PCR快速诊断系统性白念珠菌感染的实验研究及临床应用

为了探讨快速诊断系统性白念珠菌感染的方法，我们应用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术体外扩增编码白念珠菌细胞色素Ｐ＿（４５０）Ｌ＿１Ａ＿１的基因片段，在８ｈ内可检出１ｍｌ中含有２０个菌体的标本。在烧伤系统性白念珠菌感染模型中，对３０只兔的２００份血标本，１２０份尿标本和临床８例严重烧伤患者的２６份标本（包括血、尿、痰和创面分泌物）进行了检测，并与培养法对比，结果显示：①在烧伤感染动物血标本的ＰＣＲ检出率显著高于培养法（Ｐ＜０．０１）；动态组中，ＰＣＲ对尿的检出率也高于培养法（Ｐ＜０．０５）；临床标本的检测结果与之类似。②ＰＣＲ诊断系统性白念珠菌病的敏感性、准确性及阴性预测值均高于培养法。我们认为用ＰＣＲ诊断系统性白念珠菌感染，敏感、快速、特异，还可望用于临床监测、疗效评价及判定感染复发等方面。     

G试验对HIV/AIDS患者合并侵袭性真菌感染的诊断价值

目的研究G试验和真菌培养法对人类免疫缺陷病毒感染者/获得性免疫缺陷综合征(HIV/AIDS)患者合并侵袭性真菌感染的诊断价值。方法收集本院2015年6月至2016年5月入院于临床出现真菌感染症状的HIV/AIDS患者共1 423例,取其静脉血行(1,3)-β-D-葡聚糖检测的同时,留取血液或骨髓、痰、灌洗液、咽拭子、脑脊液以及粪便等标本行真菌培养;通过回顾性研究,了解使用抗真菌药后患者临床症状是否缓解作为临床诊断标准,并以此为标准比较两种检测方法的差异。结果1 423例患者中使用抗真菌药物后症状缓解588例为侵袭性真菌感染(IFI)组使用抗真菌药物后症状未缓解者835例为非IFI组。以100.5 pg/ml为临界值阳性,G试验阳性患者527例,阴性患者896例,准确度达91.36%;而以90.5 pg/ml、110.5 pg/ml或120.5 pg/ml为临界值阳性时准确度分别为89.88%、90.51%和89.18%;真菌培养阳性患者636例,阴性患者787例。IFI组及非IFI组患者G试验含量分别为(532.83±778.67)pg/ml和(44.14±35.08)pg/ml,两组差异具有统计学意义(t=15.208、P0.001);IFI组患者中念珠菌感染者、马尔尼菲青霉菌感染者、隐球菌感染者、念珠菌及马尔尼菲青霉菌混合感染者G试验含量分别为(444.29±705.44)pg/ml、(452.78±511.40)pg/ml、(89.56±71.58)pg/ml和(596.28±840.23)pg/ml,隐球菌感染者G试验含量分别与念珠菌感染者(t=6.581、P0.001)、马尔尼菲青霉菌感染者(t=6.889、P0.001)和念珠菌及马尔尼菲青霉菌混合感染者(t=4.865、P0.001)比较,差异均具有统计学意义。G试验及真菌培养法的敏感度分别为84.35%和70.75%,差异具有统计学意义(χ2=5.331、P=0.021);特异度分别为96.29%和73.65%,差异具有统计学意义(χ~2=20.067、P0.001);两方法联合检测后敏感度为96.43%,特异度为70.54%。结论 HIV/AIDS患者合并IFI诊断方面G试验较真菌培养法简便、快速、阳性率高、特异性也较高,连续监测G试验更有助于提高IFI诊断效率;两者联合检测可提高肺孢子菌及隐球菌的诊断效率,早期预测及确诊马尔尼菲青霉菌感染     

PCR快速诊断系统性白念珠菌感染的实验研究及临床应用

为了探讨快速诊断系统性白念珠菌感染的方法，我们应用聚合酶链式反应技术体外扩增编码白念珠菌细胞负素Ｐ４５０Ｌ１Ａ１的基因片段，在８ｈ内可检出１ｍｌ中含有２０个菌体的标本。在烧伤系统性白含珠菌感染模型中，对３０只兔的２００份血标本，１２０份尿村本和临床８例严重烧伤患者的２６份标本进行了检测，并与培养法对比，结果显示（１）在烧伤感染动物血标本的ＰＣＲ检出率显著高于培养法（Ｐ＜０．０１）；动态组中，ＰＣＲ     

尿标本量和沉渣制片存放条件对尿足细胞检测的影响

目的：探讨少量尿液存放后检测尿足细胞的方法。方法：采用免疫荧光法鉴别足细胞的基础上,从尿标本量,沉渣制片存放温度、时间及一抗孵育时间与原检测方法比较,以足细胞阳性检出率、足细胞数量为指标评估实用性。结果：（1）尿量10ml与100ml（原方法）足细胞检出数相关性较好（r=0.670,P〈0.05）。（2）沉渣制片标本于-20℃和4℃存放3d检出率分别为88%、63%,与原方法比较差异无统计学意义（P〉0.05）;存放7d阳性检出率分别为38%、38%,与原方法比较（P〈0.05）;同样存放3d对足细胞检出数影响不大,而7d足细胞检出数为0（0,9）、0（0,10.75）与原方法27.5（7.25,58.25）比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;温度对同一时间点足细胞检出率和计数无明显影响。（3）一抗孵育1h与过夜（原方法）对足细胞检出率无影响,足细胞检出数分别为15（6,31）/20HP和8（3,17）/20HP,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：采用免疫荧光法检测尿足细胞采尿标100ml,连续制片效果较好。临床上常遇肾衰竭少尿患者,可用10ml尿标本,沉渣制片存放4℃,3d内完成。     

新型经电子纤维支气管镜下防污染支气管肺泡灌洗、支气管肺泡灌洗以及常规痰检法在肺部感染诊治中的应用

目的分析新型经电子纤维支气管镜下防污染支气管肺泡灌洗（PBAL）、支气管肺泡灌洗（BAL）以及常规痰检法在肺部感染诊治中的应用价值。 方法随机选取2016年1月至2017年10月于合肥市第二人民医院住院的肺部感染者共85例，入组患者均行PBAL、BAL以及常规痰检法，并结合影像学检测。分析以上3种方法病原菌检出率和治疗总有效率。 结果85例患者共收集255份标本，培养出病原菌163株，总阳性率为63.92%，其中行PBAL法、BAL法与常规痰检法的病原菌检出率分别为80.00%（68/85）、67.06%（57/85）和44.70%（38/85）。PBAL法与常规痰检法的病原菌检出率差异有统计学意义（χ² = 12.582、P < 0.001），而与BAL法的病原菌检出率差异无统计学意义（χ² = 1.570、P = 0.210），BAL法与常规痰检法的病原菌检出率差异有统计学意义（χ² = 5.363、P = 0.021）。三种方法检出革兰阴性菌占病原菌总数的69.33%（113/163），革兰阳性菌占病原菌总数的24.54%（40/163），真菌占病原菌总数6.13%（10/163）。PBAL法、BAL法以及常规痰检法取样后药敏试验结果显示，革兰阴性菌平均耐药率为（87.34 ± 5.52）%、（76.13 ± 6.33）%和（66.65 ± 4.85）%，差异有统计学意义（F = 115.531、P < 0.001）；平均敏感度为（82.12 ± 4.79）%、（72.54 ± 6.14）%和（62.74 ± 4.65）%，差异有统计学意义（F = 114.712、P < 0.001）。PBAL法、BAL法以及常规痰检法取样后药敏试验结果显示，革兰阳性菌平均耐药率分别为（85.45 ± 5.13）%、（73.24 ± 4.87）%和（65.37 ± 5.13）%，差异有统计学意义（F = 54.626、P < 0.001）；平均敏感度分别为（80.56 ± 4.67）%、（69.42 ± 4.65）%和（61.34 ± 4.25）%，差异有统计学意义（F = 61.114、P < 0.001）；68例细菌培养呈阳性患者根据以上三种取样方法进行药敏试验调整抗菌药物治疗后，PBAL法总有效率为88.24%（56/68），显著高于BAL法[73.68%（42/57）]和常规痰检法[52.63%（20/38）]，差异均有统计学意义（χ² = 4.372、P = 0.036，χ² =16.692、P < 0.001）；BAL法总有效率则显著高于常规痰检（73.68% vs. 52.63%），差异有统计学意义（χ² = 4.458、P = 0.035）；PBAL法总有效率显著高于BAL法（88.24% vs. 73.68%）差异有统计学意义（χ² = 4.372、P = 0.036）。 结论PBAL与BAL法的病原学检测率与治疗总有效率均高于常规痰检，且PBAL法取样后经药敏试验调整抗菌药物后的治疗总有效率高于BAL法，故PBAL法具有更高的应用价值。     

外周血白细胞计数、淋巴细胞百分比和C-反应蛋白与呼吸道病毒检出率的相关性

目的回顾性分析外周血白细胞计数（WBC）、淋巴细胞百分比（LYN%）和C-反应蛋白（CRP）与呼吸道病毒检出率的相关性。 方法收集2016年11月至2017年12月首都医科大学附属北京地坛医院收治的103例呼吸道感染者自动巢式多重聚合酶链式反应（PCR）系统呼吸道病毒检测结果、一般资料、临床和其他实验室资料,根据患者病毒检出情况分为未检出组和检出组,对两组患者的病原学和WBC、LYN%、CRP进行统计学分析。 结果103份鼻咽拭子标本中呼吸道病毒检出率为62.14%（64/103）,其中甲型流感病毒检出阳性率最高,为26.21%（27/103）;检出组患者咳嗽例数显著多于未检出组（χ² = 12.898、P < 0.001）,发病天数少于未检出组（t =－2.727、P = 0.008）,CRP水平低于未检出组（t =－1.897、P = 0.016）;根据C-反应蛋白值将患者分为3组：≤ 10 mg/L组、10～50 mg/L组和> 50 mg/L组,各组患者病毒检出率差异有统计学意义（χ² = 10.448、P = 0.005）,其中C-反应蛋白≤ 10 mg/L组病毒检出率最高,为77.50%（31/40）;受试者工作特征曲线（ROC）分析发现WBC、LYN%和CRP曲线下面积分别为0.565、0.593和0.678,当CRP的Cut-off值为18.2 mg/L时,敏感度和特异度分别为73.3%和64.2%。 结论通过自动巢式多重PCR可检出多种呼吸道病毒。当呼吸道感染者早期表现以咳嗽、发热为主,或WBC、LYN%、CRP水平均不高时呼吸道病毒检出的可能性高,可进一步选择自动巢式多重PCR进行呼吸道病毒检测。     

血清胱抑素C和尿微量白蛋白联合检测在人类免疫缺陷病毒感染者肾功能损伤检测中的应用价值

目的评估血肌酐和尿常规的常规检测基础上联合血清胱抑素C和尿微量白蛋白检测在人类免疫缺陷病毒（HIV）感染者肾功能损伤检测中的应用价值。 方法以2019年2～5月于首都医科大学附属北京地坛医院感染一科住院的169例HIV感染者为研究对象，完善其尿常规、尿微量白蛋白、血肌酐、血清胱抑素C检测；分析尿蛋白及尿微量白蛋白的阳性检出率及其差异，血肌酐升高及血清胱抑素C升高的比例及其差异。计算应用替诺福韦酯（TDF）及合并丙型肝炎、高血压、糖尿病、肿瘤的肾功能损伤的相对危险度。 结果169例HIV感染者中尿常规示尿蛋白阳性者5例（3.0%），尿微量白蛋白升高者17例（10.1%），两者阳性检出率差异具有统计学意义（χ² = 5.9、P = 0.007）。血肌酐升高者10例（5.9%），血清胱抑素C升高者20例（11.8%），两者阳性检出率差异具有统计学意义（χ² = 3.0、P = 0.042）。在尿常规和血肌酐检测的基础上联合检测尿微量白蛋白和血清胱抑素C的总体阳性检出率为49例（30.0%）。CD4⁺ T淋巴细胞计数< 200个/μl与≥ 200个/μl组患者血清胱抑素C水平分别为0.94（0.83，1.05）mg/L、0.85（0.77，0.95）mg/L，差异具有统计学意义（Z =-3.02、P = 0.003）。应用TDF及合并丙型肝炎、高血压、糖尿病、肿瘤的肾功能损伤的相对危险度分别为1.1、1.5、1.9、2.2和1.4。 结论HIV感染者中，单纯以尿常规为依据评估有无蛋白尿，以血肌酐水平为依据评估肾小球滤过功能会低估肾功能损伤的患病率。在常规检测血肌酐和尿常规的基础上联合检测血清胱抑素C和尿微量白蛋白在提高HIV感染者肾功能损伤检出率方面具有重要的应用价值。低CD4⁺ T淋巴细胞计数、应用TDF及合并丙型肝炎、高血压、糖尿病、肿瘤均为肾功能损伤的危险因素。     

脊柱内固定术后深部感染致病菌检出率及影响因素分析

【摘要】 目的：分析脊柱内固定术后深部感染致病菌谱及影响致病菌检出率的因素,为提高致病菌检出率、规范临床治疗提供参考。方法：选取2009年1月～2019年1月南方医院骨科学科脊柱骨科诊断为脊柱内固定手术后深部感染病例作为研究对象,分析致病菌检出种类及检出率,探讨年龄、性别、手术类型、手术部位、手术时间、手术节段、感染类型（早发性及迟发性感染）、取样时间（初次手术后至样本收集的时间）、取样前抗生素干预与否、抗生素干预时间（取样前抗生素治疗的天数）等因素对致病菌检出率的影响。结果：符合纳入标准89例患者中,38例血培养或切口组织培养阳性,检出率为42.7%,其中单一病原菌31例,混合感染7例。共培养出47株病原菌,革兰氏阳性细菌26株,革兰氏阴性菌20株,真菌1株。主要致病菌为金黄色葡萄球菌（13株,27.7%）、大肠埃希菌（8株,17.0%）、表皮葡萄球菌（5株,10.6%）、铜绿假单胞菌（5株,10.6%）。感染类型（P=0.002）、取样时间（P=0.044）及抗生素干预（P＜0.001）均影响致病菌的检出,差异有统计学意义,而手术类型、手术部位、手术时间、手术节段、抗生素干预时间对检出率无影响（P＜0.05）。结论：脊柱内固定术后深部感染致病菌检出率为42.7%,以金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌为主,迟发性感染更易培养出致病菌,抗生素干预及取样时间均可影响致病菌检出率。     

2016至2018年某医院真菌血流感染者流行病学特征及耐药性分析

目的分析真菌性血流感染的病原菌分布以及耐药特征，为真菌血流感染的早期合理用药提供理论依据。 方法回顾性分析武汉大学人民医院2016年1月至2018年12月收治的真菌性血流感染者的菌群、科室分布以及耐药性。 结果入组192例真菌血流感染者的血培养样本中共分离192株真菌，其中白色念珠菌检出率为31.77%（61/192），其次热带念珠菌检出率为18.75%（36/192）；重症医学科检出率最高为33.85%（65/192）。所有菌株均对两性霉素B敏感，对其他抗菌药物耐药率分别为5-氟胞嘧啶4.49%（9/192）、伊曲康唑5.73%（11/192）、氟康唑10.94%（21/192）和伏立康唑11.46%（22/192）；除两性霉素B外，2016至2018年真菌对其他抗菌药物的耐药率均逐年上升，其中2018年所分离192株光滑念珠菌对伊曲康唑耐药菌率达46.7%。 结论真菌血流感染病原菌以念珠菌属为主，对目前抗真菌药物具有较高敏感性，但耐药率逐年上升，加强监测血培养病原菌变化及耐药趋势对指导临床用药至关重要。     

免疫荧光法与唾液酸酶检测在阴道加德纳菌感染诊断中的应用价值

目的比较免疫荧光法与唾液酶法在阴道检测加德纳菌感染诊断中的应用价值。 方法采集来本院门诊就诊或体验的已婚妇女456例阴道分泌物标本,分别采用免疫荧光法与唾液酸酶法检测,以Amsel检测法为"金标准",比较两种检测方法的诊断效能。 结果456例受检妇女中,检出阴道加德纳菌阳性175例,检出率为38.38%（175/456）;18～29岁年龄段检出率为42.79%（95/222）,显著高于40～49岁年龄段（χ² = 5.807,P = 0.016）;细菌性阴道病患者加德纳菌阳性检出率显著高于不孕不育、不良怀孕及其他人群,差异具有统计学意义（χ² = 13.860、P = 0.000,χ² = 21.131、P = 0.000,χ² = 13.860、P = 21.492）;免疫荧光法检出阴道加德纳菌阳性181例（其中假阳性13例）,唾液酸酶法检测阴道加德纳菌阳性177例（其中假阳性21例）;免疫荧光法检测灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值和阴性预测值分别为96.00%、95.37%、95.61%、92.82%和97.45%;唾液酸酶法检测灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值和阴性预测值分别为89.14%、92.53%、91.23%、88.14%和93.19;免疫荧光法灵敏度、准确度和阴性预测值显著高于唾液酸酶法,差异均具有统计学意义（χ² = 5.583、P = 0.014,χ² = 7.136、P = 0.008,χ² = 5.631、P = 0.018）。 结论不同年龄段、不同受检对象阴道加德纳菌感染率各不相同,免疫荧光法具有较高灵敏度、准确度和阴性预测值,可用于细菌性阴道病阴道加德纳菌感染者的筛查。     

Comparison of microbial composition of cough swabs and sputum for pathogen detection in patients with cystic fibrosis

BackgroundWith the continued advancement of CFTR modulator therapies there is likely to be a burgeoning population of adult cystic fibrosis (CF) patients unable to expectorate sputum. Consequently, the detection and surveillance of pulmonary colonisation, previously reliant on sputum culture, needs re-examining. We hypothesised that cough swabs analysed with culture-independent analysis of the 16S gene could serve as a surrogate for colonisation of the lower airways.MethodsCough swabs and sputum samples were prospectively collected from consecutive adults and children with CF across two sites at regular outpatient appointments. Conventional culture analysis and next generation sequencing were used to compare paired same day samples.ResultsTwenty-two adults and 8 paediatric patients provided 75 paired cough swabs and sputum samples. Alpha diversity measures showed increased bacterial richness in sputum, while evenness and Simpson's diveristy index were higher in cough swabs. Within each sampling technique, microbial composition showed greater similarity when considering intra-patient variation. Poor concordance was observed between culture independent cough swabs and culture dependent/independent sputum analysis for specific pathogens, with cough swabs unable to accurately identify commonly associated CF pathogens (AUROCC range: 0.51 to 0.64).ConclusionCulture independent analysis of cough swabs provides an inaccurate diagnosis of lower respiratory tract colonisation and should not be used as a diagnostic test in patients with CF.     

Sources of pathogens causing pleuropulmonary infections after lung cancer resection.

OBJECTIVE: The source of pathogens responsible for pleuropulmonary complications after lung resection is not yet completely understood, yet knowing this source is very important for proper perioperative use of antibiotics in lung surgery. We studied prospectively the value of sputum samples -- collected 3 days before and 3 days after surgery -- and of intraoperative bronchial swabs in the diagnosis of infective pulmonary complications following lung cancer resection. METHODS: In a prospective trial, we studied 194 patients (18 women and 176 men, age range 34-79 years, mean 57 years) who were operated on for lung cancer. The infection screen consisted of intraoperative bronchial swabs, and sputum samples obtained prior to and 3 days after surgery. Before the operation, all patients were free of clinical signs of respiratory infection. In patients with postoperative infection, causative pathogens were identified from sputum, tracheal aspirate, thoracic puncture and thoracic drainage fluids. RESULTS: Thirty-four patients suffered from 32 pleuropulmonary infections, and two from wound infection. Pathogenic organisms were isolated from preoperative and postoperative sputum samples and from intraoperative bronchial swabs in 50, 64 and 27% of patients, respectively. Postoperative infective complications were caused by gram-negative bacteria and Candida albicans in 75% of patients. These potential pathogens were recovered from preoperative sputum samples and from intraoperative bronchial swabs in only 18 and 13% of cases, but from postoperative sputum samples in 63% of cases. A strong correlation in identified pathogens was found between the postoperative sputum samples and the samples collected for microbiological diagnosis of subsequent postoperative infective complications (P<0.01). CONCLUSIONS: Our results indicate that pathogens that cause pleuropulmonary infective complications are probably acquired postoperatively from the patient's oral cavity, pharynx and hypopharynx. Appropriate antibiotic prophylaxis is discussed.     

急性坏死性胰腺炎合并念珠菌感染

目的 探讨急性坏死性胰腺炎(ANP)合并念珠菌感染的诊治方法。方法 回顾分析78例ANP患者的临床资料,诊断由手术发现或cT检查确定,其中62例接受预防性抗生素治疗,16例未接受。每例均行血、尿、便、痰和创口引流液的培养和涂片镜检,检出念珠菌。结果78例ANP中共有14例发生念珠菌感染,发病率17．9％,死亡4例,死亡率28．6％;使用预防性抗生素组发病率19．4％,死亡率25．0％;未用预防性抗生素组的发病率12．5％,死亡率50．0％。结论 资料证明ANP合并念珠菌感染是一个值得重视的临床问题,预防性使用抗生素治疗ANP可预防严重继发性感染的发牛．但也同时会合并念珠菌感染。     

新生儿重症监护室多重耐药菌感染临床分析及高危因素

目的探讨新生儿重症监护室(NICU)新生儿多重耐药菌(MDRO)感染的高危因素及其预防策略。方法收集2019年1月至2020年12月中山大学附属第七医院NICU住院新生儿中病原体培养阳性患儿的临床资料,其中检出MDRO的新生儿为MDRO组(25例),检出非MDRO的新生儿为非MDRO组(45例),回顾性分析MDRO构成比、菌种、检出部位及耐药情况,并分析两组新生儿的疾病及转归,采用单因素分析和多因素Logistic回归分析MDRO感染的高危因素。结果714份送检标本中分离出细菌70株,其中MDRO 25株(35.7%)。MDRO中革兰阳性球菌15株(60.0%),其中凝固酶阴性葡萄球菌12株(48%),耐甲氧西林金黄色葡萄球菌3株(12.0%);革兰阴性杆菌10株(40.0%),其中产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌6株(24.0%)。单因素分析显示两组新生儿的绒毛膜羊膜炎发生率[16(64.0%)vs.17(37.7%):χ^(2)=4.435、P=0.035]、联合使用2种以上抗菌药物[10(40.0%)vs.8(17.7%):χ^(2)=4.155、P=0.042]、肠外营养时间超过2周[15(60.0%)vs.15(33.3%):χ^(2)=4.667、P=0.031]差异均有统计学意义。多因素Logistic回归分析显示,绒毛膜羊膜炎为NICU新生儿MDRO感染的独立危险因素(OR=2.899、95%CI:1.007~8.350、χ^(2)=3.889、P=0.049)。MDRO组患儿主要感染疾病为新生儿败血症[6例(24.0%)]和新生儿肺炎[6例(24.0%)];非MDRO组患儿主要感染疾病为化脓性脑膜炎[2例(4.4%)]和新生儿肺炎[2例(4.4%)]。MDRO组患儿感染率高于非MDRO组[14(56.0%)vs.5(11.1%):χ^(2)=16.376、P<0.001],两组患儿住院转归[24(96.0%)vs.43(95.5%):χ^(2)=0.000、P=1.000]、住院时间[21.0(7.5,37.0)d vs.8.0(4.0,35.5)d:Z=-1.793、P=0.073]以及住院费用[3.588(1.0395,8.7050)万元vs.1.3713(0.7287,7.6127)万元:Z=-1.189、P=0.234]差异均无统计学意义。结论NICU患儿MDRO感染率较非MDRO高,绒毛膜羊膜炎为NICU新生儿MDRO感染独立危险因素。应从积极处理母亲羊膜炎、围产期抗菌药物合理使用、加强感染控制等方面进行NICU新生儿MDRO感染管理。     

烧伤患者真菌感染分析

目的 了解烧伤患者真菌感染情况.方法 2003年1月-2006年12月,笔者单位共收治3909例烧伤患者.根据临床表现,对其中怀疑有真菌感染的467例患者,采集血液、痰液、气道灌洗液、动静脉导管、尿管、尿液、大便、创面分泌物等标本2271份,行真菌培养、鉴定及药物敏感试验.1例患者多个标本培养结果为同一真菌时计为1个阳性标本.并以创面分泌物、大便、尿液、痰液及气道灌洗液、动静脉导管或尿管、血液标本为升序,仅计最高级别标本为阳性;如同时查出2种以上不同真菌时,按不同标本计算.结果 在送检的2271份标本中,有61份标本真菌培养阳性,阳性率2.69%.3909例患者中有36例(38份阳性标本)发生真菌感染,总阳性病例发生率为0.92%.36例真菌培养阳性患者中烧伤面积大于80%TBSA 18例,50%～79%TBSA 12例,30%～49%TBSA 4例,小于30%TBSA 2例.其真菌培养阳性时间为:烧伤后1周内发生2例,第2周发生6例,第3周发生16例,3周后发生12例.在36例真菌感染患者中有8例死亡,病死率为22.22%.在38份阳性标本中,培养检出最多的为热带假丝酵母菌及白色念珠菌.所检出的真菌除光滑球样酵母菌耐药较严重外,其他真菌对多数抗真菌药物如两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑等敏感.念珠球样酵母菌对所有药物敏感,热带假丝酵母菌对氟康唑、酮康唑、5-氟胞嘧啶等敏感性较好.结论 烧伤患者常有真菌感染,当临床怀疑有真菌感染时,应进一步检查确诊,并尽早开始抗真菌治疗.     

Value of the Candida antigen assay in diagnosis of systemic candidiasis in burn patients.

The Cand-tec latex agglutination test was used to analyze 2,575 serum samples from 47 consecutive burn patients at risk for systemic candidiasis and serum samples from 24 nonhospitalized control subjects. One burn patient had systemic candidiasis documented by culture of a deep biopsy specimen. In addition, blood culture produced positive results in one patient with no other evidence of systemic candidiasis. Wound, sputum, mucous membrane, or gastrointestinal tract specimens were cultured in 25 of 47 (53%) patients with no evidence of systemic candidiasis. Surveillance cultures were negative in 19 (40%) patients and there were no signs of systemic candidial infection. The sensitivity of the Candida antigen titer was 100% at titers of greater than or equal to 1:2, greater than or equal to 1:4, greater than or equal to 1:8, and greater than or equal to 1:16. Specificity was 77% at titers of greater than or equal to 1:4, 94% at titers of greater than or equal to 1:8, and 100% at titers of greater than or equal to 1:16. The positive predictive value ranged from 6.0% at greater than or equal to 1:4 to 100% at greater than or equal to 1:16. The negative predictive value was 100% for all titer values. The Cand-tec antigen test shows poor specificity and poor positive predictive value for the detection of systemic candidiasis in burn patients.     

武汉市第三医院烧伤重症监护病房三年间鲍氏不动杆菌分布及耐药性变化

目的 了解烧伤ICU鲍氏不动杆菌临床分布特征及耐药性变化,寻找与其感染相关的危险因素,为制定防治该菌株感染的策略提供参考. 方法 2006年1月-2008年12月,收集笔者单位烧伤ICU 156例患者的血液、静脉导管、痰液、创面分泌物及咽拭标本,行细菌培养.分析3年间细菌分布情况,检测细菌耐药性,行鲍氏不动杆菌感染相关危险因素分析.用WHONET 5.3软件处理细菌耐药率数据,对其他数据行x2检验与Logistic回归分析. 结果 3年间共检出鲍氏不动杆菌92株,在2006、2007、2008年各年度检出总菌株数中比例分别为23.1%(30/130)、27.5%(25/91)、28.2%(37/131).菌株来源:来自创面分泌物41株占44.6%,咽拭、痰液标本均检出14株各占15.2%,血液标本检出13株占14.1%,静脉导管10株占10.9%.除头孢哌酮/舒巴坦和亚胺培南外,所获鲍氏不动杆菌菌株对临床常用的10种抗生素平均耐药率均达50.0%以上.烧伤总面积(x2=24.374,P=0.000)、机械通气(x2=8.968,P=0.003)、抗生素使用时间(x2=3.981,P=0.046)、深静脉置管(x2=9.170,P=0.002)是引起烧伤ICU鲍氏不动杆菌感染的危险因素,前二者为独立危险因素. 结论 笔者单位烧伤ICU鲍氏不动杆菌广泛耐药且检出率呈逐年增加趋势.严格执行无菌操作及隔离措施,规范性使用抗生素,避免气管切开及深静脉置管等侵入性操作或缩短其时间,对预防和控制鲍氏不动杆菌感染有重要意义.     

深部真菌的感染特点及耐药分析

目的：了解深部真茵感染的临床分布特点及耐药情况,以指导临床合理应用抗真菌药物。方法收集我院临床患者深部的标本（痰液、尿液、粪便、血液、脑脊液、生殖道分泌物、创口分泌物）共426份,接种到沙保弱培养基和显色培养基鉴定菌株。将分纯的菌种接种梅里埃公司生产的ATB Fungus 2真菌药敏板条,用ATB Expression鉴定仪读取最小抑菌浓度（MIC）,得出临床常见真菌对抗真菌药物的药敏结果。结果发生深部真菌感染167例,感染真菌标本以痰液检出率最高为63.5%,其次为尿液占15.6%。167株真菌中,假丝酵母菌属感染有160株,其中以白假丝酵母菌为主（67.1%,112/167）。科室分布中,干诊科感染率最高,为41.9%;其次为呼吸科,占26.3%。＞60岁老年患者有123例,占73.6%。假丝酵母菌属对伏立康唑和伊曲康唑的耐药率较高,分别为75.05%和51.10%,对5-氟胞嘧啶和两性霉素B耐药率较低,分别为2.20%和2.90%。结论老年患者容易患深部真菌感染,感染部位主要为呼吸道,假丝酵母菌属为主要病原菌,其中以白假丝酵母菌感染率最高;两性霉素B、氯康唑和5-氟胞嘧啶耐药率最低,氟立康唑和伊曲康唑的耐药率最高。     

二代测序技术应用于脑脊液检测在结核性脑膜炎中的早期诊断价值

目的评价二代测序技术应用于脑脊液检测在结核性脑膜炎（TBM）患者中的早期诊断价值。 方法前瞻性纳入2018年2月2日至2018年8月2日于山东省胸科医院就诊的临床怀疑TBM的患者共50例,并跟踪随访其诊疗结局。送检脑脊液标本均进行二代测序,测序所得原始序列与病原微生物数据库进行对比得到最终结果。二代测序结果以检测到结核分枝杆菌复合群唯一比对序列为阳性,未检测到唯一比对序列为阴性。以符合脑脊液结核分枝杆菌培养阳性、涂片阳性、Xpert MTB/RIF检测阳性及结核分枝杆菌核酸检测阳性等4项中至少1项即为确诊TBM患者;临床可疑TBM且抗结核治疗有效为临床诊断患者;有其他病原学依据或临床排除TBM者为非TBM患者。分析二代测序在TBM早期诊断中的敏感性和特异度。 结果确诊为TBM患者22例中Xpert MTB/RIF检测阳性13例,培养阳性6例,结核分枝杆菌核酸PCR检测阳性5例,临床诊断为TBM患者12例,非TBM患者16例。在确诊及临床诊断患者中,二代测序技术检测到结核分枝杆菌复合群系列20例,敏感性为58.8%（20/34）,特异度为100%（16/16）。在确诊患者中,二代测序的敏感性为63.6%（14/22）;在同步进行结核分枝杆菌培养、Xpert MTB/RIF检测与二代测序的50例标本中,以临床诊断为标准,3种方法的特异度均为100%（16/16）;传统方法、Xpert MTB/RIF检测及二代测序的敏感性分别为29.4%（10/34）、38.2（13/24）和58.8（20/34）,前两种检测方法与二代测序敏感性差异均有统计学意义（McNemar检验：χ² = 8.333、P = 0.013,χ² = 8.333、P = 0.065）。传统方法与二代测序联合检测的敏感性高达82.4%（28/34）。 结论二代测序技术能够较快速地检测脑脊液中的结核分枝杆菌复合群,且其敏感性和特异度均较高,可作为TBM的早期诊断指标。二代测序联合传统检测方法可提高检出率。