弥漫性脑损伤大鼠脑组织细胞间粘附分子-1的表达与神经元损伤

目的观察细胞间黏附分子-1(ICAM-1)在大鼠弥漫性脑损伤不同时程的表达与脑组织神经元损伤。方法荧光实时定量RT-PCR和免疫组化分别测定ICAM-1mRNA和蛋白在大鼠弥漫性脑损伤不同时程的表达,光镜和电镜观察神经元的变化。结果外伤后6h脑组织中ICAM-1蛋白的表达开始升高(阳性微血管数4.8±0.8),72h达高峰(17.2±2.4),高于假手术对照组(0.4±0.5)(P<0.05)。ICAM-1mRNA表达3h即明显升高(△Ct:13.48±3.93),72h达最高(20.59±0.97),7d(15.60±0.01)仍高于假手术对照组(4.66±1.11)(P<0.01)。光镜及电镜下可见弥漫性神经元变性水肿和坏死,72h损伤最重。结论大鼠脑外伤后ICAM-1表达升高,介导了粒细胞与脑血管内皮黏附增强,ICAM-1可能参与了外伤后炎症反应和神经元损伤的病理过程。     

MMP-9/TIMP-1在大鼠弥漫性脑损伤后早期的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-9及其抑制剂TIMP-1在大鼠弥漫性脑损伤后早期的表达变化与继发脑损伤的关系。方法荧光实时定量RT-PCR分别测定MMP-9mRNA和TIMP-1mRNA在大鼠弥漫性脑损伤早期不同时程的表达,干湿重法测定脑水分含量,光镜和电镜观察血脑屏障结构的变化。结果与假手术对照组相比,外伤后1?h大鼠脑组织中MMP-9mRNA开始增加,伤后12h达到高峰并持续7?d（P<0.01）;TIMP-1mRNA表达6h明显升高,24h达高峰,表达量增加1倍,并持续7d（P<0.01）。脑组织含水量比假手术对照组明显增加,光镜及电镜下可见炎性反应和毛细血管的超微结构破坏、神经元变性水肿和坏死,72h损伤最重。 结论大鼠外伤后诱导MMP-9mRNA和TIMP-1mRNA表达增加,可能参与了弥漫性脑损伤后早期脑水肿和神经元损伤的继发脑损害病理过程。     

胡黄连提取物对缺血再灌注肾脏黏附分子表达的影响

目的研究胡黄连提取物对缺血再灌注肾脏细胞黏附分子1(ICAM-1)、单核细胞趋化因子1(MCP-1)表达的影响。方法雄性SD大鼠分为假手术组、手术对照组、胡黄连提取物不同剂量给药组,采用切除右肾无创动脉夹夹闭左肾动脉60 min再灌注72 h的方法制备急性缺血再灌注(I/R)肾损伤大鼠模型,生化法测定血清肌酐、尿肌酐,并结合尿量计算内生肌酐清除率(Ccr),光镜电镜观察肾组织病理变化并肾小管计分,免疫组化观察肾脏ICAM-1,MCP-1的表达,实时定量荧光RT-PCR测定肾组织ICAM-1,MCP-1 mRNA表达。结果肾脏I/R损伤时大鼠Ccr明显降低,肾脏病理变化明显,肾脏ICAM-1,MCP-1表达明显,肾组织ICAM-1,MCP-1 mR-NA表达增加;与手术对照组相比,各胡黄连提取物组肾脏ICAM-1,MCP-1表达减弱,肾组织ICAM-1,MCP-1mRNA表达降低,肾小管计分降低,Ccr升高。结论胡黄连提取物可以抑制缺血再灌注损伤后肾脏ICAM-1,MCP-1表达,改善肾功能。     

新生大鼠脑缺氧缺血后μ-calpain mRNA及蛋白的表达

目的 观察μ-calpain基因及蛋白在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage, HIBD)脑组织中的表达情况,探讨其在HIBD发生中的作用.方法 7日龄新生SD大鼠随机分为假手术对照组及HIBD后0 h、6 h、12 h、24 h、48 h及72 h各组,采用实时荧光定量RT-PCR及Western blot技术观察μ-calpain mRNA及蛋白随时间变化的表达情况.结果 HIBD后6 h损伤侧脑组织μ-calpain mRNA开始增高,24 h达到高峰(P＜0.05),48～72 h下降,但是仍然高于对照组(P＜0.05);μ-calpain蛋白的活性在HIBD后6～12 h表达增高(P＜0.05),24 h达到高峰(P＜0.01),48～72 h仍处于较高水平(P＜0.05).结论 μ-calpain mRNA及蛋白在HIBD新生鼠脑中表达增高,可能参与了新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的发生.     

丹参对大鼠肝缺血后再灌注损伤的保护作用

目的 通过检测丹参对大鼠肝缺血再灌注损伤后核因子-Kappa B(NF-κB)、细胞间黏附因子-1(ICAM-1)表达的影响,观察丹参对大鼠肝缺血后再灌注损伤的保护作用.方法 按Nauta等方法制备大鼠肝脏缺血再灌注模型,随机分为3组:假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、丹参预处理组(P组),分别于肝缺血再灌后2、8、24 h取材,用免疫组化方法检测肝组织NF-κB、ICAM-1的表达,测肝组织中髓过氧化酶(MPO)浓度评价肝组织中中性粒细胞浸润情况,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平及做光镜、电镜检查反映肝组织细胞损伤程度.结果 I/R组NF-κB A值于再灌注2h(0.418 4±0.039)明显升高,8h(0.308 4±0.028)、24h(0.240 ±0.032)逐渐下降.ICAM-1 A值也于再灌注2h(0.367±0.034)升高,8h(0.451±0.031)达高峰,24h(0.293±0.025)下降.MPO、ALT、AST变化与ICAM-1类似.在P组上述各指标在各时间点均较I/R组低(P<0.05),但较S组高(P<0.05).ALT、MPO、NF-κB和ICAM-1之间的变化均具有正相关(P<0.01);光镜、电镜观察各组之间也具有明显区别.结论 大鼠肝缺血再灌注时刺激NF-κB、ICAM-1的表达参与肝脏缺血再灌注损伤的发生过程,丹参能显著降低缺血再灌注时肝组织中NF-κB、ICAM-1的表达,并有效改善肝缺血再灌注损伤.     

大鼠脑缺血再灌注后TNF-α及ICAM-1的相关性分析

目的观察大鼠脑缺血再灌注损伤后细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在脑缺血再灌注损伤不同时间段的表达规律,探讨ICAM-1、TNF-α在脑缺血再灌注损伤中的关系.方法采用大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,大鼠大脑中动脉阻塞2 h,分别再灌注2、6、12、24、48、96h,免疫组织化学法测定ICAM-1、TNF-α表达水平.并设正常组、假手术组及永久缺血组对照.结果ICAM-1的表达永久缺血组、缺血再灌注组ICAM-1明显高于正常对照组和假手术组(P＜0.01);与永久缺血组比较,缺血再灌注组除再灌注2 h时段外,ICAM-1表达明显增高(P＜0.05);脑缺血再灌注2 h组局部脑组织ICAM-1的表达于再灌注48h达到峰值,再灌注96h仍保持较高水平.TNF-α的表达缺血再灌注组大鼠缺血侧半球TNF-α的表达于再灌注2 h开始升高,再灌注12 h,阳性细胞显著增多,24h达到高峰,其后逐渐下降,96h达基础水平;缺血再灌注组TNF-α的表达较正常组、假手术组有显著差异(P＜0.01),比永久缺血组TNF-α阳性细胞低,但无统计学意义(P＞0.05).缺血再灌注组TNF-α的表达与ICAM-1的表达在24、48、96h时间段呈正相关(r分别为0.765、0886、0.787,P＜0.05);TNF-α的表达早于ICAM-1的表达,且TNF-α与ICAM-1表达部位相同.结论大鼠脑缺血再灌注损伤后,ICAM-1、TNF-α参与了脑缺血后的炎症反应,且二者有明显的相关性TNF-α可能诱导了ICAM-1的上调,在神经元迟发性坏死中起着重要作用.     

GBE对HIBD新生大鼠脑组织MMP-9及TIMP-1表达影响的研究

目的 通过研究银杏叶提取物(GBE)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠脑组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响,探讨GBE的脑保护作用及机制.方法 90只新生7dSD大鼠随机分为假手术组(n=30)、HIBD模型组(n=30)、GBE治疗组(n=30).模型制造成功后24 h、72 h、168 h三个时间点,采用干湿质量法测定大鼠脑组织含水量,RT-PCR法检测各组大鼠脑MMP-9、TIMP-1 mRNA的表达情况.结果 CBE组神经系统异常症状较HIBD组更轻.HIBD组大鼠脑组织含水量在缺氧缺血后逐渐上升,72 h达到高峰,168 h开始下降.各时间点均高于假手术组(P＜0.05).同时,MMP-9及TMP-1mRNA表达量与脑含水量呈正相关.GBE治疗组明显小于HIBD模型组(P＜0.05),高于假手术组(P＜0.05).结论 GBE对HIBD脑损伤的保护作用可能与其调节MMP-9及TIMP-1的表达有关.     

大鼠脑出血后血肿周围核因子-кB的表达和意义

目的研究大鼠实验性脑出血后血肿周围脑组织核因子-кB(NF-кB)的表达及其在继发性脑损伤中的作用。方法采用自体不凝血注入大鼠尾状核制备脑出血模型,免疫组化染色法检测脑组织NF-кB、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的表达。结果脑出血后6 h血肿周围脑组织NF-кB开始表达,48 h达高峰,ICAM-1 12 h开始表达,72 h达高峰;各组与假手术组之间有显著差异(均P<0.01);脑出血后NF-кB与ICAM-1呈正相关关系(γ=0.868,P<0.05),NF-кB表达从开始到高峰均早于ICAM-1。结论脑出血后NF-кB表达增加,并通过ICAM-1参与了脑出血继发性脑组织损伤。     

CO2气腹对缺氧缺血性脑损伤大鼠脑组织S-100、NSE mRNA表达的影响

目的 研究在不同CO2气腹压及不同时段下正常及缺氧缺血性脑损伤大鼠脑组织S-100 mRNA(S-100)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)mRNA表达的变化,并进而探讨CO2气腹对中枢神经系统的影响.方法 采用健康成年Wistar大鼠建立缺氧缺血性脑损伤模型和气腹模型,用RT-PCR技术检测脑组织中S-100、NSE mRNA表达的变化.结果 (1)CO2气腹后,S-100 mRNA表达在A5-1组(64.215±10.404)和A10-2组(67.020±13.339),NSE分别为(8.976±2.379)和(9.183±3.365),对照组S-100、NSE mRNA分别为(59.340±11.378)和(8.500±2.940),S-100、NSE mRNA表达在CO2气腹后逐渐增加,但与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05); (2)S-100、NSE mRNA表达在B组较对照组明显升高(P＜0.05),在B10-2组与B组比较有统计学意义(P＜0.05).结论 在10 mmHg、2 h范围,CO2气腹对正常大鼠脑组织S-100、NSEmRNA表达无明显影响;对缺氧缺血性脑损伤大鼠有显著性影响,应尽可能缩短气腹时间及采取相应的调控措施.     

二次脑损伤鼠脑皮层mGluR3 mRNA改变及其激动剂DCG-IV的作用

目的：研究二次脑损伤（SBI）后大鼠脑皮层代谢性谷氨酸受体3亚型（mGluR3)的变化及其激动剂二碳酸环氧丙基甘氨酸（dicarboxycyclopropy1 glycine,DCG-IV)的作用。方法：SD大鼠随机分为假手术对照、单纯脑损伤、脑损伤合并SBI组及其DCG－IV治疗组4组。在Marmarou加速性弥漫性脑损伤模型基础上,以抽血造成低血压为SBI指标。在伤后不同时间进行原位杂交和病理学研究。光镜下测计DCG－IV干预前后损伤神经元数目。结果;与假手术对照组相比,单纯脑损伤脑皮层mGluR3阳性神经元在伤后12h表达开始减少,48h降至最低（P＜0．01）;脑损伤合并SBI组mGluR3阳性神经元在伤后6h即减少,伤后24h降至最低（P＜0．01）。形态学研究证实,DCG－IV干预能明显减轻脑皮层神经元损伤程度。结论：在弥漫性脑损伤和SBI所致的脑损害发生与发展过程中,mGluR3的作用可能与脑保护有关,其激动剂DCG－IV能有效降低脑组织损伤程度。