细菌性宫内感染致早产大鼠模型的建立

目的复制大鼠细菌性宫内感染模型,并探讨其与早产发生的关系.方法将20只孕15d的大鼠随机分成感染组和对照组各10只,分别于子宫腔内接种1浊度大肠杆菌悬浮液和无菌生理盐水,于分娩后观察子宫和胎盘组织的病理变化及仔鼠的死产率、平均活胎数和早产发生率.结果感染组大鼠子宫和胎盘存在炎症反应,而对照组大鼠未见炎症反应.感染组大鼠共分娩108只幼仔,死产率为8.3%;对照组大鼠共分娩118只,死产率为3.4%,两组比较差别无显著性意义(x2=2.542,P＞0.05).感染组每只大鼠平均活胎数为(9.9±2.42)只,对照组为(11.30±2.06)只,两组差别无显著性意义(t=1.392,P＞0.05).感染组大鼠早产发生率为70.0%,对照组大鼠为10.0%,两组比较差别有显著性意义(P＜0.05).宫内感染致早产的危险度分析:0R=21.000,95%CI=1.777～248.013.结论采用大肠杆菌宫内接种方法建立的宫内感染大鼠模型与亚临床型宫内感染相似,可增加早产发生率,利用该模型可进行宫内感染与早产儿疾病的发病机制研究.     

宫内给药对晚孕大鼠细菌性宫内感染胎盘炎症与滋养细胞凋亡的影响

目的:探讨头孢曲松钠羊膜腔内给药对大肠埃希菌所致宫内感染的晚孕SD大鼠胎盘组织炎症反应和滋养细胞凋亡的影响.方法:妊娠15 d的SD孕鼠36只.随机分成4组,分别为羊膜腔内给药(IUA)组、对照(IUC)组和母鼠静脉给药(IVA)组、对照(IVC)组,每组9只.(1)妊娠第15 d,所有孕鼠一侧宫角行1010个几大肠埃希菌菌液0.2 ml接种.(2)妊娠第16 d,IUA组和IUC组,分别于接种侧各羊膜腔内注射头孢曲松钠和等体积的生理盐水,IVA组和IVC组,母鼠尾静脉分别注射头孢曲松钠和等体积的生理盐水.(3)自妊娠第17 d起,每组每天随机处死3只,其接种侧宫角顶端3个胎囊胎盘行HE染色组织切片,光学显微镜下比较Naeye分期分级,随机抽取其一TUNEI.法FITC标记胎盘凋亡细胞后作半定量分析.结果:羊膜腔内穿刺总体和各天的给药组轻度炎症率高于对照组,母鼠静脉途径总体和第2、3 d.给药组轻度炎症率高于对照组(P<0.05).轻度炎症率在两个给药组和其给药后1 d时,羊膜腔内组较母鼠静脉组为高(P<0.05).给药组滋养细胞凋亡强度明显低于其对照组(P<0.05).IUA组给药后第1、3 d,凋亡强度较IVA组低(P<0.05).结论:单次头孢曲松钠给药治疗晚孕SD大鼠大肠埃希菌宫内感染,羊膜腔内较母鼠静脉途径能更迅速地减轻胎盘的炎症反应和抑制滋养细胞凋亡,以改善妊娠结局.     

4种支原体宫内感染后细胞因子检测及子鼠心、脑和肺组织的电镜观察

目的探讨4种支原体宫内感染后孕鼠血清和羊水及子鼠血清IL-10、TNF-α、IL-1β、IL-6含量的变化,并予电镜观察子鼠心、脑和肺组织的变化,为支原体宫内感染导致不良妊娠的研究提供实验依据。方法取肺炎支原体（Mp）、发酵支原体（Mf）、梨支原体（Mpi）和穿通支原体（Mpe）分别感染正常妊娠组（31只）和不良妊娠组（23只）大鼠,在支原体宫内感染后,采用ELISA法检测孕鼠血清和羊水及子鼠血清IL-10、TNF—α、IL-1β、IL-6的含量,并对不良妊娠组子鼠心、脑和肺组织予电镜观察。结果Mp、Mf、Mpe及Mpi4种支原体宫内感染后,不良妊娠组子鼠血清和孕鼠羊水TNF—α、IL-1β、IL-6水平均较正常妊娠组显著增高（均P〈001）,而子鼠血清和孕鼠羊水IL-10水平则较正常妊娠组显著降低（均P〈001）;同时发现,不良妊娠组Mf和Mp感染的子鼠肺组织内均可见组织水肿和炎症反应,而Mpi感染的子鼠脑组织内可见明显组织损伤,Mpe感染子鼠的心脏组织中可见三层膜结构的支原体颗粒、线粒体固缩、肌浆网扩张、核膜间隙扩大和局灶性肌丝溶解现象。结论Mp、Mf、Mpe及Mpi4种支原体宫内感染可导致不良妊娠。     

妊娠期糖尿病对肺发育的影响

目的建立胎儿宫内高血糖暴露模型,探讨该模型对新生鼠不成熟肺细胞凋亡、增殖及肺结构发育的影响。方法健康SD妊娠大鼠随机分成高血糖组(STZ组)和正常妊娠组,每组20只。STZ组:妊娠4.5 d腹腔注射1%链脲佐菌素(STZ)溶液40 mg/kg,正常妊娠组则在相同时点相同条件下注射同体积柠檬酸缓冲液。记录腹腔注射STZ前,妊娠6.5 d、11.5 d、16.5 d和20.5 d两组孕鼠尾静脉随机血糖;记录新生鼠出生当天(D0)、第7天(D7)的体质量、存活率;测量新生鼠D0、D7肺质量、肺间隔厚度、辐射状肺泡计数、肺细胞凋亡和增殖情况。结果注射STZ后,与正常妊娠组相比,STZ组孕鼠各时点随机血糖值显著增高(P0.05);D0、D7新生鼠存活率降低(P=0.00);D0时新生鼠体质量降低(P0.05)、相对肺质量降低(P0.05)、肺间隔变薄(P0.05),辐射状肺泡计数无明显变化。D0时STZ组肺细胞凋亡指数显著高于正常妊娠组[(11.8±1.1)%比(3.4±0.7)%,P=0.00]。STZ组新生鼠肺细胞增殖在D0、D7均显著增加(P0.05)。结论妊娠4.5 d腹腔注射1%STZ溶液40 mg/kg,可成功建立胎鼠宫内高血糖暴露模型。胎鼠高血糖暴露可增加出生当天新生鼠死亡率、肺泡细胞凋亡和增殖,影响肺结构的发育。     

促胎肺成熟药物对兔母、胎组织感染及妊娠结局的影响

目的 研究促胎肺成熟药物地塞米松、EGF、TRH对母、胎组织感染及妊娠结局的影响。方法 建立孕兔宫内感染模型,分别用地塞米松、EGF、TRH联合先锋霉素V治疗,通过光镜观察母、胎组织的感染程度,检查孕兔和胎仔的存亡情况。结果 地塞米松治疗组胎肺和胎盘的感染程度明显重于对照组和／或EGF治疗组,子宫感染程度在各组之间无明显差异;地塞米松治疗组孕兔发生早产和胎儿死亡的数量明显多于EGF治疗组,TRH治疗组的胎儿早产和死亡率明显高于EGF治疗组和对照组,母兔死亡仅见于TRH组。结论 在宫内感染时,地塞米松治疗可加重母、胎组织感染,引起胎儿早产或死亡,TRH也具有加速早产和导致母、母胎死亡的副作用,而EGF不加重感染,对妊娠结局的影响较好。     

孕鼠肝内胆汁淤积症致胎鼠心律失常的实验研究

目的:探讨孕鼠肝内胆汁淤积症致胎鼠心电图的异常。方法:应用雌、孕激素建立妊娠肝内胆汁淤积症大鼠模型,通过Powerlab生物信号处理系统Chart 5软件引导妊娠第20天和第21天胎鼠宫内心电图。结果:(1)妊娠第20天,胆淤模型组1孕鼠血清总胆汁酸(TBA)水平为(64.3±5.2)μmol/L;妊娠第21天,胆淤模型组2孕鼠血清总胆汁酸(TBA)水平为(78.5±4.5)μmol/L。两组比较差异有极显著性,P<0.01。(2)妊娠第20天,胆淤模型组1持续观察90min,胎鼠心电图均显示正常;妊娠第21天,胆淤模型组2实验开始时胎鼠心电图正常,持续观察29.3±6.4min后出现胎鼠心律不齐,继续观察23.5±4.6min后胎鼠死亡,而正常对照组2持续观察90min,胎鼠心电图均正常。结论:孕鼠肝内胆汁淤积症时胎鼠死亡前出现短暂的心律失常阶段。     

姜黄素对宫内感染性小鼠早产的防治作用

目的研究活化的激活蛋白1（Activator protein-1,AP-1）和单核细胞趋化蛋白1（monocyte chemoattractantprotein-1,MCP-1）在感染性早产孕鼠中的表达,从而探讨抑制AP-1的药物姜黄素（Curcumin,CUR）对感染性早产的预防和治疗作用。方法大肠杆菌腹腔注射建立感染性早产动物模型。将100只C57BL/6孕鼠随机分为模型组（E组）、对照组（NS组）、姜黄素组（CUR组）、治疗组（E＋CUR）、预防组（CUR＋E组）,每组20只。其中每组分8只观察潜伏期（菌液注射至分娩第一胎儿的时间）和活产率。于干预后3、6、12、24h各时间点处死3只孕鼠,免疫组化检测孕鼠子宫AP-1及MCP-1蛋白表达分布;Western blotting检测孕鼠子宫AP-1表达;ELISA检测孕鼠血清MCP-1蛋白分泌量。结果 CUR预防及治疗组能显著降低AP-1,MCP-1mRNA及蛋白的表达（P〈0.001）。CUR治疗感染性早产小鼠潜伏期延长为34.5h（对照15.1h）,CUR预防性给药则延长为45.3h;CUR作用于感染性早产小鼠可使妊娠时间延长。活产率提高（87.5%vs39.2%）。结论 CUR对大肠杆菌诱发的小鼠早产有预防和治疗作用,可能是通过抑制妊娠组织AP-1/MCP-1的活化。     

IL-12和IL-12受体在刚地弓形虫感染致不良妊娠结局中的作用机制研究

目的探讨IL-12和IL-12受体（IL-12R）在弓形虫感染致不良妊娠结局中的作用机制。方法将24只C57BL/6孕鼠随机分为感染组（n=12）和对照组（n=12）,感染组小鼠于孕8d每只腹腔注射400个RH株刚地弓形虫速殖子,对照组注射等量无菌PBS,所有孕鼠均于孕14d时安乐死,观察胎盘及胎鼠的发育情况,采用流式细胞仪的方法检测小鼠子宫自然杀伤细胞（uNK）表面的IL^-12受体表达水平的高低,用ELISA的方法检测小鼠胎盘分泌的IL-12细胞因子水平的高低。结果在孕14d感染组小鼠的胎盘出血坏死较多,未感染的对照组小鼠胎盘血供丰富。感染组小鼠的死胎率比对照组小鼠显著增加（P〈0.01）。弓形虫感染组孕鼠子宫自然杀伤细胞表面的IL^-12受体表达水平明显高于正常对照组（P〈0.05）,感染组孕鼠胎盘中的IL-12水平明显高于正常对照组（P〈0.05）。结论 IL-12水平升高和IL-12受体的高表达在弓形虫感染致不良妊娠结局中发挥重要作用。     

宫内给药对大鼠细菌性宫内感染胎盘IL-6与MMP-9表达的影响

目的探讨头孢曲松钠羊膜腔内和静脉给药对大肠埃希菌所致宫内感染的晚孕SD大鼠胎盘组织白细胞介素-6（IL-6）及基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）表达的影响。方法妊娠15d的SD孕鼠36只,完全随机分成4组,每组9只。①妊娠第15天,所有孕鼠一侧宫角行10^10／L大肠埃希菌菌液0．2ml接种。②妊娠第16天,羊膜腔内给药组（IUA）和对照组（IUC）分别于按种侧各羊膜腔内注射头孢曲松钠和等体积的生理盐水,静脉给药组（IVA）和对照组（IVC）母鼠尾静脉分别注射头孢曲松钠和等体积的生理盐水。③4组孕鼠自妊娠第17天起,每组每天随机处死3只,随机抽取其接种侧宫角顶端3个胎囊之一的胎盘行IL-6、MMP-9免疫组化染色后行半定量分析。结果胎盘IL-6和MMP-9表达水平在给药后第1、2、3天,各给药组低于各相应对照组（P〈0．05）,IUA组低于IVA组（P〈0．05）,IUC组高于IVC组（P〈0．05）。IUA组和IVA组IL-6水平于给药后第2天最低（P〈0．05）,IUC组和IVC组IL-6表达水平及各组MMP-9表达水平逐日增高（P〈0．05）。结论单次头孢曲松钠给药治疗晚孕SD大鼠大肠埃希菌宫内感染,羊膜腔内给药较母鼠静脉途径更有效,其可通过抑制IL-6和MMP-9在胎盘组织中的表达水平,降低炎症反应水平和胎膜早破的风险。     

异种抗磷脂抗体皮下注射致妊娠丢失大鼠模型的改良

目的:制备异种抗磷脂抗体皮下注射致妊娠丢失大鼠模型的改良方法.方法:将80只10周龄SD孕鼠随机分为A～H组共8组(每组各10只),分别于孕8 d、孕12 d背部多部位皮下注射25、50、75、100 ms/(kg·d)抗心磷脂抗体(ACA,A、B、C、D组)或狼疮抗凝物(LA,E、F、G、H组)蛋白液,以注射健康人血清[75 mg/(kg·d)]的SD孕鼠作为空白对照(10只),至孕15 d处死后取材,计算各组孕鼠胚胎吸收率、胚胎质量,酶标仪测各组血清ACA的相对含量,以部分凝血酶原时间(APTT)来判定LA的活性.结果:造模后,孕鼠血清ACA、APTT、胚胎吸收率明显增加(P<0.05);胚胎质量明显降低(P<0.05);胎盘切片镜下见胎盘免疫复合物沉积、组织变性坏死、炎性细胞浸润、血管内纤维素凝结及淤血等病理现象;且均与抗体蛋白液剂量呈正相关,其中以注射75 mg/(kg·d)ACA蛋白液或LA蛋白液造模最稳定.结论:LA可作为复制本动物模型所需免疫抗体来源之一;75 mg/(kg·d)ACA蛋白液或LA蛋白液为本模型所需免疫抗体的稳定有效量;改良后动物模型符合抗磷脂抗体致妊娠丢失患者的生化、产科特点及病理变化.     

电针对先天性脑损伤仔鼠脑白质神经髓鞘修复的影响

目的观察和探讨电针对宫内感染致脑损伤仔鼠脑白质神经髓鞘修复的影响和机制。方法连续两天对孕第17天的孕鼠腹腔注射脂多糖（LPS）[450μg/（kg.d）],制备先天性脑损伤仔鼠模型;对照组孕鼠腹腔注射等量无菌生理盐水,随机选取对照组仔鼠22只;随机选取LPS组仔鼠40只,随机分为非干预组22只和电针组18只,电针组电针组于第7天开始进行干预,分别于第14天、第28天用电子显微镜观察各组仔鼠脑白质神经髓鞘,并应用体视学技术测量和计算出脑白质神经髓鞘厚度平均值。结果非干预组、电针组仔鼠脑白质神经髓鞘厚度平均值均明显低于对照组（P﹤0.01）,电针组仔鼠脑白质神经髓鞘厚度平均值高于非干预组（P﹤0.01）。结论电针干预可促进脑损伤仔鼠脑白质神经髓鞘修复。     

中药治疗溴隐亭致大鼠流产模型中HB-EGF对滋养细胞增殖的影响

目的探讨中药治疗自然流产中滋养细胞肝素表皮生长因子(HB-EGF)、核增殖抗原(PCNA)的表达及相关性分析对滋养细胞增殖的影响。方法中药治疗溴隐亭致SD大鼠流产模型组,另设黄体酮、外源性泌乳素(PRL)治疗模型;单纯模型、正常孕鼠、非孕鼠为对照组,各12只;于孕12d处死观察妊娠结局。通过RT-PCR及免疫组化观察各组胎盘、子宫内膜HB-EGFmRNA及PCNA的表达,电镜观察微绒毛变化。结果中药与黄体酮、外源性PRL治疗组及正常孕鼠组胎盘HB-EGF和PCNA无显著差异,微绒毛结构正常;上述4组胎盘PCNA显著高于模型组,模型组微绒毛结构消失;模型组HB-EGF不表达,动情期子宫内膜HB-EGF显著高于上述4组;PCNA与HB-EGF正相关。结论(1)HB-EGF和早孕期滋养细胞的增殖明显相关。(2)中药可能通过自分泌或旁分泌增加滋养细胞HB-EGF表达,增强滋养细胞的增殖及侵入和对缺氧的耐受。     

重组人IL-2对感染弓形虫孕鼠T细胞亚群及垂直传播的影响

目的研究重组人IL-2对感染弓形虫孕鼠T细胞亚群及垂直传播的影响。方法取BALB/C孕鼠90只,随机分为空白组、感染组、IL-2组。于妊娠第8d空白对照组腹腔注射0.2ml生理盐水,其余各组腹腔注射200个弓形虫速殖子,并于妊娠第7、8、9dIL-2组每只孕鼠腹腔注射1 000UIL-2,其余两组腹腔注射0.2ml生理盐水。妊娠第10、12、14、16d取妊娠鼠脾,流式细胞仪检测CD4~＋及CD8~＋水平,并在妊娠第12d解剖孕鼠,观察活胎率及胎仔脑组织弓形虫感染情况。结果与空白组相比,妊娠各期感染组的脾CD4~＋T细胞水平显著降低,而CD8~＋T细胞水平显著升高（第10、12、1 4d）,二者比值明显倒置;IL-2组的CD4~＋T细胞水平在妊娠第10、12、14d高于感染组,CD8~＋T细胞水平在妊娠第10、12、14d低于感染组,CD4~＋/CD8~＋T细胞比值在妊娠第10、12、14d高于感染组。活胎率也明显升高,宫内胚胎弓形虫感染率明显降低。结论 IL-2可以改善感染弓形虫孕鼠的细胞免疫功能,提高孕鼠免疫力,减少垂直传播概率。     

妊娠末期吗啡暴露的子代鼠NR2A亚基与成瘾性的关系

目的:探讨妊娠末期吗啡暴露的子代鼠在不同成瘾性时脑伏隔核N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体NR2A亚基水平.方法:孕SD大鼠36只随机分为吗啡暴露组(M组)和对照组(N组),M组孕鼠第一天给予吗啡用量为2 mg·kg-1,此后每天增加1 mg·kg-1至6 mg·kg-1维持至分娩,N组孕鼠以同样方式注射等量生理盐...     

早期干预对宫内感染致脑瘫大鼠运动功能影响的研究

目的:研究早期干预对宫内感染致脑瘫大鼠运动功能改善的影响。方法:采用孕鼠腹腔注射LPS制备脑瘫动物模型,随机选取对照组(A组)足月仔鼠60只,LPS组足月仔鼠120只分为早期干预组(B1组)和非干预组(B2组)各60只。各组于生后25天进行神经行为学检测,B1组中检测出的CP鼠(B1CP组)继续早期干预,B2组中检测出的CP鼠(B2CP组)常规饲养,A组中随机选取10只鼠作为对照组(A’组);A’组、B1CP组和B2CP组仔鼠分别于25天及42天进行神经行为学检测和运动功能评定。结果:(1)25天B1组鉴定出7只CP鼠,B2组13只CP鼠,A组中无CP鼠。(2)B1CP组25天与42天各项检测结果比较:悬吊试验、斜坡试验、旷场实验、拒俘反应及改良BBB运动功能评分均有显著性差异(P<0.01);B2CP组和A’组大鼠25d与42d各项检测结果比较无显著性差异(P>0.05)。结论:(1)联合应用神经行为学检测与改良BBB运动功能评定可全面反映CP大鼠运动功能状况。(2)早期干预可以明显改善CP大鼠的运动功能。     

重组腺病毒介导的HIF-2α过表达对孕鼠的影响

目的 通过重组腺病毒介导使低氧诱导因子-2α(HIF-2α)过表达,探讨其过表达对SD孕鼠的影响.方法 将SD孕鼠随机分为重组腺病毒组、盐水组、空白腺病毒组,每组12只,于妊娠第9d经鼠尾静脉分别注射100 μL载有HIF-2α的重组腺病毒(1×1010Pfu/只)、盐水、空白腺病毒(1×1010 Pfu/只),观测孕...     

经口感染弓形虫垂直传播小鼠模型的建立

目的建立经口感染弓形虫RH株速殖子垂直传播小鼠模型。方法将54只妊娠0天的BALB/c孕鼠随机分为6组,于妊娠第8天,分别用0,1000,2000,4000,8000,16000个弓形虫速殖子灌胃感染,妊娠第18天处死,记录活胎率,测定母鼠肝、胎盘和胎仔脑组织弓形虫抗原。结果经ELISA检测弓形虫循环抗原证实,孕鼠死亡率与胎盘和胚胎感染率均随感染剂量的增加而升高,而活胎率下降。1000,2000组的胎盘、胚胎未发生感染,4000组的胚胎感染率5.13%,16000组的胚胎感染率20.00%,但孕鼠的健康状况差、死亡率高,均不适宜建立弓形虫垂直传播动物模型。综合分析表明,8000组孕鼠既有较高的存活率,又可保证胎盘和胚胎较高的感染率。结论每只孕鼠灌胃感染8000个速殖子为建立弓形虫垂直传播小鼠模型的适宜剂量。     

丹芍化纤方对大鼠肺纤维化NF-κB与氧化应激的影响

目的 观察博莱霉素致大鼠肺纤维化中核转氯因子-kB (NF-kB)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)的变化及丹芍化纤方对其的影响.方法 选取SD大鼠30只,随机分为正常对照组(正常组)、肺纤维化模型组(模型组)和丹芍化纤方治疗组(丹芍组),每组各10只.正常组气管内滴注生理盐水,模型组和丹芍组气管内一次性灌注...     

高脂饮食诱导妊娠期糖尿病大鼠模型的建立

目的 通过高脂饮食喂养的方法建立妊娠期糖尿病大鼠模型.方法 选取雌性SD大鼠55只,随机分为正常饮食未孕组、正常饮食怀孕组、高脂饮食未孕组、高脂饮食怀孕组,喂养3月后孕鼠组与雄性大鼠2:1合笼,各组继续给予高脂或普通饲料,分别于孕前及妊娠1、7、14、20 d测空腹血糖与体重,用酶联免疫吸附法动态监测空腹胰岛素和血清C肽值并计算胰岛素抵抗指数,于妊娠末期评估大鼠的葡萄糖耐量和血脂代谢指标,取大鼠肝脏和胰腺组织切片染色并做镜下观察.结果 高脂大鼠体重明显高于对照鼠,孕期体重显著增加(P<0.05),在孕期高脂孕鼠的空腹血糖,胰岛素,C肽水平都显著高于正常怀孕大鼠,胰岛素抵抗明显(P<0.05),孕晚期高脂怀孕大鼠的葡萄糖耐量曲线下面积、血脂水平都明显升高(P<0.05).结论 使用高脂饮食诱导可成功建立妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)的大鼠模型,此模型接近人类妊娠糖尿病的发病特点,为今后的广泛研究提供了媒介.     

脑瘫动物模型研究进展

脑性瘫痪的发病原因与机制复杂、多样,建立稳定的动物模型是后续研究的基础。目前脑瘫模型制备方法主要有缺血缺氧型、感染型、神经毒素型、脑外伤型、多法联合型5种。在诸多的脑瘫模型中,大鼠单侧颈总动脉结扎合并缺氧环境动物模型被认为最为成熟,成功率高,易于操作,重复性好,实验结果稳定可靠,运用较为广泛。感染模型中,应用孕鼠腹腔注射脂多糖(LPS)致宫内感染合并缺氧的方法更为成熟,具有创伤小,简单易行,能够逼真模拟人类在怀孕晚期宫内感染缺氧致胎儿脑部损伤等优点。