葡多酚对体外培养肝细胞PKC表达影响

目的体外观察葡多酚（GPC）对小鼠肝细胞蛋白激酶C（PKC）表达的影响。方法将正常小鼠肝细胞加入不同剂量GPC共同培养后，用免疫细胞化学法检测各组肝细胞PKC表达；四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法检测各组肝细胞的增殖活性。结果109mg／LGPC组肝细胞内PKC阳性表达率和细胞增殖活性分别为34．24％和0．654±0．062，经统计学X^2检验和t检验，与正常对照比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论葡多酚可促进小鼠肝细胞PKC表达。提高肝细胞增殖活性。     

葡多酚对小鼠乳腺癌细胞增殖活性抑制作用

目的研究葡多酚（GPC）对小鼠乳腺癌细胞增殖活性的抑制作用。方法将皮下接种乳腺癌（EMT6）细胞株的小鼠每日经口灌胃给予不同剂量的GPC，13d后取乳腺癌组织，用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法测各组小鼠乳腺癌细胞的增殖活性．免疫组化法检测各组增殖细胞核抗原（PCNA）和P53表达。结果肿瘤对照组PCNA和P53阳性表达率分别为72．78％和37．22％．高剂量GPC组则分别为28．32％和7．46％，差异有统计学意义（P〈0．05）。各组乳腺癌细胞的增殖活性随GPC剂量的增高而降低。结论葡多酚可有效抑制小鼠乳腺癌细胞增殖活性。     

葡多酚对人乳腺癌细胞增殖的抑制作用研究

目的研究葡多酚(GPC)对人乳腺癌(MCF-7)细胞增殖活性的影响及雌激素受体(ER)的调节作用。方法将GPC与MCF-7细胞共同培养,共设肿瘤细胞对照组、高、中、低(200、100、10μg/ml)剂量GPC组、ER阻断剂对照组(ICI10-6mol/L)和ER阻断剂(ICI10-6mol/L)+GPC(200μg/ml)6个组。用MTT法测定各组乳腺癌细胞的增殖活性水平,用免疫组化方法检测乳腺癌细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)和Bax蛋白的表达水平。结果与肿瘤细胞对照组比,高剂量GPC组乳腺癌细胞的增殖活性水平和PCNA阳性表达率降低,Bax蛋白阳性表达率升高(P<0.05);ER阻断剂+GPC组乳腺癌细胞的增殖活性水平、PCNA阳性表达率,均较高剂量GPC组升高,Bax蛋白阳性表达率降低,各项差别均有显著性意义(P<0.05)。结论GPC可有效抑制人乳腺癌细胞的增殖,并促进其凋亡;其作用与ER调节有密切关系。     

葡多酚对大鼠肝脏TNF-α与TGF-β_1mRNA异常表达的抑制作用

目的: 研究葡多酚(GPC)对N-亚硝基化合物引发的大鼠肝细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA与转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA异常表达的抑制作用。 方法:将大鼠随机分为正常对照组、阳性对照组和2个GPC实验组,每组10只,雌雄各半。后3组给口服50 mg/kg bw亚硝酸钠诱发突变,2个GPC实验组经口分别给予GPC100 mg/kg bw和10 mg/kg bw,喂养8 w,体内灌注固定肝组织,用原位杂交技术检测肝细胞TNF-αmRNA与TGF-β1 mRNA的表达水平。 结果: 阳性对照组TNF-αmRNA与TGF-β1 mRNA表达的阳性细胞率分别为30.23%和19.47 %,高剂量GPC组则为11.94 %和6.96 %,低剂量GPC组分别为18.16%和14.03%,与阳性对照组之间的差别均有显著性意义(P<0.05)。结论: 葡多酚对N-亚硝基化合物引发的大鼠肝细胞TNF-αmRNA与TGF-β1 mRNA的异常表达均有抑制作用。     

葡多酚对小鼠肝细胞体内外增殖活性的影响

目的观察葡多酚(GPC)对正常肝细胞及受乙醇损伤的肝细胞增殖活性的影响.方法将小鼠正常肝细胞和乙醇引发损伤的肝细胞加入GPC培养,用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法测定各组肝细胞增殖活性.将GPC经口给予正常小鼠和乙醇引发急性肝损伤的小鼠,取肝脏匀浆后培养3和16 h,用前述方法测定肝细胞增殖活性.结果体外实验的正常对照组和乙醇对照组细胞增殖活性分别为0.438±0.040和0.365±0.024;50mg/L GPC保护组和50 mg/L GPC对照组则为0.541±0.026和0.603±0.060.体内实验的150 mg/L GPC保护组细胞增殖率较乙醇对照组升高0.095;150mg/LGPC对照组则较正常对照组升高0.030.各组之间的差异均有统计学意义(P＜0.05).结论GPC能抑制乙醇对肝细胞增殖活性的损伤,并对正常肝细胞增殖活性有一定促进作用.     

葡多酚对大鼠肝PARP mRNA异常表达的抑制

目的　研究葡多酚 (GPC)对N -亚硝基化合物引发的大鼠肝细胞聚腺苷二磷酸核糖聚合酶〔(poly(ADP-ribose)polymerase,PARP)〕mRNA表达的影响作用。 方法　采用 0 5%的亚硝酸钠经口灌胃诱发大鼠肝脏突变 ,2个GPC实验组同时经口分别给予GPC 10 0和 10mg/kg ,8周后体内灌注固定肝组织 ,用原位杂交技术检测肝细胞PARPmRNA的表达水平 ,用图像分析仪对其表达水平进行定量分析。结果　诱变损伤组PARPmRNA表达的阳性细胞率和吸光度分别为 3 0 12 %和 0 3 543± 0 0 419,高剂量GPC组则分别为 11 48%和 0 2 687± 0 0 172 ,两组之间均有显著性差异 (P <0 0 1)。结论　葡多酚可抑制N -亚硝基化合物引发的大鼠肝细胞PARPmRNA的异常表达     

葡萄原花青素对乙醇诱发小鼠肝细胞Caspase-3和Bax蛋白异常表达的影响

目的研究葡萄原花青素(GPC)对乙醇诱发小鼠肝细胞Caspase-3和Bax蛋白异常表达的影响。方法将小鼠随机分为正常对照组、乙醇对照组和各剂量GPC组,除正常对照组外,每组小鼠均每天经口灌胃乙醇4g/kg,低、中、高剂量GPC组同时分别给予GPC 50、100和200mg/kg,连续4周。取肝组织用MTT法检测各组小鼠的肝细胞增殖活性,用免疫组织化学法检测肝细胞Caspase-3和Bax蛋白的表达水平。结果高剂量GPC组Caspase-3和Bax蛋白阳性表达率分别为19.08%和14.06%,乙醇对照组则为51.78%和58.08%,差异有显著性(P<0.05)。高、中剂量GPC组细胞增殖活性高于乙醇对照组(P<0.05)。结论 GPC可抑制乙醇诱发的肝细胞Caspase-3和Bax蛋白异常表达,对乙醇性肝损伤具有防护作用。     

葡多酚对N-亚硝基化合物诱发的肝细胞SSTR-2 mRNA表达的抑制

目的　研究葡多酚 (GPC)对N 亚硝基化合物诱发的大鼠肝细胞生长抑素受体 - 2mRNA(SSTR 2mRNA)表达的影响作用。方法　将大鼠经口灌胃 0 5 %的亚硝酸钠诱发肝细胞突变 ,2个GPC实验组同时经口给予GPC 1 0 0mg kg和 1 0mg kg,用原位杂交技术检测肝细胞SSTR 2mRNA的表达水平。结果　诱变损伤组和高GPC组SSTR 2mRNA表达的阳性细胞率分别为 1 9 89%和 7 83% ,两组之间的差别有显著性意义 (P<0 0 5 )。结论　葡多酚对N 亚硝基化合物诱发的大鼠肝细胞SSTR 2mRNA异常表达有抑制作用     

萘乙酸对睾丸细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨萘乙酸(NAA)对小鼠睾丸细胞增殖与凋亡的影响。方法将25只健康雄性昆明种小鼠随机分为5组,每组5只。正常对照组和阳性对照组小鼠喂饲普通颗粒饲料,高、中、低剂量组的饲料中加入萘乙酸的剂量分别为5000、1000、200mg/kg,喂养4周处死小鼠,阳性对照组于处死前3天每天腹腔注射环磷酰胺20mg/kg。取睾丸组织,用MTT法测定各组睾丸细胞增殖活性,用免疫组织化学方法检测各组增殖细胞核抗原(PCNA)和半胱天冬酶(Caspase-3)表达。结果高剂量组和正常对照组的睾丸细胞增殖活性分别为(0.501±0.069)和(0.875±0.082),差别有显著性(P<0.05)。高剂量NAA组PCNA和Caspase-3阳性表达率分别为8.9%和41.3%,正常对照组分别为34.9%和9.1%,差异均有显著性(P<0.05)。结论萘乙酸有一定抑制睾丸细胞增殖活性、诱发睾丸细胞凋亡的作用。     

葡多酚对辐射引发胰腺细胞凋亡的抑制作用

目的　探讨葡多酚 (GPC)对辐射引发的细胞凋亡与增殖活性损伤的防护作用。方法　给口服不同剂量GPC的小鼠用 60 Co γ射线进行 1次全身性照射 ,照射后第 2天处死动物 ,取胰腺组织分别检测bcl 2和bax表达水平、细胞增殖活性及凋亡率等指标。结果　高剂量GPC组动物的细胞增殖率为 3.16 %± 0 .13% ,bcl 2表达水平为 4 9.8% ,均较辐射对照组 (分别为 0 .6 4 %± 0 .11%、2 9 .7% )高 ;而细胞凋亡率和bax表达水平则为 19.8%和 5 5 .0 % ,均低于辐射对照组 (35 .6 %、85 .7% )。各组间差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　GPC可抑制60 Co γ射线诱发的小鼠胰腺细胞凋亡及相关基因的异常表达 ,对辐射损伤有一定防护作用。     

葡多酚对肝细胞内Ca~(2+)浓度和增殖活性的影响

目的探讨葡多酚(GPC)对正常肝细胞和受乙醇损伤肝细胞内Ca2+浓度与细胞增殖活性的影响。方法将大鼠正常肝细胞和乙醇损伤肝细胞加入不同剂量GPC共同培养,用Fura-2荧光测定肝细胞内Ca2+浓度,用MTT法测定细胞增殖活性。结果①正常对照组和乙醇对照组的Ca2+浓度分别为(108·26±14·17)和(651·24±47·95)nmol/L,二者差异有显著性意义(P<0·05);中、高剂量GPC组均较乙醇对照组显著性降低(P<0·05)。②加入GPC的正常肝细胞内Ca2+浓度依次为:细胞外液含Ca2+组>外液无Ca2+组>正常对照组。③正常肝细胞和乙醇损伤肝细胞的中、高剂量GPC组细胞增殖活性均较正常对照组和乙醇对照组显著性升高(P<0·05)。结论GPC可通过增加细胞外液Ca2+内流和胞内Ca2+库的释放两种途径升高正常肝细胞内Ca2+浓度,提高细胞增殖活性,并可抑制乙醇引发的肝细胞内Ca2+浓度异常升高(超载)和细胞增殖活性损伤。     

蛋白激酶C信号通路对温石棉介导的肺成纤维细胞细胞周期调控蛋白表达的影响

目的 研究细胞周期调控蛋白在温石棉所致成纤维细胞（HEPF）增殖中的表达和蛋白激酶C（PKC）对细胞周期调控蛋白的影响。方法 利用体外细胞培养技术,用流式细胞仪测定温石棉介导的HEPF的细胞周期调控蛋白的表达,同时设立阳性对照（标准SiO2)、阳性对照（标准TiO2)、正常对照（未经粉尘处理的免肺泡巨噬细胞）和空白对照。结果 温石棉细胞周期蛋白（cyclin)Cyclin D1、CyclinE、增殖细胞核抗原（PCNA）和CyclinA表达阳性率分别为19．0％、22．8％、79．7％和65．1％,均较各对照组低,差异有显著性（P＜0．05）,且CyclinD1和CyclinE表达阳性率低于PCNA和CyclinA,差异有显著性（P＜0．01)而 CyclinB1和p34cdc2激酶的阳性表达率较空白对照和正常对照略高。当PKC信号通路被阻断后,PCNA在温石棉组表达的阳性率明显降低,差异有显著性（P＜0．05）,p34cdc2激酶的阳性表达率改变不明显。结论 这几种蛋白可能均参与了温石棉所致HEPF增殖,其中PCNA表达的改变可能与上游PKC信号通路有关。     

蛋白激酶抑制剂对青石棉诱导肺成纤维细胞的细胞周期调控蛋白表达的影响

目的 探讨青石棉致人胚肺成纤维细胞（ＨＥＰＦ）增殖的细胞周期变化的机制。方法 用流式细胞技术检测青石棉诱导ＨＥＰＦ的细胞周期调控蛋白表达的改变,观察酷氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）和蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）的抑制剂对其表达的影响。结果 青石棉可诱导ＨＥＰＦ的Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１、Ｃｙｃｌｉｎ Ｅ、ＰＣＮＡ、Ｃｙｃｌｉｎ Ａ、Ｃｙｃｌｉｎ Ｂ１和Ｐ３４ｃｄｃ２激酶等蛋白的阳性表达率发生改变。在青石棉组,ＰＫＣ抑制剂使表达的阳性率较未加入ＰＫＣ抑制剂组明显降低,对Ｐ３４ｃｄｃ２激酶影响不大（Ｐ〉０．０５）;而ＴＰＫ抑制剂使ＰＣＮＡ表达的阳性率增高;Ｐ３４ｃｄｃ２激酶表达的阳性率降低（Ｐ〈０．０１）。结论 这几种蛋白可能均了青石棉致ＨＥＰＦ增殖,ＰＣＮＡ（和Ｐ３４ｃｄｃ２激酶）表达的改变可能与上游的ＰＫＣ（和ＴＰＫ）信号通路有关。     

葡多酚对核接触人员辐射损伤的防护作用研究

目的 研究葡多酚对核接触人员辐射损伤的防护作用.方法 选取某单位从事核作业的核接触人员60人,数字表法随机分为对照组和实验组,每组30人,另选15名非核接触人员作为正常对照组.实验组服用葡多酚制剂,每天1粒(含葡多酚100 mg/粒),对照组同样的方法服用淀粉安慰剂,连续60 d.于实验前后各抽取空腹静脉血1次,检测白细胞计数、淋巴细胞转化率、血清总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)、细胞增殖活性、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2、Bax等指标.结果 实验后实验组的白细胞计数、T-AOC和淋巴细胞增殖活性分别为(5.62±0.40)×109个/L、(17.07±1.91)U/ml和0.87±0.09,均较对照组增高,差异有统计学意义.MDA和Bax分别为(4.12±0.37)nmoL/L和28.06%±5.79%,均较对照组降低,差异有统计学意义.结论 葡多酚对核接触人员的细胞增殖活性降低和脂质过氧化等损伤,有一定的防护作用.     

染锰鼠睾丸增殖细胞核抗原与热休克蛋白表达

目的研究锰对小鼠精子数量与睾丸增殖细胞核抗原(PCNA)和热休克蛋白70(HSP70)表达的影响。方法将小鼠随机分为3个不同剂量MnCl2(7.5,15,30 mg/kg)组和对照组,分别于染锰,3,7,14,28,56 d计数精子数量,用免疫组化S-P法结合图象分析技术测定睾丸PCNA和HSP70表达。结果随染锰剂量增加和时间延长精子数量减少、睾丸PCNA表达降低。3个不同剂量MnCl2组精子计数于染锰28 d明显低于对照组(P<0.05,P<0.01,P<0.01),睾丸PCNA表达于染锰14,28,56 d比对照组明显降低(P<0.05,P<0.01,P<0.01),直线相关分析各染锰组小鼠精子数量与睾丸PCNA表达呈正相关(r=0.794,P<0.01)。睾丸HSP70表达,15,30 mg/kg组染锰56 d明显低于染锰28 d(P<0.01)。结论锰对小鼠生精功能的损伤呈一定的剂量-效应和时间-效应关系。各染锰组小鼠精子数量与睾丸PCNA表达呈正相关(r=0.794,P<0.01)。锰可诱导小鼠睾丸HSP70表达,染锰28 d达高峰。     

Study on protective effect of grape procyanidins in radiation injury in radiation-contacted persons

OBJECTIVE: To study the protective effect of Grape procyanidins (GPC) on radiation injury in radiation-contacted persons. METHODS: Sixty radiation-contacted persons were randomly divided into the experimental group and the control group and 15 radiation-uncontacted persons were selected as the normal group. The experimental group was given GPC (100 mg/day), while the control group was given the capsule of starch every day for 60 days. Vein blood samples were taken before and after the study and the total antioxidative capacity (T-AOC), Malondialdehyde (MDA), cell proliferation, expression levels of proliferative cell nuclear antigen (PCNA), Bcl-2 and Bax protein, WBC were measured. RESULTS: The WBC, T-AOC and cell proliferation rate of the experimental group were (5.62 +/- 0.40) 10(9)/L, (17.07 +/- 1.91) U/ml and 0.87 +/- 0.09 respectively, which were significantly higher than those of the control group. The MDA and Bax expression levels were (4.12 +/- 0.37) nmol/L and 28.06% +/- 5.79% respectively that were significantly lower than those of the control group. CONCLUSION: GPC should have protective effects on radiation injury of the radiation-contacted persons.