99Tcm-抗人膀胱癌人-鼠嵌合抗体在荷人膀胱癌裸鼠的放射免疫显像

目的　研究99Tcm 抗人膀胱癌人 鼠嵌合抗体ch BDI对膀胱癌细胞的体外结合性能、在荷人膀胱癌裸鼠中的体内分布及对肿瘤的靶向定位性能。方法　用改进的Schwarz方法进行99Tcm 标记 ,经SephadexG 5 0柱分离纯化。用纸层析法测定标记率与放化纯 ;用Lindmo的方法测定免疫活性分数 ;用Scatchard作图法求得亲和常数。荷人膀胱癌裸鼠静脉注射99Tcm ch BDI 11.1MBq(30 μg) ,分别于 2、6、2 0及 2 4h行放射免疫显像。用感兴趣区 (ROI)技术获得全身和肿瘤放射性计数及肿瘤与对侧正常组织 (T NT)的放射性比值。 2 4h显像后处死裸鼠 ,测定体内放射性分布 ,计算每克组织百分注射剂量率 (%ID g)及T NT比值。结果　99Tcm ch BDI标记率为 (6 6 .5± 7.3) % ,放化纯 >90 % ,免疫活性分数为 76 % ,亲和常数为 3.5 6× 10 9L mol。荷人膀胱癌裸鼠放射免疫显像结果示 ,静脉注射后 6h肿瘤显影清晰 ,随时间延长更清晰。全身放射性计数随时间延长迅速降低 ,肿瘤放射性计数下降缓慢 ,T NT比值随时间增高。荷瘤裸鼠体内分布结果示 ,静脉注射后 2 4h肿瘤 %ID g为 17.4 ,除肾脏外 ,肿瘤与其他正常组织有很高的T NT比值 ,与脑、肌肉、小肠壁、骨骼及心壁的T NT比值分别为 136 .0、5 5 .1、39.3、2 9.7及 2 7 9。结论　ch BDI具有良     

^131I—抗HBxAg人／鼠嵌合抗体在裸鼠人肝癌模型定位的初步研究

在抗ＨＢｘＡｇ人／鼠嵌合抗体基因构建及表达成功后，进行了放射免疫显像研究，以评价在其在动物模型中的导向活性。＾１３１Ｉ标记嵌合抗体，经腹腔注射１，５，７天后行裸鼠人肝癌模型放射免疫显像，于第７天作组织分布测定，并以单区抗体及原鼠源抗体对照进行比较，结果显示实验组在标记抗体注入后２天即获肿瘤阳性显像，第７天更清晰，此时嵌合抗体，单区抗体，抗ＨＢｘ单抗及对照组的瘤／肝放射性比值分别为２．８，２．４４，     

抗人结肠癌单克隆抗体及其片段 在荷瘤裸鼠体内的动态分布

肿瘤的定位尤其是手术中肿瘤转移灶的确定对肿瘤的治疗至关重要。将标记抗体注入体内 ,术中用手持式γ探测仪探测肿瘤范围及转移灶 ,以彻底清除肿瘤 ,称为放射免疫引导外科手术(ＲＩＧＳ)。而提高放射免疫显像 (ＲＡＩＤ)和ＲＩＧＳ的效率一直是人们关注的研究课题。本研究观察了1 2 5 Ｉ标记ＣＬ 3全抗体及其Ｆ(ａｂ′) 2 片段注入荷瘤裸鼠体内后第 1、3、7ｄ在 12种器官和组织中的动态分布情况 ,比较了每克肿瘤组织结合标记抗体量占注入量的百分数 (%ＩＤ ｇ)和Ｔ ＮＴ比值的变化 ,现报道如下。材料与方法1 单克隆抗体 (ＭｃＡｂ )ＣＬ 3…     

抗癌胚抗原单链抗体在荷人结直肠癌裸鼠体内的分布和放免显像

目的研究１２５Ｉ、１３１Ｉ标记抗癌胚抗原单链抗体（ＣＥＡＳｃＦｖ）在荷人结直肠癌裸鼠体内的分布和定位显像。方法采用Ｉｏｄｏｇｅｎ法制备１２５ＩＣＥＡＳｃＦｖ和１３１ＩＣＥＡＳｃＦｖ。２０只荷人结直肠癌裸鼠,腹腔注射１２５ＩＣＥＡＳｃＦｖ后１、３、６和２４ｈ进行裸鼠的体内分布研究,对３只荷人结直肠癌裸鼠腹腔注射１３１ＩＣＥＡＳｃＦｖ后１、３、６和２４ｈ进行裸鼠的定位显像研究。结果在荷人结直肠癌裸鼠腹腔注射１２５ＩＣＥＡＳｃＦｖ后３ｈ,肿瘤与血之比为１２８,６ｈ达５５０,２４ｈ达到最高,为６４６。腹腔注射１３１ＩＣＥＡＳｃＦｖ后,６ｈ肿瘤部位放射性明显浓聚,２４ｈ本底明显降低,肿瘤呈放射性热区。结论ＣＥＡＳｃＦｖ能提高靶／非靶组织比值,缩短显像时间,改善图像质量。     

~(99m)Tc标记抗人肝癌单抗Fab片段修饰物在荷人肝癌裸鼠模型中的放射免疫显像

研究抗人肝细胞癌单克隆抗体Ｆａｂ片段修饰物的９９ｍＴｃ标记方法。用２亚氨基噻吩盐酸盐（ＩＴ）修饰ＨＡｂ１８Ｆａｂ片段。用９９ｍＴｃＧＨ转络合法标记ＩＴＦａｂ，测定标记物的放化纯度及生物活性，进行荷人肝癌裸鼠模型的放射免疫显像。结果：纸层析法测得标记率为５０％～８０％，体外细胞结合法测定免疫活性为３０％～４０％。荷人肝癌裸鼠模型尾静脉注入９９ｍＴｃＩＴＦａｂ后４～８小时，肿瘤区放射性有浓聚，１２～２２小时浓聚最多，Ｔ／ＮＴ值为５１８～７４８。因此，９９ｍＴｃＩＴＦａｂ可特异性浓聚于荷人肝癌裸鼠模型中，可能成为肝癌放射免疫显像的有效显像剂。     

单克隆抗体L4B4在荷人膀胱移行细胞癌裸鼠中的放射免疫显像

目的：研制与膀胱移行上皮癌（ＴＣＣ）特异结合的单克隆抗体Ｌ４Ｂ４。方法：用免疫组化法评价Ｌ４Ｂ４，并对荷人ＴＣＣ裸鼠行放射免疫显像（ＲＩＩ）。结果：免疫组化研究显示：Ｌ４Ｂ４对ＴＣＣ具有很高的特异性（２３／２４），而很少与其他恶性肿瘤（２／２４）及良性肿瘤（０／７）相结合。荷瘤裸鼠ＲＩＩ研究显示：注入１２５Ｉ－Ｌ４Ｂ４后第３天及第５天可清晰显示肿瘤影像，第５天的Ｔ／ＮＴ＞４。结论：Ｌ４Ｂ４可在膀胱癌的ＲＩＩ研究中发挥作用，值得进一步研究。     

99 Tcm-抗人粒细胞单克隆抗体对兔炎症的放射免疫显像

目的评价99Tcm-抗人粒细胞单克隆抗体(McAb) SZ-102在实验性炎症家兔放射免疫显像中的价值.方法以2-亚氨基噻吩盐酸盐(2-IT)修饰SZ-102,99Tcm-葡庚糖酸钠(GH)配体交换法标记SZ-102.兔左下肢炎症模型经耳缘静脉注入99Tcm-SZ-102,行SPECT显像,99Tcm标记非特异性鼠IgG作阴性对照.显像完毕处死动物,测定99Tcm-SZ-102离体炎症肌肉/血液和对侧正常肌肉/血液放射性比值.结果 99Tcm-SZ-102对家兔炎症部位显影清晰,其最佳显像时间为注射后2～4 h,而99Tcm标记非特异性鼠IgG对家兔炎症部位未能显影.血液半清除时间99Tcm-SZ-102 T1/2α为(0.10±0.04) h,T1/2β为(3.19±0.41) h.99Tcm-SZ-102显像离体炎症肌肉/血液和对侧正常肌肉/血液放射性比值分别为0.22±0.02和0.02±0.01.结论 99Tcm-SZ-102具有活体内炎症定位导向能力,显像时间短,对隐匿性炎症或肿瘤感染病灶的诊断有潜在的临床价值.     

抗人BlyS嵌合抗体的研制及功能鉴定

目的:在具有中和功能的母本抗体基础上,进行人源化改造,获得具有相同功能的嵌合抗体.方法:本研究以一株具有中和活性的抗人BlyS鼠单抗(B20)为母本,将抗人BlyS鼠单抗B20的轻、重链可变区基因分别插入到含有人κ链和IgG1重链恒定区基因的真核表达载体中,构建了人-鼠嵌合抗体表达载体,转染真核细胞,通过ELISA、RT-PCR、免疫印迹、体外中和实验分别对嵌合抗体(CB20)进行检测.结果:RT-PCR结果显示,转染后细胞系有人-鼠嵌合抗体mRNA的转录;ELISA、免疫印迹实验鉴定表明,该嵌合抗体与人BlyS特异性结合;体外中和实验表明,此抗体能中和BlyS对B淋巴细胞促增殖效应.结论:成功地构建人-鼠嵌合抗体CB20.     

放射性核素唾液腺显像及抗核抗体联合检查在干燥综合征中的诊断价值

目的 探讨放射性核素唾液腺动态显像及抗核抗体联合检查在干燥综合征中的诊断价值。 方法 对临床已确诊的30例原发性干燥综合征患者分别进行放射性核素唾液腺动态显像及抗核抗体联合检查,回顾性研究其在该病中的诊断价值。 结果 30例干燥综合征患者中,抗核抗体检查阳性患者19例,占63.3%,阴性11例,占36.7%;唾液腺动态显像阳性患者24例,占80%,阴性6例,占20%;唾液腺动态显像与抗核抗体联合检查阳性率为100%（30/30）,显著高于放射性核素唾液腺动态显像（P＜0.05）及抗核抗体检查（P＜0.01）。 结论 唾液腺动态显像及抗核抗体联合检查在干燥综合征筛查、诊断及评价唾液腺功能损伤程度等方面具有非常重要的临床价值。     

丙型肝炎病毒核心蛋白人源抗独特型单链抗体在大肠杆菌中的表达

目的 在大肠杆菌中表达丙型肝炎病毒核心蛋白人源抗独特型单链抗体。方法 采用噬菌体表面展示技术,将丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白单克隆抗体固相包被于Nunc板。从人源噬菌体单链可变区抗体库中经过3轮“吸附-洗脱-扩增”的筛选,获得结合活性较强的人源HCV核心蛋白抗独特型(抗-Id)scFv阳性克隆。从阳性克隆中提取质粒,经SfiI／Not I酶切鉴定后,亚克隆到pCANTAB5E载体,转化大肠杆菌XL1-Blue,应用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达可溶性的HCV核心蛋白抗独特型单链可变区抗体。酶联免疫吸附法(ELISA)证实表达的HCV核心蛋白抗-Id scFv具有与HCV核心蛋白单克隆抗体反应的特异性。对转化的大肠杆菌XL1-Blue上清中表达的HCV核心蛋白抗-Id scFv进行硫酸铵沉淀,并进行SDS-PAGE电泳。结果 筛选得到的HCV核心蛋白抗-Id scFv片段基因由774bp组成。SDS-PAGE电泳表明,大肠杆菌XL1-Blue中表达的可溶性HCV核心蛋白抗-Id scFv分子量约28kD。结论 HCV核心蛋白抗-Id scFv与HCV核心蛋白抗-Id scFv单克隆抗体具有较强的结合活性和特异性。HCV核心蛋白抗-Id scFv的筛选和表达成功,为今后HCV核心蛋白抗-Id scFv的研究和应用奠定了基础。