乳胶凝集试验检测耐甲氧西林葡萄球菌的分析研究

耐甲氧西林葡萄球菌(methecillin resistant Staphylocaccus,MRS)是目前抗生素难以控制的医院感染菌,为此我们对检测MRS的乳胶血清凝集法、K-B纸片扩散法、聚合酶链反应(PCR)mecA基因法以及β-内酰胺酶法作了平行比较分析。     

胶乳凝集试验快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)是重要的医院感染致病菌 ,快速准确检测MRSA是控制感染的关键。MRSA的表型检测受多种因素的影响 ,结果不够准确 ,耗时长。通过聚合酶链反应 (PCR)扩增编码耐药菌特异的青霉素结合蛋白 2a (PBP2a)的mecA基因来鉴定是实验室最可靠的方法之一 ,但受设备、试剂等的限制 ,不易在临床推广应用。现报道一种新的直接测定PBP2a的快速检测方法———MRSA 胶乳凝集试验法 ,并以PCR法为“金标准”评价了胶乳凝集试验法、全自动仪器 (VITEK1)法、琼脂筛选法、纸片扩散法 4种方法测定MRSA的可靠性和临床应…     

乳胶结合试验快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的：评价乳胶结合试验检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的试验方法。方法：收集81株金黄色葡萄球菌临床分离株，通过药敏试验将其分为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和对甲氧西林敏感的金葡菌（MSSA），应用乳胶结合试验和基因扩增分别检测青霉素结合蛋白2a(PBP2a)和mecA基因。结果：33株mecA基因扩增阳性菌株中的28株PBP2a检测呈阳性，5株为阴性，46株MSSA中，meca基因扩增及PBP2a检测全部为阴性。与聚合酶链反应检测mecA基因相比，乳胶结合试验检测MRSA的特异性和敏感性分别为100％和91．3％（74／81）。结论：乳胶结合试验是一种简便、快速、准确地检测MRSA的方法，适于在普通临床微生物实验室开展。     

耐甲氧西林葡萄球菌检测方法评价

目的对耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）的检测方法进行评价．寻找适合基层医院实验室检测MRS的方法。方法以聚合酶链反应（PCR）法作为“金标准”，对苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法和青霉素结合蛋白2a（PBP2a）胶乳凝集法检测MRS进行方法学评价。结果3种检测方法与PCR法相比，差异均无统计学意义（P〉0．05），但以PBP2a胶乳凝集法的敏感性和特异性较高（97．6％，100．0％）。其次是头孢西丁纸片扩散法（97．6％，87．5％），而苯唑西林纸片扩散法的敏感性和特异性最低（90．2％，75．0％），并且苯唑西林容易失效。结论临床实验室可根据实际情况使用此3种检测方法进行MRS筛检，但推荐以PBP2a胶乳凝集法和头孢西丁纸片扩散法为更佳。     

金黄色葡萄球菌耐药性分析及耐甲氧西林的检测

目的 了解我院金黄色葡萄球菌多重耐药性情况 方法 采用法国生物梅里埃ATB半自动细菌分析仪ID 32STAPH试条进行细菌鉴定,药物敏感试验采用K-B法。结果 共分离出116株金黄色葡萄球菌,其中MRSA 75株占金黄色葡萄球菌的64.5％,MRSA为多重耐药,对β-内酰胺类药物均耐药。结论 金黄色葡萄球菌的耐药问题相当严重,MRSA所占比例较高     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的研究进展

１什么是ＭＲＳＡ金黄色葡萄球菌是临床上常见的毒性较强的细菌，自从本世纪４０年代青霉素问世后，金黄色葡萄球菌引起的感染性疾病受到较大的控制，但随着青霉素的广泛使用，有些金黄色葡萄球菌产生青霉素酶，能水解β－内酰胺环，表现为对青霉素的耐药。因而人们又研究...     

耐甲氧西林葡萄球菌的DNA 探针杂交检测

我们认为有效控制耐甲氧西林葡萄球菌(ＭＲＳ)感染的流行,准确的检测是关键,但常规药敏方法易受酸碱度、温度、盐浓度等因素的影响,结果不准确,主张从耐药基因型(ＭｅｃＡ基因)进行检测诊断[13],主要方法之一为ＤＮＡ探针杂交检测ＭｅｃＡ基因诊断ＭＲＳ。一、材料和方法1菌株来源:共39株菌,其中22株为本院实验室保留菌株,16株菌为最近从重症监护病房(ＩＣＵ)一次暴发流行中分离所得,另1株为质控菌(金葡菌ＡＴＣＣ25923)。2试剂:ＴＥａｓｙ载体,限制性内切酶ＥＣＯＲＩ,通用引物Ｔ7ＰｒｏｍｏｔｅｒＰｒｉｍｅｒ,ＤＮＡ探针标记试剂盒均为Ｐ…     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌

目的以PCR法检测葡萄球菌的mecA基因(mecA基因法)为标准，评价头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和苯唑西林盐平板法检测葡萄球菌中耐甲氧西林葡萄球菌的灵敏度和特异性。方法PCR扩增葡萄球菌的特异性mecA基因片段，头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和苯唑西林盐平板法检测葡萄球菌中耐甲氧西林葡萄球菌，药敏试验方法按标准K—B(Kirby-Bauer)法进行。结果在190株临床分离的葡萄球菌中金黄色葡萄球菌(金葡菌)138株，表皮葡萄球菌30株，溶血葡萄球菌22株，经。PCR法检测mecA基因，金葡菌中耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和凝固酶阴性葡萄球菌中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的发生率分别为81.2％(112／138)、96．1％(50／52)。头孢西丁纸片扩散法检测金葡菌中MRSA和CNS中MRCNS的发生率分别为81.2％(112／138)、94．2％(49／52)，与mecA基因法结果相比较，头孢西丁纸片扩散法检测葡萄球菌中MRS的灵敏度和特异度分别为99．4％(161／162)、100．0％(28／28)，两者符合率为99．5％(189／190)。2种方法所获得的结果经统计学处理，两者差异无显著性。结论头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌具有很高的灵敏度和特异度，适合在临床微生物实验室中进行推广。     

VITEK系统筛选耐甲氧西林葡萄球菌的可靠性

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)与耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)是目前导致医院感染的重要病原菌[1]。该两类葡萄球菌对常用抗菌药物大多耐药,惟有对万古霉素敏感。     

老年慢性支气管炎患者耐甲氧西林葡萄球菌的检测

目的研究老年慢性支气管炎患者耐甲氧西林葡萄球菌的感染情况,并进行耐药性分析。方法对纳入病例采用法国生物梅里埃API细菌自动分析软件进行咽拭子培养、鉴定,就其中分离得到的共362株葡萄球菌中耐甲氧西林葡萄球菌的分布规律及耐药性进行回顾性分析。结果在被分离的362株葡萄球菌中耐甲氧西林葡萄球菌171株,分离率为47.23%,耐甲氧西林葡萄球菌对左氧氟沙星、苯唑西林、克林霉素、阿奇霉素、头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦的耐药性与凝固酶阴性葡萄球菌的差异有统计学意义(P0.05)。结论耐甲氧西林葡萄球菌是老年慢性支气管炎患者的重要病原菌,且对常用抗菌药物呈多重耐药性,依照药敏试验使用抗菌药物是抗感染治疗有效的关键。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的实验研究

目的 探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌抗生素药敏试验的情况.方法 药敏试验采用纸片扩散法.结果63株金黄色葡萄球菌中,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)有33株,占52.4%,并呈多重耐药,对青霉素、红霉素、庆大霉素、氯林可霉素和四环素均100%耐药,对利福平、左旋沙星表现为较高耐药率;甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA),对青霉素、红霉素和庆大霉素的耐药率均在80%以上.MRSA和MSSA对万古霉素和替考拉宁耐药率为0.结论 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对抗生素表现为多重耐药,临床应注意合理使用抗生素.     

三种检测甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌方法的比较

目的:比较苯唑西林纸片扩散法、苯唑西林-高盐琼脂筛选试验和PBP2′乳胶凝集试验(PBP2′ latex agglutination test,LA)检测甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)的差异。方法:用上述3种方法同时检测85株临床分离的金黄色葡萄球菌。结果:3种方法同时检测出38株MRSA和47株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌,一致性为100%。结论:LA法适于临床实验室快速准确检测MRSA。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌临床耐药性分析

目的 为预防和控制医院感染的发生,对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的临床分布和耐药性进行分析.方法 使用ATB细菌鉴定分析仪进行细菌鉴定,用纸片扩散法鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,药敏试验用K-B法.结果 在各临床科室中,由耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引起的医院感染,ICU的比例最高,下呼吸道是最常见的感染部位,52株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对多种抗菌药物耐药,没有发现耐万古霉素菌株.结论 由耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引起的医院感染以ICU病人最多见,以下呼吸道感染为主,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌除对万古霉素敏感外对多种抗菌药物耐药.因此,临床医生要合理使用抗菌药物.     

评价头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法测定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的 评价头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测耐甲氧两林金黄色葡萄球菌（MRSA）的临床价值。方法用头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测临床分离的200株金黄色葡葡球菌，以测定PBP2a的MRSA-乳胶凝集试验作为“金标准”。结果92株PBP2a阳性金黄色葡萄球菌巾．头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法分别检出MRSA91株和84株：108株PBP2a阴性中，头孢西丁纸片扩散法全部为阴性，苯唑西林纸片扩散法阴性为103株。以PBP2a检测结果为标准．头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测MRSA的特异性分别为100．0％和95．4％．敏感性分别为98．9％和91.3％。5株苯唑西林纸片扩散法检测为中介的菌株。经PBP2a检测结果证实，3株为MRSA，2株为MSSA。结论头孢西丁比苯唑西林更适合检测MRSA．并能提高测定MRSA的可靠性，是临床实验室常规检测MRSA的首选方法。     

耐甲氧西林葡萄球菌的临床检测及耐药性分析

采用药敏实验与MRS的检测均采用琼脂扩散法(K-B)法检测,测定耐甲氧西林金黄色葡萄糖菌(MRSA)及耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄糖球菌(MRCNS)。结果 MRSA、MRCNS对头孢唑啉、苯唑西林、红霉素、氨苄西林的耐药率均为100%,明显高于其他抗菌药物,差异均有统计学意义(P<0.05),对复方新诺明耐药率分别为100%,93.26%,对哌拉西林、庆大霉素、左氧氟沙星、环丙沙星耐药率均>70%,对诺氟沙星耐药率分别为55.26%、89.72%,对呋喃妥因、氯霉素、利福平、阿米卡星耐药率均30%左右及以下,未检出对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁的耐药菌株。MRS具有多重耐药性,应积极进行病原学监测,为临床合理用药提供帮助,有效控制感染的发生。     

评价头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法测定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的评价头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的临床价值.方法用头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测临床分离的200株金黄色葡葡球菌,以测定PBP2a的MRSA-乳胶凝集试验作为″金标准″.结果92株PBP2a阳性金黄色葡萄球菌中,头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法分别检出MRSA 91株和84株;108株PBP2a阴性中,头孢西丁纸片扩散法全部为阴性,苯唑西林纸片扩散法阴性为103株.以PBP2a检测结果为标准,头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测MRSA的特异性分别为100.0%和95.4%,敏感性分别为98.9%和91.3%.5株苯唑西林纸片扩散法检测为中介的菌株,经PBP2a检测结果证实,3株为MRSA,2株为MSSA.结论头孢西丁比苯唑西林更适合检测MRSA,并能提高测定MRSA的可靠性,是临床实验室常规检测MRSA的首选方法.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec检测及耐药性分析

目的探明耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的流行情况,分析葡萄球菌盒染色体mec（SCCmec）的主要分型,通过检测葡萄球菌属细菌的耐药性,为MRSA的流行病学调查和临床治疗提供理论依据。方法用头孢西丁纸片法筛选耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌,用青霉素结合蛋白2a（PBP2a）测定法对MRSA进行确证;应用实时荧光定量PCR系统扩增葡萄球菌染色体mec盒,并对MRSA进行基因分型;用VITEK 32全自动微生物分析仪检测其耐药性。结果 97株MRSA菌株中包括SCCmec II型12株、Ⅲ型77株、IV型8株。所有菌株对包括苯唑西林在内的多种抗生素耐药,对利福平的耐药率均较低,对万古霉素完全敏感,各型别间差异无统计学意义。Ⅲ型MRSA菌株表现为多重耐药,耐药率高于II型、IV型MRSA菌株。结论深圳东部地区临床分离的MRSA SCCmec基因型以Ⅲ型菌株为主,且具有对抗生素多重耐药的特征。     

聚合酶链反应检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌mecA基因

建立聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔＳ．ａｕｒｅｕｓ，ＭＲＳＡ）ｍｅｃＡ基因的技术。四种ＤＮＡ提取方法检测灵敏度依次为超声裂解法（５×１０５ＣＦＵ／ｍｌ）、溶菌酶表面活性剂法（５×１０６ＣＦＵ／ｍｌ），表面活性剂法（１×１０７ＣＦＵ／ｍｌ）和直接煮沸法（１×１０８ＣＦＵ／ｍｌ），直接煮沸法具有简便性。引物的正链位于１８１～２００、负链位于３１１～３３０，序列分别为５＇－ＧＡＡＡＴＧＡＣＴＧＡＡＣＧＴＣＣＧＡＴ，５＇－ＧＣＧＡＴＣＡＡＴＧＴＴＡＣＣＧＴＡＧＴ，其扩增产物长度为１５０ｂｐ。五种常见菌证明本法具有较高特异性。苯唑青霉素ＭＩＣ水平与ｍｅｃＡ基因之间具有很好的相关性，ＭＩＣ≥４μｇ／ｍｌ的２２株菌均检出ｍｅｃＡ基因，提示苯唑青霉素常规检测ＭＲＳＡ的可行性。ＰＣＲ方法对于隐匿型耐药株的检出具有重要价值。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性分析

目的分析本院2005年1月至2006年12月耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的分布及耐药性,指导临床合理应用抗生素。方法用头孢西丁检测金黄色葡萄球菌临床分离株的敏感性,用K—B法检测MRSA对青霉素、红霉素、环丙沙星、氯霉素、呋喃妥因、利福平、复方新诺明、万古霉素、力奈唑烷等抗生素的耐药结果。结果136株金黄色葡萄球菌中,共检出MRSA97株,检出率为71．3％。痰及咽拭子标本检出率最高,为62．9％（61／97）,依次分别为分泌物19．6％（19／97）,尿12．4％（12／97）,其他5．0％（5／97）。MRSA对青霉素、红霉素、环丙沙星的耐药高达98％～100％,没有检出耐万古霉素的金黄色葡萄球菌。结论MRSA的耐药现象严重,万古霉素是目前治疗MRSA最为有效的抗生素。加强对MRSA的检测和耐药性监测对指导临床合理使用抗生素具有重要意义。