EV71和CoxA16型肠道病毒RT-PCR检测方法的研究

目的建立咽拭子标本中EV71和Cox A16型肠道病毒逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测方法。方法根据GENBANK数据库中EV71和Cox A16型肠道病毒的基因序列,利用CLUSTAL软件进行序列比对分析,选择基因组的保守序列,并借助引物设计生物信息学软件,设计筛选出一套针对EV71和Cox A16型肠道病毒的RT-PCR扩增的引物。从特异性、最低检测限、重复性等方面进行评估,建立了EV71和Cox A16型肠道病毒RT-PCR检测方法。结果RT-PCR方法对EV71和COXA16病毒的最低检测量分别为63 TCID50/ml和32 TCID50/ml。其他病原微生物及人类基因组在该系统无反应信号,显示方法特异性良好。结论RT-PCR对手足口病病原体检测准确性高、特异性强,具有快速、经济等特点,适合手足口病的早期诊断。     

北京市儿童手足口病与肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型感染有关

目的了解2007年5-6月北京市儿童中流行的手足口病的病原。方法于2007年5、6月间采集来首都儿科研究所附属儿童医院门诊就诊的手足口病患儿咽拭子标本6份和1份病情危重的手足口病并发神经系统症状而急诊收住院患儿（编号F4243，年龄9岁8个月，女性）的经气管插管呼吸道抽吸液、脑脊液及血清标本。将咽拭子和气管插管抽吸液标本接种Hep-2、MDCK和Vero细胞进行病毒分离。同时设计位于肠道病毒5^＋非编码区（UTR）的通用引物2对（巢式PCR）、肠道病毒71型（EV71）VPl基因不同位置的特异性引物2对半（PCR和半巢式PCR）和柯萨奇病毒A组16型（CAl6）的特异性引物1对检测标本中的病毒核酸。首先用随机引物将标本中的RNA逆转录成cDNA，然后分别用上述引物进行PCR扩增肠道病毒5^＋UTR和EV71／CAl6的VPl基因片段；对EV71阳性的标本还扩增了VPl全基因，扩增产物直接进行序列测定和分析。结果6例门诊就诊的普通手足口病患儿和F4243的呼吸道标本中均扩增到肠道病毒5^＋UTR基因片段，有2例门诊患儿和F4243的标本中还扩增到EV71的VPl基因片段，提示该组手足口病患儿均为肠道病毒感染，其中3例为EV71感染。序列测定和分析表明有1例普通手足口病患儿（F4211）和F4243标本确定为EV71。所有标本接种Hep-2和MDCK细胞均未出现病变，说明常见的呼吸道病毒为阴性。除1份咽拭子标本（F4283）外，其余6份接种Vero细胞的标本均出现细胞病变。用肠道病毒通用引物和EV71特异性引物对分离到的病毒株核酸的扩增结果显示这6株病毒均为肠道病毒，其中F4211和F4243为EV71，与直接从呼吸道标本中扩增的结果相符；其余4株为CAl6。结论北京市儿童中流行的手足口病与肠道病毒EV71和CAl6感染有关；EV71可以在5岁以上儿童中引起严重的神经系统并发症，应引起注意。     

2011年郴州市手足口病病原学及EV71型分离株基因特性研究

目的了解2011年郴州市手足口病病原学特征及EV71型分离株基因特性,为郴州地区手足口病防治工作提供依据。方法收集郴州市手足口病临床诊断病例的咽拭子或肛拭子、粪便标本,采用实时荧光PCR法检测EV71、CA16和其他肠道病毒核酸。随机挑选55份EV71阳性的标本进行RD细胞分离,10株分离株用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增EV71的VP1片段,并作基因测序和序列分子系统发生树分析。结果 2011年郴州市共报告手足口病例5 128例,发病有两个高峰,分别是5-7月和11-12月。病原学检测提示,2011年检测手足口病标本574例,发病年龄以1～3岁儿童为主,男性是女性的2.04倍,检出阳性标本461份,其中EV71占30.15%,CA16占31.89%,EV71和CA16同时阳性占0.65%,其他肠道病毒占37.31%;三种型别病毒分布在病例发病时间、发病年龄和地域上有所不同(P<0.001);重症病例25例,18例检出EV71病毒核酸,死亡病例6例均为EV71病毒感染;采用实时荧光PCR法随机检测68份其他肠道病毒,其中23份CA6、8份CA10,CA6和CA10占其他EV的45.59%。10株EV71分离株基因测序均为C4a亚型,重症和普通病例EV71的VP1基因序列差异较小。结论手足口病的发病存在明显季节、地区、性别、年龄差异,EV71是2011年郴州市引起手足口病重症和死亡病例的主要毒株类型,要开展对EV71型病毒的深入研究,同时也要关注非EV71和非CA16病毒的流行趋势,以防范其快速传播。     

278例手足口病病原学监测结果分析

目的 分析永州市2012年1-12月手足口病(HFMD)的病原学特征,为手足口病的预防控制工作提供病原学依据.方法 选取2012年1-12月辖区内三级甲等综合性医院定点收治的278例手足口病病例作为研究对象.采集HFMD患儿发病1周内的咽拭子标本,用实时荧光RT PCR法对患者进行总肠道病毒、柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)和肠道病毒71型(EV71)的特异性核酸检测.回顾性分析患儿性别、年龄、病例来源的分布情况.结果 278例手足口病病例中,肠道病毒通用型核酸阳性182份,检出率65.47％ (182/278),其中EV71、CoxA16、EV71和CoxA16混合感染、非EV71和CoxA16的其他肠道病毒核酸分别为151、1、1、29份,占肠道病毒感染阳性的82.97％ (151/182)、0.55％(1/182)、0.55％(1/182)、15.93％(29/182),非肠道病毒(NEV) 96例占34.53％ (96/278).患儿以3岁以下儿童为主,男性多于女性,以散居儿童居多.结论 2012年1-12月永州市HFMD流行的病原体优势株可能为EV71,实时荧光RT-PCR可用于手足口病的快速诊断,对3岁以下儿童手足口病进行病原学检测,及早发现及早治疗,是防止手足口病死亡病例的关键.     

EV71与Cox A16病原体RT-PCR检测在预防手足口病传播中的意义

目的探讨EV71和Cox A16病毒的RT-PCR检测在早期诊断与预防手足口病传播中的应用价值。方法选择2013年11月至2014年10月间疑似手足口病患儿120例纳入疑似组,同期排除手足口病诊断患儿100例纳入对照组,均行粪便RTPCR检测,比较两组EV、EV71、Cox A16的检出率。结果疑似组的EV、EV71、Cox A16和EV71联合Cox A16检出率分别为100.0%、37.5%、31.7%和11.7%,均显著高于对照组的15.0%、0.0%、0.0%和0.0%,两组间差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论 EV71和Cox A16的RT-PCR检测对于早期评价手足口病发病作用明显,有利于早期发现和隔离患儿,预防疫情传播扩散。     

北京地区柯萨奇病毒A组6型、肠道病毒EV71型和柯萨奇病毒A组16型手足口病流行特征及临床特点比较

目的 了解柯萨奇病毒A组6型、肠道病毒71型和柯萨奇A组16型手足口病流行特征、临床特点,为指导临床诊断,调整手足口病防控策略提供科学依据.方法 采用前瞻性调查的方法,采集2013年8月至2015年9月在北京市儿童医院诊断的手足口病临床确诊病例的咽拭子,将手足口病原核酸检测阳性的病例分为CA6、EV71、CA16 3组,分析比较3组的临床特点、流行特征、预后及影响因素.结果 共采集HFMD临床诊断病例574例患儿咽拭子,CA6入组122例,EV71入组107例,CA16入组124例.①3组年龄、性别分布一致,差异无统计学意义.②不同年份流行主要毒株不同,但3种病原体引起的手足口病高峰均在夏季.③CA6组发热比例高达78.69％,明显高于EV71组(35.51％)和CA16组(37.90％) (P ＜0.001),平均体温约为38.78℃.CA6组表现大疱疹(9.01％)、结痂(8.20％)、皮疹部位疼痛(29.51％)、恢复期脱皮(38.52％)、脱甲(35.25％)、色素沉着(11.47％)比例高于EV71组、CA16(P ＜0.001).④3组在卫生学指标方面差异无统计学意义.结论 CA6、EV71和CA16感染所致的HFMD发病高峰季节一致;与EV71、CA16感染相比,CA6感染引起的高热比例较高,部分病例可表现为大疱疹,疼痛、脱皮、脱甲、色素沉着、结痂发生率高,预后较好.     

2010-2013年江苏省泰州市非EV71和非CoxA16型手足口病肠道病毒病原谱及CoxA6VP1基因特征分析

肠道病毒（EV）71型和柯萨奇病毒（Cox）A16型是导致手足口病的主要病毒,也有部分非EV71和非Cox A16型病毒导致手足口病,针对这部分病毒的研究较少。本研究对泰州市各监测哨点医院诊断为手足口病患儿的1509份临床咽拭子和肛拭子混合标本进行研究。     

临海市2010-2011年手足口病病原学监测结果分析

目的了解浙江省临海市2010-2011年手足口病主要病原体型别及分布特征,为手足口病的防控提供病原学依据。方法采用实时荧光RT-PCR方法,对哨点医院定期采集的临床诊断病例样本进行肠道病毒(EV)核酸检测和型别鉴定。结果共采集咽拭子样本157份,检出112例EV阳性病例,阳性率为71.34%;其中EV71阳性病例28例,CoxA16阳性病例33例,分别占EV阳性病例的25.00%、29.46%;5岁以下儿童EV感染占所有感染者的95.54%;2010年和2011年儿童EV71和CoxA16阳性率分别为17.44%、24.42%和18.31%、16.90%,差异无统计学意义(P>0.05);男性病例EV阳性检出率高于女性病例(P<0.05);重症病例EV71阳性检出率为100%。2010-2011年病原构成呈动态变化特征。结论引起临海市手足口病的主要病原体为EV71和CoxA16;5岁以下儿童是EV感染的高危人群;EV71是引起重症病例的主要病原体。     

2010年湖南省郴州市手足口病病原学和人肠道病毒71型基因特征研究

目的:了解2010年湖南省郴州市手足口病的病原学特征,为手足口病的防控工作提供依据。方法:采集2010年郴州市手足口病患者的咽拭子、肛拭子或粪便标本,采用Real time-RT-PCR方法检测HEV71、CVA16和HEV的核酸,选择HEV71阳性的标本使用RD、Vero细胞进行病毒分离,使用RT-PCR法扩增HEV71分离株的VP1区片段,进行VP1区核苷酸序列测定和分析。结果:2010年共检测手足口病患者临床标本665份,HEV阳性率72.78%,其中HEV71占55.17%、CVA16占18.59%、其它HEV占26.24%。不同月份、年龄、地区以及不同类型病例HEV型别构成比差异有统计学意义。分离出4株HEV71,其VP1区核苷酸序列分析表明为C4基因亚型。结论:HEV71为郴州市2010年手足口病流行的主要病原体,属于C4基因亚型。HEV71和CVA16的分布在病例发病时间,发病年龄和地域上有所不同。     

实时荧光定量PCR检测手足口病肠道病毒71型与柯萨奇病毒16型临床分析

目的 探讨肠道病毒71型(EV71)与柯萨奇病毒A 16型(Cox A16)实时荧光定量PCR检测在早期诊断手足口病(HFMD)中的意义,为临床治疗提供参考依据。方法 对2012年3月-2013年6月157例疑似HFMD患儿的粪便、疱疹液、鼻咽拭子样本进行EV71、Cox A16、肠道病毒(EV)的实时荧光定量PCR检测,根据试剂说明书的标准判定;采用SPSS16.0进行数据分析。结果 粪便中EV、EV71、Cox A16的检出率分别为94.09%、42.04%、38.85%,高于鼻咽拭子样本,差异有统计学意义(P<0.05);而粪便与疱疹液中EV、EV71、Cox A16的阳性率相比,差异无统计学意义。结论 对HFMD患儿早期诊断、早期治疗,应该首选粪便标本采用实时荧光定量PCR法检测EV、EV71、Cox A16。     

血清氨基末端脑钠肽和肌酸激酶同工酶MB型在儿童肺炎合并心力衰竭诊断中的应用价值

目的探讨血清氨基末端脑钠肽(N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-pro-BNP)和肌酸激酶同工酶MB(creatine kinase MB isoenzyme,CK-MB)在儿童肺炎合并心力衰竭诊断中的价值。方法选取儿童肺炎合并心衰、单纯肺炎和健康对照组各50例,采用化学发光法测定血清NT-pro-BNP和CK-MB值,统计分析3组的差异。并利用logistic回归模型分析血清NT-pro-BNP和CK-MB与心衰发生的关联。结果肺炎合并心衰组NT-pro-BNP,CK-MB值明显高于单纯肺炎组和健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。单纯肺炎组与健康对照组相比,NT-pro-BNP值差异不具有统计学意义,但CK-MB值差异具有统计学意义。结论血清NT-pro-BNP和CK-MB是诊断儿童肺炎合并心衰的有效指标。     

个人日志记录法调查社区高血压患者的影响因素

目的探索上海市闵行区H社区高血压患病影响因素,为制定社区高血压健康管理策略提供依据。方法随机抽取辖区内有电子健康档案的并符合纳入标准的高血压患者,并1:1选取血压正常人群为对照组。使用统一配备电子血压计和电子运动手环,连续30d每日记录基本情况、运动、睡眠、吸烟、饮酒、膳食、服药等情况,高血压组回收80人,对照组回收88人。结果高血压组晨起3次平均血压为(130.58±8.82)Hg/(80.23±5.87)Hg,晚间3次平均血压为(131.30±9.27)Hg/(80.33±5.51)Hg;对照组晨起3次平均血压为(120.92±10.09)Hg/(75.43±5.22)Hg,晚间3次平均血压为(121.11±75.74)Hg/(10.16±5.73)Hg。多因素条件logistic回归分析显示,该地区高血压主要危险因素为小学及以下文化程度、中学文化程度、有家族史、低运动和高盐饮食,保护因素有基本运动、家庭月平均收入3 000~5 000元。结论继续加强社区高血压规范管理,提倡家庭干预、体育运动、合理膳食和健康教育。     

龙血竭胶囊联合医用胶水用于整形创口愈合的效果分析

正安全可靠的创口愈合不仅可以有效避免患者皮肤瘢痕残留,同时对维持皮肤功能的完整性、避免创伤并发症的发生亦具有重要作用[1]。为此我们选择医用胶水联合龙血竭胶囊用于整形创口愈合,现将结果报告如下。1对象与方法 (1)对象:2012年3月-2014年12月来某医院就诊的外科不同部位整形患者220例,随机分为试验组和对照组,各110例。2组患者年龄、性别、创口部位比例均无统计学差异(P0.05)。     

某部一起警卫战士群体发热疫情报告

正2015年1月,驻京某警卫团出现10例群体发热病例,经某医院发热门诊紧急隔离处置及治疗,患者病情迅速得到控制并治愈出院。现将疫情及诊疗过程报告如下。1疫情概况(1)基本情况:10例患者均为参加集中培训的厨师,居住同一宿舍;男性,年龄18~23岁。均以发热为主要症状就诊,体温37.2~38.5℃,持续6 h;4例在就诊前10 h有乏力、周身不适等类似感     

“三防”医学救援队实战化训练现状与对策

总结历次重大活动核、生、化(简称“三防”)医学救援保障实践和训练演练经验做法,重点分析了军队“三防”医学救援队实战化训练取得的主要成绩和存在的问题等现状。同时,就如何提升我军“三防”医学救援队实战化训练成效提出了对策:(1)思想认识要到位,切实铸牢实战化思想根基;(2)训练理念要更新,牢固确立实战化训练指导;(3)训练条件要改善,着力构设实战化训练环境;(4)训练体系要健全,科学搭建实战化训练平台。     

投稿须知

呼吸衰竭病人存在不同程度的缺氧,而胃肠道对缺血、缺氧最敏感.胃肠道一旦缺血、缺氧易发生腹内压升高[1].呼吸衰竭病人常合并不同程度的肺部感染,短时间内大量细菌和毒素入血,迅速引发急性全身性炎症反应综合征(SIRS).SIRS又会引起毛细血管渗漏综合征,使组织间隙液体大量增加,出现间质性肺水肿和肠道水肿,此时,机械通气虽是治疗和改善该疾病的有效方式之一,但气管切开、气管插管等操作加重病人能量的消耗,使已经营养不良的现状更加严重,肺顺应性变差,腹内压(IAP)增高[2].     

《中国计划生育学杂志》稿约

正本刊为国家人口和计划生育委员会创办、主管,国家卫生计生委科学技术研究所主办,中国计划生育杂志社承办的国家级综合指导类科技期刊。读者对象为从事人口和计划生育/生殖健康科学研究、技术服务、科技管理以及相关学科工作者。1本刊欢迎下列稿件1.1人口和计划生育科技管理理论研究及经验介绍,如职业化建设、流动人口管理和信息化建设,技术服务机构改革与发展探索等。     

柔性管理在妇产科护理中的实践初探

正随着现代社会经济的不断发展与人们生活水平的逐步提高,患者对于医疗机构提供的护理质量有着越来越高的要求,对于妇产科患者而言在疾病的治疗过程总尤其需要得到更多更细致的优质护理服务[1]。近年来许多研究显示妇产科疾病的发生率呈现出逐年上升的趋势,患者易产生各类炎症、月经不适、内分泌失调或妇科肿瘤等疾病,严重影响着妇女的工作和生活[2]。柔性管理是在研究人类心理和行为规律的基础上,重视个人的心理、个性、情感、欲望     

《中国计划生育学杂志》稿约

正本刊为国家人口和计划生育委员会创办、主管,国家卫生计生委科学技术研究所主办,中国计划生育杂志社承办的国家级综合指导类科技期刊。读者对象为从事人口和计划生育/生殖健康科学研究、技术服务、科技管理以及相关学科工作者。1本刊欢迎下列稿件1.1人口和计划生育科技管理理论研究及经验介绍、如职业化建设、流动人口管理和信息化建设,技术服务机构改革与发展探索等。