肝胆舒康胶囊对免疫性肝纤维化大鼠血清HYP、肝组织HYP及胶原含量影响的研究

肝胆舒康胶囊对大鼠免疫性肝纤维化动物模型肝功能具有改善和增强作用,我们进一步探讨该药抗肝纤维化的作用,观察对血清羟脯氨酸(HYP)、肝组织羟脯氨酸(HYP)及肝组织胶原含量的影响,现将实验结果报告如下。1　材料1.1　药品　肝胆舒康胶囊:郑州豫新制药股份有限公司生产,批号:980110。秋水仙碱:匈牙利LaboratorgesHoade公司(上海分装),批号:970114。人血清白蛋白:西班牙,批号:9611-9911。羊毛脂:上海嘉定华亭羊毛脂厂,批号:9709117。液体石蜡:郑州化学试剂三厂,批号:970317。1.2　动物　Wistar大鼠,体重130g～150g,雌雄各半,河南省中医…     

抗纤益肺胶囊对肺纤维化大鼠肺组织病理变化及纤维4项的影响

目的:观察抗纤益肺胶囊对博莱霉素致大鼠肺纤维化的病理学影响。方法:选用60只健康Wistar大鼠,随机分为6组:正常组、模型组、阳性对照组、抗纤益肺胶囊高剂量组、抗纤益肺胶囊中剂量组、抗纤益肺胶囊低剂量组,每组各10只。正常组一次性气管滴注等量生理盐水,其余各组均采用经气管滴注博来霉素溶液建立肺纤维化大鼠模型。在造模48 h后,各组分别予生理盐水、生理盐水、强的松混悬液、抗纤益肺胶囊高、中、低剂量药,每日1次,共28天。光镜下观察大鼠肺组织病理形态学变化,并测定肺组织羟脯氨酸(HYP),以及纤维4项,即III型胶原(PCⅢ)、IV型胶原(Ⅳ-C)、层粘连蛋白(LN)和透明质酸(HA)的含量。结果:与正常组比较,模型组、阳性对照组HYP明显升高,有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,抗纤益肺胶囊低、中、高剂量组HYP均有明显降低,有统计学意义(P<0.05);PCⅢ、IV-C、LN、HA均明显降低,有统计学意义(P<0.05)。与阳性对照组比较,高剂量组HYP有明显降低,有统计学意义(P<0.05);抗纤益肺胶囊高、中、低剂量组血清层粘连蛋白和透明质酸酶有所降低,但没有统计学意义(P>0.05)。结论:抗纤益肺胶囊抗肺纤维化作用的机制之一,可能是抑制肺组织中纤维4项的表达,以及抑制胶原蛋白合成。     

鳖甲煎丸对肺纤维化大鼠肺组织中TGF-β1表达的影响

目的:观察鳖甲煎丸抗博莱霉素所诱导的大鼠肺纤维化的作用机制.方法:SD大鼠60只,随机分为生理盐水对照组、模型对照组、醋酸泼尼松组、中药中剂量组、中药高剂量组.采用博莱霉素气管内注入法,制备肺纤维化模型,于实验第28天留取标本,用免疫组化技术检测TGF-β1在肺组织中的表达.结果:鳖甲煎丸中、高剂量组大鼠TGF-β1表...     

甲乙煎对肝纤维化大鼠肝组织MMP2及TGFβ1表达的影响

目的:观察中药甲乙煎对实验性肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶-2(MMP2)及转化生长因子1(TGFβ1)的影响。方法:雄性清洁级Wister大鼠60只,随机分为正常对照组和肝纤维化模型组,运用DMN(二甲基亚硝胺)对模型组大鼠诱导肝纤维化,四周后将模型组大鼠随机分为模型对照组、甲乙煎高浓度组和低浓度组。对甲乙煎高浓度组和低浓度组给与中药甲乙煎灌胃,共治疗四周,处死全部大鼠。对肝组织进行HE染色观察,并采用免疫组化法检测大鼠肝组织MMP2和TGFβ1的表达。结果:经中药甲乙煎高、低浓度治疗后,大鼠肝组织TGFβ1的表达较模型对照组明显降低(P<0.05),甲乙煎高浓度组较低浓度组TGFβ1的表达亦明显降低(P<0.05),而甲乙煎高、低浓度组MMP2的表达较模型对照组无明显差异(P>0.05)。结论:甲乙煎能下调实验性肝纤维化大鼠肝组织TGFβ1的表达,这是其抗肝纤维化的作用机理之一。     

平敏煎对慢性荨麻疹模型大鼠的影响

目的:通过平敏煎对慢性荨麻疹动物模型的实验观察,研究其治疗慢性荨麻疹的作用机制。方法:将实验动物随机分为正常组、模型组、平敏煎低、中、高剂量组、氯雷他定组,每组10只。造模后,正常组与模型组给予等体积的生理盐水,平敏煎组分别按10、5、2.5g/kg对应高、中、低剂量灌胃给予平敏煎提取浓缩液,氯雷他定组给予10mg/kg氯雷他定生理盐水溶液。首次致敏13d后,颈静脉取血,收集血液,采用双抗夹心ELISA法测试血清中IgE含量,采用放射免疫分析法测定SP、IFN-γ、IL-4含量,采用荧光分光光度法测定5-HT含量。结果:平敏煎可减少肥大细胞脱颗粒(P<0.01),延长发敏时间,降低死亡率,可增加大鼠血清IFN-γ、5-HT含量,降低SP、IgE、IL-4含量(P<0.01),差异均有显著性(P<0.05)。结论:提示平敏煎治疗慢性荨麻疹的作用机制, 可能是与提高IFN-γ、5-HT含量以及降低SP、IgE、IL-4含量有关。     

化纤方对肺纤维化模型大鼠肺组织匀浆中GSH-PX SOD活性及MDA含量的影响

目的：观察化纤方对肺纤维化模型大鼠肺组织匀浆中超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroidase,GSH-PX）的活性及丙二醛（Maleic Dialdehyde,MDA）含量的影响,探讨化纤汤在大鼠肺纤维化过程中,对肺组织的保护作用的机理。方法：144只清洁级SD雄性大鼠,体重180-220g,随机分成正常对照组（A组）、博来霉素模型组（B组）、强的松干预组（C组）、化纤方大（D组）、中（E组）、小（F组）剂量干预组.每组各24只,除A组外,其余各组采用博来霉素复制大鼠肺纤维化模型,造模第2天起,D、E、F组每天分别用化纤方（浓度依次为2、1、0.5g/mL）灌胃,C组用醋酸强的松混悬液灌胃,A、B组用生理盐水灌胃,每组分别于7、14、28天随机处死8只大鼠,采集肺组织,制作匀浆,检测各组肺组织匀浆中SOD、GSH-PX的活性及MDA含量的变化.结果：化纤汤能提高肺组织匀浆中的GSH-PX和SOD活性,降低MDA的含量。结论：化纤方对肺纤维化大鼠的作用机制,可能是通过调节其体内自由基水平,减轻自由基对肺组织结构的氧化损伤,而且化纤汤大剂量组的作用优于中小剂量组,呈一定的量效关系。     

肺络通合剂对肺纤维化大鼠肺组织病理形态学 和纤维连接蛋白含量的影响

目的:探讨肺络通合剂对肺纤维化大鼠肺组织病理形态学的影响。方法:选择Wistar大白鼠,气管内注入博莱霉素建立肺纤维化模型。随机分为正常对照组、模型组、中药高、低剂量组和强的松组。除正常对照组外,其余4组均制成肺纤维化动物模型,模型组用生理盐水ig,中药高、低剂量组用肺络通合剂(相当于生药18,9 g.kg-1)ig。强的松组用强的松(2.04mg.kg-1)ig。各组于用药后28,56 d各随机处死一半大鼠取材送检,观察肺泡炎症病理变化,肺纤维化病理变化和纤维连接蛋白(FN)含量。结果:模型组大量胶原纤维增生,呈重度肺纤维化改变,平均病理积分(56 d,下同)为2.50±0.71;肺络通合剂高剂量组呈轻度肺纤维化(1.00±0.82);低剂量组(1.50±0.85)病变程度较中药高剂量组略重,强的松组(1.80±0.92)病变程度较模型组轻,但较中药高剂量组为重;FN含量平均A值(28 d)肺络通高剂量组(49.55±6.57)明显低于模型组(272.11±40.12),且作用优于强的松组(73.25±11.11)。结论:肺络通合剂能有效抑制博莱霉素引起的肺纤维化形成。     

丹鸡芪甲煎对实验性肝损伤肝纤维化大鼠血清HA、LN的影响

目的：探讨中药丹鸡芪甲煎对实验性肝损伤肝纤维化大鼠血清HA、LN的影响。方法：实验分为中药组、模型组和正常对照组，采用生化、放免、病理学方法，检测肝功能、血清HA、LN水平，并观察肝组织病理形态变化。结果：中药组ALT、AST活性、HA、LN的血清含量明显低于模型组，病理变化减轻。结论：中药丹鸡芪甲煎在保护肝细胞抑制肝纤维化方面有一定作用。     

虎杖对肺纤维化大鼠肺组织中TGF-β1表达的影响

目的：观察博莱霉素致肺纤维化大鼠中转化生长因子（TGF-β1）的表达及虎杖对其影响。方法：SD大鼠120只,随机分成正常对照组、模型组、虎杖预防组各30只,7d治疗组20只和28d治疗组10只。除正常对照组给予生理盐水外,其余各组均予气管内注射博来霉素诱导肺纤维化。虎杖预防组、7d治疗组和28d治疗组胃饲受试药物4g.kg-1.d-1,其余两组则予生理盐水灌胃。用RT-PCR和免疫组化观察各组大鼠肺组织TGF-β1mRNA和TGF-β1蛋白的表达。结果：与模型组比较,虎杖预防组和7d治疗组羟脯氨酸含量下降明显（P〈0.05或P〈0.01）,TGF-β1mRNA和TGF-β1蛋白表达较模型组减弱（P〈0.05或P〈0.01）。结论：虎杖抑制肺组织中TGF-β1的表达,可能是虎杖抑制肺纤维化的作用机制之一。     

针刺预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠血清中LDH含量的影响

目的：通过观察针刺预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠血清中LDH含量的影响，探讨针刺预处理对心肌的保护机制。方法：先对大鼠“内关”、“膻中”穴进行针刺预处理，然后用“推管法”制作心肌缺血再灌注损伤大鼠动物模型，检测大鼠血清中LDH含量变化情况。结果：针刺“内关”、“膻中”穴可明显提高心肌缺血再灌注损伤模型大鼠血液中LDH含量。与缺血再灌注模型组（IR组）比较差异显著（P〈0．05），与缺血预处理组（IP组）无显著差异（P〉0．05）。结论：针刺预处理可以诱导心肌缺血耐受，减轻心肌缺血再灌注对心肌造成的损伤，从而使心肌得到保护作用。     

补阳还五汤对博来霉素诱导大鼠肺间质纤维化过程中羟脯氨酸含量的影响

目的:动态观察补阳还五汤(Byhut)对博来霉素A5(BLMA5)所致肺纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数、分类计数及肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量的影响,探讨补阳还五汤防治肺纤维化的机制.方法:将78只SD大鼠一次性气管内注入BLM制备肺纤维化模型,随机分为:模型组(n=18)、强的松组(n=18)、By-hutⅠ组(n=18)及ByhutⅡ组(n=18),在实验的第7 d、14d、28 d分批处死大鼠进行支气管肺泡灌洗并收集灌洗液,另取6只为正常对照组,于实验的第28天一次性处死记数细胞总教及分类计数,采用刘氏等方法测定肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量,并计算肺组织胶原纤维蛋白含量.结果:造模后第7天,HYP含量5组差异无统计学意义(P＞0.05);造模后第14天,模型对照组HYP含量显著高于对照组(P＜0.05),其余各组与正常对照组相比无统计学意义(P＞0.05);造模后第28天,模型对照组HYP含量显著高于正常对照组、补Ⅰ、补Ⅱ组(P分别小于0.01,0.05和0.05),强的松组HYP含量高于正常对照组(P＜0.05).结论:补阳还五汤(Byhut)对博来霉素A5(BLMA5)所致肺纤维化有一定的防治作用.     

壮肝逐瘀煎对肝纤维化大鼠肝Smads表达的影响

目的:研究壮肝逐瘀煎对肝纤维化(HF)大鼠Smad3,Smad4,Smad7表达的影响,探讨其抗HF的作用机制。方法:采用CCl4复合因素法建立Wistar大鼠肝纤维化模型。对肝纤维化大鼠予壮肝逐瘀煎灌胃治疗,并予秋水仙碱及大黄虫丸为对照。12周后获取肝组织,苏木精-伊红染色观察肝纤维化的程度;免疫组织化学染色、图像分析方法对Smad3,Smad4,Smad7的组织分布进行半定量分析。结果:与病理模型组大鼠相比,壮肝逐瘀煎治疗组肝小叶结构趋于正常,纤维间隔明显变薄,肝组织Smad3、Smad4表达显著减少(均P<0.01),Smad7表达显著增加(P<0.01)。结论:壮肝逐瘀煎能够显著改善肝纤维化大鼠肝组织的病理变化,具有明显的抗肝纤维化作用,其作用机制可能与壮肝逐瘀煎调控Smad3,Smad4,Smad7的表达有关。     

敦煌灸法对RA模型大鼠血清炎症因子和MMPs的影响

目的：通过敦煌灸疗选穴组悬钟、风市穴和常规艾灸选穴组足三里、肾俞，验证敦煌灸法疗效并探讨其作用机制。方法：将40只SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、西药组、常规灸组和敦煌灸组。除空白组外，其余各组大鼠制备风寒湿型类风湿关节炎（RA）模型。造模成功后，西药组给予1 mg/kg甲氨蝶呤腹腔注射；常规灸组在大鼠后三里（双）、肾俞（双）艾灸；敦煌灸组在悬钟（双）、风市（双）艾灸。于造模前、实验第21、31天测量大鼠足趾厚度并记录。第21、31天对各组大鼠进行关节炎指数（AI）评分。治疗结束后，用ELISA法检测大鼠血清中IL－2、TNF－α、IL－4、IL－10、MMP－3和MMP－9的含量。每组大鼠取左后足踝关节滑膜，HE染色，200倍镜下观察组织病理学变化。结果：实验第21、31天，与空白组比较，模型组大鼠足趾厚度、AI评分升高（P < 0. 01）；第31天，与模型组比较，西药组、常规灸组、敦煌灸组大鼠足趾厚度、AI评分降低（P < 0. 01），与常规灸组比较，敦煌灸组大鼠足趾厚度、AI评分降低（P < 0. 05）。实验第31天，与空白组比较，模型组血清IL－2、TNF－α含量升高（P < 0. 01），IL－4、IL－10含量下降（P < 0. 01），血清MMP－3、MMP－9含量明显增多（P < 0. 01）；与模型组比较，西药组、常规灸组、敦煌灸组大鼠血清 IL－2、TNF－α 含量均下降（P < 0. 01，P < 0. 05），IL－4、IL－10 含量均上升（P < 0. 01，P < 0. 05），MMP－3、MMP－9含量均明显减少（P < 0. 01）；与常规灸组比较，敦煌灸组大鼠血清IL－2、TNF－α含量降低（P < 0. 05），IL－4、IL－10含量升高（P < 0. 05），MMP－3、MMP－9含量均下降（P < 0. 05）。结论：敦煌灸疗可明显降低RA大鼠AI评分，降低大鼠足趾肿胀度，减少大鼠滑膜组织增生、炎性浸润，减轻滑膜细胞水肿，减少血管增生。其机制与敦煌灸疗能降低血清IL－2、TNF－α含量，增加IL－4、IL－10含量，抑制MMP－3、MMP－9表达水平，动态调节炎症平衡，缓解关节炎症，减少软骨破坏有关。敦煌灸治疗效果优于常规灸组，提示在RA早期从“少阳主骨”出发选穴治疗更优。     

加味鳖甲煎丸对肝纤维化大鼠血清IgG的影响

目的:观察加味鳖甲煎丸(JWBJ)对肝纤维化大鼠模型血清IgG的影响。方法:用人血清白蛋白和CCl4的方法[1]分别制作大鼠肝纤维化模型,在成模前预防治疗和成模后治疗,用免疫扩散法测定大鼠血清IgG含量。结果:JWBJ预防治疗大,中剂量组及治疗大剂量组与各自的模型组相比均可使白蛋白所致肝纤维化大鼠血清IgG含量明显降低(P&lt;0.05);JWBJ预防治疗大剂量组与模型组相比可使CCl4所致肝纤维化大鼠血清IgG含量明显降低(P&lt;0.05)。结论:JWBJ可降低人血清白蛋白和CCl4所致肝纤维化大鼠过度产生的IgG,表明JWBJ对机体免疫功能有一定的调节作用,对肝纤维化的治疗有一定的参考意义。     

虎芪活血煎对肺纤维化大鼠肺组织HYP含量及TGF-β1mRNA表达的影响

目的:观察中药虎芪活血煎对大鼠肺纤维化的干预作用,探讨其可能的作用机制。方法:通过气管内注射博莱霉素A5(BLMA5)5mg.kg-1复制大鼠肺纤维化模型,给予小、中、大剂量(分别为10g.kg-1.d-1、20g.kg-1.d-1和40g.kg-1.d-1)的虎芪活血煎干预后,用紫外分光光度计测定肺组织羟脯氨酸(HYP)含量,并用原位杂交法(ISH)检测肺组织转化生长因子-β1mRNA(TGF-β1 mRNA)表达水平。结果:虎芪活血煎中、大剂量组肺组织HYP含量及TGF-β1 mRNA表达均显著低于模型对照组(P<0.05或P<0.01)。结论:中、大剂量的虎芪活血煎能降低肺纤维化大鼠HYP含量、抑制TGF-β1 mRNA表达,减轻肺纤维化程度,对博莱霉素A5诱导的大鼠肺纤维化有良好的干预作用。其机制之一是通过抑制TGF-β1 mRNA的表达,减少胶原沉积,使纤维化病变减轻。     

沙参麦冬汤对肺间质纤维化大鼠氧自由基损伤及细胞外基质代谢的影响

目的:观察沙参麦冬汤(SM)对肺间质纤维化(PF)模型大鼠的影响。方法:大鼠气管内注射平阳霉素复制PF模型后分为模型对照组、SM组、醋酸泼尼松片(PA)对照组,设空白对照组。连续灌胃28d。检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、层黏连蛋白(LN)及透明质酸(HA)含量的动态变化。结果:与空白对照组相比,模型对照组动物同期血清SOD活性降低,而MDA、LN、HA升高,并有显著性差异(P<0.05);与模型对照组比较,SM组动物血清MDA、LN、HA含量均不同程度减少,而血清SOD活性增加(P<0.05)。结论:沙参麦冬汤对PF模型动物的氧自由基损伤有不同程度的干预作用,并能降低其血清LN、HA含量,改善ECM代谢。     

红芪黄酮对肺间质纤维化模型大鼠微血管密度的影响

目的观察红芪黄酮对肺间质纤维化模型大鼠微血管密度(MVD)的影响,为其开发提供实验依据。方法 SPF级Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、强的松组和红芪黄酮高、中、低剂量组,采用博莱霉素气管滴入方法建立肺纤维化模型,自造模后第2日,各治疗组分别给予相应剂量药物,按时间点连续灌胃治疗14 d和28 d,采用免疫组化法观察肺组织MVD。结果模型组大鼠14 d肺组织内可见新生微血管显著增多,28 d有所减少。与空白组比较,模型组14、28 d MVD显著升高(P0.01)。与模型组比较,红芪黄酮高剂量组14、28 d MVD明显降低(P0.05)。红芪黄酮中剂量组表达介于高剂量组与低剂量组之间,红芪黄酮低剂量组表达与模型组相近。结论红芪黄酮具有抑制肺纤维化大鼠微血管新生的作用,其作用与剂量相关。     

理肺化纤方对肺纤维化大鼠的防治作用和对肺功能及血清、组织羟脯氨酸含量的影响

目的:以经方升降散为基础,加味组成理肺化纤方,研究理肺化纤方对肺纤维化的防治作用以及对肺纤维化大鼠肺功能及血清和组织羟脯氨酸含量的影响。方法:Wistar大鼠100只,体重(200±20)g,雌雄各半,随机分为5组,每组20只。模型组与各治疗组实验大鼠气管内注入博莱霉素A5复制肺纤维化模型,正常对照组和模型组给等容积生理盐水ig、理肺化纤方治疗组给药剂量为4.41 g.kg-1.d-1、强的松对照组给药剂量为1.05 mg.kg-1.d-1、强的松合理肺化纤方治疗组给等量的强的松和理肺化纤方水煎液ig,实验分两批,分别于7,28 d末次给药后,采用Anires2005动物肺功能分析系统测试肺功能和样本碱水解法检测实验大鼠的血清和组织羟脯氨酸(Hyp)的含量。结果:肺组织病理学方法观察苏木精-伊红及Masson染色切片,观察显示造模成功,检测实验大鼠的肺功能用力肺活量(FVC)、最大呼出量(PEF)和第0.25 s用力呼出容积占用力肺活量百分比(FEV 0.25/FVC%)、最大通气量(MVV)等指标表明各治疗组与模型组对比肺功能和血清及组织Hyp含量均有显著改善,以中西药结合组效果更为明显。结论:理肺化纤方能明显改善肺纤维化大鼠的肺功能和降低血清及组织Hyp含量,尤其在加用激素强的松治疗时能明显减轻肺纤维化大鼠的肺纤维化程度。     

鳖甲煎丸对肺纤维化模型大鼠外周血CTGF表达的影响

目的：探讨鳖甲煎丸对肺纤维化模型大鼠外周血结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响。方法：SD大鼠50只随机分为生理盐水对照组、模型对照组、醋酸泼尼松组、鳖甲煎丸中剂量组、鳖甲煎丸高剂量组,采用博莱霉素气管内注入制备肺纤维化模型,造模后各组分别用生理盐水、西药、中药灌胃,第3、14、28天乙醚麻醉后毛细玻管眼眶静脉丛采血,ELISA法检测CTGF表达明显减少,与模型对照组比较有显著性差异（P〈0.05）。结果：模型对照组外周血中CTGF表达明显增加,第14天鳖甲煎丸中、高剂量组外周血CTGF的表达。结论：鳖甲煎丸可抑制肺纤维化模型大鼠外周血CTGF的表达,可能是抗肺纤维化作用的机制之一。     

红芪有效部位对肺间质纤维化模型大鼠肺组织胶原面积、透明质酸及层黏连蛋白的影响

目的观察红芪对肺间质纤维化模型大鼠肺组织胶原面积、透明质酸(HA)及层黏连蛋白(LN)表达的影响,探讨其作用机制,并筛选红芪最佳有效部位。方法将144只SPF级Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、强的松组,以及红芪多糖、黄酮、皂苷的高、中、低剂量组。采用气管滴注博莱霉素法建立肺纤维化模型,从造模后第2日起,各药物组分别给予相应剂量药物,每日1次,共28 d。Masson染色观察肺组织胶原纤维的变化,放射免疫法检测各组大鼠肺组织匀浆中HA、LN含量。结果与模型组比较,红芪黄酮各剂量组、红芪多糖低剂量组肺泡炎明显减轻。红芪黄酮低剂量组、红芪多糖中剂量组、红芪皂苷低剂量组肺组织胶原面积明显减小。与模型组比较,红芪多糖高剂量组、红芪黄酮各剂量组、红芪皂苷高剂量组HA含量明显下降。红芪多糖高剂量组,红芪黄酮中、低剂量组,红芪皂苷中、低剂量组LN含量明显下降。结论红芪多糖、黄酮、皂苷在适宜剂量下均能减轻肺泡炎症,抑制胶原纤维增生、沉积,降低肺组织中HA、LN含量,其中红芪黄酮效果较佳。