应用指纹图谱研究类方方剂配伍物质基础——二妙丸物质基础在配伍类方中的变化研究

为探索类方方剂配伍规律的科学内涵和研究途径,依据类方方剂的配伍特征,用一组抗湿热型痛风二妙丸类方（二妙丸、三妙丸、四妙丸、加味四妙丸）研究基本方效应物质基础在类方配伍中的作用及配伍变化。将二妙丸类方组方药有效部位正交组合,抗湿热型痛风效应评价,分析显示基本方二妙丸有效部位在配伍类方中起重要作用。建立二妙丸类方有效部位群GC、HPLC 四张指纹图谱,充分反映各类成分色谱峰信息,并进行组方药的归属分析,HPLC/MS/MS、GC/MS/MS 分析各共有峰成分种类及结构特征,分析比较二妙丸有效部位共有峰数目、相对峰面积比值配伍类方前后的变化。研究显示,基本方二妙丸是类方物质基础的主要来源,配伍前后相对含量的变化与其类方功效的变化密切相关。     

二妙丸类方抗湿热证痛风有效部位群指纹图谱比较研究

目的：为探索类方方剂配伍物质基础变化特征，研究二妙丸类方(二妙丸、三妙丸、四妙丸及加味四妙丸)配伍物质基础的关联。方法：建立加味四妙丸抗湿热证痛风有效部位群HPLC指纹图谱，利用对照品确定指纹图谱共有峰成分、组方药有效部位色谱峰归属以及有效部位群共有峰的组方药有效部位来源，测定二妙丸类方抗湿热证痛风有效部位群指纹图谱，比较指纹图谱共有峰成分特征及配伍变化。结果：加味四妙丸有效部位群有60个共有峰，分别来源于组方药生物碱、黄酮、有机酸部位。基础方与类方间有效部位群指纹图谱共有峰在数目及相对峰面积比值方面呈现一定的变化规律。结论：二妙丸及其类方有共同的物质基础，从基础方到各类方，抗湿热证痛风物质基础的配伍变化具有相关性。     

二妙丸类方抗湿热证痛风有效部位群乙酰化GC指纹图谱比较研究

目的：为探索类方方剂配伍物质基础变化特征,研究二妙丸类方（二妙丸、三妙丸、四妙丸及加味四妙丸）配伍物质基础的变化规律。方法：建立加味四妙丸抗湿热证痛风有效部位群乙酰化GC指纹图谱,利用对照品和组方药材确定指纹图谱共有峰成分、组方药色谱峰归属,测定二妙丸类方有效部位群乙酰化GC指纹图谱,比较指纹图谱共有峰成分特征及配伍变化。结果：加味四妙丸有效部位群乙酰化GC图谱有26个共有峰,有葡萄糖、木糖及来源于组方药的苍术、牛膝、薏苡仁等。基础方与类方间水液部位乙酰化指纹图谱共有峰在数目及相对峰面积比值方面呈现一定的变化规律。结论：二妙丸及其类方有共同的物质基础,从基础方到各类方,物质基础的配伍变化具有相关性。     

基于二妙丸类方探讨主从方类方配伍规律的研究思路与方法

主从方类方体现中医方剂制方用药主旨及加减变化规律,是认识和理解方剂配伍规律的有效途径之一。本文在阐述主从方类方形成溯源与衍化关系基础上,基于二妙丸类方的组方特点及衍化规律,研究抗痛风效应及物质基础的共性规律与差异性、主方与从方的配伍特征,并探讨主从方类方配伍规律的研究思路与方法。     

二妙丸指纹图谱研究

目的:对市售二妙丸进行色谱指纹图谱研究.方法:采用HPLC法,对不同批号的二妙丸HPLC指纹图谱进行研究,建立共有模式,计算相似度,并将制剂指纹图谱与苍术、黄柏的HPLC指纹图谱进行相关性研究.结果:对不同批号市售二妙丸相似度进行了计算,并对其HPLC指纹图谱中共有峰进行了归属.结论:可以利用指纹图谱技术进行中成药中主要成分的药味来源归属及部分特征峰的定性.     

二妙丸类方抗湿热证痛风有效部位群乙酰化GC指纹图谱比较研究

目的：为探索类方方剂配伍物质基础变化特征,研究二妙丸类方（二妙丸、三妙丸、四妙丸及加味四妙丸）配伍物质基础的变化规律。方法：建立加味四妙九抗湿热证痛风有效部位群乙酰化GC指纹图谱,利用对照品和组方药材确定指纹图谱共有峰成分、组方药色谱峰归属,测定二妙丸类方有效部位群乙酰化GC指纹图谱,比较指纹图谱共有峰成分特征及配伍变化。结果：加味四妙丸有效部位群乙酰化GC图谱有26个共有峰,有葡萄糖、木糖及来源于组方药的苍术、牛膝、薏苡仁等。基础方与类方间水液部位乙酰化指纹图谱共有峰在数目及相对峰面积比值方面呈现一定的变化规律。结论：二妙丸及其类方有共同的物质基础,从基础方到各类方,物质基础的配伍变化具有相关性。     

不同粉体二妙丸HPLC指纹图谱对比研究

目的:分别建立超微粉和细粉二妙丸的HPLC指纹图谱,并对其进行对比研究。方法:采用HPLC对不同粉体形态制备的二妙丸建立指纹图谱,采用"中药色谱指纹图谱相似度评价软件"建立标准指纹图谱,对不同粉体二妙丸的指纹图谱进行相似度分析。结果:方法的精密度、重复性及稳定性良好。两种不同粉体形态制备的二妙丸指纹图谱的相似度均大于0.91,两者在共有峰上没明显差别,而峰面积差别明显。结论:该方法稳定准确,建立的HPLC指纹图谱能从整体上反映出二妙丸的化学成分信息,为建立二妙丸质量标准提供参考。     

四妙丸HPLC指纹图谱建立

目的 建立四妙丸HPLC指纹图谱.方法 四妙丸50%乙醇提取物的分析采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温25℃;检测波长280 nm(0~65 min)和330 nm (65~90 min).结果 11批样品指纹图谱中有31个共有峰,指认其中8个峰为绿原酸、黄柏碱、木兰花碱、阿魏酸、药根碱、巴马汀、盐酸小檗碱、苍术素;相似度大于0.994.结论 该方法简便可靠,稳定性好,可用于四妙丸质量评价.     

指纹图谱在中药物质基础研究中的应用

1 引言 中药指纹图谱（finger printing）是借用DNA指纹图谱发展而来的。中药材或中成药经过适当处理后，利用现代信息采集技术和质量分析手段得到的能够显现中药材或中成药性质的图像、图形、光谱的图谱及其数据，即为中药指纹图谱。它可以较全面地反映中药所含化学成分的种类与数量，进而反映中药的质量和中医用药所体现的整体疗效。     

二妙丸系列类方作用规律的相关性探讨

目的：探索类方方剂作用规律的研究途径。方法：以二妙丸、三妙丸、四妙丸及加味四妙丸组成的系列类方为例，分析它们的组方结构、主治疾病的发病机制及生物效应。结果：二妙丸系列方在组方结构、发病机制及抗炎、镇痛、降尿酸及免疫作用方面具有相关性。     

HPLC法测定黄柏生物碱成分含量及在二妙丸类方中的比较研究

目的:比较黄柏生物碱配伍二妙丸类方前后含量的变化,探讨类方方剂物质基础配伍变化的特征。方法:采用HPLC,Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(50∶50,每100 mL加十二烷基磺酸钠0.17 g),流速0.8 mL·min-1,柱温30℃,检测波长345 nm。测定黄柏及其二妙丸类方(二妙方、三妙方、四妙方、加味四妙方)中小檗碱、巴马汀及药根碱成分含量。结果:3种生物碱在四妙方中含量基本没变化,在二妙方、三妙方中含量减少,在加味四妙方中减少较多,药根碱较小檗碱、巴马汀在二妙丸类方中减少量大。结论:黄柏配伍二妙丸类方后,黄柏生物碱成分在基本方二妙及不同类方中呈现一定的变化规律。     

二妙丸系列类方有效部位群药效学比较研究

目的:比较二妙丸系列类方(二妙丸、三妙丸、四妙丸及加味四妙丸)有效部位群抗湿热下注证及痛风药效的关联性。方法:采用醋酸刺激引起小鼠扭体实验、二甲苯致小鼠耳肿胀实验、小鼠高尿酸模型的降尿酸实验及小鼠碳粒廓清实验,评价二妙丸系列类方药效作用。结果:各系列方均具有显著的免疫增强作用,多糖为免疫增强有效部位;各系列方有效部位群均具有显著的抗炎作用,镇痛、降尿酸作用依次增强,其中四妙丸及加味四妙丸有效部位群镇痛、降尿酸作用更强。结论:二妙丸系统类方对湿热下注证及抗痛风作用具有共同的药效物质基础,从基本方到系列类方,药效物质基础及效应的变化存在着一定的联系和作用规律。     

指纹图谱技术在方剂现代研究中的应用现状

介绍了中药指纹图谱的概念及其应用意义,从技术层面详细地综述了近几年指纹图谱技术在方剂现代研究中的主要应用领域,包括方剂的质量控制研究,方剂的配伍规律研究以及方剂的药效物质基础研究。分析了指纹图谱技术在方剂研究中存在的问题并提出了相应的解决方法。最后展望了指纹图谱技术在方剂现代研究中的应用前景。指出：指纹图谱技术是量化表达和解析中药药效物质基础整体特征的重要手段,是中药走向世界的关键技术之一;指纹图谱技术在方剂的现代研究中已经得到了广泛的应用,并且随着科学技术的发展,方剂的指纹图谱研究还有更大的发展空间。     

加味四妙丸有效部位群GC指纹图谱谱效关系及配伍变化研究

目的:研究加味四妙丸有效部位群配伍药效物质基础特征,表征君药挥发油部位化学-配伍-药效的相关性。方法:评价不同工艺全方及不同组合有效部位抗炎、镇痛及降尿酸作用,并测定GC指纹图谱,运用数理统计方法将药理数据与指纹图谱各共有峰相对面积相关联;比较挥发油部位、有效部位群及全方GC指纹图谱有效共有峰的变化特征。结果:挥发油指纹图谱25个共有峰中,除1、4、6、12号共有峰外,均与抗炎、镇痛、降尿酸活性相关;挥发油部位在与全方及有效部位群配伍组合后,有效共有峰减少,大多数共有峰峰面积比值减小,少数共有峰峰面积比值增大。结论:用指纹图谱谱效关系是表征复方整体成分-配伍-药效的相关性的有效途径     

HPLC法同时测定加味二妙颗粒中7种成分及指纹图谱建立

目的建立HPLC法同时测定加味二妙颗粒(黄柏、苍术、土茯苓等)中黄柏碱、盐酸小檗碱、盐酸药根碱、(R,S)-告依春、落新妇苷、橙皮苷、白术内酯Ⅲ的含有量,并建立指纹图谱。方法该药物70%甲醇提取液的分析采用Amethyst C18-H色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以0.05 mol/L磷酸二氢钾-乙腈为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;检测波长237、291 nm;柱温35℃。结果 7种成分在各自范围内线性关系良好(r=1),平均加样回收率95.77%~110.36%,RSD 0.06%~2.94%。14批样品指纹图谱中有20个共有峰,相似度均大于0.990,有5个被鉴定出(5-羟甲基糠醛、黄柏碱、落新妇苷、橙皮苷、盐酸小檗碱)。结论该方法稳定可靠,重复性好,可用于加味二妙颗粒的质量控制。     

指纹图谱技术在方剂现代研究中的应用现状

介绍了中药指纹图谱的概念及其应用意义,从技术层面详细地综述了近几年指纹图谱技术在方剂现代研究中的主要应用领域,包括方剂的质量控制研究,方剂的配伍规律研究以及方剂的药效物质基础研究。分析了指纹图谱技术在方剂研究中存在的问题并提出了相应的解决方法。最后展望了指纹图谱技术在方剂现代研究中的应用前景。指出：指纹图谱技术是量化表达和解析中药药效物质基础整体特征的重要手段,是中药走向世界的关键技术之一;指纹图谱技术在方剂的现代研究中已经得到了广泛的应用,并且随着科学技术的发展,方剂的指纹图谱研究还有更大的发展空间。     

银翘散不同复方配伍HPLC指纹图谱

目的:建立银翘散(YQS)不同复方配伍组及君(J),臣(C),佐(Z),使(S)关系的HPLC指纹图谱,找出配伍前后物质基础变化及复方配伍过程中物质基础相互作用关系,从整体上探讨YQS复方配伍关系。方法:利用Ulti Mate 3000 XRS型超快速液相色谱仪,Thermo C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-0.05%磷酸水梯度洗脱,检测波长237 nm,流速1 m L·min-1,对YQS及君臣佐(J,C,Z),君臣使(J,C,S),君佐使(J,Z,S),君臣(J,C),J,C,Z,S不同配伍关系进行HPLC指纹图谱研究;利用指纹图谱处理软件对各组间HPLC指纹图谱进行数据分析。结果:YQS与各配伍组相似度由高到低为J,C,S(0.981)J,C(0.959)J,C,Z(0.953)J,Z,S(0.806);YQS与J,C,Z,S组相似度由高到低为J(0.749)C(0.573)Z(0.136)S(0.104)。YQS配伍合煎与单煎相加后的指纹图谱相比,14个峰面积降低,63个峰面积增加。结论:君臣药是YQS物质基础主要来源;本文从物质基础组成的角度,对YQS中J,C,Z,S在全方中的重要性进行了数据分析,使传统方解更具有说服力。     

炮制-配伍对理中丸方水煎液指纹图谱影响研究

目的:比较炮制-配伍前后理中丸方水煎液指纹图谱的差异。方法:用生制饮片和炮制品饮片分别制备各10批理中丸,以水煎煮法制备其水煎液。采用超高效液相色谱法(UPLC),对炮制-配伍前后理中丸方水煎液指纹图谱差异进行研究。色谱条件:色谱柱Acquity BEH C18(100 mm×2. 1 mm,1. 7μm);流动相:乙腈-0. 1%磷酸水;梯度洗脱;流速:0. 2 m L·min-1;柱温:30℃;检测波长:237 nm。利用指纹图谱相似度软件分别对10批生品和10批炮制品指纹图谱进行比较,又利用SIMCA 13. 0. 3软件对生品、炮制品各10批理中丸方水煎液进行聚类分析和主成分分析。结果:分别建立了10批生品和10批炮制品理中丸方水煎液指纹图谱,并计算其相似度,10批生品的相似度大于0. 98,10批炮制品的相似度大于0. 99。指纹图谱各色谱峰的保留时间基本一致,差异较小,但炮制前后相对峰面积变化较大。聚类和主成分可以清楚地将生品与炮制品聚为两大类。结论:实验所建立的指纹图谱方法稳定、准确,可用于比较生品与炮制品理中丸方的质量差异,为其质量控制提供依据。     

苍耳子配伍黄芪的HPLC-DAD指纹图谱研究

目的 建立苍耳子配伍黄芪的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱分析方法,研究配伍对各单味药主要特征峰的影响.方法采用HPLC分析苍耳子、黄芪单煎及苍耳子配伍黄芪合煎样品,选用Diamonsil C18色谱柱(5 μm,250 mm×4.6 mm),以甲醇-0.2%甲酸水为流动相进行线性梯度洗脱,流量为0.8 mL/min,检测波长为260 nm.结果 建立了苍耳子配伍黄芪的HPLC指纹图谱,基本为两单味药特征峰的加和,无明显新特征峰的增加,但配伍合煎对某些成分的溶出有明显的相互抑制作用.结论 本方法简便、快捷,为临床类方的配伍应用以及制定复方质量标准提供了参考.     

指纹图谱在中药研究中的应用

随着人类疾病谱的变化和人类“回归自然”潮流的兴起,中医药及其它传统医药逐渐受到世界各国人民的重视。但是由于西方对中医药学理论理解的困难,因而中药质量评价问题还不能为世界所认同。目前.中医药在世界医药领域还不能进入主流医疗体系,这就制约了中医药在世界范围的发展。因此,采用既符合中医药理论又能够为世界所接受的中药质量评价体系就成为我国医药产业