NF-κBp65蛋白与p62蛋白在胃癌组织中的表达及意义

目的:研究NF-κ Bp65蛋白与p62蛋白在胃癌中的表达及临床意义。方法 :采用免疫组化检测72例胃癌组织及癌旁正常粘膜组织中NF-κ Bp65蛋白与p62蛋白的表达,并分析两者在胃癌发生、发展机制中的相互关系。结果:胃癌组织中NF-κ Bp65的阳性表达率(65.3%)显著高于癌旁正常组织(27.8%,P0.05);胃癌组织中p62阳性表达率(66.7%)显著高于癌旁正常组织(30.6%,P0.05);NF-κ Bp65、p62与胃癌组织分化程度、肿瘤的浸润深度以及淋巴结转移有关(P0.05);NF-κ Bp65、p62在胃癌中的表达呈正相关(P0.05)。结论 :p62、NF-κ Bp65可能通过调节细胞凋亡及细胞增殖参与胃癌的发生、发展,且p62可激活NF-κ Bp65的表达,监测p62、NF-κ Bp65的表达可在一定程度上有助于胃癌的病情评估及预后判断。     

自噬相关基因Beclin1和MAPLC3在乳头状甲状腺癌的表达及意义

目的 检测人甲状腺乳头状癌标本中自噬相关基因Beclin1和微管相关蛋白轻链3(MAPLC3)的表达,并探讨其意义.方法 采用 Western blot方法检测甲状腺乳头状癌(PTC)组织和甲状腺良性疾病组织中以及正常甲状腺组织中Beclin1和MAPLC3蛋白的表达.结果 Westernblot检测Beclinl在甲状腺乳头状癌的相对表达量为3.05±0.43,与甲状腺良性疾病组织(5.48±0.63)和正常甲状腺组织(5.93 ±0.88)中的相对表达量比较差异有统计学意义(F=205.30,P<0.05);MAPLC3在甲状腺乳头状癌的相对表达量为2.17±0.37,与甲状腺良性疾病组织(3.18 ±0.49)和正常甲状腺组织(3.55±0.53)中的相对表达量比较差异有统计学意义(F=91.53,P<0.05).结论 Bedim和MAPLC3蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达明显低于甲状腺良性疾病组织以及正常甲状腺组织,表达的差异有统计学意义.自噬相关基因在甲状腺癌组织中的表达下降,可能与甲状腺癌的发生、发展相关.     

自噬相关蛋白Beclin 1在胃癌组织中表达意义的Meta分析

目的:系统评价胃癌组织中自噬相关蛋白Beclin 1(BECN1)的表达及其与胃癌患者临床病理特征之间的相关性。方法:检索国内外相关数据库,收集2015年2月1日前发表的关于胃癌组织中BECN1的表达及其临床意义的研究,提取相关数据,采用Rev Man 5.3及Stata12.0软件进行Meta分析。结果:最终纳入了9个研究,其中包含胃癌患者1 620例。Meta分析结果显示,胃癌组织中BECN1的表达阳性率明显低于非胃癌组织(OR=0.11,95%CI=0.02~0.62,P=0.01);高分化胃癌组织的BECN1表达阳性率明显高于中低分化胃癌组织(OR=14.30,95%CI=5.94~34.4,P=0.000);无远处转移患者的胃癌组织中BECN1表达阳性率明显高于有远处转移者(OR=0.39,95%CI=0.22~0.70,P=0.001);BECN1表达与胃癌患者性别、年龄、肿瘤浸润深度、淋巴结转移及TNM分期等无关(均P0.05)。结论:BECN1在胃癌的发生和胃癌细胞分化中可能起重要作用,且BECN1可能参与了胃癌细胞转移能力的调控。     

自噬相关基因ULK1在前列腺癌中的表达及临床意义

目的研究人自噬相关基因ULK1在前列腺癌中的表达及其与前列腺癌临床病理特征、预后的关系。方法利用免疫组织化学的方法检测ULK1前列腺癌组织及良性前列腺增生组织中的表达水平,分析ULK1蛋白的表达水平与前列腺癌患者临床特征的关系。结果 ULK1阳性率在前列腺癌组中为62.3%,在良性前列腺增生组织中为83.3%,两者差异有统计学意义(P0.05)。前列腺癌Gleason评分高、临床分期晚患者的ULK1表达水平降低(P0.05),而不同年龄、血清前列腺特异抗原(PSA)水平、手术切缘阳性情况患者的ULK1表达水平无明显差异(P0.05)。ULK1表达阴性组前列腺癌患者的无生化复发率明显高于表达阳性者(P0.05)。结论 ULK1在前列腺癌组织中表达下调、表达水平较低者的临床预后较差。     

膀胱癌中自噬相关基因Beclin1和Bcl2 mRNA表达相关性及其临床意义

目的探讨自噬相关基因Beclin1和Bcl2 mRNA在膀胱癌组织中的表达和临床意义。方法采用分支DNA-液相芯片法检测53例膀胱癌组织标本和20例癌旁组织标本中Beclin1和Bcl2 mRNA的表达水平,并分析Beclin1和Bcl2 mRNA表达与膀胱癌临床病理的关系。结果膀胱癌组织中Beclin1和Bcl2 mRNA的高表达率分别为45.3%和26.4%,均显著低于癌旁正常组织的90.0%和55.0%,差异有统计学意义(P0.05)。在膀胱癌组织中,Beclin1mRNA的高表达率在不同病理分级、临床分期、生长方式以及淋巴结转移状态之间差异有统计学意义(P0.05);Bcl2 mRNA高表达率在不同病理分级、临床分期以及淋巴结转移状态之间差异有统计学意义(P0.05)。膀胱癌组织中Beclin1和Bcl2 mRNA两者的高表达率之间呈负相关(r=-0.287,P=0.037)。结论①Beclin1和Bcl2可能与膀胱癌的发生、发展密切相关。②Bcl2表达可能对Beclin1调控的细胞自噬起负调节作用,抑制Beclin1与Bcl2的结合可能是膀胱癌治疗的新思路。     

自噬蛋白p62在急性脊髓损伤大鼠脊髓组织中的表达

目的观察p62在早期急性脊髓损伤(SCI)模型大鼠脊髓组织中的表达变化,探讨p62在急性SCI的作用。方法将SD大鼠随机分为假手术组和造模后1、3、7、14 d组,每组6只。采用高空重物坠落击打方法造成大鼠SCI。采用Basso、Beattie、Bresnahan(BBB)评分法评估大鼠神经功能,取损伤的脊髓组织进行HE染色,观察病理学改变。通过实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法和免疫组织化学方法检测急性SCI后大鼠脊髓组织中p62的表达变化。结果造模后1、3、7、14 d组BBB评分分别为(2.00±0.89)分、(4.67±1.03)分、(7.83±0.75)分、(14.50±1.05)分,均低于假手术组(21.00分),差异有统计学意义(P 0.05)。造模后1、3、7、14 d组损伤的脊髓组织神经元和白质髓鞘发生肿胀,随时间的延长逐渐出现变性和坏死。造模后1、3、7、14 d组p62表达逐渐增加,并呈持续增长趋势。结论 p62在大鼠发生急性SCI后表达持续增加,提示p62在急性SCI后发挥一定作用。     

自噬相关分子Beclin1和LC3在糖尿病肾脏疾病患者血清中的表达及意义

目的探究自噬相关分子Beclin1、LC3在2型糖尿病肾脏疾病(DKD)患者血清中的表达水平及意义。方法纳入2016年1月至2017年6月期间于宜昌市第二人民医院就诊的2型DKD患者123例,按照尿白蛋白/肌酐比值(ACR)进行分组,分为尿白蛋白正常组(ACR30 mg/g)、微量白蛋白尿组(30 mg/gACR300 mg/g)、大量白蛋白尿组(ACR300 mg/g)。同时纳入48例体检健康者作为对照组。收集4组研究对象的一般资料,并且采集静脉血,检测ACR、尿微量白蛋白(UAlb)、Beclin1、LC3的水平。对各指标进行组间差异比较和相关性分析。结果对照组与尿白蛋白正常组的ACR比较,无统计学差异(P0.05);微量白蛋白尿组、大量白蛋白尿组ACR与尿白蛋白正常组比较显著升高,有统计学差异(P0.05)。4组间的UAlb比较,差异均有统计学意义(P0.05)。在Beclin1和LC3水平方面,4组间两两比较显示,差异均具有显著性(P0.05),其中对照组最高,大量白蛋白尿组最低。在相关性分析方面,不同组别的DKD患者血清中Beclin1与ACR、UAlb均呈反比,LC3与ACR、UAlb均呈反比。结论在DKD的发病过程中存在细胞自噬反应,自噬反应的增强可能会对DKD蛋白尿起到一定的抑制作用。     

核因子-κBp65及bcl-xL基因在胰腺癌组织中表达及意义

目的:探讨核因子-κB(NF-κBp65)及凋亡相关基因bcl-xL在胰腺癌组织中的表达及其意义.方法:应用免疫组织化学SABC法,检测52例胰腺癌组织中NF-κBp65及凋亡相关基因bcl-XL的基因蛋白产物,并分析其与胰腺癌临床病理的关系.结果:胰腺癌组织中NF-κ65及bcl-XL的表达率为63.5%和73.1%,显著高于胰腺正常组织(P＜0.01).NF-κΒp65的表达与肿瘤直径、ΤΝΜ分期、淋巴结转移有关,而与分化程度、病理类型无关.bcl-XL的表达与TNM分期有关,且与NF-κBp65呈显著相关.结论:NF-κBp65是一种与胰腺癌有关的癌蛋白,可能通过对bcl-xL的上调作用,进而影响胰腺癌的发生发展.     

缺氧调控人肝癌细胞核转录因子NF-κBp65/基质金属蛋白酶9表达相关机制的研究

目的探讨缺氧调控人肝癌细胞(HepG2)核转录因子NF-κBp65/基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达相关机制。 方法采用CoCl₂模拟低氧环境处理细胞,MTT法检测细胞的增殖,Western blotting法测定胞质蛋白NF-κBp65、MMP-9蛋白的表达。 结果低氧处理后胞质NF-κBp65、MMP-9的活性增加,当CoCl₂浓度在50~200 μmol/L时MMP-9表达呈现剂量依赖性,当CoCl₂浓度超过200 μmol/L后,MMP-9的表达不再增加;而NF-κBp65的表达继续增加,并且细胞迁移侵袭能力增加与MMP-9的表达呈正相关。 结论一定的低氧环境下肝癌细胞(HepG2)NF-κBp65、MMP-9的表达增加,并且细胞迁移侵袭能力增加与MMP-9的表达呈正相关。     

AEG-1、NF-κB在胃癌组织中的表达及临床意义

目的探讨AEG-1、NF-κB在胃癌组织中的表达情况及其与胃癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学法检测84例胃癌患者AEG-1、NF-κB表达情况,观察两个指标之间的相互关系及其与患者临床病理特征及预后的关系。使用SPSS16.0统计软件进行统计分析,计量数据使用均数±标准差(x珋±s)表示,采用方差分析进行多组间比较,两组间比较采用独立样本t检验;Spearman等级相关分析AEG-1、NF-κB表达的相关性,用COX回归分析模型进行多因素分析,P0.05为差异具有统计学意义。结果胃癌组织中AEG-1的阳性表达率为75.00%,其阳性表达的PU值明显高于癌旁胃组织(t=12.206,P0.01);其阳性表达与分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关(P0.05)。NF-κB在胃癌组织中的阳性表达率为80.95%,其阳性表达的PU值明显高于癌旁胃组织(t=11.997,P0.01);其阳性表达与分化程度、浸润深度、TNM分期、淋巴结转移有关(P0.05)。胃癌组织中AEG-1、NF-κB阳性表达呈正相关。COX模型多因素分析显示,AEG-1表达情况、淋巴结是否转移及临床TNM分期是影响胃癌术后生存率的指标中最为重要的3个指标(P0.05)。结论胃癌组织中可能存在AEG-1、NF-κB信号通路。检测胃癌组织中AEG-1、NF-κB的表达,有利于判断胃癌的发生、发展、浸润、转移并可评价胃癌的预后。     

自噬相关因子LC3及Beclin1在大鼠发育性髋关节发育不良早期退变关节软骨中的表达及意义

目的探讨自噬相关因子LC3及Beclin1在大鼠发育性髋关节发育不良早期退变关节软骨中的表达及意义。方法将80只新生大鼠随机分为模型组(40只)与对照组(40只),对模型组大鼠行双下肢并拢屈髋伸膝位固定以制造发育性髋关节发育不良模型。分别于2、4、6、8周龄时处死模型组和对照组大鼠,并测量这4个年龄段大鼠髋臼和股骨头的大小,通过苏木精-伊红(HE)染色及改良番红O-固绿染色观察髋关节软骨病理组织学改变,采用免疫组化及实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测软骨退变指标基质金属蛋白酶(MMP)-13、Ⅹ型胶原及自噬相关因子LC3和Beclin1在髋关节软骨中的表达与分布。结果模型组关节囊增厚,股骨头扁平,髋臼深度变浅,股骨头及髋臼长径与横径较对照组小。但随着年龄的增长,模型组股骨头及髋臼长径与横径仍呈增长趋势。6、8周龄时两组Mankins评分差异均有统计学意义(P0.05)。2周龄时模型组关节软骨中Ⅹ型胶原表达量与对照组无明显差异,4、6周龄时模型组Ⅹ型胶原表达量均高于对照组(P0.05);模型组关节软骨中MMP-13、LC3在各年龄段的表达量均高于对照组(P0.05);2、4和6周龄时模型组Beclin1表达量高于对照组(P0.05)。结论自噬在早期髋关节发育不良的髋臼软骨退变中起着重要作用。     

阿托伐他汀钙对缺血/再灌注大鼠肾组织SOCS-1及NF-κBp65表达的研究

目的：探讨阿托伐他汀钙对缺血/再灌注大鼠肾组织SOCS-1及NF-κB表达的影响。方法：健康雄性Wist-ar大鼠54只随机分成假手术组（n=18）、模型组（n=18）及干预组（n=18）,组内再分为成IR6h、IR24h及IR48h组（每小组6只）。采用夹闭双侧肾动脉的方法制作模型,干预组于术前1周给予阿托伐他汀钙（ATO）10mg·kg-1·d-1灌胃。检测大鼠血清BUN、Scr水平,行HE染色,免疫组化法检测大鼠肾组织SOCS-1及NF-κBp65蛋白表达。结果：（1）模型组中BUN、Scr浓度均于再灌注6h起逐渐升高,24h达高峰,48h回落,但仍维持较高水平;干预组各时间点BUN、Scr水平也显著高于同期假手术组（P〈0.01）,但低于同期模型组（P〈0.01）;（2）干预组中IR24h的SOCS-1阳性表达较模型组明显增多（P〈0.01）,而NF-κBp65阳性表达较模型组明显降低（P〈0.01）,且病理损伤减轻。结论：阿托伐他汀钙可能通过调节SOCS-1及NF-κBp65的表达,抑制炎症反应,从而对缺血/再灌注肾组织有保护作用。     

Smad4和NF-κBp65蛋白在肝癌组织中的表达及意义

目的:探讨Smad4和NF-κBp65蛋白在肝癌组织中的表达及意义。方法:选取肝癌患者100例肝组织标本(观察组),同时选取正常肝组织标本42例作为对照组,采用免疫组化染色法检测Smad4和NF-κBp65蛋白表达。结果:观察组Smad4蛋白阳性表达率为21.00%,明显低于对照组的76.19%(P0.05);而NF-κBp65蛋白阳性表达率为73.00%,明显高于对照组21.43%(P0.05);有淋巴结转移者Smad4蛋白阳性表达率为5.88%,明显低于无淋巴结转移者的28.59%(P0.05);肿瘤直径5cm者NF-κBp65蛋白阳性表达率为88.71%,明显高于肿瘤直径≤5cm者的47.37%(P0.05);Smad4和NF-κBp65蛋白表达呈负相关(r=-0.350,P0.05)。结论:肝癌组织中Smad4表达降低,NF-κBp65蛋白表达升高,相关表达异常与淋巴结转移、肿瘤直径具有一定的相关性。     

NF-κBp65、VEGF在肝癌血管生成中的作用与相关性研究

目的 通过对肝细胞癌(HCC)组织、癌旁组织、肝硬化组织及正常肝组织中核转录因子-κBp65(NF-κBp65)、血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达和微血管密度(MVD)的检测,探讨NF-κBp65、VEGF的蛋白表达与HCC新生血管生成的关系及相关性,阐述二者在HCC血管生成中的机制.方法 选用45例HCC组织和32例癌旁肝组织、15例肝硬化组织、10例正常肝组织标本作对照,采用免疫组化法(SABC)检测其NF-κBp65、VEGF的表达和计数MVD值,并结合患者的临床病理指标进行统计学分析.结果 HCC中NF-κBp65、VEGF的表达和MVD值显著高于癌旁肝组织、肝硬化组织和正常肝组织(P＜0.05);HCC组织中NF-κBp65、VEGF阳性表达组显著高于阴性表达组(P＜0.05);NF-κBp65、VEGF的表达在有血管侵犯组显著高于无血管侵犯组(P＜0.05);Spearman等级相关分析NF-κBp65与VEGF表达之间存在正相关性(r=0.72,P＜0.05).结论 HCC中NF-κBp65、VEGF的表达与肝癌血管生成有关;HCC组织中NF-κBp65的表达与VEGF存在相关性,它们之间在肝癌血管生成中可能存在调节关系.     

自噬相关基因微管相关蛋白1轻链3-β在肝癌中的表达及意义

我们通过检测肝细胞肝癌(HCC)组织中微管相关蛋白1轻链3-β(简称LC3,MAP1LC3-Ⅱ)蛋白的表达,探讨其相互关系. 一、材料与方法 1.材料:选取2005年1月至2010年12月山西医科大学第一临床医学院62例肝癌患者组织标本,并随机采集癌旁组织41例(距肿瘤边缘1～2 cm)及正常肝组织30例(距离肿瘤边缘＞6 cm)作为对照组.LC3定位于细胞质、部分胞核内,以出现棕黄色颗粒为阳性细胞.     

自噬相关蛋白Atg5和LC3在婴幼儿血管瘤中的表达

目的研究自噬相关蛋白在婴幼儿血管瘤中的表达,初探自噬在婴幼儿血管瘤发生发展中的作用。方法根据患儿临床表现判断其瘤体处于增殖期还是消退期;将石蜡包埋的婴幼儿血管瘤(IH)标本经HE染色后,于光学显微镜下观察不同时期IH内血管内皮细胞的增生程度、形态;切片经TUNEL法染色后,根据标记凋亡细胞计数比较不同时期IH凋亡率差异;免疫组化染色观察不同时期IH中Atg5的表达水平差异;免疫荧光标记法分析不同时期IH中LC3-Ⅱ的表达水平变化。结果 Tunel凋亡检测显示,消退期IH细胞凋亡率明显高于增殖期IH(P0.01);免疫组化结果显示,增殖期IH中Atg5的表达水平高于消退期IH(P0.01);免疫荧光显示增殖期IH中的LC3-Ⅱ阳性细胞多于消退期IH。结论消退期IH凋亡细胞比增殖期明显增多;增殖期自噬活性较强,消退期自噬下调;自噬的下调有可能促进增殖期IH向消退期转化。     

NF-κB p65在人难愈合创面肉芽组织及增生性瘢痕中的表达和意义

目的：本研究拟观察NF-κB信号传导通路关键基因p65在人难愈合创面肉芽组织、不同时间阶段的增生性瘢痕以及正常皮肤标本的表达水平是否存在差异及关系。方法：收集临床标本40例为实验组,其中难愈合创面肉芽组织（A组）、半年内增生性瘢痕（B组）、半年至1年增生性瘢痕（C组）、一年以上增生性瘢痕（D组）组织各10例,收集正常皮肤组织标本8例为对照组（E组）。采用组织免疫化学方法、实时荧光定量RT-PCR和Westernblot技术分析检测各标本中NF-κBp65表达。结果：免疫组化SP法染色B、C、D组中表达阳性,尤其是在B组中皮肤基底细胞层细胞阳性表达尤为明显。RT-PCR检测中,各组间均无显著的统计学意义（P〉0.05）。但从各组均数来看,B、C、D组处于较高水平（B组为0.44,C组为0.46,D组为0.47）,数值相近,并且有高于E组和A组的趋势（A组为0.38,E组为0.30）。Western blot检测中B、C、D组的蛋白表达水平明显要高于A组和E组（P〈0.05）。结论：①在难愈合创面肉芽组织中NF-кBp65表达水平较低,表明难愈合创面肉芽组织中细胞凋亡增强,抗凋亡水平受到抑制,组织难以愈合;②在增生性瘢痕早期（半年内）中,NF-кBp65的表达明显增强,表明在增生性瘢痕早期瘢痕组织凋亡作用降低,抗凋亡作用明显增强,瘢痕组织表现出明显的增生作用;NF-κBp65皮肤基底细胞层细胞阳性表达尤为明显,表明NF-кBp65可能在增生性瘢痕增生中发挥着重要作用,对增生性瘢痕凋亡有着强有力的抑制作用,促进了增生性瘢痕增生;③在增生性瘢痕后期（半年至1年）,NF-кBp65的表达仍高于正常皮肤,表明在增生性瘢痕后期细胞凋亡水平较低,抗凋亡水平较高,仍有组织增生;④在增生性瘢痕成熟期（1年后）,NF-кBp65表达水平接近正常皮肤。瘢痕组织凋亡作用增强,增生减弱,变得平坦和消退。     

自噬在肝癌中的表达及相关机制研究进展

自噬是广泛存在于真核细胞生物中的一种溶酶体依赖性的降解系统,它通过降解长寿命蛋白和破损的细胞器而在细胞中发挥一系列生物功能,这对保持细胞内环境的稳定有很大的帮助.但在许多生理及病理应激情况下(诸如营养缺乏、内质网应激等)自噬会被过分激活而导致细胞的死亡,这种死亡方式被称为Ⅱ型程序性细胞死亡,又称自噬性细胞死亡[1].自噬与肿瘤、免疫系统疾病、病原体感染及多种神经退行性疾病等许多疾病有密切的关系.     

自噬相关基因在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义

目的本研究通过对肾透明细胞癌自噬相关基因蛋白水平的检测,分析其与临床病理资料的关系。方法 Western blot检测肾透明细胞癌中自噬相关基因LC3和Beclin1的蛋白表达量。结果 Western blot检测显示肾透明细胞癌中自噬相关基因LC3和Beclin1的蛋白表达水平均低于癌旁组织组(P0.05);低分化组和中分化组LC3的蛋白表达水平比高分化组低(P0.05);进展期和转移性肾癌组比局限性肾癌组LC3的蛋白表达水平低(P0.05)。结论自噬在肾透明细胞癌中的低表达水平可能与肾透明细胞癌的发生、发展及转移有关。