丙酮酸在微板赖氏法测定ALT酶活力中的应用

丙酮酸在丙氨酸氨基转氨酶 ( ALT)的测定中 ,主要用于绘制标准曲线 (赖氏法 )。测定 ALT的方法有速率法和赖氏法等。赖氏法又分为试管法和微板法两种 ,试管法费工、费时 ,不利于计算机对原始数据的网络化管理 ,而速率法受温度影响较大 ,为此 ,笔者在微板赖氏法中 ,利用丙酮酸为标准液 ,进行 ALT检测 ,并与试管法与速率法比较 ,现介绍如下。材料与方法1　仪器　 TECAN GENESIS RSP1 5 0全自动加样系统 (奥地利产 ) ,TECAN SPECTRA温控酶标仪 (奥地利产 ) ,Heidolph温控震荡器 (德国产 ) ,96孔微孔平底板 (天津开元公司提供 )…     

用MK3酶标仪绘制ALT标准曲线

笔者将MK3酶标仪曲线定量功能,运用到改良赖氏法检测献血者ALT绘制标准曲线工作中,现介绍如下。1材料与方法1.1材料雷勃MK3酶标仪,96孔平底微孔板,赖氏法试剂盒(下面以北化康泰试剂盒为例)。1.2标准管的配制按试剂盒说明书在试管中作出标准曲线管(表1)。将各管置于37℃水浴箱内温育5min,加入2.4-二硝基苯肼100μl,置于37℃水浴箱内温育20min,加NaOH0.4mmol/L2ml室温放置10min后,在酶标仪520nm处比色,以蒸馏水调零,测各管吸光度。将蒸馏水、标准管的液体用微量加样器加200μl到平底微孔板孔中,A1孔中加蒸馏水,“1”管加入A2中,“2”号…     

快速ALT测定筛选法

目前，各基层医院仍较普遍的采用越氏法测定血清ALT，由于赖氏法中基质浓度低和基质内甜酸的干扰，其标准曲线呈抛物线状态，ALT高值血清测定结果明显偏低，已不能满足临床对检验结果越来越精确的要求．而市售的酸偶联速率法（以下称速率法）测定ALT试剂盒价格昂贵，复港后保存期短。因此我们通过实验将越氏法做适当改变，建立了一种快速ALT倒卖筛选法，对需测ALT血清标本进行筛选·然后用速率法测定ALT活力，即提高了准确性，又节约了贵重试剂．现报告如下：1材料和方法1．1试剂、仗8①测定ALT赖氏法试剂：按《全国临床检验操作规…     

应用丙酮酸氧化酶法替代赖氏法筛查血浆ALT活性

目的　用丙酮酸氧化酶法替代赖氏法筛查血浆丙氨酸氨基转移酶 (ALT)活性 ,并对其可行性及适用性进行研究。方法　用赖氏法和丙酮酸氧化酶法 (酶标板法和试管法 )分别测定不同ALT值的血浆标本 ,并对结果进行统计分析。结果　 96孔酶标板法具有较好的精密度 ;线性范围达 135卡门氏单位 ;与赖氏法结果比较 ,可将 5 8份阳性标本全部检出 ,无阳性漏检。但酶标板法结果存在假阳性 (假阳性率为 0 .2 5 %) ,使用试管法进行复检后 ,结果与赖氏法完全一致。结论　使用丙酮酸氧化酶法ALT检测试剂盒可进行大批量ALT筛查 ,该方法具有快速、简便的优点 ,特别适用于标本量大手工操作的实验室。检测结果可用赖氏法的卡门氏单位表示 ,可以代替赖氏法。     

用丙酮酸标准品测定ALT

血清谷丙转氨酶(ALT)是献血者健康检查的项目之一,而赖氏法是血站基本标准中规定的ALT检测方法.为适应于血站检测ALT的特点,笔者沿用赖氏法的试验原理、步骤,并对结果的判定方法加以改进,即以丙酮酸作为标准品替代赖氏法标准曲线,由公式计算得出试验结果.该检测方法检测ALT,结果准确,操作简便,无需更新设备,适用于血站,现报告如下.     

应用丙酮酸氧化酶法替代赖氏法筛查血浆ALT活性

目的用丙酮酸氧化酶法替代赖氏法筛查血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,并对其可行性及适用性进行研究.方法用赖氏法和丙酮酸氧化酶法(酶标板法和试管法)分别测定不同ALT值的血浆标本,并对结果进行统计分析.结果 96孔酶标板法具有较好的精密度;线性范围达135卡门氏单位;与赖氏法结果比较,可将58份阳性标本全部检出,无阳性漏检.但酶标板法结果存在假阳性(假阳性率为0.25%),使用试管法进行复检后,结果与赖氏法完全一致.结论使用丙酮酸氧化酶法ALT检测试剂盒可进行大批量ALT筛查,该方法具有快速、简便的优点,特别适用于标本量大手工操作的实验室.检测结果可用赖氏法的卡门氏单位表示,可以代替赖氏法.     

丙酮酸钠在ALT赖氏法检测室内质控中的应用

用ALT赖氏法试剂盒内丙酮酸钠标准液作为ALT赖氏法检测室内质控物,每次随样本一同检测,与购置的质控血清进行比较,结果表明丙酮酸钠优于质控血清,结果稳定可靠,使用方便.     

丙氨酸氨基转移酶3种方法检验结果比较

根据献血者健康检查要求．献血者丙氨酸氨基转移酶（ALT）的合格标准．速率法为ALT≤40iU／L，赖氏法ALT≤25U。但由于传统赖氏法操作烦琐费时，因此很多血站．特别是基层血站用新的ALT检测方法（丙酮酸氧化酶法和赖氏法微板孔测定法）来测定献血者ALT。为此，我们把传统赖氏法的检测结果与丙酮酸氧化酶法和赖氏法微板孔测定法结果作了比较分析。     

及时分离血清对速率法测定转氨酶活力的意义

目前,国内各实验室测定转氨酶(ALT和AST)多采用赖氏法或速率法。当临床送检的全血标本不及时分离血清时,则用速率法测定的结果偏高。由此,我们进行了以下实验。材料和方法1.ALT、AST活力测定分别用赖氏手工法和荷兰Vital AB-210型半自动生化分析仪速率法。2.血糖使用GOD-POD法,采用上海     

简便准确的谷丙转氨酶标准曲线数据处理法

血清谷丙转氨酶（ALT）测定是临床诊断肝病的重要指标。赖氏法是国内推荐的方法。目前虽有一些大单位使用速率法，但赖氏法仍是基层单位普遍使用的方法。赖氏法测定ALT的基质中，由于废物浓度不足，酶催化产生的丙酮酸量与酶活性不成正比，标准曲线不是一条直线，不能用直线回归来进行处理。普遍采用的描点作图法，不但操作繁琐，且易造成人为误差。计算机法‘”结果准确，但设备昂贵．不适用于基层单位．而其他方法计算较繁。我们根据赖氏法测定AnT标准曲线的图形特征，采用直线回归和对数回归相结合的方法（下称本法）对其数据进行处…     

2种测定血清丙氨酸氨基转移酶方法的比较

血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定项目是常用检测肝功能的试验,在健康人群体检中作为了解肝功能情况的主要指标之一,以前一直使用赖氏法检测,该方法存在着血清需要量大、检测时间长、操作步骤多、每批试剂都需要绘制标准曲线等缺点;在健康人群体检时标本数量很大,需要一种能够简便、快速、准确的适合大量筛选的检测方法。然而用丙酮酸氧化酶法测定ALT ,具有血清用量小、检测时间短、步骤简单、无需绘制标准曲线等优点,可以作为体检筛选ALT的好方法。一、材料和方法1.标本来源　随机抽取体检血清标本4 0份。2 .试剂来源　赖氏法检测试剂和…     

全血微量ALT试条法初筛献血者的探讨

丙氨酸氨基转移酶 ( ALT)是献血者健康检查的重要项目之一 ,按照目前采供血机构标准中的有关规定 ,在血液采集前后均需进行 ALT等的初筛和复检 ,以确保血液质量。但由于现行初筛 ALT的方法受到实验条件及时间的限制 ,已不能满足无偿献血 ,特别是街头无偿献血的要求。为减少血液报废率 ,笔者用全血微量 ALT试条法 (简称微量法 )对献血者进行 ALT初筛 ,并同时用速率法、赖氏法进行对比实验 ,达到了预期的结果。材料与方法1　试剂　全血微量 ALT试条 ,批号 2 0 0 1 1 0 2 0 ,北京远东协和生物技术有限公司产品 ;丙氨酸氨基转移酶试剂盒…     

献血者筛查ALT活性标准研究分析

目的　探讨分析ALT活性作为献血者检测标准及其参考区间。方法　选择从未受血和HBV、HCV标志物均为阴性的 2 84 9名健康人和献血者作为研究对象 ,采用连续监测技术测定其血清ALT活性 ,又在其中随机选取 6 85名以赖氏法测定ALT活性。结果　血清ALT的测定值在各年龄组无显著性差异 ;男性ALT活性明显高于女性 ,具有明显的统计学差异 (连续监测法 :Ρ<0 .0 0 1 ;赖氏法 :Ρ<0 .0 5 )。ALT活性连续监测法测定 x± 2s上限为 5 3 4 9U/L , x± 3s限为 6 6 .5 9U/L ;ALT活性赖氏法测定 x± 2s上限为 2 4 96U , x± 3s上限为 38 89U。结论　参照赖氏法参考区间 ,ALT连续监测法参考区间上限应该为 5 3.4 9U/L。     

全自动酶免分析系统定量检测ALT的应用

手工赖氏试管法定量 AL T,首先要定期制定标准曲线 ,然后按标准曲线进行计算 ,手工计算时要减去空白管 ,费工费时。因此 ,我们利用全自动酶免分析系统 ,采用现有 Au S.L ab2 .0软件读板 ,建立了微板赖氏定量方法 ,以不同量的丙酮酸为标准 ,每次试验仪器均可自动建立标准曲线 ,然后仪器自动给出各样品的卡门单位 ,现报告如下。1　对象和方法1.1　对象　郑州市无偿献血者。1.2　试剂及厂家　 AL T赖氏法试剂盒 (上海生物制品研究所 ) ;96微孔平底板 (丹麦 Nunc公司 )。1.3　仪器及厂家　RSP2 0 0全自动加样器 (瑞士 Tecan集团 ) ;BEP (…     

读者·作者·编者

<正> 编辑部: 看到贵刊1993年第6卷第4期218页“河南省部分地区1140名献血者丙型肝炎病毒感染状况”一文中“1.3 ALT的测定赖氏法,大于40u异常”,认为不妥。我国于60年代初即开始用赖氏法测ALT(SGPT),文革期间有些单位自定>40单位为异常,但从来没有被正式承认过。 朱忠勇与陈之航主编《临床医学检验》(上海科学技术出版社,1978)一书曾有说明:本法正常值几经改变,1970年原作者将正常值定为GPT5～25单位(26～35可疑)”(328页注7)。中华人民共和国卫生部医政司《全国临床检验操作规程》(东南大学出版社,1991)规定:ALT参考值5～26卡门氏单位(即赖氏法单位)(87页)。卫生部血站基本标准,附件2之三,供血者化验标准:ALT血液检测,赖氏法≤25单位。     

2种测定血清丙氨酸氨基转移酶方法的比较

血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定项目是常用检测肝功能的试验，在健康人群体检中作为了解肝功能情况的主要指标之一，以前一直使用赖氏法检测，该方法存在着血清需要量大、检测时间长、操作步骤多、每批试剂都需要绘制标准曲线等缺点；在健康人群体检时标本数量很大，需要一种能够简便、快速、准确的适合大量筛选的检测方法。然而用丙酮酸氧化酶法测定ALT，具有血清用量小、检测时间短、步骤简单、无需绘制标准曲线等优点，可以作为体检筛选ALT的好方法。     

改良赖氏法测定谷丙转氨酯的标准曲线拟合

改良赖氏法测定谷丙转氨酶 (以下简称 AL T)活力时 ,标准曲线不呈直线 ,随着酶活力的增大 ,曲线斜度逐渐趋于平坦 ,测定结果准确性相应减少 ,在 1～ 2 0 0 u只能大致反映酶活力的大小 ,超过 2 0 0 u时 ,曲线已很平坦 ,需将标本稀释后再行测定。用丙酮酸钠标准液按改良赖氏法做标准系列测 OD值 ,作y=a+bx、y=a+bex、y=10 a+ bx三种曲线拟合 ,从中优选相关性最显著 ,剩余平方和最小的方程为最佳标准曲线 ,以之确定标本的 AL T单位 ,可提高检测结果准确性。1　材料和方法1.1　材料　试剂由上海荣盛生物技术有限公司生产。 1丙酮酸钠标准液 …     

3种方法检测血清ALT的比较

根据献血者健康检查标准,献血者丙氨酸氨基转移酶(ALT)的合格标准,赖氏法ALT≤25U,速率法ALT≤40U/L,现在有赖氏微板孔法更方便,而且可以用酶标仪来打印结果保存,保存时间为10年[1],以便有医疗纠纷时可以查询.由于赖氏法操作简单、方便和价格便宜在基层小血站还是使用,速率法操作简单,结果稳定,只能单个检测,不适合大量标本检测.为此,我们把赖氏试管法、赖氏微板孔法和速率法的检测结果作比较分析.     

用快速法检测ALT筛选无偿献血者

目的　建立快速检测ALT方法用于筛选无偿献血者。方法　BASIC快速法和赖氏法、AT PLUS自动分析仪同时测定无偿献血者血液ALT ,并对结果分析比较。结果　对 134份标本的ALT测定结果显示 :3种检测方法的差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。结论　快速法检测ALT可以应用于非固定点筛选无偿献血者。     

转氨酶测定标准化的意见

本文探讨了转氨酶(ALT/AST)测定的标准化问题.作者认为,速率法试剂应按IFCC 推荐法的配方,不加PP,以血清直接启动;延迟时间1～2分钟,然后连续监测30～90秒钟;标本试剂体积以1∶10左右较合适;反应温度30℃,如用25℃或37℃,可分别乘以1.40或0.65校准到30℃的结果.作者重复了Reitman 的工作,随机取105份和54份ALT、AST 含量不同的标本,同时用Reitman 法与IFCC 推荐法(以血清启动)分别测定Karmen 单位与IU/L,得到赖氏法丙酮酸浓度的Kar U 和速率法IU/L 的关系,使得赖氏法可能通过查标准曲线直接得到IU/L,统一了结果的报告方式.