及其对临床预后的影响。方法应用免疫组化法检测68例原发喉癌组织中Caspase-3基因蛋白的表达情况。结果68例喉癌中Caspase-3呈阳性反应34例,占50.0%。其中,48例声门上型喉癌中呈现Caspase-3阳性反应占45.83%(22/48),20例声门型喉癌占60.0%(12/20);Caspase-3的阳性表达与喉癌颈淋巴结转移呈负相关。结论Caspase-3在喉癌中低表达,其原位检测对喉癌淋巴结转移和预后估计具有参考价值。     

Livin与caspase-3蛋白在胃腺癌组织中的表达及临床意义

目的研究生存蛋白(livin)与胱天蛋白酶3(caspase-3)在胃腺癌组织中的表达及其临床意义。方法选择2010年1月至2012年6月阜宁县人民医院经过病理诊断确诊为胃癌的蜡块标本114例作为胃癌组,另外取病理诊断为正常胃黏膜的蜡块标本46例作为对照组,应用免疫组织化学染色检测两组livin与caspase-3蛋白的表达情况,分析比较其表达与临床病理特征的相关性以及两者之间的相关性。结果 Livin在胃腺癌组织中的阳性表达率显著地高于正常胃黏膜组织(χ2=66.74,P<0.05),caspase-3在胃腺癌组织中阳性表达率低于正常胃黏膜组织(χ2=68.01,P<0.05)。不同临床分期、组织分化、肿瘤浸润深度以及淋巴转移与否的livin和caspase-3阳性率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Livin和caspase-3在胃腺癌组织表达呈负相关(rs=-0.57,P<0.05)。结论Livin和caspase-3在胃腺癌的表达呈负相关,提示livin可能通过抑制细胞凋亡来促进胃腺癌的发生、发展。     

清开颗粒对急性肝衰竭小鼠肝细胞凋亡和Caspase-3表达的影响

目的:研究急性肝衰竭小鼠肝细胞凋亡和Caspase-3表达的变化及清开颗粒对其影响,探讨清开颗粒防治急性肝衰竭的作用机制。方法:以Ga1N LPS染毒昆明小鼠造成急性肝衰竭动物模型。分别以大、中、小剂量清开颗粒进行干预,并以大、中、小剂量促肝细胞生长颗粒(HGF)作为阳性对照,采用TUNEL染色观察肝细胞凋亡,RT-PCR检测Caspase-3 mRNA表达,采用免疫印迹方法(Western Blot)检测Caspase3表达。结果:清开颗粒各组凋亡细胞数均较HGF各组明显减少(P<0.05);清开颗粒中、高剂量组Caspase-3 mRNA表达明显低于HGF低、中剂量组(P<0.05);清开颗粒各组活化的Caspase3表达较HGF低、中剂量组显著降低(P<0.05)。结论:清开颗粒能减少内毒素肝损伤小鼠肝细胞凋亡、下调肝细胞Caspase-3的表达,提示其抑制肝细胞凋亡可能是其防治急性肝衰竭的机制之一。     

葛根素对大鼠肝缺血再灌注后Caspase-3和Bcl-2表达的影响

目的：探讨葛根素对肝缺血再灌注损伤Caspase-3、Bcl-2表达及肝细胞凋亡的影响。方法：建立大鼠肝脏部分缺血再灌注模型,以葛根素预处理,免疫组化法检测Caspase-3和Bcl-2表达,透射电镜观察肝细胞凋亡的超微结构改变。结果：肝缺血再灌注后发生了显著的细胞凋亡现象,Caspase-3表达升高,Bcl-2蛋白表达减少,6h恢复正常,其后逐渐升高。葛根素预处理使细胞凋亡明显减轻,Caspase-3表达明显下降,Bcl-2持续高表达。结论：葛根素可上调Bcl-2的表达,抑制Caspase-3的表达,减少肝细胞凋亡,对肝脏缺血再灌注损伤有保护作用。     

塞来昔布对喉癌Hep-2细胞COX-2和Caspase-3表达的影响

目的:探讨塞来昔布对喉癌细胞株Hep-2生长抑制及对环氧化酶-2(COX-2)和Caspase-3变化的影响。方法:将不同浓度塞来昔布作用于体外培养的人喉癌细胞株Hep-2,MTT法计算细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞周期变化,Western blot检测COX-2表达,分光光度法检测Caspase-3活性。结果:塞来昔布呈剂量依赖性显著抑制Hep-2细胞生长,阻滞细胞G0/G1期转化,且可明显降低COX-2蛋白水平,增加Caspase-3活性。结论:塞来昔布能抑制喉癌细胞的生长,其机制可能与下调COX-2表达、增强Caspase-3活性有关。