抑癌基因PTEN在鼻咽癌中的表达及突变

目的了解抑癌基因PTEN在鼻咽癌中的表达、突变情况,探讨其与鼻咽癌发生发展的关系。方法采用免疫组化检测52例鼻咽癌中PTEN基因的表达,利用PCR-SSCP银染、DNA测序分析等方法检测PTEN基因第5、8外显子突变。结果鼻咽癌中PTEN蛋白表达率低于癌旁组织,表达与临床TNM分期、颈部淋巴结转移密切相关（P〈0.05）。52例鼻咽癌中PTEN基因第5、8外显子未见明显突变。结论抑癌基因PTEN可能参与鼻咽癌的发生发展,其第5、8外显子在鼻咽癌的发生发展中可能不起关键作用。     

鼻咽癌组织中P16基因缺失突变的分析

目的探讨p16基因缺失突变在鼻咽癌中的发生情况与临床意义。方法采用多重PCR分析法,对157例鼻咽癌标本及47例治疗后病理阴性组织标本P16基因突变情况进行了检测。结果鼻咽癌组织中P16基因第2外显子的缺失率高于疗后病理阴性组织,统计学上有显著差异性（P〈0.000）,P16基因第2外显子的缺失与鼻咽癌的临床分期、性别、年龄统计学上无显著差异（χ2值分别为1.726、0.582、0.196,P〉0.05）,P16基因第2外显子的缺失率不足3年生存组高于超过3年生存组,统计学上有显著差异性（χ2=14.12,P〈0.000）。结论P16基因第2外显子缺失可能与鼻咽癌的发生发展预后有关,与临床分期、性别、年龄无关,可作为预后评价指标。     

Beclin1与PTEN在鼻咽癌中的表达及相关性研究

目的检测Beclin1、PTEN在鼻咽癌组织中的表达水平,分析自噬蛋白Beclin1与凋亡相关蛋白PTEN在鼻咽癌发生发展中的作用及临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测50例鼻咽癌、20例癌旁黏膜和15例鼻咽黏膜慢性炎组织中Beclin1和PTEN蛋白表达,并分析其与临床分期、病理组织类型和转移的关系。结果Beclin1在鼻咽癌、癌旁黏膜和鼻咽黏膜慢性炎组织中阳性表达率分别为38.0%、65.0%、93.3%,PTEN的阳性表达率分别为34.0%、85.0%、93.3%,Beclin1和PTEN蛋白表达程度都与鼻咽癌临床分期、组织学分型和颈部淋巴结转移相关（P〈0.05）,且Beclin1与PTEN在鼻咽癌中的表达呈正相关（rs=0.946,P〈0.05）。结论鼻咽癌组织中Beclin1、PTEN低表达与鼻咽癌发生、发展相关,检测其表达对研究鼻咽癌发生、发展有重要的作用,并可作为患者预后判断的重要标志物。     

卵巢子宫内膜异位症组织中PTEN基因mRNA及蛋白表达的研究

目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中PTEN基因mRNA及蛋白的表达及其临床意义.方法应用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中PTEN基因外显子1-9和5-9的mRNA表达水平,免疫组织化学方法检测其蛋白表达,同时结合病人的临床资料进行分析.结果卵巢子宫内膜异位症组织中PTEN外显子1-9、5-9 mRNA相对表达水平高于正常卵巢组织,差异有显著性（P〈0.01,P〈0.05）.卵巢子宫内膜异位症组织中PTEN mRNA表达水平与病人年龄、囊肿大小无关（P〉0.05）.与临床分期有关（P〈0.05）.卵巢子宫内膜异位症组织中Ⅰ～Ⅱ期有2例细胞核PTEN蛋白呈中等染色表达,与正常卵巢组织中PTEN蛋白的表达比较差异无显著性（P〉0.05）.结论 PTEN mRNA及蛋白表达水平的异常可能是卵巢子宫内膜异位症发生的早期事件.     

乳腺癌及癌旁组织中PTEN基因5’CpG岛甲基化状态研究

目的：检测乳腺癌及癌旁组织中PTEN基因5’端CpG岛启动子区域的甲基化状况。方法：采用甲基化特异性聚合酶链反应（Methylation-specific PCR,MSP）方法对乳腺癌及癌旁组织中PTEN基因5’端CpG岛启动子区域甲基化状况进行研究。结果：乳腺肿瘤组织中PTEN基因甲基化率为31.5%（29/92）,显著高于癌旁组织和正常组织（P〈0.05）,而癌旁组织和正常乳腺组织中甲基化率均比较低,分别为8.3%（2/24）、6.2%（1/16）,两者差异无统计学意义（P〉0.05）;PTEN基因甲基化与肿瘤组织学类型、年龄及肿瘤大小均无相关性,但与淋巴结转移相关（P〈0.05）,淋巴结转移组PTEN基因甲基化率显著高于无淋巴结转移组。结论：PTEN基因5’端CpG岛启动子区域甲基化可能是散发性乳腺癌PTEN基因失活的主要机制,参与了乳腺癌的发生发展过程;PTEN基因甲基化可能是乳腺癌发生发展过程中的晚期事件,提示可以考虑将PTEN基因甲基化作为评价乳腺癌肿瘤细胞转移潜能的分子标记。     

鼻咽癌p16基因表达与突变的对比研究及意义

目的探讨p16蛋白表达与p16基因突变在鼻咽癌发生中的作用,以确定两者之间的联系及意义.方法运用免疫组化二步法检测鼻咽癌中p16蛋白表达状况;采用多重PCR法检测鼻咽癌中p16基因第二外显子可能的缺失突变.结果p16蛋白表达缺失率鼻咽癌组中55.3%(26/47),慢性鼻咽炎8%(2/25),鼻咽癌组中p16蛋白表达缺失率高于慢性鼻咽炎组(P＜0.001);p16基因第二外显子缺失突变鼻咽癌组中纯合缺失突变率34%,而相应的癌旁组织未检出(P＜0.001);鼻咽癌p16蛋白表达缺失率高于p16基因外显子2缺失率.结论鼻咽癌的发生不仅与p16基因表达缺失和突变密切相关,而且p16蛋白表达下调可能是鼻咽癌发生发展的主要原因.     

肿瘤抑癌基因PTEN在骨及软组织肿瘤中的突变

目的：探讨肿瘤抑癌基因PTEN在骨及软组织肿瘤发生中的作用。方法：应用聚合酶链反应（PCR）分析骨及软组织肿瘤患者110例肿瘤标本,3个肿瘤细胞系PTEN基因第4-9外显子有无纯合性缺失。应用单链构象多态性分析（SSCP）及基因测序技术观察有无基因突变。对照为瘤旁正常组织。结果：PTEN基因第4-9外显子经扩增后均有产物,无基因纯合性缺失改变。SSCP分析未发现变异带,无基因突变。但外显子8表现出两种不同带型,该基因存在多态性,6例肿瘤在内含子8距拼接部32bp处存在两种不同碱基,基因型为g/t。结论：在DNA水平肿瘤抑癌基因PTEN在骨及软组织肿瘤的发生中不起作用;该基因在国人中存在多态性。     

鼻咽癌组织EBI3和p35蛋白的表达及临床意义

目的 检测EBI3、p35在鼻咽癌（NPC）组织中的表达水平,分析EBI3和p35在NPC发生发展中的作用及临床意义。方法 应用免疫组织化学方法检测50例NPC患者、30例癌旁黏膜和25例鼻咽黏膜慢性炎患者炎症组织中EBI3和p35表达,并分析其与NPC患者临床分期、病理组织类型和淋巴结转移的关系。结果 NPC组织中EBI3高表达率为62.0%,显著高于癌旁黏膜组织中的36.7%（χ2=4.83,P〈0.05）和鼻咽黏膜慢性炎患者炎症组织中的36.0%（χ2=4.53,P〈0.05）。T3～T4期NPC患者中EBI3高表达率显著高于T1～T2期患者（χ2=17.24,P〈0.01）;非角化型鳞癌NPC患者癌组织中EBI3高表达率显著高于角化型鳞癌患者（χ2=8.78,P〈0.01）;有颈部淋巴结转移NPC患者癌组织中EBI3高表达率显著高于无颈部淋巴结转移癌患者（χ2=14.49,P〈0.01）。p35高表达率为60.0%,显著高于癌旁黏膜组织中的33.3%（χ2=5.33,P〈0.05）和鼻咽黏膜慢性炎患者炎症组织中的36.0%（χ2=3.85,P〈0.05）。T3～T4期NPC患者中p35高表达率显著高于T1～T2期患者（χ2=19.28,P〈0.01）;非角化型鳞癌NPC患者癌组织中p35高表达率显著高于角化型鳞癌患者（χ2=7.24,P〈0.01）;有颈部淋巴结转移NPC患者癌组织中p35高表达率显著高于无颈部淋巴结转移癌患者（χ2=5.56,P〈0.05）。NPC组织中EBI3和p35表达之间呈正相关（r=0.328,P〈0.05）。结论 NPC组织中EBI3和p35高表达与鼻咽癌发生、发展相关,有望作为患者预后判断的重要标志物。     

PTEN和p53蛋白异常表达与子宫内膜异位症恶变的关系

目的探讨PTEN基因和p53基因蛋白表达异常与子宫内膜异位症（简称内异症）恶变的关系以及两者在其发生发展过程中的相互作用。方法应用免疫组化PV-9000二步法检测23例内异症相关卵巢癌（EAOC）、10例不典型内异症（aEMs）和20例典型卵巢内异症（EMT）组织中PTEN和p53基因蛋白表达情况。结果EAOC中PTEN、p53基因蛋白表达缺失率分别为78.26%和17.39%,前者高于EMT组（5%）和aEMs组（20%）,后者低于EMT组（85%）和aEMs组（70%）。EAOC中PTEN、p53基因蛋白表达缺失率与EMT组相比差异有高度统计学意义（P〈0.01）,与aEMs组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。EAOC中PTEN、p53基因蛋白表达缺失率均与临床分期、病理分级、是否伴有转移密切相关（P〈0.05）,与年龄、组织学类型无关（P〉0.05）,不同的是,PTEN在临床分期早、组织分化好、无转移的EAOC中的蛋白表达缺失率明显低于临床分期晚、组织分化差和（或）伴转移者,而p53蛋白表达相反。PTEN和p53基因的蛋白表达呈负相关。结论PTEN蛋白表达缺失和p53蛋白过表达与内异症相关卵巢癌及内异症恶变的发生发展密切相关。     

PTEN在宫颈癌组织中的表达及对宫颈癌发生、发展的作用

目的探讨第10染色体同源丢失磷酸酶-张力蛋白基因（PTEN）在宫颈癌组织中的表达及对宫颈癌发生、发展的作用。方法选取广东省汕头市中心医院2009年6月～2010年6月宫颈石蜡包埋组织90例,其中正常宫颈组织20例,宫颈癌组织70例;采用SP法检测两类组织中PTEN的表达情况;分析PTEN表达与宫颈癌临床病理指标的关系。结果①PTEN在正常宫颈组织阳性表达率[100%（20/20）]高于在宫颈癌组织中的阳性表达率[70%（49/70）],差异有高度统计学意义（χ2=7.83,P〈0.01）。②PTEN在宫颈癌临床分期（Ⅰ、Ⅱ期）中的表达差异无统计学意义（χ2=1.48,P〉0.05）;PTEN在中高分化和低分化宫颈癌的阳性表达率[71.7%（43/60）,60.0%（6/10）]差异无统计学意义（χ2=0.56,P〉0.05）;PTEN在无淋巴结转移的宫颈癌组织中阳性表达率[73.6%（39/53）]与有淋巴结转移的宫颈癌组织中的阳性表达率[58.8%（10/17）]差异无统计学意义（χ2=1.34,P〉0.05）。结论 PTEN蛋白的表达缺失可能与宫颈癌的发生、发展相关。     

Survivin和PTEN在鼻咽癌组织表达及其临床意义

目的 探讨Survivin和PTEN蛋白在鼻咽癌(NPC)组织中的表达及其临床意义.方法 应用免疫组织化学方法检测68例NPC和20例鼻咽黏膜慢性炎组织中Survivin和PTEN表达,并分析其与临床分期、病理组织类型和转移的关系.结果 在NPC中,Survivin和PTEN阳性表达率分别为84.5%(49/68)和51.5%(35/68).Survivin高表达和PTEN低表达与NPC的临床分期、组织学分型和颈部淋巴结转移相关(÷2=5.21～9.99,P<0.05).结论 Survivin和PTEN表达与NPC的分化程度和转移相关,检测其表达可作为判断NPC预后的客观指标.     

LKB1及VEGF-C在鼻咽癌中的表达及意义

目的：探讨LKB1及血管内皮生长因子C（VEGF- C）在鼻咽癌中的表达情况及意义。方法选取鼻咽癌患者50例（观察组）,另择同期鼻咽黏膜慢性炎症患者50例作为对照组。采用RT- PCR法检测两组患者LKB1及VEGF- C mRNA的表达情况,并分析鼻咽癌组织中LKB1及VEGF- C mRNA的表达与临床病理因素（年龄、淋巴结转移、临床分期、肿瘤大小）的关系。结果观察组患者LKB1 mRNA的表达水平明显低于对照组,VEGF- C mRNA的表达水平明显高于对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。LKB1及VEGF- C mRNA的表达与淋巴结转移及TNM分期明显相关（均P＜0.05）,而与年龄及肿瘤大小无明显相关性（均P＞0.05）。鼻咽癌组织中LKB1与VEGF- C的表达呈负相关（r=-0.62,P＜0.05）。结论鼻咽癌组织中LKB1与VEGF- C的表达呈负相关, LKB1的低表达及VEGF- C的高表达可能与鼻咽癌的发生、发展及淋巴结转移有关。     

鼻咽部非角化性癌中TGF-β1表达与未成熟树突状细胞数量的关系及意义

目的探讨鼻咽部非角化性癌中TGF-β1表达情况和CD1a标记的未成熟树突状细胞数量及它们与病理、临床资料的联系。方法鼻咽癌组织62例、癌旁组织16例及鼻咽黏膜慢性炎症组织10例,应用免疫组化ElivisionTM法检测TGF-β1和CD1a蛋白的表达情况,并结合病理、临床资料进行统计分析。结果62例鼻咽癌组织及癌旁组织中TGF-β1阳性率分别为67．7％（42／62）、93．8％（15／16）,均高于对照组的50％（5／10）;鼻咽癌组CD1a阳性率为41．9％（26／62）,癌旁组组织阳性率为12．5％（2／16）,对照组为阴性;TGF-β1表达与CD1a呈负相关（r=-0．304,P=0．016）;TGF-β1的表达与临床分期、颈部淋巴结转移明显有关（P〈0．05）;CD1a的表达与颈部淋巴结转移之间有关（P=0．011）。结论TGF-β1可抑制imDC的增生,两者在鼻咽部非角化癌演进过程中可能起协同作用。     

P16蛋白在鼻咽癌中的表达及意义

目的通过测定鼻咽癌组织中P16蛋白的表达情况,探讨P16抑癌基因异常或失活与鼻咽癌发生的关系。方法 应用S-P免疫组化技术,检测90例鼻咽癌组织中P16蛋白的表达情况,以慢性鼻咽粘膜炎症标本80份作为对照分析。结果 90例鼻咽癌组织中P16蛋白表达阴性68例,阴性率为75.56％(68/90);对照组80鼻咽炎症组织的P16蛋白表达阴性13例,阴性率为16.25％(13/80),两组比较差异有高度显著性(x2=59.717,P<0.01)。结论 抑癌基因P16失活或P16蛋白低表达与鼻咽癌的发生、发展有关系。     

Survivin mRNA在鼻咽癌中表达及其与细胞凋亡关系

目的检测鼻咽癌组织中Survivin的表达及肿瘤细胞凋亡情况。方法应用原位杂交和原位末端标记技术对64例鼻咽癌和30例慢性鼻咽炎鼻咽部组织中Survivin的表达和细胞凋亡进行检测,并分析两者之间的关系。结果鼻咽癌Survivin的阳性表达率为65．6％,慢性鼻咽炎鼻咽部组织阳性表达率为33．3％,差异有极度统计学意义（P〈0．01）;在Survivin阳性表达和阴性表达的组织中,细胞凋亡指数分别是（0．63±0．36）和（1．58±0．44）,Survivin阳性表达者明显低于Survivin阴性表达者;差异有统计学意义（P〈0．05）。慢性鼻咽炎鼻咽部组织中细胞凋亡指数为1．32＋0．36,与NPCSurvivin阳性表达者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论在鼻咽癌的发生发展过程中Survivin表达引起的凋亡抑制可能有一定的作用。     

鼻咽癌中p-PTEN、P-Akt、P-FoxO1的表达及意义

目的检测鼻咽癌组织中p-PTEN、P-Akt和p-FoxO1的表达,探讨P11EN/Akt/FoxO1信号传导通路在鼻咽癌发生发展中的作用。方法应用Western Blot法检测p-PTEN、P．Akt和p-FoxO1在38例鼻咽癌组织与20例鼻咽部慢性炎症组织中的表达水平。结杲38例鼻咽癌组织中,p-PTEN的灰度值为0．53±0．04。明显低于慢性炎症组织（P〈0．05）;p-Akt的灰度值为1．72±0．31,明显高于慢性炎症组织（P〈0．05）;p-FoxO1的灰度值为1．35±0．20,明显高于慢性炎症组织（P〈0．05）。经Pearson相关性分析,P-PTEN的表达水平与P-AKt呈负相关（r=-0．39,P〈0．05）,与P-FoxO1呈负相关（r=-0．51,P〈0．05）。结论PTEN/Akt/FoxO1信号转导通路可能在鼻咽癌的发生发展中起重要的作用。鼻咽癌中PTEN的磷酸化水平降低,对Akt的负调控作用下降,高的Akt磷酸化水平使通路下游FoxO1磷酸化水平升高,导致细胞异常增殖,抑制细胞凋亡,促进细胞的恶性转化。     

鼻咽癌后程加速超分割放射治疗的疗效观察

目的：观察鼻咽癌后程加速超分割的近期疗效。方法选取120例局部晚期鼻咽癌患者,随机分为后程加速超分割组（研究组）和常规分割组（对照组）（n=60）,2组均行同期顺铂化疗。2组开始均常规分割,50 Gy/25次后,研究组鼻咽每天照射2次,每次1.5 Gy,颈部CTV 1（Clinic Target Volume 1）上午照射1.8～2.0 Gy,GTVnd（Gross Tumour Volume nord）下午照射1.0～1.2 Gy,间隔6 h以上,鼻咽总剂量71～73 Gy,颈部CTV 1至59～60.8 Gy,GTVnd至65～68 Gy;对照组鼻咽及颈部仍常规分割,鼻咽剂量70～74 Gy,CTV 1至60 Gy,GTVnd至66～68 Gy。结果研究组、对照组放疗结束时、放疗后3、6个月鼻咽控制率分别为91.7%、95.0%、96.7%及78.3%、80.0%、83.3%（P＜0.05）,颈部控制率分别为93.3%、96.7%、98.3%及80.0%、86.7%、86.7%。（P＜0.05）。研究组耳及口咽黏膜2、3级急性放射损伤增加较明显（50%vs 30%及53%vs 35%,均P＜0.05）,但均能耐受。结论后程加速超分割并同期化疗能提高局部晚期鼻咽癌的原发灶及颈部淋巴结局控率,耐受性好。     

肿瘤抑制基因p53及Rb在鼻咽癌中的表达

为观察ｐ５３基因和Ｒｂ基因与鼻咽癌发生的关系，应用聚合酶链反应－单链构型多态分析技术（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术），检测３３例鼻咽癌组织、４例鼻咽部炎悸组织及３例正常鼻咽部组织中ｐ５３基因第７，８外显子的突变。结果显示，在３３例鼻咽癌中有７例存在ｐ５３基因第８外显子的突变，突变率为２１．２％。在第７外显子中未检测出突变发生。应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交，对Ｒｂ基因在鼻咽癌在存在状态基因突变及Ｒｂ基因的缺