溃疡性结肠炎磷脂酰肌醇3激酶的表达及其抑制剂对肿瘤坏死因子α表达的影响

目的探讨磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）／Akt信号传导通路在溃疡性结肠炎（UC）发病中的作用并为沃特曼宁（wortmannin）作为UC治疗新药物提供实验依据。方法收集UC患者30例,15例结肠癌旁正常组织作为对照,采用免疫组化法检测UC肠黏膜组织中磷酸化Akt（p-Akt）的表达情况;体外组织培养观察P13K／Akt信号传导通路抑制剂wortmannin对UC肠黏膜活检组织肿瘤坏死因子（TNF）-α表达的影响。结果①UC肠黏膜组织中p-Akt的表达明显高于正常对照组（A值分别为73．6±5．2、18．0±2．6,阳染面积分别为720±58、133±29,均P〈0．05）。②与未用wortmannin处理的UC对照组比较,wortmannin处理后UC肠黏膜组织分泌TNF-α的水平明显较低（分别为296±39、138±11、26±5,均P〈0．05）。③用wortmannin处理后UC患者肠黏膜组织中p-Akt的表达低于未用wortmannin处理的UC对照组（A值分别为：72．3±6．2、35．3±5．6、18．0±2．2,阳染面积分别为716±94、351±50、129±30,均P〈0．05）。结论①PI3K／Akt信号转导通路参与了促炎性细胞因子TNF-α的调控与释放,可能在UC的发生发展中起着重要作用。②P13K的抑制剂wortmannin能阻断P13K／Akt信号转导通路,进而减少细胞因子的释放。wortmannin有可能成为治疗UC的新药物。     

PTEN/磷脂酰肌醇3激酶通路在心力衰竭患者心肌重构中的信号传导作用

目的观察不同程度充血性心力衰竭(CHF)患者心肌组织PTEN/磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)信号通路的表达,探讨心肌重构的信号转导机制。方法通过手术取材,选择因瓣膜性心脏病接受二尖瓣置换术的CHF患者39例作为心衰(CHF)组,正常对照组38例(其中8例来自意外死亡的器官捐献者)。免疫沉淀法检测心肌组织PTEN、PI3K、蛋白激酶B(Akt)蛋白表达及其磷酸化,以及α骨骼肌蛋白的表达。结果CHF患者心肌组织呈典型的重构心肌病理改变。心肌组织PTEN蛋白表达用光密度(A)比值(PTEN/βactin)表示,正常组3.29±0.11,心功能Ⅱ级组2.56±0.19,心功能Ⅲ级组1.52±0.35,心功能Ⅳ级组0.91±0.10,各CHF组与正常组相比差异有统计学意义(P<0.05或0.01)。PI3K磷酸化A比值(PI3K/βactin),正常组0.21±0.04、心功能Ⅱ级组0.52±0.09、心功能Ⅲ级组1.12±0.29、心功能Ⅳ级组1.62±0.54;Akt磷酸化A比值(Akt/βactin),正常组0.75±0.13,心功能Ⅱ级组1.21±0.34,心功能Ⅲ级组2.45±0.71,心功能Ⅳ级组3.55±0.80,随心功能恶化,PI3K及Akt磷酸化逐渐增强(P<0.05或0.01)。α骨骼肌蛋白表达A比值(α骨骼肌蛋白/βactin),正常组0.20±0.03,心功能Ⅱ级组0.41±0.04,心功能Ⅲ级组0.82±0.09,心功能Ⅳ级组1.56±0.11,各CHF组与正常组相比差异有统计学意义(     

PI3K/Akt信号通路与心血管疾病关系的研究进展

磷脂醜肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol-3-kinase/ protein kinase B,P13K/ Akt)信号通路具有广泛的生物学效应,在信号转导中起着重要作用.近年其在心血管疾病发生发展中的作用越来越受到关注,本文从PI3K/ Akt的分子生物学特点、与心血管疾病的关系以及...     

盐酸青藤碱介导Hedgehog信号通路治疗小鼠溃疡性结肠炎分子机制的研究

  目的  研究盐酸青藤碱(SH)对小鼠溃疡性结肠炎(UC)的保护作用及可能机制。   方法  将24只小鼠采用随机数字表法分为正常组、模型组、SH低、高剂量组(SH 20 mg/kg、60 mg/kg)4组,每组6只;记录疾病活动指数(DAI)和结肠组织病理学评分,检测Shh mRNA及相关蛋白和细胞因子的表达。   结果  与正常组相比,模型组DAI评分[(3.44±0.27)分vs. 0分, P＜0.001]升高,组织病理学评分升高[(7.67±0.52)分vs. 0分,P＜0.001],Shh mRNA降低(P＜0.05),Shh、Smo、Ptch1、Gli1蛋白表达水平降低(均P＜0.01),TNF-α、IL-1β、IL-6升高(均P＜0.001);与模型组相比, SH低、高剂量组DAI评分[(2.50±0.18)分、(1.89±0.17)分vs. (3.44±0.27)分, P < 0.001]降低, 组织病理学评分降低[(5.17±0.75)分、(3.33±0.52)分vs. (7.67±0.52)分, P < 0.001],Shh、Smo、Ptch1、Gli1蛋白升高(均P＜0.001),TNF-α、IL-1β、IL-6降低(均P＜0.01)。   结论  SH可治疗小鼠UC,其机制可能是SH上调了Hedgehog信号通路活性,从而降低了TNF-α、IL-1β、IL-6含量。      

磷脂酰肌醇3激酶信号通路影响细胞凋亡在肺腺癌A549细胞群集耐药中的作用

目的探讨PI3K信号通路在肿瘤群集耐药中的作用.方法采用旋转培养瓶结合台式水浴恒温振荡器旋转培养的方法,进行肺腺癌A.549细胞体外立体培养,通过Western blot、原位细胞凋亡检测、四唑盐(MTT)比色法及血球计数器计数法检测Akt、Bcl-2、Bad的表达、细胞凋亡率及对阿霉素(ADM)敏感性.结果①立体培养细胞存在Akt的高表达;②同平面培养比较,立体培养细胞存在Bcl-2高表达,Bad低表达,细胞凋亡率低,对ADM敏感性低的特征,阻断PI3K信号通路后,两者差异明显缩小.结论PI3K信号通路可通过抑制细胞凋亡在肺腺癌A549细胞群集耐药中发挥作用,阻断PI3K信号通路可能逆转该耐药现象.     

TNFα在溃疡性结肠炎发病机制中的探究

目的 观察肿瘤坏死因子在溃疡性结肠炎动物模型血清及肠粘膜中的表达，分析其发生机制。方法 将大鼠随机分为对照组、实验组和实验治疗组，用大鼠TNFα ELISA试剂盒测定大鼠血清及肠粘膜中TNFα含量。结果 实验组血清及肠粘膜中TNFα含量明显高于对照组和实验治疗组，且差异具有显著性，但对照组和实验治疗组间差异无显著性。结论 TNFα在UC血清及肠粘膜中明显升高并通过多种途径介导肠粘膜的损伤。     

熊果酸通过靶向STAT3信号通路对葡聚糖硫酸钠

目的:研究熊果酸(UA)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的实验性小鼠结肠炎模型的抗炎作用,旨在阐明其对肠上皮细胞(IEC)作用的可能分子机制.方法:在体内研究中,将体质量为20～22 g 的雄性BALB/c 小鼠15只采用随机数字表法分为正常对照组、DSS模型组、DSS+熊果酸治疗组.通过3％DSS诱导8 d,制备小鼠结肠...     

基于PI3K/AKT/mTOR信号通路对电针干预慢性结肠炎大鼠的腧穴特异性及机制研究

目的：基于PI3K/AKT/mTOR信号通路探讨电针“天枢”、“大肠俞”、“足三里”、“上巨虚”穴对慢性实验性结肠炎大鼠的效应差异及作用机制。方法：将60只清洁级SD大鼠随机分为正常组、模型组、天枢组、大肠俞组、足三里组、上巨虚组,每组各10只,采用免疫致敏法结合局部刺激制备慢性结肠炎大鼠模型;各腧穴组于造模结束后行电针干预,疏密波,频率2 Hz/50 Hz,电流强度2 mA,每日1次,20 min/d。分别观察各组大鼠结肠组织黏膜炎症损伤情况;ELSA检测大鼠血清中促炎因子IL-23、IL-17、IL-10水平;RT-PCR检测结肠组织中PI3K、Akt、mTOR mRNA的表达;Western blot检测结肠组织中p-PI3k/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白含量。结果：与正常组相比,模型大鼠一般状态较差,结肠黏膜受损严重,有大量炎性细胞浸润;血清中IL-23、IL-17表达水平明显升高,IL-10表达水平明显降低（P<0.01）;结肠组织中PI3K、Akt、mTOR mRNA及p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达水平显著升高（P<0...     

PI3K/AKT/mTOR信号传导通路在胃癌中的研究进展

胃癌的形成是一个十分复杂的过程,不但涉及到基因的突变,还涉及到细胞内信号传导通路的改变.PI3K/AKT/mTOR通路是细胞内重要的信号传导通路之一,该通路活化可以抑制多种刺激诱发的胃癌细胞凋亡,促进细胞周期进展,促进血管形成,参与胃癌的侵袭和转移[1-2].现就PI3K/AKT/mTOR通路的结构特点及在胃癌发生、发展中作用的研究进展进行综述.     

PI3K/Akt信号通路与肿瘤关系的研究进展

PI3K/Akt信号通路作为细胞内重要信号转导通路之一,通过影响下游多种效应分子的活化状态,在细胞内发挥着抑制凋亡、促进增殖的关键作用,与人类多种肿瘤的发生、发展密切相关。该信号通路的成分在人类大多数恶性肿瘤中都发生了变化,在肿瘤的增殖、存活和抵抗凋亡、血管发生以及细胞运动中发挥了重要作用。因此,通过对PI3K/Akt信号通路的研究有望寻求肿瘤药物治疗的新靶点。本文将重点就PI3K/Akt信号通路的组成及其与肿瘤发生、发展的关系予以综述。     

PI3K/Akt信号通路及神经损伤的研究进展

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路是一系列的级联反应过程,是一条经典的调节细胞存活、分化及凋亡信号转导通路,在生理和病理过程中起关键作用,并通过调节下游相关蛋白的活化过程发挥重要的生物学效应。由于神经细胞凋亡与一些老年性记忆减退或丧失之间有紧密联系,因此人们开始关注PI3K/Akt信号转导在神经系统发育和学习记忆中的作用机制。通过人们不断深入的研究,该信号通路在神经损伤性病变中的作用及机制被不断的发掘。总结PI3K/Akt的结构、作用机制与神经损伤性疾病中的关系,可为临床治疗神经损伤/退化性疾病提供理论指导。     

舒正颗粒对2型糖尿病大鼠糖脂代谢异常PI3K/AKT信号通路的影响

【目的】探讨舒正颗粒调节2型糖尿病(T2DM)大鼠糖脂代谢异常的作用机制。【方法】将70只大鼠随机分为正常组(N=10)、造模组(N=60)。采用高脂联合小剂量链脲佐菌素法复制2型糖尿病大鼠模型。再将造模成功的50只大鼠随机分为模型组,二甲双胍组(剂量为1.80 g·kg^-1·d^-1),舒正颗粒高、中、低剂量组(剂量分别为5.40、2.70、1.35 g·kg^-1·d^-1),每组10只。药物干预4周后,采用葡萄糖氧化酶法测定大鼠空腹血糖(FPG),酶联免疫吸附分析(ELISA)测定空腹胰岛素(FINS)及糖化血红蛋白(HbA1c),胆固醇氧化酶-过氧化物酶偶联(COD-PAP)法测定总胆固醇(TC),甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶(GPO-PAP)法测定甘油三酯(TG),过氧化氢酶清除法测定高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),表面活性剂清除法测定低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法、蛋白免疫印迹(Western Blot)法分别检测大鼠肝脏胰岛素受体底物2(IRS2)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、叉头框蛋白O1(FoxO1)的mRNA及蛋白表达情况。【结果】与正常组比较,模型组糖、脂代谢观察指标(FPG、Hb A1c、FINS、TC、TG、LDL-C)水平明显升高(P<0.05),IRS2、PI3K、AKT2的蛋白含量及mRNA表达水平均降低(P<0.05或P<0.01),FoxO1的蛋白含量及mRNA表达水平升高(P<0.01)。与模型组比较,舒正颗粒高、中、低剂量组糖、脂代谢观察指标(FPG、HbA1c、FINS、TC、TG、LDL-C)水平明显降低(P<0.05或P<0.01),舒正颗粒高剂量组IRS2、PI3K、AKT2的蛋白含量及m RNA表达水平均升高(P<0.05或P<0.01),FoxO1的蛋白含量及mRNA表达水平均下降(P<0.05或P<0.01)。【结论】舒正颗粒可调节2型糖尿病大鼠糖脂代谢异常状态,其机制可能与上调IRS2、PI3K、AKT2及下调FoxO1表达有关。     

p38丝裂原活化蛋白激酶在溃疡性结肠炎中的作用

目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)在溃疡性结肠炎(UC)以及葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结肠炎中的作用。 方法 ①7只Balb/c小鼠随机分为3组:正常对照组、DSS结肠炎组、p38MAPK选择性抑制剂SB203580干预组。结肠炎组小鼠每日饮用5% DSS溶液,干预组小鼠则在饮用5% DSS溶液72 h后,加用SB203580[1 mg/(kg·d)]进行腹腔注射。观察并记录各组小鼠的疾病活动指数(DAI);7 d后处死小鼠,观察各组小鼠肠黏膜组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的表达。②收集36例活动性UC患者的肠黏膜组织标本,并以18例结肠癌旁的正常组织标本作对照,通过体外组织培养,观察SB203580对UC患者肠黏膜活检组织中TNF-α和IL-1β表达的影响。 结果 ①DSS结肠炎小鼠的DAI评分、肠黏膜组织中TNF-α和IL-1β的水平明显升高(P均<0.01),经SB203580干预后,其DAI评分、TNF-α、IL-1β的水平均明显降低,但仍然高于正常对照组(P均<0.01)。②体外组织培养结果显示,与未用SB203580处理的UC组比较,SB203580处理后UC患者肠黏膜组织中TNF-α和IL-1β的水平明显降低(P<0.01)。 结论 SB203580能阻断p38MAPK信号转导通路,从而降低促炎性细胞因子TNF-α和IL-1β的释放。     

PI3K/Akt信号通路在增生性瘢痕中的调控作用

目的 探讨PI3K/AKT信号通路在增生性瘢痕中的调控作用。方法 构建兔耳增生性瘢痕模型,并随机分为4组：正常兔耳皮肤组（A）、瘢痕模型组（B）、DMSO刺激模型组（C）、PI3K特异性抑制剂（LY294002）刺激模型组（D）。通过组织病理学观察兔耳瘢痕的形态学变化;免疫组化和Western blot检测pAkt[S473]和p-Akt[T308]的表达量;免疫荧光双染色评估p-Akt[S473]和p-Akt[T308]的共定位情况;以及TUNEL评估皮肤组织中成纤维细胞的凋亡水平。结果 D组中瘢痕厚度及成纤维细胞数明显高于B和C组。免疫组化和Western blot检测结果表明,p-Akt[T308]和p-Akt[S473]在B组中的表达量明显高于A组,但在D组中显著低于C组。免疫荧光表明,p-Akt[T308]和p-Akt[S473]主要定位于瘢痕组织中的细胞浆内,且在D组中的共表达量低于B组。TUNEL检测结果证实,与A组相比,B组皮肤组织中细胞凋亡水平明显下调,且D组中细胞凋亡水平高于C组（P <0.01）。结论 阻断PI3K/Akt信号通路可通过抑制Akt磷酸化,导致...     

PI_3K-AKT信号通路在急性胰腺炎发病与进展中的作用

急性胰腺炎(AP)被认为是与全身炎性反应综合征密切相关的全身性疾病,目前发病机制尚不清楚,但炎性反应及胰腺细胞的凋亡坏死是AP的基本病理过程。磷酸肌醇3激酶-蛋白激酶B(PI3K-PKB/Akt)信号通路的研究已明确其在细胞生长、增殖、凋亡、炎症等细胞功能中发挥重要作用。PI3K-AKT信号通路是否参与AP的发病与进展及其机制仍无一致意见。现就PI3K-Akt信号通路在AP中的作用进行综述。     

PI3K/Akt信号通路调控胃癌细胞SGC7901生长的研究

目的 探讨PI3K/Akt(磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B)信号转导通路在人胃癌细胞株SGC7901生长中的作用机制.方法 应用PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002用SGC7901,并设对照组和实验组.MTT法检测LY294002作用24、48、72 h后,对SGC7901细胞增殖的影响;流式细胞仪检测胃癌细胞周期的变化;Western-blot检测P-Akt蛋白的表达水平的变化.结果 LY29400对SGC7901细胞的增殖有抑制作用,与正常培养组比较,培养24 h时尚无差异,培养48、72 h后差异显著(P<0.05)具有统计学意义.流式细胞法及Western blot结果显示:LY29400作用于SGC7901细胞后,胃癌细胞SGC7901的凋亡率增强、G0/G1期细胞比例增加并使P-Akt 蛋白表达减弱.与正常培养组比较(P<0.05),具有统计学意义.结论 阻断PI3K/Akt信号转导通路,胃癌细胞生长、分化受到抑制,凋亡率增强.PI3K/Akt信号通路对胃癌细胞SGC7901的调控起一定作用.     

艾灸对压疮大鼠皮肤损伤修复及PI3K/Akt信号通路的影响

背景　近年来研究发现,艾灸能够促进压疮（PU）愈合,但其作用机制尚未明确。磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶（Akt）信号通路通过参与细胞增殖、分化和凋亡等多种生物过程,在皮肤损伤的愈合过程中发挥重要的调节作用。目的　观察艾灸对PU大鼠创面愈合及PI3K/Akt信号通路的影响,探讨艾灸在皮肤损伤与修复过程中的作用机制。方法　2018年3月—2019年2月选取SPF级成年雌性SD大鼠30只,20只大鼠参照缺血-再灌注原理进行PU造模,造模后按1∶1比例随机分为艾灸组和模型组,另外10只为空白组不予造模。模型组给予碘伏清洁创面,1次/d,10 d为1个疗程;艾灸组采用艾灸在创面局部治疗,15 min/次,1次/d,10 d为1个疗程。干预1、3、5、7、10 d观察比较创面愈合率、创面病理损伤情况、磷酸化Akts473、磷酸化Bads136、磷酸化Caspase-9s196蛋白表达水平。结果　干预3、5、7、10 d艾灸组创面愈合率均高于模型组（P<0.05）。HE染色显示,与模型组相比,艾灸组炎性细胞浸润较少,可见较多新生肉芽组织及血管。干预1、3、5、7、10 d模型组与艾灸组磷酸化Akts473蛋白表达水平高于空白组（P<0.01）;干预1、3、5、7、10 d艾灸组磷酸化Akts473蛋白表达水平高于模型组（P<0.05）。 干预1、3、5、7、10 d模型组与艾灸组磷酸化Bads136蛋白表达水平高于空白组（P<0.01）;干预1、3、5、7、10 d艾灸组磷酸化Bads136蛋白表达水平高于模型组（P<0.01）。干预1、3、5、7、10 d模型组与艾灸组磷酸化Caspase-9s196蛋白表达水平高于空白组（P<0.01）;干预1、3、5、7、10 d艾灸组磷酸化Caspase-9s196蛋白表达水平高于模型组（P<0.01）。结论　艾灸能够促进PU大鼠创面皮肤愈合,其作用机制可能与激活PI3K/Akt信号通路,发挥抗凋亡作用有关。     

PI3K-Akt信号通路与心肌保护

越来越多的研究表明,药物及非药物手段可以在再灌注之初通过活化磷酯酰肌醇-3-激酶-丝氨酸/苏氨酸激酶(PI3K-Akt)这一共同通路,发挥提高心肌功能和促进细胞存活的重要作用。本文对PI3K、Akt、下游靶点、效应器在缺血/再灌注中的作用进行综述,阐明PI3K-Akt信号通路的主动保护效应在心肌保护中的重要性。     

PI3K/Akt通路与肿瘤的化疗耐药关系研究

肿瘤细胞耐药性的产生是导致肿瘤化疗失败的重要因素,其产生的机制尚未完全清楚。研究发现,PI3K/Akt通路不仅与细胞的增殖、凋亡有关,而且在肿瘤的生长、对化疗的反应方面都扮演着重要角色。特异性抑制PI3K/Akt通路的活性可减少肿瘤细胞的化疗耐药性,通路抑制剂联合化疗可增强化疗效果,这提示了PI3K/Akt通路可作为肿瘤治疗的潜在靶点。