2012财政年度FDA新药批准数量再创新高

肿瘤细胞能够激活自身DNA的损伤修复机制进行修复,从而导致其对抗肿瘤药物和放疗产生耐药性,而聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶（poly ADP-ribose polymerase,PARP）是一种DNA修复酶,在DNA修复通路中起关键作用。veliparib是一种新型高选择抑制PARP的苯并咪唑类化合物,体内外实验表明本品具有显著的抑制PARP活性的作用。在治疗转移性乳腺癌、结肠癌、转移性黑色素瘤和脑肿瘤方面已取得显著的效果,其与替莫唑胺联用治疗乳腺癌的研究即将进入III期临床。     

Iniparib联合化疗在转移三阴性乳腺癌中的应用

三阴性乳腺癌存在DNA修复缺陷,这让DNA修复酶多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）抑制剂可能成为一种潜在的靶向治疗药物。最近在《新英格兰医学杂志》上发表了一项开放、Ⅱ期临床研究的结果,该研究比较了单用吉西他滨和卡铂化疗或化疗联合Iniparib（BSI-201．小分子PARP抑制剂）在转移性乳腺癌中的有效性及安全性。     

卵巢癌中BRCA突变及PARP抑制剂的应用

乳腺癌易感基因(BRCA) 1/2突变是遗传性乳腺癌和卵巢癌综合征的主要危险因素,BRCA突变携带者易患妇科恶性肿瘤,尤其是高级别浆液性卵巢癌。BRCA突变产生的DNA修复通路缺陷使卵巢癌患者对铂类化疗和多腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂等高度敏感。BRCA突变检测是卵巢癌风险评估、预后、治疗和预防的关键步骤,与卵巢癌的预后关系密切。PARP抑制剂可用于多种DNA损伤的修复,有效治疗卵巢癌。由于BRCA突变产生的DNA修复通路缺陷使其对铂类化疗和PARP抑制剂等高度敏感,可作为铂类化疗后复发性卵巢癌的维持治疗。     

Iniparib联合化疗在转移性三阴性乳腺癌中的应用

三阴性乳腺癌存在DNA修复缺陷,这让DNA修复酶多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂可能成为一种潜在的靶向治疗药物。最近在《新英     

多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶及其抑制剂在创伤性脑损伤治疗方面的研究进展

多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)在DNA损伤修复、维持基因组稳定性方面起着重要作用。笔者对PARP的结构和生物学功能进行简要介绍,归纳近几年PARP抑制剂在创伤性脑损伤方面的研究成果,并提出临床策略中可能存在的问题以及未来发展方向。     

芥子气中毒机制及防护药物研究进展

芥子气(SM)是一种双功能烃化剂,能与蛋白质、DNA、RNA等多种生物大分子发生烃化反应,其中与DNA发生反应是其最重要的毒理机制之一.SM损伤机制主要包括DNA损伤、多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)激活、氧化应激、炎症及免疫调节反应和蛋白水解酶激活等.目前临床上尚无SM特效药物,主要是对症治疗.目前对症治疗SM使用的主要药物有自由基清除剂及抗氧化剂、PARP抑制剂、抗炎药物及蛋白酶抑制剂等.本文总结了SM的毒理机制及相应的防护药物研究进展.     

DNA损伤应答靶向抑制剂对卵巢癌细胞的化疗增敏作用

目的 观察DNA损伤应答抑制剂及其联合常规化疗药物（顺铂等）在卵巢癌耐药细胞株OVCAR-8中的作用,研究其化疗致敏效应。方法 利用针对DNA损伤应答关键信号蛋白质的抑制剂,与顺铂等连用处理卵巢癌细胞,分析这些药物处理方式对卵巢癌细胞的杀伤能力。MTT法检测不同药物作用后OVCAR-8的增殖抑制情况;免疫荧光法检测OVCAR-8中磷酸化组蛋白2A变体（γH2AX）和p53结合蛋白1（53BP1）的表达,观察二者在DNA损伤位点的募集和形成灶点的能力。结果 毛细血管扩张共济失调突变蛋白（ATM）/ATM和Rad 3相关蛋白（ATR）抑制剂与顺铂联用能抑制损伤修复机制的活化,明显减弱OVCAR-8细胞的增殖活力（P<0.01）,促进其凋亡;在羟基脲和Wortmannin联合处理时,OVCAR-8细胞的ATR转导信号（如γH2AX）减弱,细胞生存率明显降低（P<0.05）;多聚ADP-核糖聚合酶（PARP）抑制剂与顺铂联合处理OVCAR-8细胞未发现明显的增敏作用（P>0.05）。结论 适当的DNA损伤应答抑制剂有潜力提高常规化疗药物的抗肿瘤效果,以达到快速清除肿瘤细胞和防止产生耐药性的效果。     

RO3306与AZD2281对BRCA1WT乳腺癌协同抑制作用的体外研究

目的研究CDK1抑制剂RO3306联合PARP1抑制剂AZD2281对BRCA野生型(BRCA1WT)乳腺癌是否具有协同抑制作用及其机理。方法选取乳腺癌细胞株MCF-7、SKBR3、MDA-MB-231和HCC-1937,应用MTT实验检测PARP1抑制剂AZD2281、CDK1抑制剂RO3306、联合应用AZD2281与RO3306对乳腺癌细胞的生长抑制作用。通过基因转染、流式细胞分析、免疫蛋白印迹等,进一步了解AZD2281、RO3306抗肿瘤作用机理。结果联合应用CDK1和PARP1抑制剂显著抑制了BRCA1野生型乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞生长,导致细胞发生持续DNA损伤、细胞凋亡。结论 RO3306与AZD2281联合对BRCA1野生型乳腺癌细胞有效。两药联合具有协同抑制作用。     

PARP抑制剂奥拉帕尼用于前列腺癌精准治疗的研究进展

探讨PARP抑制剂奥拉帕尼的作用机制及治疗前列腺癌（PC）的应用进展。查阅近年来关于奥拉帕尼与前列腺癌靶向治疗的文献资料,予归纳综述。奥拉帕尼在有DNA修复缺陷的PC治疗有较好疗效,除BRCA1/2、ATM外,其他参与DNA修复的基因突变也有效,也可能作为疗效预测指标。另外奥拉帕尼与放疗、化疗及其他治疗方法联合应用具潜在的优势,需进一步临床验证。cfDNA液体活检可能成为新的预测标志物。奥拉帕尼的耐药及长期应用的血液学毒性需要注意。奥拉帕尼治疗中晚期PC有效,尤其是含有DNA修复缺陷的PC患者。这为PC的治疗提供了新选择。     

聚ADP核糖聚合酶抑制剂用于卵巢癌治疗的研究进展

卵巢癌是导致女性死亡的主要癌症之一,死亡率在妇科癌症中居高不下.聚ADP核糖聚合酶(PARP)抑制剂可靶向杀灭同源重组修复缺陷的肿瘤细胞,包括乳腺癌易感基因(BRCA)突变的癌细胞,这种机制被称为协同致死效应.目前已有3个PARP抑制剂被FDA批准用于治疗晚期BRCA突变的卵巢癌.本文旨在阐述PARP抑制剂治疗卵巢癌的作用机制,并对已进入临床试验阶段的PARP抑制剂进行综述,以期为开发新的卵巢癌治疗药物提供参考.     

PARP-1抑制剂与其他药物联用克服耐药性的研究进展

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)在DNA修复和细胞凋亡中发挥着至关重要的作用,PARP-1抑制剂在肿瘤治疗领域取得了突破性的进展,但耐药性的出现限制了其在临床上的进一步应用。本文就PARP-1抑制剂与其他药物联用克服耐药性的研究进展进行了综述,重点介绍了临床上现有的药物组合方法及其疗效,并对药物联用策略进行了评价与展望,提出双靶点或多靶点药物的开发将成为克服PARP-1抑制剂耐药性、拓宽适应证的新思路。     

沉默PARP-1对卵巢癌上皮细胞耐药性及肿瘤相关生物学行为的影响

目的 研究探讨沉默聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶(PARP-1)后,卵巢癌上皮细胞对顺铂药物的敏感性及相关生物学行为的变化。 方法 以人卵巢癌细胞株A2780为研究对象,采用小RNA干扰技术,沉默PARP-1的表达后,采用Western blot实验、RT-PCR实验、MTT实验等观察PARP-1蛋白、mRNA的表达及细胞存活率的变化趋势,采用方差分析进行比较。 结果 PARP1小RNA干扰序列(PARP1-siRNA)转染组PARP-1 mRNA表达量明显低于A2780组和阴性对照组接种转染组(NC-siRNA),3组PARP-1 mRNA表达量分别为(45.22±3.99)%、(24.13±5.24)%、(46.28±6.19)%(P＜0.05);PARP1-siRNA转染组PARP-1蛋白表达IOD值明显低于A2780组和NC-siRNA转染组(P＜0.05);与0 μmol/L相比,5 μmol/L和10 μmol/L组的PARP-1蛋白表达IOD值明显降低(P＜0.05);随着顺铂浓度的增高,PARP1-siRNA转染组的细胞存活率下降的速度最快。 结论 PARP1-siRNA转染明显下调人卵巢癌细胞株A2780的PARP-1表达后,该细胞对顺铂药物的敏感性增强,细胞的存活率明显下降。      

Poly ADP-ribose polymerase (PARP) inhibitors transiently protect leukemia cells from alkylating agent induced cell death by three different effects

Polyadenosylation of nuclear enzymes is well known to regulate the cellular repair capacity after DNA damage. PARP mediates the transfer of poly-ADP-ribose moieties on itself and other nuclear proteins by the breakdown of NAD+. The present study investigated how modulation of PARP activity interferes with cell death induced by two different alkylating agents used in cancer chemotherapy. 1-methyl-3-nitro-1-nitrosoguanidinium (MNNG) decreased cellular reduction capacity (WST-1 assay) in HL60 and CCRF-CEM cells, accompanied by increased activity of PARP and depletion of intracellular NAD+ and ATP. Pretreatment with the PARP inhibitors 3-AB or 4-AN resulted in transient cell protection, which was associated with a switch from necrosis to apoptosis in CCRF-CEM cells and enhanced apoptosis in HL60 cells. Both PARP inhibitors delayed the drop in WST-1 reduction and retained NAD+ and ATP levels required for apoptosis. Furthermore, 3-AB or 4-AN prevented progressive DNA degradation in MNNG-treated CCRF-CEM cells. In contrast to MNNG, we did not observe early activation of PARP, decrease in WST-1 reduction, or wasteful consumption of NAD+ and ATP after treatment with melphalan. However, preincubation with 3-AB or 4-AN resulted in decreased HL60 cell membrane blebbing and reduced formation of apoptotic bodies. In conclusion, the cell death preventing effects of PARP inhibitors are mediated by their ability to maintain cellular energy metabolism, to inhibit the activation of endonucleolytic DNA degradation and to prevent cell blebbing. Surprisingly, these protective effects of PARP inhibitors on different cell functions seem to be independent of each other and are rather determined by the respective cytotoxic mechanisms implicated by different drugs. Our results support the hypothesis, that PARP activation and/or cleavage plays a regulatory role in the induction of apoptosis.     

DNA-PKcs抑制剂在肿瘤治疗中的研究现状

细胞修复DNA损伤的能力与肿瘤的发生发展及治疗效果密切相关。肿瘤治疗中广泛使用的DNA损伤药物和放射治疗都会造成DNA双链断裂这种致命性的损伤,肿瘤细胞主要通过 DNA依赖性蛋白激酶（DNA-PK）参与的一种非同源末端连接（NHEJ）方式来进行修复。DNA-PK全酶由催化亚单位DNA-PKcs和Ku70/Ku80异二聚体两部分组成,对它们活性的抑制能显著降低肿瘤细胞修复DNA双链断裂的能力,进而增强放化疗的敏感性。目前研究主要关注DNA-PKcs抑制剂,其中一些已进入临床研究阶段。本文对多种DNA-PKcs抑制剂在肿瘤治疗中的相关研究进行概括。     

PARP-1激活和AIF易位在肠缺血再灌注损伤中的作用

目的:研究大鼠肠缺血再灌注后肠损伤中是否存在聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)激活和凋亡诱导因子(AIF)易位,并探索二者在肠缺血再灌注损伤中的作用?方法:通过阻断腹腔干和肠系膜上动脉30 min后,恢复血运,制作鼠肠缺血再灌注模型,分为肠缺血再灌注组(I/R),缺血再灌注前15min经静脉给PARP-1抑制剂3-AB组(Drug)和假手术组(Sham)?取肠组织分别作HE染色?聚腺苷二磷酸核糖(PAR)的免疫组化染色,TUNEL方法检测组织细胞凋亡情况,Western Blot检测凋亡早期信号PARP-1片段p85和凋亡诱导因子(AIF)的表达情况?结果:I/R组肠损伤程度?PAR阳性表达率?细胞凋亡率和凋亡早期信号PARP-1 p85片段?AIF表达程度均较Sham组显著增高(P < 0.05);应用PARP-1抑制剂后,Drug组上述指标均较I/R组显著降低(P < 0.05),但仍高于Sham组?结论:在大鼠肠缺血再灌注损伤中存在PARP-1激活和AIF易位两分子事件,并在肠缺血再灌注损伤中发挥重要作用;肠缺血再灌注前应用PARP-1抑制剂有肠保护效果?     

沉默Ku70后PARP1参与DNA双链断裂修复

目的研究碱基切除修复途径(base excision repair,BER)关键因子PARP1在Ku70缺失的条件下是否参加DNA双链断裂(double-strand break,DSB)的修复。方法针对人类Ku70构建编码shRNA序列的重组表达载体并转染细胞,建立Ku70蛋白表达沉默的细胞株。以高效的DNA双链断裂诱导剂刺孢霉素calicheamycin诱导DSB形成,在Ku70沉默或联合PARP1抑制剂条件下,通过结晶紫染色法检测DSB对细胞存活率的影响,以及Western blot检测H2AX的磷酸化状态。根据与染色质相互作用的差别,分段提取细胞蛋白组分,Western blot检测PARP1在各组分的分布变化。结果细胞Ku70蛋白水平在Ku70 shRNA干扰后显著下调。Ku70沉默和PARP1抑制剂明显降低细胞在calicheamycin处理后的存活率(P<0.01),两者有明显协同效应。在Ku70沉默的细胞诱导DSB后,PARP1主要分布在与染色质紧密结合的组分。结论在Ku70缺陷时,PARP1可与染色质结合,且抑制其功能影响细胞生存,说明PARP1可能参与了不依赖于Ku的DNA双链断裂修复的替代途径。