多抗甲素对人类单核细细IL-1生成及淋巴细胞IL-1反应性的促进作用

新抗生素多抗甲素对免疫功能有明显的促进作用,其作用机理包括促进白细胞介素2(IL-2)的分泌及反应性。最近我们又发现多抗甲素在体外和体内均能促进小鼠腹腔巨噬细胞分泌白细胞介素1(IL-1)。本文进一步针讨多抗甲素在体外对人外周血单核     

多抗甲素增强大鼠腹腔巨噬细胞抗癌免疫功能的研究

目的 本实验探讨腹腔内注射多抗甲素增强大鼠腹腔免疫功能的机制。方法 大鼠腹腔内分别注射0．5、1．0和1．5mg的多抗甲素。2d后处死大鼠分离巨噬细胞。计数并测定乳酸脱氢酶（LDH）和酸性磷酸酶（AcP）的活性，巨噬细胞吞噬活力，一氧化氮（NO）的分泌以及对人K562细胞的细胞毒性进行分析。同时采集大网膜，对大网膜乳斑的数量和面积进行了观察分析。结果 大鼠腹腔巨噬细胞数量、LDH和ACP的活性、吞噬活力、NO的分泌以及细胞毒性随着多抗甲素剂量的增加而增加。并且多抗甲素也显著增加了大网膜乳斑的数量和面积。结论 腹腔内注射多抗甲素可显著增加大鼠大网膜乳斑的数量和面积，并因此增加PMφ的数量，增强PMφ的活性。因而增强了腹腔巨噬细胞的免疫功能。     

游离脂肪酸受体4在腹腔与肺泡巨噬细胞的差异性表达及其与细胞因子表达的相关性分析

目的观察小鼠腹腔和肺巨噬细胞游离脂肪酸受体4(FFAR4)的表达情况并分析与细胞因子水平的相关性。方法采用流式细胞术分选成年BALB/c小鼠腹腔和肺泡巨噬细胞,应用实时定量PCR检测细胞的FFAR4和白细胞介素1(IL-1)、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA水平,并采用一元线性回归法对FFAR4与细胞因子的相关性进行分析。结果肺泡巨噬细胞的FFAR4 mRNA水平显著高于腹腔巨噬细胞。IL-1和TNF-α的mRNA水平在肺泡巨噬细胞也显著高于腹腔巨噬细胞,IL-10和IL-6的mRNA水平在肺泡巨噬细胞显著低于腹腔巨噬细胞。腹腔FFAR4 mRNA水平与IL-10、IL-6、TNF-α的mRNA水平正相关,与IL-1 mRNA水平负相关。肺巨噬细胞的FFAR4 mRNA水平与IL-1、IL-6、TNF-α的mRNA水平正相关,与IL-10 mRNA水平负相关。结论 BALB/c小鼠腹腔和肺巨噬细胞的FFAR4 mRNA水平不同,且与细胞因子的水平具有一定的相关性。     

Pam3Csk4 预处理增强巨噬细胞对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌杀菌作用

目的:初步探讨TLR2激动剂Pam3Csk4预处理后,小鼠腹腔巨噬细胞对耐甲氧西林金葡菌(Methicillin-resistant S.aureus,MRSA)的免疫反应性。方法:1μg/ml Pam3Csk4作用于鼠腹腔巨噬细胞,12 h后以热灭活耐甲氧西林金葡菌刺激细胞,ELISA和荧光定量PCR(Q-PCR)法分别检测培养细胞中TNF-α、IL-6和IL-1及mRNA含量,流式检测小鼠腹腔巨噬细胞对热灭活金葡菌的吞噬能力,平板计数法检测Pam3Csk4预处理巨噬细胞对金葡菌杀菌能力;Q-PCR法检测Pam3Csk4预处理巨噬细胞6 h和12 h后吞噬相关受体与补体受体、一氧化氮诱导合成酶(i NOS)及抗菌肽LL37基因表达。结果:金葡菌刺激后,Pam3Csk4预处理组TNF-α、IL-6、IL-1蛋白和基因水平均显著低于未处理组(P0.05),但Pam3Csk4预处理组细胞对金葡菌吞噬和杀菌能力均显著增强(P0.05),对于MRSA菌株,增强的杀菌能力在补体和抗体参与。进一步Q-PCR结果显示Pam3Csk4预处理巨噬细胞6 h和12 h后调理吞噬相关受体FCγRⅠ/Ⅲ与补体受体CR1/3表达均显著增强,i NOS和LL37基因表达也显著增加。结论:Pam3Csk4预处理小鼠腹腔巨噬细胞能增强其对金黄色葡萄球菌甲氧西林敏感和耐药菌株杀菌或抑菌能力,并降低其相应炎症反应,该现象可能与Pam3Csk4激活巨噬细胞吞噬相关受体以及i NOS和抗菌肽表达有关。     

Bestatin的免疫药理学研究Ⅰ.Bestatin对白细胞介索Ⅰ的影响

Bestatin(BS)是从橄榄网状链球菌培养液中提取的一种小分子肽,对动物自体和移植肿瘤均有抑制作用。 1.在0.01～100ug/ml的浓度范围内,BS在体外能提高C57 BL/6小鼠腹腔巨噬细胞在大肠杆菌脂多糖(LPS)作用下分泌IL-1的能力,也能够直接刺激这些巨噬细胞生成IL-1。2.给小鼠灌服BS5mg/kg/日Po×7日后腹腔巨噬细胞在体外自发生成的     

腹腔巨噬细胞功能平衡对小鼠异位子宫内膜细胞清除的影响

目的探讨腹腔巨噬细胞功能平衡对小鼠腹腔微环境和腹腔异位子宫内膜细胞清除的影响。方法给小鼠、裸鼠腹腔注射子宫内膜上皮和间质细胞,不同时间观察腹腔募集巨噬细胞数,D iI-Ac-LDL鉴定分化巨噬细胞吞噬功能的清道夫受体(SR-A1)。同步反转录-聚合酶链技术(Real-Tim e RT-PCR)检测巨噬细胞的MCP-1/JE和IL-1αmRNA表达。结果腹腔注射子宫内膜细胞后的小鼠、裸鼠募集巨噬细胞增多,上皮细胞的刺激作用强于间质细胞。24 h点为腹腔巨噬细胞募集高峰、MCP-1/JE和IL-1α的基因表达高峰,免疫正常小鼠表达反应吞噬功能的巨噬细胞清道夫受体(SR-A1)强于免疫缺陷裸鼠。结论子宫内膜细胞募集腹腔巨噬细胞为一独立免疫防御反应,募集巨噬细胞的清道夫功能和细胞因子分泌功能的平衡可能对维持正常腹腔微环境和有效清除异位子宫内膜细胞起重要作用,这在内异症的发病机制中具有重要意义。     

Vilon(L-Lys-L-Glu)对小鼠腹腔巨噬细胞分泌IL-1β、NO的影响

目的 探讨Vilon(L-Lys-L-Glu)对参与炎症反应的小鼠腹腔巨噬细胞分泌IL-1β、NO的影响.方法 以小鼠原代培养腹腔巨噬细胞为阳性参照,ELISA法检测Vilon及脂多糖(LPS)共刺激的小鼠腹腔巨噬细胞IL-1β的分泌水平;还原酶法分析NO分泌水平;RT-PCR法检测IL-1β和iNOS mRNA的表达.结果 Vilon和LPS共刺激小鼠腹腔巨噬细胞时,Vilon对LPS活化的小鼠腹腔巨噬细胞分泌IL-1β及NO具有明显的促进作用,并且呈剂量依赖关系;同时也促进了IL-1β和iNOS mRNA表达.结论 Vilon对活化的小鼠腹腔巨噬细胞分泌IL-1β、NO具有明显的促进作用.     

羧胺三唑抑制佐剂性关节炎大鼠腹腔巨噬细胞产生细胞因子

目的探讨羧胺三唑(CAI)体外对佐剂性关节炎(AA)大鼠腹腔巨噬细胞产生细胞因子的影响。方法采用弗氏完全佐剂诱导大鼠AA模型,无菌制备大鼠腹腔巨噬细胞,加CAI(10、20和40μmol/L)体外培养;ELISA法检测细胞培养上清中TNF-α、IL-1β和IL-6含量;荧光定量PCR法检测细胞内TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表达;Trans AM试剂盒检测核蛋白NF-κB p65的DNA结合活性。结果 CAI(20、40μmol/L)能够明显降低AA大鼠腹腔巨噬细胞培养上清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平,减少细胞内TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表达,同时也能够抑制核内NF-κB p65的DNA结合活性(P0.05,P0.01)。结论 CAI可能通过抑制NF-κB的活性而减少AA大鼠腹腔巨噬细胞内TNF-α、IL-1β和IL-6等促炎细胞因子的产生,CAI的抗关节炎作用可能与上述机制有关。     

淋巴细胞缺陷对内毒素血症小鼠腹腔巨噬细胞活化的影响

目的观察淋巴细胞缺陷对内毒素血症小鼠腹腔巨噬细胞活化的影响。方法采用腹腔注射脂多糖(LPS)建立Balb/c小鼠和T、B细胞缺陷的重症联合免疫缺陷(SCID)小鼠内毒素血症模型,ELISA检测2种小鼠腹腔灌洗液TNF-α和IL-10水平,实时荧光定量PCR检测腹腔巨噬细胞(peritoneal macrophage,PMa)TNF-α、IL-10及丝裂原蛋白激酶磷酸酶-1(mito-gen-activated protein kinase phosphatase-1,MKP-1)mRNA表达;ELISA检测Balb/c及SCID小鼠PMa体外刺激后细胞因子分泌情况。结果 LPS注射后1 h,SCID小鼠腹腔灌洗液TNF-α水平高于Balb/c小鼠,注射后3 h,IL-10水平低于Balb/c小鼠;LPS注射前及注射后,SCID小鼠PMa TNF-αmRNA表达高于Balb/c小鼠PMa,IL-10 mRNA表达低于Balb/c小鼠PMa;体外实验LPS刺激下,SCID小鼠PMa较Balb/c小鼠PMa分泌更多的TNF-α,IL-10的分泌却偏少。LPS注射前及注射后,Balb/c小鼠PMa MKP-1 mRNA表达均明显高于SCID小鼠。结论淋巴细胞缺陷导致内毒素血症小鼠腹腔巨噬细胞活性的增加,淋巴细胞抑制巨噬细胞的活化并可能调控其发育及成熟;MKP-1表达的减少可能是淋巴细胞缺陷导致腹腔巨噬细胞活性增加的分子机制之一。     

三七总皂甙对佐剂性关节炎大鼠腹腔巨噬细胞产生炎性细胞因子的影响

目的研究三七总皂甙(PNS)对脂多糖(LPS)诱导的佐剂性关节炎(AA)大鼠腹腔巨噬细胞产生炎性细胞因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1及IL-6的影响。方法大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂诱发大鼠佐剂性关节炎模型,采用放射免疫法检测炎性细胞因子TNF-α、IL-1及IL-6。结果体外给药PNS 0.8、0.4及0.2 mg/m l作用24 h,可不同程度的抑制LPS诱导的佐剂性关节炎大鼠腹腔巨噬细胞产生TNF-α(P<0.01,P<0.01,P<0.05)及IL-1(均P<0.05)。同时体外给药PNS 0.8 mg/m l可抑制产生IL-6(P<0.05),而PNS 0.4 mg/m l及0.2 mg/m l不能抑制IL-6的产生(均P>0.05)。结论PNS可能通过抑制佐剂性关节炎大鼠巨噬细胞释放炎性细胞因子TNF-α、IL-1及IL-6发挥治疗作用。     

莫西沙星对脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞炎性反应的影响

目的探讨莫西沙星(MXF)能否调节脂多糖(LPS)诱导的体外巨噬细胞的炎性反应。方法 Real-time PCR和Western blot检测巨噬细胞TLR4、SPHK1、NF-κB mRNA及蛋白的表达。ELISA检测各组细胞上清液TNF-α和IL-1的分泌。结果低及中等浓度(8,16 mg/L)的MXF可抑制LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TLR4、SPHK1和NF-κB p65 mRNA及蛋白的表达,TNF-α和IL-1分泌量的升高,而高浓度(64 mg/L)则起促进炎性反应的作用。结论低中浓度MXF可抑制LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞的炎性反应,而高浓度则相反。     

miR-146a对小鼠巨噬细胞IL-18表达的影响

目的:探讨miR-146a对小鼠单核-巨噬细胞株RAW264.7以及小鼠原代腹腔巨噬细胞Thl/Th2类细胞因子表达的影响。方法:体外培养的小鼠单核-巨噬细胞系RAW264.7细胞和腹腔新鲜分离的巨噬细胞分别瞬时转染miR-146a mimics、阴性对照mimics(NC mimics)、抑制性miR-146a(miR-146a inhibitor)和抑制性miR-146a阴性对照(NC in-hibitor)。转染后,利用real time PCR定量检测IL-18、IL-5和IL-10的表达情况。结果:RAW264.7细胞和原代腹腔巨噬细胞在转染miR-146a mimics后IL-18的表达水平明显降低(P<0.05),转染miR-146a inhibitor后IL-18的表达水平明显升高(P<0.05),但对IL-5和IL-10的表达,两种转染形式均没有影响。结论:巨噬细胞RAW264.7及原代巨噬细胞表达的miR-146a能够负向调控Thl类细胞因子IL-18的表达,但是不能调控Th2类细胞因子IL-5及IL-10的表达。     

低氧增强巨噬细胞中脂多糖诱导的IL-1β表达

目的探讨低氧对巨噬细胞表达IL-1β的作用及可能机制。方法给予巨噬细胞系RAW264.7常氧(21%O_2)、低氧(2%O_2)、常氧联合脂多糖(LPS)培养和低氧联合LPS培养,RT-q PCR检测Vegf、Nlrp3和Il1b的mRNA水平,Western blot检测HIF-1α、NLRP3、caspase-1、cleaved caspase-1、Pro-IL-1β和IL-1β的蛋白水平;Vhlfl/fl/Apoe~(-/-)及Vhl~(ΔMac)/Apoe~(-/-)小鼠腹腔巨噬细胞给予或不给予LPS培养,RT-q PCR检测Vhl、Nlrp3、Il1b和Il6的mRNA水平。结果与常氧组相比,低氧仅显著升高RAW264.7 Vegf、Nlrp3和Il1b的mRNA水平(P0.01)。给予LPS培养后,与常氧组相比,低氧可进一步升高LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞中NLRP3和IL-1βmRNA及蛋白水平(P0.01),低氧联合LPS培养不能激活caspase-1及剪切Pro-IL-1β。给予LPS培养后,Vhl~(ΔMac)/Apoe~(-/-)小鼠腹腔巨噬细胞与Vhlfl/fl/Apoe~(-/-)小鼠相比,Nlrp3、Il1b和Il6的mRNA表达水平升高更显著(P0.05)。结论低氧可以放大巨噬细胞中LPS诱导的IL-1β表达。     

胆红素对脂多糖引起的腹膜炎及腹腔免疫细胞功能的影响

目的探讨胆红素(bilirubin)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)引起的腹膜炎中腹腔炎性因子分泌,以及腹膜巨噬细胞和Raw264.7细胞功能的影响。方法构建LPS诱导的小鼠腹膜炎模型,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠腹腔灌洗液上清液中炎性因子(IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-6)的含量;分离培养小鼠腹膜巨噬细胞并进行分组处理,培养Raw264.7细胞进行分组处理。采用MTT法检测不同处理的腹膜巨噬细胞与Raw264.7细胞的活性;实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测不同处理的腹膜巨噬细胞与Raw264.7细胞中Nlrp3和IL-1βmRNA的表达情况;免疫印迹法(Western blot)检测不同处理的腹膜巨噬细胞中Nlrp3、IL-1β和caspase-1蛋白表达,Raw264.7细胞中Nlrp3、IL-1β、IκBα和p-p65蛋白表达,以及Raw264.7胞质与胞核中p50、p65和p-p65蛋白表达水平;免疫荧光染色检测p-p65蛋白在不同处理的Raw264.7细胞胞质与胞核中的表达情况。结果在LPS诱导的小鼠腹膜炎模型中,注射胆红素的小鼠腹腔灌洗液中IL-2、IL-4、IL-6和IFN-γ的含量明显降低。10μmol/L胆红素处理腹膜巨噬细胞后对细胞活性无影响;10μmol/L胆红素预处理可以显著抑制脂多糖诱导的腹膜巨噬细胞中Nlrp3、IL-1βmRNA和Nlrp3、IL-1β、caspase-1蛋白的表达。5μmol/L、10μmol/L胆红素处理Raw264.7细胞后对细胞活性无影响;胆红素呈剂量依赖性地抑制脂多糖诱导的Raw264.7细胞中Nlrp3、IL-1βmRNA和蛋白表达水平,并抑制IκBα蛋白表达降低与p-p65蛋白表达升高;10μmol/L胆红素预处理抑制了脂多糖诱导的Raw264.7细胞核中p50、p65和p-p65蛋白表达升高以及p-p65从细胞质向细胞核的转移。结论胆红素可抑制脂多糖引起小鼠腹膜炎中腹腔灌洗液中炎性因子的分泌,并抑制腹膜巨噬细胞和Raw264.7细胞中Nlrp3炎性体活化,该作用可能是通过抑制NF-κB通路激活实现的。     

Pg-LPS对兔单核/巨噬细胞炎症因子表达的影响

目的比较Pg-LPS对新西兰兔不同部位单核/巨噬细胞炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)表达的影响。方法分离新西兰兔不同部位(血液、肺、腹腔、肝脏)的单核/巨噬细胞(Mo、AM、PM、KC),将每一个部位的细胞分别用E.coli-LPS、Pg-LPS刺激。运用RT-PCR法检测各组Mo、AM、PM、KC中IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA的表达情况。结果各实验组的4个部位(Mo、AM、PM、KC)相比,IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA的表达均存在部位差异(P﹤0.05)。E.coli-LPS组和Pg-LPS组IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA的表达较对照组总体上均明显升高(P﹤0.05),并且E.coli-LPS组的升高作用强于Pg-LPS组(P﹤0.05)。结论不同部位的单核/巨噬细胞对Pg-LPS的刺激存在敏感性差异。Pg-LPS可以增强单核/巨噬细胞炎症因子基因的表达水平。     

IL-16通过促进巨噬细胞的M1型极化加重葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠炎症性肠病

目的研究白细胞介素16(IL-16)在炎症性肠病(IBD)发生发展过程中的作用并且明确其参与IBD发病的调控机制。方法采用7周龄野生型C57BL/6(WT)和IL-16敲除(IL-16~(-/-))雌性小鼠,分为WT对照组、WT葡聚糖硫酸钠(DSS)处理组、IL-16~(-/-)对照组和IL-16~(-/-)DSS处理组。DSS模型组给予含25 g/L DSS的饮水7 d,建立IBD模型,对照组小鼠给予正常饮水,建模期间记录小鼠体质量绘制体质量变化曲线。7 d后,解剖分离小鼠全结肠,反转录PCR检测结肠组织IL-16 mRNA水平,ELISA检测结肠组织IL-16蛋白水平,免疫荧光技术检测结肠组织IL-16的表达和定位。HE染色检测小鼠结肠病理损伤,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测结肠组织细胞凋亡,流式细胞术检测腹腔细胞中巨噬细胞的数量和极化情况(F4/80、CD86),免疫组织化学染色法检测结肠组织中巨噬细胞的分布,反转录PCR分别检测结肠组织IL-6、IL-12 mRNA水平,ELISA检测IL-6、IL-12蛋白水平。结果 DSS诱导后,结肠组织高表达IL-16。与WT DSS处理组相比,IL-16~(-/-)DSS处理组小鼠体质量变化较小,结肠组织损伤较轻,凋亡细胞显著减少,IL-16~(-/-)小鼠腹腔或结肠组织中巨噬细胞显著减少,巨噬细胞向M1亚型的极化水平明显减弱,其标志性炎性因子IL-6、IL-12的水平显著降低。结论 IL-16可通过促进巨噬细胞的M1型极化加重DSS诱导的炎症性肠病。     

白细胞介素10信号转导机制对C57BL/6和MRL/lpr~-小鼠腹腔巨噬细胞功能及活性影响的比较

目的：体外比较白细胞介素10（IL-10）信号转导机制对C57BL/6和MRL/lpr-小鼠腹腔巨噬细胞功能及活性的影响。方法：分别分离C57BL/6和MRL/lpr-小鼠腹腔巨噬细胞进行培养；用不同浓度IL-10（0.01、0.1、1和10ng/ml）进行刺激,用MTT法测定比较两种品系小鼠腹腔巨噬细胞的增殖反应能力；Real time PCR分别测定其产生前炎性细胞因子IL-1α、M-CSF、TNF-α的量；用100ng/mlIL-10分别刺激两种品系小鼠腹腔巨噬细胞10分钟,免疫印迹法比较两种细胞中JAK1、TYK2、STAT3及磷酸化水平。结果：C57BL/6小鼠巨噬细胞数及其产生的前炎性细胞因子量随IL-10刺激浓度的增加而递减；MRL/lpr-小鼠巨噬细胞数及其前炎性细胞因子IL-1α、M-CSF的量随IL-10刺激浓度的增加而递增,但巨噬细胞产生TNF-α的量随IL-10刺激浓度的增加而递减；MRL/lpr-小鼠细胞内信号转导分子的磷酸化水平低于C57BL/6。结论：MRL/lpr-小鼠的细胞免疫和炎症反应不能被IL-10抑制,可能是由于其信号转导过程中的缺陷所致。     

腹膜间皮细胞在小鼠子宫内膜细胞刺激腹腔微环境中作用

目的：探讨腹腔微环境受子宫内膜细胞刺激改变中腹膜间皮细胞的作用及其对子宫内膜异位症发病机制的意义。方法： 注射小鼠子宫内膜上皮和间质细胞入小鼠腹腔，酶联免疫吸附法（ELISA）检测注射后4、24和72 h时点腹腔冲洗液细胞因子MCP-1/JE、IL-1α和IL-6蛋白表达，同步逆转录-聚合酶链式反应技术 (Real-Time RT-PCR) 检测腹膜组织 (主要含腹膜间皮细胞) 和腹腔巨噬细胞的细胞因子MCP-1/JE、IL-1 α和IL-6 mRNA表达。结果: 子宫内膜细胞刺激腹腔细胞因子蛋白含量迅速一过性升高，4 h时点为表达高峰，腹膜细胞因子基因表达与腹腔液蛋白表达同步，腹腔巨噬细胞基因表达高峰滞后于腹腔液蛋白表达。子宫内膜上皮细胞刺激腹腔炎症反应作用强于间质细胞。结论: 子宫内膜细胞刺激腹腔发生非特异性炎症反应，腹膜间皮细胞可能是其细胞因子效应的主要来源，提示腹膜在子宫内膜异位症中除作为病灶依附体外，还可能在腹腔微环境无菌性炎症反应中起重要作用。     

慢性华支睾吸虫感染对脂多糖刺激巨噬细胞反应的影响

 目的：了解慢性华支睾吸虫（Cs）感染的免疫状态及其对巨噬细胞表型和炎症反应的影响。方法：选择Sprague-Dawley雄性大鼠,按随机数字表法分组进行2部分实验。(1) 经口华支睾吸虫虫卵灌胃感染70 d建立慢性Cs感染模型,分为正常对照组和慢性Cs感染组,每组10只,用酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清白细胞介素 4（IL-4)、IL-10、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和干扰素γ（IFN-γ）水平,腹腔灌洗获取巨噬细胞,流式细胞术检测腹腔巨噬细胞亚型;(2)腹腔灌洗获取巨噬细胞,按照腹腔巨噬细胞的来源,分为空白对照组、正常组和慢性Cs感染组,以脂多糖（LPS,10 μg/L）刺激孵育,用ELISA法动态监测LPS刺激后0、2、12和24 h细胞培养上清液的TNF-α和IL-10的变化。结果：(1) 慢性Cs感染组大鼠血清促炎因子TNF-α［(77.64±3.25) ng/L］和IFN-γ［(212.69±12.60)  ng/L］水平较正常组TNF-α［(55.13±3.25) ng/L］和IFN-γ［(108.15±10.49)  ng/L］升高（均P＜0.05）,而抗炎因子IL-4［(248.24±8.99) ng/L］和IL-10［(223.56±5.60) ng/L］水平较正常组血清IL-4［(52.40±3.97) ng/L］和IL-10［(60.18±5.36) ng/L］也显著升高（均P＜0.01）,并可使腹腔巨噬细胞向替代活化型（M2型）巨噬细胞分化;(2) 2组腹腔巨噬细胞培养上清液TNF-α水平在LPS刺激后2 h即开始上升,至24 h达到高峰,慢性Cs感染组巨噬细胞在LPS刺激后2、12和24 h上清液的TNF-α水平均显著低于正常大鼠组［2 h： （88.20±1.91） ng/L vs（123.45±2.98） ng/L;12 h：（123.66±4.31） ng/L vs（161.11±7.38） ng/L;24 h：（154.52±4.83） ng/L vs（227.85±10.67） ng/L,均P＜0.05］,而IL-10的水平较正常组升高［2 h：（105.46±12.28） ng/L vs（80.86±2.28） ng/L;12 h：（194.19±8.62） ng/L vs（117.56±8.02） ng/L;24 h：（280.02±11.31） ng/L vs（168.14±8.97） ng/L,均P＜0.05］。结论：慢性Cs感染时宿主血清的促炎因子升高,而抗炎因子升高得更明显,使巨噬细胞向M2型极化;体外实验表明慢性Cs感染宿主的巨噬细胞对LPS刺激产生耐受。     

脂多糖体内外诱导年轻和衰老小鼠腹腔巨噬细胞表达IL-6的差异研究

目的 探讨脂多糖(LPS)对年轻和老龄小鼠腹腔巨噬细胞体内外表达炎性细胞因子IL-6的影响.方法 年轻(2个月)和年老(18个月)小鼠分别腹腔注射LPS,对照组注射PBS,24h后处死小鼠,分离腹腔巨噬细胞,收集细胞,real time PCR检测IL-6的表达水平.未经LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞,体外用LPS处理2...