乌司他丁对急性肾脏创伤大鼠MMP-2/TIMP-2和NF-κB的调控作用

目的:观察大鼠急性肾脏创伤中MMP-2、TIMP-2和NF-κB的表达,探讨鸟司他丁对三者表达的影响和对创伤肾脏的保护机制.方法:用自由落体生物撞击仪撞击大鼠脊肋区,复制创伤动物模型:将66只清洁级Wistar大鼠随机分为3组:对照组(C)6只、单纯创伤组(TRA)30只、创伤后注射鸟司他丁组(UTI)30只.根据创伤后时间的不同将后两组分别分为5个时相点(1、6、12、18、24 h),每个时相点6只大鼠.联合应用组织芯片和免疫组织化学法检测各组肾脏中MMP-2/TIMP-2和NF-κB的表达.结果:TRA组:MMP-2、NF-κB在创伤后1h开始表达且显著高于对照组(P<0.05,P<0.01),两者分别在12、6 h表达最强,以后逐渐下降;UTI组:MMP-2、NF-κB分别在18、12 h表达最强且高于对照组(P<0.01),但已明显低于TRA组同期的表达(P<0.01,P<0.05);TIMP-2在该组的表达显著增强,于创伤后6、12、18 h明显高于对照组和TRA组(P<0.01,P<0.05).结论:肾创伤后NF-κB、MMP-2在肾组织中的表达增强,但TIMP-2表达升高不明显;乌司他丁能够通过抑制NF-κB、MMP-2在肾组织中表达和调节MMP-2/TIMP-2的平衡发挥肾保护作用.     

基质金属蛋白酶9和组织金属蛋白酶抑制剂1在大鼠肾脏机械性损伤后的表达

目的 探讨大鼠肾脏机械性损伤后肾组织基质金属蛋白酶9(MMP-9)和组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)的表达及意义.方法 36只Wistax大鼠随机分为对照组和创伤组.采用自由落体生物撞击仪撞击大鼠脊肋角复制创伤动物模型.用组织芯片技术及免疫组织化学方法检测各组大鼠创伤后1、6、12、24和36 h肾组织中MMP-9和TIMP-1蛋白的表达.结果 对照组肾组织中MMP-9蛋白表达微弱,创伤组MMP-9表达在创伤后1 h开始增强.6 h迅速增加并达高峰(P<0.05),以后逐渐下降并接近正常.创伤组各时段TIMP-1蛋白表达与对照组相比,差别无统计学意义(P>0.05).结论 大鼠肾脏机械性损伤后MMP-9是参与肾脏损伤的重要因素之一.     

雷公藤诱导急性肾损伤大鼠肾脏热休克蛋白70的表达

目的:探讨雷公藤诱导的急性肾损伤大鼠模型中肾脏热休克蛋白70(HSP70)的分布及表达规律。方法:150只大鼠随机分为对照组(A)和低剂量组B(雷公藤20mg/(kg·d))以及高剂量组C(雷公藤40mg/(kg·d))一次性灌胃,将对照组和实验组分别于给药后6、12、24、36、48小时各取10只大鼠剖腹取肾,光镜、电镜下观察肾脏的病理变化,通过免疫组化法观察HSP70的表达情况。结果:HSP70在肾皮质肾小球周围近曲小管上皮细胞胞浆内分布增加,其表达量在给药后6h已经升高,12h达到高峰,48h仍高于正常对照组。同一时相点高剂量组较低剂量组HSP70的表达量高(P<0.01)。结论:中药雷公藤一次性大剂量给药即可引起急性肾损伤,在损伤的早期HSP70的表达亦显著增加,提示肾毒性药物早期即可引起肾小管上皮细胞的应激反应,可能与细胞的自我保护机制启动有关。     

大鼠肾脏损伤早期HIF-1α、PPAR-γ的表达及其对肾脏的保护机制

目的探讨经体表创伤后肾脏组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)表达的变化,及创伤后肾脏损伤与修复的作用机制。方法采用自由落体生物撞击仪撞击大鼠脊肋区复制创伤动物模型。实验大鼠分为5组,包括非创伤对照组,创伤后1、6、12、24 h组。采用免疫组织化学方法进行HIF-1α、PPAR-γ染色。结果肾脏创伤后1、24 h HIF-1α表达增强,分布于皮质远曲小管、肾盏旁小管、髓质小管;6、12 h表达减弱,局限于肾盏旁小管、髓质外带小管。各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。PPAR-γ1、24 h呈阳性表达,分布于髓质小管上皮细胞;6、12 h呈阴性表达,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HIF-1α、PPAR-γ可能参与了肾脏创伤后缺血、缺氧、再生、修复的过程。     

外源性肾上腺素质素对大鼠肾脏创伤早期肾脏和下丘脑肾上腺素质素表达的影响

目的观察大鼠肾脏创伤早期肾脏和下丘脑ADM表达的变化及外源性ADM对二者表达的影响。方法将健康成年普通级Wistar大鼠随机分为对照组、创伤组(32只);预防组(32只)和治疗组(32只)4组,后3组均采用自由落体打击仪直接打击大鼠脊肋区制作创伤模型,两给药组分别于创伤前后10min腹腔注射ADM(0.1nmol/kg)。平均分为四批于创伤后1、6、12、24h采用快速心脏采血法处死。迅速解剖动物提取肾脏及下丘脑标本,中性福尔马林固定,免疫组织化学染色,观察ADM在肾脏及下丘脑组织中的表达,并进行统计学分析。结果肾脏ADM阳性表达:预防组于伤后1h阳性表达,其阳性结果随时间呈上升趋势,与创伤组及对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组于伤后1h、6h强阳性表达,并随时间呈下降趋势,至伤后24h恢复正常水平,差异有统计学意义(P<0.05)。创伤组ADM呈低阳性表达,以1h及12h为著,24h基本恢复正常,差异有统计学意义(P<0.05)。下丘脑ADM阳性表达:治疗组阳性表达趋势基本同肾脏ADM阳性表达趋势,与创伤组及对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。预防组于6h及24h呈强阳性表达;12h阳性表达结果明显降低且达最低峰,差异有统计学意义(P<0.05)。创伤组于6h阳性表达结果明显降低,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论下丘脑ADM对肾脏ADM的表达有一定的上调作用,ADM通过局部及全身的正负反馈调节以维持机体内环境的相对稳定和正常生理活动。     

热应激大鼠早期炎性因子水平及乌司他丁干预的效果

目的 热应激(heat stress)是机体暴露在热环境中产生的一系列非特异性全身反应,多种细胞因子在热应激发生发展的病理过程起重要作用.文中探讨热应激大鼠早期外周血中细胞因子TNF-α、IL-1、IL-6、IL-10的表达及蛋白酶抑制剂乌司他丁(ulinastatin)对热应激的干预作用. 方法 将SD大鼠随机分为3组:正常对照组、热应激组、乌司他丁干预组,每组10只.热应激组、乌司他丁干预组均建立热应激大鼠模型,各组在6、12、24h后取动脉血标本,用ELISA法测定TNF-α、IL-1、IL-6、IL-10水平,同时记录体温、心率、动脉收缩压(systolic arterial pressure, SAP)和呼吸频率. 结果热应激组大鼠各时间点血清TNF-α、IL-1、IL-6、IL-10水平均高于正常对照组(P<0.01),其中IL-10水平在各时间点逐渐降低.乌司他丁干预组大鼠各时间点血清TNF-α、IL-1、IL-6水平均低于热应激组(P<0.01),而IL-10水平在各时间点均高于热应激组(P<0.01).乌司他丁干预组大鼠体温、心率、呼吸频率均低于热应激组(P<0.01). 结论热应激大鼠在24h内促炎细胞因子水平明显增加,全身炎症反应明显,24h后促炎细胞因子水平呈下降趋势.乌司他丁早期干预可降低TNF-α、IL-1、IL-6水平,提高IL-10水平,具有双相调节作用.     

环胞霉素A诱导急性肾损伤大鼠肾脏热休克蛋白70的表达

目的 探讨环胞霉素A(CsA)诱导的急性肾损伤大鼠模型中肾脏热休克蛋白70(HSP70)的分布及表达规律.方法 150只大鼠随机分为对照组A和实验组B[CsA 2mg/(kg·d)注射],实验组C[CsA 5mg/(kg·d)注射],将对照组和实验组分别于注射后1、3、6、12、24h各取10只大鼠剖腹取肾,光镜、电镜下观察肾脏的病理变化,通过免疫组化法观察HSP70的表达情况.结果 HSP70在肾皮质肾小球周围近曲小管上皮细胞胞浆内分布增加,其表达量在注射后1h已经升高,3h达到高峰,24h仍高于正常对照组.同一时相点C组较B组HSP70的表达量差异显著(P＜0.01).结论 一次小剂量注射CsA即可引起急性肾损伤,在损伤的早期HSP70的表达亦显著增加,提示肾毒性药物早期即可引起肾小管上皮细胞的应激反应,可能与细胞的自我保护机制启动有关.     

HSP70对大鼠IL-1β性发热及脑内 AVP含量的影响

目的:观察热休克蛋白HSP70对大鼠IL-1β性发热反应的影响,并研究其与脑内精氨酸升压素(AVP)含量变化的关系,以探讨HSP70是否参与热限作用.方法:(1)60只大鼠随机分为热应激(HS)处理组(A组)和经热应激处理前10 min加用放线菌酮(CHX)组(B组),Western 印迹法观察热应激处理后0、4、8、12、16 h各自下丘脑内HSP70的表达水平.(2)24只大鼠随机分为4组:①HS IL-1β组,经热应激处理后,在HSP70表达最高时,向其下丘脑视前区(POA)注射IL-1β;②CHX HS IL-1β组,于应激前10 min腹腔注射CHX;③IL-1β组,仅注射IL-1β;④对照组,仅注射1 μl生理盐水.连续观察体温变化指标8 h,绘制体温变化曲线.(3)30只大鼠按方法(2)分为4组及HS组(只进行热应激处理,不注射IL-1β);测定体温变化曲线中体温高峰时各自脑内AVP含量.结果:(1)各时间点A组HSP70水平均显著高于B组(P<0.01),A组4、8、12、16 h的HSP70表达水平显著高于0 h,其中12 h的表达水平最高(P<0.01).(2)IL-1β注射后15 min,体温开始升高,120 min达发热高峰.HS IL-1β组各时间点的体温变化指标与IL-1β组有显著差异(P<0.05,P<0.01),高表达的HSP70能明显抑制IL-1β性发热的幅度.单独注射IL-1β 120 min时VSA中AVP的含量明显高于对照组和HS IL-1β组(P<0.05),而与CHX HS IL-1β组无显著差异.各组间大鼠体温高峰期下丘脑中AVP的含量均无显著变化.结论:高水平表达的HSP70能抑制IL-1β性发热;HSP70对IL-1β性发热的抑制作用是否与VSA中AVP含量的变化有关,是否参与了大鼠的热限作用仍待进一步探讨.     

甲状腺激素T3减轻小鼠再灌注肾脏炎症反应

目的：甲状腺激素（T3）预处理通过调控细胞因子白介素-10（IL-10）、内源性白介素-1受体阻滞剂（IL-1Ra）的表达,减轻小鼠缺血再灌注肾脏中性粒细胞浸润所带来的炎症反应。方法：雄性C57BL/6小鼠随机分为4组：正常对照组（假手术）、单纯IR组（仅行肾脏IR）、T3+IR组（肾脏IR前48h T3预处理）、0.1N NaOH+IR组（肾脏IR前48h 注射等量溶剂）,建立肾脏IR模型。各组于再灌注后24h取血标本进行肾功能检测(肌酐、尿素氮),取肾脏标本采用PAS染色评估肾脏组织形态学改变,MPO染色评估中性粒细胞浸润情况,逆转录-聚合酶链反应（Real-Time PCR）检测肾脏再灌注后1h、3h、6h、12h、24h五个时间点的IL-10、IL-1Ra mRNA的表达情况。结果：T3干预组24h血肌酐比单纯IR组低(P<0.05);T3干预组肾脏病变比单纯IR组轻(P<0.05);MPO染色示：与单纯IR组相比较,T3干预组中性粒细胞浸润明显减少(P<0.05);再灌注后12h,T3干预组IL-10 、IL-1Ra表达高于单纯IR组,差异有统计学意义（P<0.05）;而单纯IR组和0.1N NaOH+IR组在上述各项指标的变化上无明显差异。结论：T3能在肾脏再灌注的晚期阶段发挥作用,促进IL-10、IL-1Ra的表达,减轻中性粒细胞浸润所带来的炎症反应,改善肾功能。     

乌司他丁对脓毒症急性肺损伤大鼠热休克蛋白70表达的影响

目的研究热休克蛋白(HSP)70在脓毒症急性肺损伤(ALI)大鼠中的表达变化及应用乌司他丁(UTI)进行干预,并探讨作用机制。方法 39只Wistar大鼠分为假手术(sham)组(9只)、ALI组(15只)和UTI组(15只)。大鼠盲肠结扎穿孔术后6、12、24 h分别处死大鼠。检测血气分析、肺组织湿/干重比(W/D),光镜下观察肺组织形态学变化,应用实时荧光定量-聚合酶链反应(realtime-PCR)测定肺组织HSP70 mRNA的表达。结果与ALI组比较,UTI组PaO2显著改善(P<0.05),肺W/D比值降低(P<0.05),苏木精-伊红染色显示肺组织损伤减轻。各时间点肺组织HSP70 mRNA表达明显上升(P<0.05)。结论 HSP70在脓毒症ALI大鼠中的表达上调,UTI可能通过上调HSP70的表达改善脓毒症肺组织的损伤。     

乌司他丁减轻老年大鼠髋部骨折后肺损伤程度的实验研究

目的 探讨乌司他丁减轻髋部骨折后肺损伤的作用及相关机制。方法 将24只10月龄SD大鼠随机分为对照组、实验组及干预组,每组8只,后2组制成左侧髋部骨折,其中干预组在造模前给予尾静脉注射乌司他丁50 000 U/kg。造模24 h后处死各组大鼠,检测各组实验动物血清中线粒体DNA（mtDNA）水平,肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）水平,肺组织中toll样受体-9（TLR9）、转录因子NF-κB表达水平,肺组织干湿质量比（W/D）、病理评分情况。结果 实验组大鼠血清中mtDNA水平,肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6水平,肺组织中TLR9、NF-κB表达水平,肺组织W/D、病理评分情况均高于对照组（ P<0.05）;干预组大鼠血清中mtDNA水平,肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6水平,肺组织中TLR9、NF-κB表达水平,肺组织W/D、病理评分情况均较实验组下降（ P<0.05）,但均未恢复至对照组水平（ P<0.05)。结论 乌司他丁可能通过减少髋部骨折释放的mtDNA,进而降低肺组织中TLR9、NF-κB表达及下游的炎症因子水平,最终达到保护肺功能的作用。     

妥泰对脑缺血再灌注后HSP70表达的影响和脑保护作用的研究

目的　探讨高血压大鼠急性脑缺血再灌注后妥泰对HSP70 表达的影响及其脑保护作用。方法　将大鼠制成高血压模型 ,喂养 2个月。再次手术将大鼠制成大脑中动脉闭塞 (MCAO)模型 ,MCAO时间均为 2h ,并随机分为三组 :妥泰干预组、缺血再灌注组和假手术组。各组再分为测体积组和HSP70 组。再灌注时点 :测体积组为 6h ;HSP70 组为 1d。将测体积组鼠脑经TTC染色 ,用计算机病理图象分析仪测量并计算梗死体积比。测HSP70 组鼠脑经免疫组化染色后用病理图象分析仪测出HSP70阳性细胞数。结果　 (1)妥泰干预组脑梗死体积比明显小于缺血再灌注组 (P <0 0 5 ) ;(2 )妥泰干预组HSP70 的表达高于缺血再灌注组 (P <0 0 5 )。结论　妥泰能促进HSP70 的表达 ,使梗死体积减少 ,对脑缺血再灌注损伤的脑组织有保护作用。     

乌司他丁对肝大部切除合并缺血再灌注损伤后肝再生及TNF-α/IL-6/STAT-3 信号通路的影响

摘要：目的探讨乌司他丁（UTI）预处理对大鼠70%肝切除合并缺血再灌注损伤后残肝再生和TNF-α/IL-6/STAT-3信号通路的
影响。方法健康清洁级雄性SD 大鼠120 只,体质量230~280 g,随机分为单纯肝切除组（PH）、肝切除合并缺血再灌注组
（PHIR）和乌司他丁组（UTI）,40只/组。PH组不阻断残肝血流;PHIR组阻断血流30 min后恢复灌注;UTI组于缺血前5 min经尾
静脉给予UTI 50 000 U/kg。再灌注后1、6、12、24、48 h取各组大鼠残肝组织,测定残肝再生度、PCNA阳性率,TNF-α、IL-6水平,
STAT-3、CyclinD1、Cdk4mRNA表达及CyclinD1、Cdk4 蛋白表达水平。结果UTI组24 h 和48 h 肝再生度和PCNA阳性率较
PHIR组显著升高（P<0.05）;UTI组早期TNF-α、IL-6水平较PHIR组显著降低（P<0.05）,但再灌注晚期IL-6水显著高于PHIR组
（P<0.05）;UTI组24 h 和48 h STAT-3、CyclinD1、Cdk4 mRNA表达及CyclinD1 和Cdk4 蛋白表达水平均显著高于PHIR组（P<
0.05）。结论乌司他丁对肝大部切除合并缺血再灌注损伤后残肝的再生具有促进作用,其机制与激活IL-6/STAT-3信号通路,
促使肝细胞CyclinDl-Cdk4复合物合成,促进肝细胞增殖有关。
     

输尿管结扎预适应通过上调热休克蛋白27的表达减轻肾脏缺血再灌注损伤

目的探讨热休克蛋白27（HSP27）在通过输尿管结扎（UO）预适应减轻小鼠肾脏缺血再灌注（IR）损伤中的作用及其机制。方法实验动物为雄性C57BL/6小鼠,①将小鼠随机分为3组,每组30只,对照组为正常C57BL/6小鼠,UO＋IR组小鼠经左侧输尿管结扎24 h后再通,再通48 h后行IR处理,non-UO＋IR组除不结扎左输尿管其余操作同UO＋IR组。比较3组小鼠再灌注后血清肌酐（Cr）水平,肾组织内肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）mRNA表达情况。②取C57BL/6小鼠随机分为UO组与non-UO组,每组20只,UO组予以左侧UO处理24 h,再通48 h后检测左肾组织HSP27蛋白表达,并与non-UO小鼠对比。③取C57BL/6小鼠随机分为两组,每组50只,一组予以小鼠左肾注射包装有干扰HSP27表达的短发夹RNA的重组腺病毒100μL靶向抑制HSP27的表达,将该组设为HSP27干扰组,另一组小鼠予以注射空病毒100μL作为对照组,每组取10只小鼠验证HSP27干扰成功后,每组再随机分为UO＋IR及non-UO＋IR两个亚组（每个亚组20只小鼠）,观察HSP27对IR损伤和UO效应的影响,比较各组Cr水平,检测肾组织内TNF-α和IL-6 mRNA,以及凋亡效应蛋白胱天蛋白酶-3的表达水平。结果①UO＋IR组Cr水平较non-UO＋IR组显著降低（P〈0.05）,TNF-α及IL-6mRNA的表达明显低于non-UO＋IR组（P〈0.05）。②较non-UO组,UO组肾组织HSP27表达明显上调（P〈0.05）。③相对于non-UO＋IR处理,UO＋IR不能降低HSP27干扰组小鼠Cr水平（P〉0.05）、TNF-α和IL-6 mRNA的表达（P〉0.05）及胱天蛋白酶-3的表达（P〉0.05）,却可显著降低空病毒对照组小鼠以上各指标表达;且相对于空病毒对照组中UO＋IR亚组,HSP27干扰组中UO＋IR亚组以上各指标仍高表达（P〈0.05）。结论 UO通过上调HSP27表达减轻小鼠肾脏IR损伤,其机制可能与HSP27抑制炎性反应、减少细胞凋亡的作用有关。     

乌司他丁对体外循环冠脉搭桥手术围术期炎症反应的影响

目的:探讨乌司他丁对体外循环冠脉搭桥手术(CABG)围术期炎症反应的影响.方法:择期行CABG患者40例,随机分为对照组(C组,n=20)和乌司他丁组(U组,n=20).U组于体外循环(CPB)前静脉滴注乌司他丁1.5×10~4 U/kg,C组于相同时间静脉滴注生理盐水.分别于麻醉诱导前(T1)、CPB1h(T2)、CPB后1h(T3)、CPB后24 h(T4)检测血浆肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-10和中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)的浓度.比较两组患者手术后的恢复情况.结果:与T1相比,2组患者在T2,T3,T4时点TNF-α,IL-6,IL-10及NE的浓度均明显升高((P<0.05);U组在T2,T3,T4的TNF-α,IL-6及NE浓度均明显低于C组(P<0.05),而IL-10的浓度明显高于C组(P<0.05).U组患者术后肺、肾及脑功能明显优于C组(P<0.05),心、肝功能及ICU停留时间无明显差异(P>0.05).结论:乌司他丁能够减轻体外循环冠脉搭桥手术围术期炎症反应,减少术后并发症.     

HSP70在大鼠内毒素血症肺损伤中的作用

目的探讨热休克蛋白70（HSP70）在内毒素血症大鼠肺损伤中的作用及可能机制。方法大鼠尾静脉注射脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）复制内毒素血症模型。雌性Wistar大鼠24只，随机分为4组：对照组（C组）；内毒素血症组（E组）；Gln提前干预组（G1组）；Gln延迟干预组（G2组）。所有的动物于注射LPS之后6h放血处死，测定肺组织HSP70的表达、超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）的含量，并用光镜观察大鼠肺组织的病理变化。结果E组同C组相比，肺组织HSP70表达明显增多（P〈0．01），SOD活性明显降低（P〈0．01），MDA含量增高（P〈0．05）。与E组相比，G1，G2组肺组织HSP70表达增多（P〈0．05），SOD活性增高（P〈0．05），MDA含量明显降低（P〈0．05）。G1与G2在肺组织HSP70表达。SOD活性，MDA含量等方面比较均无显著性差异（P〉0．05）。结论增加HSP70的表达对内毒素血症大鼠肺损伤可能起保护作用，作用机制可能与增加肺组织HSP70，提高机体应激时抗氧化能力有关，尚不能认为Gln提前干预与Gln延迟干预之间有差异。需要作进一步研究。     

乌司他丁对创伤失血性休克患者外周血单核细胞TOLL样受体4表达的影响

目的:观察乌司他丁对创伤失血性休克患者外周血单核细胞TOLL样受体4表达的影响,从而进一步了解乌司他丁抑制炎症反应的作用机制。方法:创伤失血性休克患者60例随机分为对照组(n=30)和乌司他丁组(n=30),乌司他丁组在麻醉诱导后切皮前静注乌司他丁30万U,对照组采用等量生理盐水。于麻醉诱导后切皮前,切皮后2h、4h,术后第1天、第2天、第3天采集动脉血,以流式细胞仪检测TLR4的表达变化,用ELISA试剂盒检测血浆TNF-α和IL-6浓度。结果:两组各时点CD14+单核细胞表面TLR4表达以及TNF-α、IL-6均较麻醉诱导后切皮前增加(P<0.05);乌司他丁组各指标值均较对照组上升幅度低(P<0.05)。结论:乌司他丁可有效抑制单核细胞表面TLR4的表达,抑制炎症因子的释放,对创伤失血性休克患者有一定的保护作用。     

五步蛇毒蛋白C激活剂在脓毒症大鼠早期适应性免疫应答中的作用

目的 探讨五步蛇毒蛋白C激活剂（PCA）在脓毒症大鼠早期适应性免疫应答中的作用。方法 采用SPF级SD大鼠78只,用随机数字表法分组：对照组（n=6,腹腔注射生理盐水）;通过腹腔注射脂多糖（LPS 10 mg/kg）复制脓毒症大鼠模型,模型组以LPS注射后4、6、8、12、16、24 h时的标本采集时间分为6组,6只/组;余36只大鼠于LPS注射30 min后使用药物干预,分为1-磷酸鞘氨醇受体1（S1PR1）激动剂SEW2871干预组（0.5 mg/kg,腹腔注射）和PCA干预组（0.1 mg/kg,腹腔注射）,各干预组以LPS注射后6、12、24 h时的标本采集时间分为3组,每组6只。采用ELISA法检测血浆IL-4、S1P、IL-12和IFN-γ水平,应用免疫荧光法检测肠系膜淋巴结S1PR1和CD103表达的变化。结果 与对照组比较,脓毒症大鼠在注射LPS后的24 h内,血浆S1P、IL-12、IL-4和IFN-γ水平明显增高（P<0.05）,LPS注射后6 h内IFN-γ/IL-4比值逐渐增高,之后逐渐降低;肠系膜淋巴结中S1PR1和CD103的表达明显增高（P<0.05）。SEW2871明显增加血浆S1P、IL-12和IFN-γ的浓度,降低血浆IL-4水平（P<0.05）,且明显减少淋巴结中S1PR1和CD103的表达（P<0.05）。蛇毒PCA干预后,血浆IL-4水平明显增高,淋巴结S1PR1表达显著增多（P<0.05）。结论 五步蛇毒PCA对维持脓毒症早期机体炎症和免疫反应的平衡具有调节作用,其机制可能与S1P-S1PR1通路有关。     

乌司他丁对羊水栓塞大鼠肺部损伤的影响及机制

目的探讨乌司他丁对羊水栓塞大鼠肺部损伤的影响及机制。方法取晚期妊娠 SD 雌鼠 60 只,实验分为3组,每组20只: 对照组股静脉注入生理盐水;羊水栓塞组：股静脉按0.25 mL/100 g 注入羊水胎粪液;乌司他丁组：在羊水栓塞组的基础上,腹腔注射乌司他丁10×104 U/kg。8 h后酶联免疫吸附试验(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-8、IL-1β及IL-6的含量。光镜分析小鼠肺组织病理及湿干比(W/D)变化。RT-PCR、Western blot检测大鼠肺组织中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9表达情况。结果与对照组相比,羊水栓塞组肺泡灌洗液TNF-α、IL-8、IL-1β及IL-6明显升高(P<0.05),乌司他丁组以上指标较羊水栓塞组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。肺组织病理学显示：羊水栓塞组大鼠肺组织可见不同程度水肿, 局部血管丰富, 可见少量出血, 支气管及血管的周围有大量炎症细胞浸润;乌司他丁组肺组织病理改变较羊水栓塞组减轻;对照组大鼠肺组织则无明显改变。与对照组相比,羊水栓塞组W/D值明显升高(P<0.05),乌司他丁组较羊水栓塞组降低,差异有统计学意义(P<0.05);羊水栓塞组肺组织MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05),乌司他丁组肺组织MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达较羊水栓塞组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论乌司他丁可能通过降低肺组织MMP-2、MMP-9表达水平,减轻炎症反应,对羊水栓塞后肺组织损伤有一定的保护作用。     

低分子量肝素对SAP大鼠肾组织保护的实验研究

目的观察低分子量肝素(LMWH)对大鼠重症急性胰腺炎(SAP)肾组织热休克蛋白70(HSP70)表达、肾组织的光镜下形态学的改变及血清尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)水平的变化,探讨LMWH对肾组织保护的作用机制。方法选用Wistar大鼠随机分为3组,假手术组(A组)、SAP模型组(B组)、SAP低分子量肝素治疗组(C组),术后24h和72h分别取肾组织,HE染色检测肾组织形态学变化,免疫组化检测肾组织HSP70的表达,并测定大鼠血清BUN和Cr。所有实验数据均采用均数±标准差(x±s)表示,统计学处理用F检验。结果肾组织HSP 70表达:各组肾组织HSP70表达在术后24h比72h多,统计学处理有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。A组HSP70表达较少,B组HSP70表达最多,C组HSP70表达明显下调,与B组比较有显著性差异(P<0.01)。光镜下可见:A组大鼠双侧肾脏无明显病理改变;B组肾小管上皮细胞坏死脱落,肾小管水肿;C组肾小管水肿程度较B组明显减轻,未见肾小管上皮细胞坏死,但有红细胞渗出。血清Cr和BUN含量:C组与B组比较,有显著性差异(P<0.01,P<0.015)。结论 LMWH通过下调肾组织内HSP70表达,减轻SAP大鼠肾的损伤,从而起到保护肾组织的作用。