腹腔感染所致多器官损害与Toll样受体2基因表达的关系

目的　探讨Toll样受体 2 (TLR2 )基因表达与严重腹腔感染所致多器官损害的关系。方法　采用大鼠盲肠结扎穿孔 (CLP)模型造成脓毒症。将 80只大鼠随机分为正常对照组 (n =10 )、假手术组 (n =10 )和脓毒症组 (n =6 0 ) ,留取肝、肺、肾及小肠组织检测TLR2和肿瘤坏死因子 α(TNF α)mRNA表达 ,同时测定血浆中丙氨酸转氨酶 (ALT)、肌酐 (Cr)及肺组织髓过氧化物酶(MPO)、小肠组织二胺氧化酶 (DAO)活性。结果　CLP后 2～ 6h肝、肺、肾及小肠组织TLR2mR NA表达迅速增多 (P <0 .0 1) ,12h达高峰 (P <0 .0 1) ,分别为 0 .818± 0 .0 14 ,0 .95 5± 0 .0 31,0 .82 0± 0 .0 45 ,0 .885± 0 .0 18,并持续至伤后 72h。相关分析结果显示 ,肝、肺、小肠中TLR2与TNF α基因表达呈显著正相关 (P <0 .0 5 0 .0 1) ,肾组织内TLR2与TNF α基因表达无明显相关(P >0 .0 5 ) ;肝、肺、肾、小肠组织中TLR2基因表达分别与ALT、MPO、Cr、DAO水平显著相关。结论　严重腹腔感染可导致多种组织TLR2mRNA持续表达 ,其改变与多器官损害密切相关。     

脓毒症大鼠多器官Toll样受体4基因表达的改变及意义

目的　探讨脓毒症大鼠肝、肺、肾及小肠组织中Toll样受体4(TLR4)基因表达的变化 规律及其意义。方法　雄性Wistar大鼠100只,动物随机分为正常对照组、假手术组、盲肠结扎穿孔 (CLP)致脓毒症组和杀菌/通透性增加蛋白(BPI)治疗组。分别检测肝、肺、肾、小肠组织TLR4、TNF αmRNA表达以及组织、血浆中内毒素水平的改变。结果　CLP后6～12h肝、肺、肾及小肠组织 TLR4mRNA表达显著升高达峰值(P<0.05或P<0.01);BPI早期治疗可显著降低各组织内毒素 水平,CLP后12h肝、肺、肾、小肠组织和24h肾组织TLR4mRNA表达亦明显抑制(P<0.05或 P<0.01)。相关分析显示,肝、肺、肾组织TLR4mRNA表达分别与相应组织及血浆内毒素水平、组 织TNF αmRNA水平均呈显著正相关。结论　CLP后细菌内毒素可迅速侵入血循环和多种组织, 它对于诱导体内TLR4基因表达上调具有显著影响,而TLR4基因广泛表达可能参与了脓毒症的病 理生理过程。     

肿瘤坏死因子α、干扰素γ刺激对肺泡巨噬细胞表面主要模式识别受体表达的影响

目的观察脓毒症主要相关细胞因子肿瘤坏死因子α(TNFα)和干扰素γ(IFNγ)对巨噬细胞表面主要模式识别受体(PRRs)表达的影响。方法分离培养小鼠肺泡巨噬细胞,用TNFα、IFNγ(终浓度均为20ng/ml)分别刺激细胞3h、6h、12h,通过逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学检测细胞内PRRs,包括白细胞分化抗原14(CD14)、Toll样受体4(TLR4)、清道夫受体(SR)、细菌脂蛋白受体TLR2和细菌DNA受体TLR9mRNA表达及其蛋白表达。结果TNFα和IFNγ表现为不同程度地上调与炎细胞激活作用有关的PRRs(CD14、TLR2、TLR9)(P<0.05),下调与炎细胞防御作用有关的SR(P<0.05),而对TLR4基因及蛋白表达无显著刺激作用(P>0.05)。结论效应细胞释放的促炎因子TNFα、IFNγ能从基因转录和蛋白水平上对细胞表面PRRs产生明显的反馈调控作用,对于促进失控性炎症反应的发生具有一定病理生理意义。     

脓毒症大鼠高迁移率族蛋白-1基因表达及其与内毒素血症的关系

目的观察脓毒症时高迁移率族蛋白 1(HMG 1)基因表达的变化及其与内毒素血症的关系。方法采用大鼠盲肠结扎穿孔 (CLP)造成脓毒症模型。 10 0只动物随机分为正常对照组 (10只 )、假手术组 (10只 )、CLP组 (6 0只 )及重组杀菌 /通透性增加蛋白 (rBPI2 1)治疗组 (2 0只 )。留取肝、肺及肾组织标本分别检测HMG 1mRNA表达及内毒素水平。结果CLP术后 6～ 72h肝、肺及肾组织HMG 1mRNA表达均不同程度增强 (P <0 0 5 )。rBPI2 1治疗后 12h肝、肺及肾组织内毒素水平分别为3 1± 0 8、2 6± 0 3、2 4± 0 4EU/g ,均明显低于CLP组 (5 2± 0 8、5 0± 0 8、14 2± 4 0EU/g ,P <0 0 5 ) ;同时 ,12h肝、肺、肾组织和 2 4h肝组织HMG 1mRNA表达明显受抑制 (P <0 0 5 )。CLP后肝、肺、肾组织HMG 1mRNA表达分别与相应组织内毒素水平呈显著正相关 (r =0 2 90 ,P <0 0 5 ;r =0 4 5 5 ,P <0 0 5 ;r=0 2 87,P <0 0 5 )。结论脓毒症时细菌内毒素持续侵入血循环 ,并蓄积于局部组织 ,参与了HMG 1的诱生 ,并可在基因水平调控其表达     

内毒素受体Tlr4及CD14基因在脓毒症大鼠肺、肝组织中的表达及其意义

目的 采用盲肠结扎穿孔（CLP）法制备脓毒症模型，探讨脓毒症时大鼠肺、肝组织内毒素受体Th4及CD14mRNA的改变及其意义。方法 50只SD大鼠，随机分为正常对照组（10只）、CLP组（40只），CLP后24、48、72和96h处死动物，留取肺、肝、肾及空肠组织，分别检测Tlr4、CD14mRNA的表达。CLP组24、48、72和96h肺、肝组织Tlr4及CD14mRNA的表达升高，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05），而肾、空肠组织Tlr4及CD14mRNA的表达与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 提示肺、肝组织中Tlr4及CD14基因的表达改变与脓毒症的发生发展过程有密切的关系。     

盐酸戊乙奎醚预先给药对脓毒症小鼠急性肺损伤时肺组织β-arrestin-2表达的影响

目的 探讨盐酸戊乙奎醚预先给药对脓毒症小鼠急性肺损伤时肺组织p抑制蛋白-2(β-arrestin-2)表达的影响.方法 健康雌性昆明小鼠30只,6周龄,体重18～20 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=10):假手术组(S组)、脓毒症组(CLP组)和盐酸戊乙奎醚预先给药组(PHC组).CLP组和PHC组采用盲肠结扎并穿孔法制备脓毒症模型.PHC组于模型制备前1h时腹腔注射盐酸戊乙奎醚0.45 mg/kg,S组和CLP组于模型制备前1h时腹腔注射等容量生理盐水.模型制备后12h时,采血和收集肺泡灌洗液测定肺通透性指数,采用化学比色法测定肺组织MPO活性,采用ELISA法测定肺组织IL-6含量,采用Western blot法测定肺组织β-arrestin-2蛋白表达,采用RT-PCR法测定肺组织β-arrestin-2 mRNA表达.结果 与S组比较,CLP组肺通透性指数、肺组织MPO活性和IL-6含量均升高,肺组织β-arrestin-2蛋白表达下调,β-arrestin-2 mRNA表达上调(p＜0.05),PHC组肺通透性指数、肺组织MPO活性和IL-6含量均升高,肺组织β-arrestin-2蛋白表达上调,β-arrestin-2 mRNA表达下调(p＜0.05).与CLP组比较,PHC组肺通透性指数、肺组织MPO活件和IL-6含量均降低,肺组织β-arrestin-2蛋白表达上调,β-arrestin-2 mRNA表达下调(P＜0.05).结论 盐酸戊乙奎醚预先给药减轻脓毒症小鼠急性肺损伤的机制可能与上调肺组织β-arrestin-2的蛋白表达有关.     

性别差异对脓毒症大鼠肝脏Toll样受体4和髓样分化蛋白-2基因表达的影响

目的探讨性别差异对脓毒症大鼠肝脏组织Toll样受体4(TLR4)和髓样分化蛋白- 2(MD-2)基因表达的影响。方法以脂多糖(LPS)按5 mg/kg体重由大鼠腹腔注射制作脓毒症动物模型,注射后2 h留取肝脏组织检测TLR4、MD-2和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因表达,同时测定各组大鼠血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)及雌二醇含量。结果正常雌雄性大鼠肝脏组织均可表达少量TLR4、MD-2、TNF-α基因,其中雌性组分别为0．175±0．034、0．211±0．044、0．201±0．068; 雄性组分别为0．205±0．061、0．243±0．049、0．243±0．063,两组数据差异无统计学意义(P> 0．05),但LPS刺激后雌性大鼠肝脏组织上述指标分别为0．615±0．089、0．708±0．181、0．730± 0．118,血浆中ALT含量为(81．07±10．72)U／L;雄性组分别为0．723±0．091、1．123±0．272、 0．881±0．156,ALT含量为(106．39±14．21)U／L,雌性组各项指标均明显低于雄性大鼠(P< 0．05)。相关分析表明雌性及雄性脓毒症大鼠肝脏组织TLR4及TNF-α基因表达与相应性别大鼠血浆中雌二醇含量呈显著负相关(P<0．05)。结论 LPS刺激后大鼠肝脏组织TLR4、MD-2及 TNF-α基因表达存在性别差异,内源性雌激素的作用可能导致雌性脓毒症大鼠肝脏组织损伤较雄性轻。     

CD14-159C/T基因多态性对全血培养CD14表达的影响

目的探讨CD14基因启动子-159C/T基因多态性对全血培养CD14mRNA表达及可溶性CD14(sCD14)浓度的影响。方法采集118例健康献血员血标本,用全血细胞培养模型检测内毒素刺激前后CD14mRNA表达及sCD14浓度的变化。采用聚合酶链反应(PCR)及限制性内切酶HaeⅢ对PCR产物的消化作用检测CD14基因多态性。同时,对内毒素刺激后肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱生水平进行了分析。结果118例健康献血员中,等位基因T和C的频率分别为60.2%和39.8%;40例是T等位基因纯合子(TT),62例为杂合子(TC),还有16例基因型为CC。基因型TT与TC白细胞中CD14mRNA的表达及上清液sCD14浓度均明显高于CC纯合子(P<0.05或0.01)。并且TT纯合子TNF-α诱生水平为(352±215)pg/ml,显著高于基因型TC及CC[(261±163)pg/ml及(198±122)pg/ml,P<0.05]。结论内毒素受体CD14-159C/T基因多态性对全血培养CD14的表达及释放产生显著影响,并与内毒素诱导TNF-α的反应性相关。     

盐酸戊乙奎醚预先给药对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织CD14和Toll样受体4表达的影响

目的 探讨盐酸戊乙奎醚预先给药对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织CD14和Toll样受体4(TLR4)表达的影响.方法 健康雄性SD大鼠32只,2月龄,体重230 ～ 280 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=8),对照组(C组):腹腔和尾静脉均注射生理盐水1 ml/kg;急性肺损伤组(ALI组):腹腔注射生理盐水1 ml/kg,30 min后经尾静脉注射内毒素5 mg/kg;盐酸戊乙奎醚低剂量组(LP组)和高剂量组(HP组):分别腹腔注射盐酸戊乙奎醚0.3和1.0 mg/kg,30 min后经尾静脉注射内毒素5 mg/kg.静脉注射生理盐水或内毒素后6h时,取肺组织,分别采用Western blot法和RT-PCR法检测CD14、TLR4蛋白及其mRNA的表达水平,并观察肺组织病理学结果.结果 与C组比较,ALI组、LP组和HP组肺组织CD14、TLR4蛋白及其mRNA表达上调(P＜0.05);与ALI组比较,LP组及HP组肺组织CD14、TLR4蛋白及其mRNA表达下调(P＜0.05).LP组和HP组CD14、TLR4蛋白及其mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05).LP组和HP组肺组织病理学损伤较ALI组减轻.结论 盐酸戊乙奎醚预先给药可通过降低肺组织CD14、TLR4的活性减轻大鼠内毒素性急性肺损伤.     

Kupffer细胞CD14及Toll样受体4介导大鼠肝移植缺血再灌注损伤的机制

目的研究大鼠肝移植缺血再灌注后Kupffer细胞CD14和Toll样受体4(TLR4)的表达及其参与缺血再灌注损伤的机制。方法建立肝移植缺血再灌注模型,并分为正常对照组、缺血再灌注组、抗CD14抗体组,每组均为10只大鼠。分离培养大鼠肝移植缺血再灌注后的Kupffer细胞。检测Kupffer细胞CD14及TLR4的mRNA、蛋白表达、核转录因子κB(NFκB)活性以及培养上清TNFα的分泌量。结果再灌注后Kupffer细胞CD14及TLR4的mRNA和蛋白表达明显高于正常对照组(P<001),再灌注后核转录因子κB活性、培养上清TNFα表达量明显高于对照组(P<001)。用抗CD14抗体后NFκB活性,TNFα表达量明显下降(与再灌注组相比,P<005),但仍然高于对照组(P<001)。结论缺血再灌注后肠道内毒素(脂多糖)能够上调Kupffer细胞CD14及TLR4的表达,激活NFκB,启动细胞因子的转录和分泌,但除CD14和TLR4以外的其他信号途径参与了缺血再灌注损伤。     

Neurokinin-1 Receptor Antagonists Inhibit the Recruitment of Opioid-containing Leukocytes and Impair Peripheral Antinociception

Background: Neurokinins (e.g., substance P) contribute to pain transmission in the central nervous system, peripheral neurogenic inflammation, and leukocyte recruitment in inflammation. Leukocyte recruitment involves (1) up-regulation of adhesion molecule expression through neurokinin-1 (NK1) receptors on endothelial cells, (2) augmented chemokine production, or (3) chemotaxis through NK1 receptors on leukocytes. In inflammation, leukocytes can trigger endogenous antinociception through release of opioid peptides and activation of opioid receptors on peripheral sensory neurons. The authors hypothesized that NK1 receptor antagonists impair recruitment of opioid-containing leukocytes and stress-induced antinociception.

Methods: Rats were treated intraperitoneally and intrathecally with peripherally restricted (SR140333) or blood-brain barrier-penetrating (L-733,060) NK1 receptor antagonists and were evaluated for paw pressure thresholds, numbers of infiltrating opioid-containing leukocytes and leukocyte subpopulations, expression of adhesion molecules, NK1 receptors, and chemokines 24-48 h after complete Freund adjuvant-induced hind paw inflammation.

Results: Systemic and peripherally selective, but not intrathecal, NK1 receptor blockade reduced stress-induced antinociception (control: 177 +/- 9 g, L-733,060: 117 +/- 8 g, and control: 166 +/- 30 g, SR140333: 89 +/- 3 g; both P < 0.05, t test) without affecting baseline hyperalgesia. In parallel, local recruitment of opioid-containing leukocytes was decreased (L-733,060 and SR140333: 56.0 +/- 4.3 and 59.1 +/- 7.9% of control; both P < 0.05, t test). NK1 receptors were expressed on peripheral neurons, infiltrating leukocytes and endothelial cells. Peripheral NK1 receptor blockade did not alter endothelial expression of intercellular adhesion molecule-1 or local chemokine and cytokine production, but decreased polymorphonuclear cell and macrophage recruitment.     

高迁移率族蛋白-1在脓毒症所致多器官功能损害中的作用

目的　观察高迁移率族蛋白 1(HMG 1)在脓毒症中的变化规律及其与多器官功能损害的关系。　方法　采用大鼠盲肠结扎穿孔 (CLP)造成脓毒症模型。动物分为正常对照组 ( 10只 )、假手术组 ( 10只 )、盲肠结扎穿孔组 ( 6 0只 )及正丁酸钠治疗组 ( 2 0只 )。留取组织和血标本分别检测HMG 1mRNA表达及器官功能指标。另设实验观察正丁酸钠对脓毒症大鼠的治疗效果 ( 5 7只 )。结果　CLP术后 6～ 72h肝、肺、肾及小肠组织HMG 1mRNA表达均显著增强 (P <0 0 5或P <0 0 1)。正丁酸钠处理可显著降低CLP术后 12及 2 4h动物各组织HMG 1mRNA表达 ,12h血清丙氨酸转胺酶、肌酐水平比未治疗组显著降低 (P <0 0 1) ,2 4h肺组织髓过氧化物酶活性亦明显下降 (P <0 0 1)。早期给予正丁酸钠治疗 ,大鼠 1～ 6d存活率显著高于未治疗组 (P <0 0 5或P <0 0 1)。　结论　HMG 1在诱导脓毒症动物过度炎症反应与多器官功能损害中具有重要作用。     

Activation of nociceptive neurons in T9 and T10 in cerulein pancreatitis

Mechanisms of pain transduction in acute pancreatitis are poorly understood. Increased Fos expression in the spinal cord is a marker of activation of nociceptive neurons. We hypothesized that cerulein pancreatitis leads to increased Fos expression at T9 and T10, which receive sensory input from the pancreas. Rats were injected with cerulein (100 microg/kg, s.c.) or saline carrier (NS). Endpoints at 4, 6, and 10 h were serum amylase, myeloperoxidase activity (MPO), and spinal cord Fos expression (number of immunoreactive nuclei/section dorsal gray matter). Fos-like immunoreactivity (FLI) at T9-T10 was compared to internal controls (T6, T12). An average of 20 spinal cord histologic sections were evaluated per rat. Some animals were injected with the mu-opioid receptor agonist, buprenorphine (90 microg/kg, s.c.), 3 h after cerulein, and their endpoints were measured at 6 h. Analysis of variance and t tests were used for statistical analysis. Results are means +/- SEM. As expected, cerulein induced edematous pancreatitis, with a 4-fold increase in serum amylase at 6 h [cer (n = 8): 14,000 +/- 1,300 U/ml versus NS (n = 10): 3,700 +/- 300, P < 0.005)] and a 2-fold increase in MPO activity (0.25 +/- 0.05) activity units/dry wt versus 0.13 +/- 0.02, P < 0.05). Cerulein induced nearly a 2-fold increase in FLI at T9 and T10 [n = 10 (cer) and n = 13 (NS): T9, 14 +/- 1.5 versus 7.8 +/- 0.88; T10, 15 +/- 1.7 versus 8.3 +/- 0.70; P < 0.05]. Peak effects of cerulein on FLI occurred at 6 h and were greatest at T9/T10 with relative sparing of T6/T12. T6/T12 expression was similar in experimental and control groups. Buprenorphine significantly reduced both serum amylase and FLI and T9/T10. Cerulein-induced acute pancreatitis in rat increases visceral nociceptive signaling at spinal cord levels T9 and T10, with a peak at 6 h. Blockade of this effect by the mu-opioid receptor agonist buprenorphine could occur either by direct activation of central opioid receptors and/or an anti-inflammatory mechanism. FLI is a useful tool for studying the pathophysiology of pain in experimental acute pancreatitis.     

脓毒症大鼠生物喋呤的组织分布特点和意义

目的　探讨腹腔感染致脓毒症时重要器官生物喋呤及其合成限速酶基因表达的改变和病理生理意义。方法　腹腔感染致脓毒症模型采用盲肠结扎穿孔法(CLP),用反相高效液相分析法和逆转录-聚合酶链反应方法测定24只大鼠肝、肺、肾等组织生物喋呤含量及三磷酸鸟苷环水解酶I(GTP-CHI)mRNA的表达。结果　脓毒症大鼠2h时肝、肺、肾组织生物喋呤含量显著增多［分别为(4.18±0.16)、(2.71±0.32)、(2.45±0.27)ng/g蛋白］,同时不同组织GTP-CHImRNA表达亦明显增强,各脏器功能均表现不同程度地损害(P＜0.05)。相关分析显示,肝、肺组织生物喋呤与反映相应脏器功能的指标呈高度正相关(分别为r=0.7916,P＜0.001和r=0.8004,P＜0.001)。结论　生物喋呤参与了腹腔感染所致脓毒症的发生、发展过程。     

肺动脉灌注低温肺保护液抑制肺内实质细胞凋亡的研究

目的　探讨体外循环中肺动脉灌注低温保护液对肺内实质细胞凋亡的影响。方法　将4 0例行法洛四联症根治术的患儿分为肺保护组和对照组 (各 2 0例 )。肺保护组体外循环期间肺动脉灌注低温肺保护液 ,对照组行常规法洛四联症根治术。 2 0例患儿 (两组各 10例 )术后取右下肺组织活检标本 ,原位末端标记免疫组化染色法检测肺内实质细胞凋亡情况。同时监测围手术期肺功能及临床指标。结果　肺保护组肺内实质细胞凋亡率为 (10± 2 ) % ,而对照组肺内实质细胞凋亡率为 (18± 7) % ,两者比较 ,差异有显著性 (t=- 2 95 ,P <0 0 5 )。肺保护组术后氧指数较对照组高 ,回ICU病房后 0、6和 12h均有显著差异 [分别为 (4 92± 172 )、(4 4 4± 10 4 )、(4 89± 5 8)mmHg和 (36 9± 12 6 )、(347± 10 7)、(340± 119)mmHg ,t =2 5 9,P <0 0 5 ;t=2 88,P <0 0 1;t =5 0 6 ,P <0 0 1];肺保护组呼吸机辅助通气时间短于对照组 [(15± 11)h和 (2 6± 15 )h ,t=- 2 76 ,P <0 0 1]。结论　肺动脉灌注低温保护液可抑制肺组织内实质细胞凋亡 ,减轻体外循环肺损伤     

碱性成纤维细胞生长因子和基质金属蛋白酶-9 mRNA表达与胃癌临床病理学及生存期的关系

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA在胃癌中的表达及其与肿瘤微血管密度(MVD)、浸润转移和生存期的关系.方法应用原位杂交和免疫组织化学技术,检测105例胃癌组织中bFGF mRNA和MMP-9 mRNA及CD34蛋白的表达.结果bFGF mRNA和MMP-9 mRNA在胃癌中的阳性表达率分别为60.95%和58.1%;阳性表达组的平均血管数(46.09±11.52)个/0.72 mm2和(43.75±13.41)个/0.72 mm2分别显著高于阴性表达组的平均血管数(29.41±12.47)个/0.72 mm2和(33.45±13.92)个/0.72 mm2;bFGF mRNA和MMP-9 mRNA的阳性表达率与肿瘤浸润深度(rs=0.211, P=0.031; rs=0.335, P=0.001)、生长方式(rs=0.324,P=0.001; rs=0.267, P=0.006)、脉管侵犯(rs=0.579, P=0.001; rs=0.209, P=0.032)、淋巴结转移(rs=0.405, P=0.001; rs=0.343, P=0.001)及远处转移(rs=0.474, P=0.001; rs=0.468, P=0.001)有关; MVD分别与bFGF mRNA(t=3.207, P=0.002)和MMP-9 mRNA(t=7.035, P=0.001)的表达水平呈正相关;阳性表达组及MVD值≥39.5的病例的平均生存时间和5年生存率均显著低于阴性表达及MVD值<39.5的病例.结论胃癌组织中bFGF和MMP-9表达与肿瘤微血管密度及生存期密切相关,两者在促进胃癌血管生成方面具有协同作用,因此对估计预后和指导治疗都具有重要意义.     

杀菌性/通透性增加蛋白模拟肽对内毒素/脂多糖致小鼠急性肺损伤的保护作用

目的　观察杀菌性/通透性增加蛋白模拟肽(BNEP)对内毒素/脂多糖(LPS)致小鼠急性肺损伤(ALI)的作用。　方法　将BALB/c小鼠随机分为对照组、LPS组、BNEP组,每组20只。LPS组和BNEP组分别经鼻滴注等渗盐水(NS) LPS和NS LPS 尾静脉注射BNEP复制小鼠ALI模型。对照组处理方式类似,但仅滴注NS.检测各组小鼠肺脏湿干重比、肺血管通透性、肺组织病理学变化,应用免疫组织化学法检测肺组织中Toll样受体(TLR) 2、4表达水平的变化。　结果　BNEP组与LPS组比较,肺湿干重比减小,肺血管通透性降低,肺内以中性粒细胞为主的炎性细胞浸润减轻, TLR2、4在肺组织中的表达减弱(两组TLR2分别为128±10、214±12,P<0. 01).　结论　BNEP对由LPS引起的小鼠ALI有较好的保护作用。     

小鼠全肝缺血再灌注时肺泡巨噬细胞TLR2的激活与肺损伤的机制

目的：探讨肺泡巨噬细胞Toll样受体2（TLR2）的激活机制及其在肝脏缺血再灌注（HIR）中肺损伤的意义。方法：用野生型小鼠C3h/Heouj和TLR4缺失小鼠C3h/Hej建立HIR动物模型。于再灌注1，6，12h后经支气管肺泡灌洗液获取肺泡巨噬细胞，采用荧光定量PCR方法检测TLR2/4mRNA的表达。同时检测支气管肺泡灌洗液中内毒素及肿瘤坏死因子（TNF）的水平，肺组织湿干重比值，肺组织髓过氧化物酶的浓度，并进行肺组织学评分。结果：C3h/Heouj组HIR缺血再灌后各时点肺泡巨噬细胞TLR2/4mRNA表达升高，TLR2mRNA表达持续升高，TLR4mRNA6h达到最高值。同时C3h/Heouj组HIR后支气管肺泡灌洗液中TNF水平明显升高，肺损伤加重，肺组织湿干重比值持续升高，肺组织髓过氧化物酶持续增加(P<0.05)。C3h/Hej组HIR后TLR2mRNA表达仅轻度升高，且支气管肺泡灌洗液中TNF水平低于C3h/Heouj组(P<0.05)，肺损伤轻于C3h/Heouj组(P<0.05)。结论：HIR可致肺泡巨噬细胞表面TLR4的激活，可上调TLR2的表达，从而可加重HIR时的肺损伤。