维拉帕米对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的：研究维拉帕米对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响。方法：对40只成年Wistar雄性大鼠建立冠状动脉左前降支（LAD）缺血再灌注模型，其中16只大鼠在缺血前及再灌注前给予给维拉帕米进行干预治疗，观察大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡情况，以及维拉帕米对其影响。采用末端标记法（TUNEL）进行细胞凋亡检测。结果：假手术组及单纯缺血凋亡细胞无明显增多，而缺血再灌注组凋亡细胞明显增多（P＜0．001）；在缺血前及再灌注前给予维拉帕米治疗均可减少细胞凋亡的数量（P＜0．01）。结论：在缺血再灌注可见心肌细胞凋亡发生，再灌注可加速细胞凋亡的发生；维拉帕米可抑制心肌细胞凋亡。     

卡托普利对缺血再灌注心肌细胞凋亡Bcl-2和Bax基因蛋白表达的影响

有研究提示，卡托普利能改善心功能，早期应用能降低心肌梗死远期病死率，但作用机制尚不清楚。人类心肌细胞凋亡与Bcl-2抑制基因和Bax凋亡刺激基因有密切的关系，且受Bax蛋白上调与Bcl-2蛋白下调的影响，Bax与Bcl-2基因蛋白共同调节心肌细胞凋亡，卡托普利对缺血再灌注心肌细胞凋亡及凋亡相关基因蛋白有何影响，本研究对此进行了初步探讨。     

BCL—2蛋白在肝脏缺血再藻注损伤后表达的实验研究

目的：探讨BCL－2蛋白在大鼠肝脏缺血再灌注过程不同时间的表达。方法：以大鼠肝脏原位灌注为模型，用免疫组织化学方法检测BCL－2蛋白的表达，生化方法测定AST值，电泳法检测凋亡细胞。结果：随着缺血时间延长，BCL－2蛋白表达指数呈进行性降低，AST值则逐渐升高，凋亡细胞出现。结论：BCL－2蛋白对肝脏缺血再灌注损伤具有保护作用，对细胞凋亡具有抑制作用。     

终末温血灌注对低温缺血再灌注心肌细胞微管蛋白的影响

目的：研究体外循环低温心肌保护中,采用终末温血灌注(TWBC)对心肌细胞微管蛋白(TB)组分的影响,探讨TWBC心肌保护作用的机制。方法：建立猫体外循环(CPB)模型,随机分为两组：组Ⅰ,间断冷血心停搏液灌注(ICBC);组Ⅱ,先ICBC,主动脉开放前给予TWBC。动态观察不同时间点左心室收缩压峰值(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左心室内压正负相最大变化速率［(±dp/dt)max］及达到最大收缩速率的时间［(t-dp/dt)max］。采用Western杂交技术,检测主动脉阻断(ACC)115、120 min、再灌注5、15、60、120 min时心肌TB含量,进行半定量分析。结果：(1)心脏再灌注120 min内,两组心功能差异显著(P<0.05)。(2)心肌细胞TB含量变化：ACC 120 min、再灌注5min时,两组游离、聚合TB含量差异均非常显著(P<0.01)。结论：TWBC能加速低温心肌保护中细胞TB聚合,有利于再灌注早期心功能恢复。     

缺血再灌注对心肌细胞Ca^2＋—ATP酶蛋白及其基因表达的影响

目的　研究鼠缺血再灌注(I/R)心肌细胞肌浆网钙ATP酶(SR     

BCL-2蛋白在肝脏缺血再灌注损伤后表达的实验研究

目的 :探讨BCL - 2蛋白在大鼠肝脏缺血再灌注过程不同时间的表达。方法 :以大鼠肝脏原位灌注为模型 ,用免疫组织化学方法检测BCL - 2蛋白的表达 ,生化方法测定AST值 ,电泳法检测凋亡细胞。结果 :随着缺血时间延长 ,BCL - 2蛋白表达指数呈进行性降低 ,AST值则逐渐升高 ,凋亡细胞出现。结论 :BCL - 2蛋白对肝脏缺血再灌注损伤具有保护作用 ,对细胞凋亡具有抑制作用。     

人参对大鼠缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡及bcl-2基因表达的影响

采用结扎大鼠左冠状动脉前降支 (L AD)建立心肌缺血再灌注动物模型 ,应用原位末端标记法检测心肌凋亡细胞 ,并进行细胞计数。原位杂交和免疫组化检测 bcl- 2 m RNA和基因表达产物的蛋白质 ,通过图像分析系统测量阳性染色区域的平均光密度值进行量化分析 ,以观察人参对大鼠心肌缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响及基因表达。结果显示 :心肌细胞凋亡数单纯结扎组为 (37.5± 9.2 )个 /视野 ,人参治疗组为 (6 .5± 3.6 )个 /视野 ,假手术组为 0～ 1个 /视野 ,各组间差异非常显著 (P<0 .0 0 1)。人参治疗组 bcl- 2 m RNA光密度值为 0 .11± 0 .0 2 ,较单纯结扎组 (0 .0 7±0 .0 2 )和假手术组 (0 .0 6± 0 .0 1)明显升高 (P<0 .0 0 1) ;人参治疗组 Bcl- 2蛋白光密度值为 0 .15± 0 .0 2 ,与单纯结扎组 (0 .0 9± 0 .0 2 )比较有非常显著性差异 (P<0 .0 0 1) ,但与假手术组 (0 .14± 0 .0 1)比较差异不显著 (P>0 .0 5 )。心肌缺血再灌注可使心肌细胞凋亡数显著增加 ,人参治疗可明显地抑制缺血再灌注时所诱导的心肌细胞凋亡的发生 ,提示人参具有防治心肌缺血再灌注损伤 ,抑制心肌细胞凋亡的作用。其机制可能是通过增强 bcl- 2基因表达而实现的     

维拉帕米对心肌缺血再灌注损伤状况下血浆内皮素水平的影响

目的　观察维拉帕米对心肌缺血再灌注损伤后血浆内皮素 (ET)水平的影响 ,探讨其心肌保护作用的可能机制。方法　根据心肌缺血再灌注的不同时限对 30只家兔进行分组 ,建立家兔心肌缺血再灌注模型 ,采用放免法检测同一剂量维拉帕米 (0 .2mg/kg静脉注射 )对缺血再灌注不同时限血浆ET水平。结果　与生理盐水组比较 ,维拉帕米能降低血浆ET水平 (P <0 .0 5 )。结论　维拉帕米对缺血再灌注损伤后心肌的保护作用可能与降低血浆ET水平有关     

大鼠心肌急性缺血再灌注Fos蛋白表达及其意义

目的：探讨急性心肌缺血再灌注早期不同时间心肌细胞内Ｆｏｓ蛋白表达的变化，为心肌早期缺血再灌注损伤致死死后诊断提供新方法。方法；在３２只ＳＤ大鼠建立心肌早期缺血再灌注损伤模型，另外４０只大鼠分业怀缺血对照组，用免疫组化ＳＡＢＣ法结合图象分析研究心肌细胞核Ｆｏｓ蛋白的累积情况。结果：缺血３０ｍｉｎ再灌注３０ｍｉｎ后，再灌注区有部分心肌细胞核呈弱阳性着色，以后随缺血时间延长核阳性增强。     

bcl-2和Fas/Apo-1基因在缺血-再灌注损伤、缺血预适应心肌细胞中的表达

目的:观察凋亡抑制基因bcl-2和凋亡促进基因Fas/Apo-1在缺血-再灌注损伤、缺血预适应心肌细胞中的表达情况。方法:制备家兔心肌缺血-再灌注损伤(RI)、缺血预适应(IP)、持续缺血(CI)和control模型。实验方法:①采用免疫组织化学方法观察bcl-2基因表达。②采用逆转录扩增(PCR)方法观察Fas/Apo-1表达情况。结果:①免疫组化检测bcl-2基因蛋白标记阳性者,在病变边缘区,IP组为(46.5±11.0)%,CI组为(42.9±9.9)%,两者之间无明显差别(P>0.05),但均明显高于RI组(19.4±5.6)%和对照组(1.92±0.88)%(P<0.01);在病变中心区,IP组为(52.5±8.8)%,均明显高于RI组(32.2±10.2)%和CI组(28.0±10.2)%(P<0.01);而RI组与CI组之间比较则无显著性差异(P>0.05);在正常对照组分别仅为(1.92±0.88)%和(1.92±1.02)%,说明正常心肌中bcl-2无表达或弱表达。从自身不同部位对照来看,RI组在病变中心区bcl-2基因蛋白的表达明显强于边缘区(P<0.01);而IP组2个部位比较无明显差别(P>0.05);CI组则表现出病变边缘区bcl-2基因蛋白的表达增强(P<0.01)。②在RT-PCR方法观察Fas蛋白的表达中,可见凝胶电泳在control和IP组的心肌细胞中Fas基因蛋白的表达水平极低,在RI组和CI组的心肌细胞中则见Fas基因蛋白的表达明显增高(P<0.01);而对照β-actin基因的mRNA表达水平在各组基本一致,无显著性差异(P>0.05)。结论:缺血可诱发凋亡促进基因Fas/Apo-1基因蛋白的表达增强,而再灌注则加重这一过程。     

急性白血病bcl-2基因表达的研究

目的观察凋亡调控基因bcl-2在急性白血病（AL）患者中的表达。方法体外模拟常规用药的血药浓度最大值进行研究。首先应用流式细胞仪（FCM）技术检测凋亡调控基因bcl-2在各种急性白血病中的表达;然后检测体外药物作用后bel-2表达水平。结果bcl-2表达在AML中无显著性差异,而在ALL中表达明显低于AML。bcl-2蛋白在化疗药物作用一定时间后明显下调,与对照组有显著性差异（P〈0．05）。结论bcl-2蛋白在诱导AL原代细胞凋亡中有相应作用。     

他汀类对缺血再灌注心肌保护作用的研究进展

他汀类药物是目前临床上广泛使用的调脂药,近年来它的非调脂作用日益引起人们的重视。大量的动物实验和临床研究都证实了其除了可以降低血浆胆固醇水平,进而降低心血管疾病的发生率及致死率外,还具有改善内皮功能、抗炎、稳定斑块、抗血小板聚集、抑制血管平滑肌细胞的增殖及迁移等,这些非降脂作用即为他汀类药物的多效性(Pleiotropic effects)。研究他汀类药物的作用机制,合理地应用他汀类药物,可以更好地防治缺血再灌注损伤。     

抗凋亡基因bcl-2在肾癌中的表达与意义

目的 研究ｂｃｌ－２在肾癌组织中的表达与意义。方法：采用鼠抗人单克隆抗本及ＳＡＢＣ免疫组织化学染色法。结果：ｂｃｌ－２蛋白在肾癌组织中的阳性率为５２．１％（２５／４８）,正常肾组织中为１６．１％（５／３１）肾癌组织中ｂｃｌ－２表达阳性率明显高于正常肾组织（Ｐ〈０．０５）,但不同病理细胞类型及不同临床分析正常肾组织（Ｐ〈０．０５）,但不同病理细胞类型及不同临床分期的肾癌组织ｂｃｌ－２表达阳性率无明显     

c-erbB-2、bc-2蛋白在宫颈鳞癌细胞中的表达及其意义

目的研究c-erbB-2、bcl-2基因在宫颈鳞癌中的表达及其在宫颈癌发生、发展中的作用及意义.方法 采用免疫组织化学S-P法分别检测45例宫颈鳞癌组织、10例宫颈上皮内瘤变和10例正常宫颈鳞状上皮中c-erbB2、bcl-2蛋白的表达.结果 c-erbB-2、bcl-2蛋白在宫颈鳞癌中的阳性表达率分别为55 56%、28.29%;在CIN 中的阳性表达率分别为0、10.00%;在NE组均无表达.c-erbB-2蛋白在宫颈鳞癌中阳性表达与在CIN、NE中的表达差异有显著性(P＜0.01);bcl-2蛋白在宫颈鳞癌中阳性表达与在CIN中的表达及在NE中的不表达差异均无显著性(P＞0.05);c-erbB-2与bcl-2之间在宫颈鳞癌组织中的阳性表达呈负相关(P＜0.05).结论 c-erbB-2、bcl-2基因参与了宫颈鳞癌的发生、发展过程.c-erbB-2基因蛋白的过表达是宫颈组织恶性变的重要生物学标志.联合检测c-erbB-2、bcl-2基因蛋白对判断宫颈癌预后有一定意义.     

增殖细胞核抗原PCNA, 凋亡抑制基因bcl-2在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达及意义

目的：探讨增殖细胞核抗原（PCNA）和调亡抑制基因bcl-2产物在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达规律以及与宫颈鳞状细胞癌的关系．方法：应用SP（链霉抗生物素蛋白一过氧化物酶）免疫组织化学方法,检测43例宫颈鳞状细胞癌（Ⅰ级10例,Ⅱ级22例,Ⅲ级11例）,24例宫颈不典型增生,16例正常宫颈组织中PCNA,bcl-2基因产物的表达．结果：PCNA在子宫颈鳞状细胞癌组织中呈明显阳性表达,定位于宫颈鳞癌细胞核,PCNA在宫颈鳞癌Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ各级中的表达有显著差异（P＜0．05）．PCNA在正常宫颈组织中无阳性表达,在宫颈鳞癌中的表达与宫颈不典型增生及正常宫颈组织有显著差异（P＜0．05）,且随肿瘤恶性程度的增高而升高．bcl-2阳性表达产物定位于宫颈鳞癌细胞质,bcl-2在宫颈鳞癌Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ各级中的表达有显著差异（P＜0．05）,在宫颈鳞癌中的表达与宫颈不典型增生及正常宫颈有显著差异（P＜0．05）．结论：PCNA,bcl-2在子宫颈鳞状细胞癌中的过度表达及其共同作用,可能在宫颈鳞状细胞癌发生、发展过程有重要意义．     

脑利钠肽预处理对在体大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及bcl-2、Bax表达的影响

目的 通过建立在体大鼠心肌缺血再灌注模型,探讨脑利钠肽预处理对在体大鼠心肌缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡及对凋亡基因bcl-2、Bax表达的影响.方法 21只雄性SD大鼠,随机数字表法分为3组:(1)假手术组:只开胸,不结扎冠状动脉;(2)缺血再灌注组:结扎冠状动脉左前降支35 min、再灌注4 h;(3)脑利钠肽(BNP)组:缺血前10 min,静脉开始予以BNP 0.01μg·kg-1·min-1,结扎冠状动脉左前降支35 min,再灌注4 h,BNP静脉恒速维持至再灌注结束.用TUNEL法检测缺血再灌注心肌细胞的凋亡,用反转录聚合酶链反应、Western印迹方法 检测缺血再灌注心肌bcl-2和Bax的表达.结果 假手术组、BNP组与缺血再灌注组的心肌细胞凋亡指数分别为5.4%±4.2%、22.5%±9.5%、45.2%±13.0%(P＜0.05).bcl-2蛋白表达假手术组、BNP组明显高于缺血再灌注组,分别为0.87±0.09、0.70±0.07、0.38±0.09(P＜0.05);假手术组、BNP组与缺血再灌注组的Bax蛋白表达分别为0.08±0.04、0.39±0.09、0.71±0.18(P＜0.01).假手术组、BNP组、缺血再灌注组的bcl-2/Bax比值分别为0.763±0.154、0.099±0.025、0.022±0.024(P＜0.05).结论 BNP预处理能减少心肌缺血再灌注损伤导致的心肌细胞凋亡,其机制可能与其增加bcl-2表达、抑制Bax表达,从而上调bcl-2/Bax比值相关.     

电针内关对心肌缺血再灌注损伤大鼠腺苷及bcl-2基因表达的影响

目的:通过研究电针内关对心肌缺血再灌注损伤过程中内源性保护物质腺苷(Ado)及细胞凋亡调控基因bcl-2的影响,阐明电针内关抑制心肌缺血再灌注损伤的作用机理。方法:在大鼠冠状动脉左前降支根部穿线建立心肌缺血再灌注损伤模型,电针内关穴,检测血清中腺苷含量,分析凋亡细胞基因的表达。结果:内关穴组血清Ado含量高于模型组(P<0．01);模型组bcl-2蛋白表达的阳性率较低,电针内关组阳性表达率明显增高,与模型组比较均有非常显著性意义(P <0．01)。结论:电针内关穴可促进内源性保护物质腺苷的释放,且可对凋亡的调控基因bcl-2的生成有促进作用,从而在一定程度上对心肌缺血再灌注损伤心肌起到保护作用。     

乳化异氟醚对缺氧复氧乳鼠心肌细胞的保护作用及bcl-2、bar表达的影响

目的 观察乳化异氟醚(8%体积分数)对培养乳鼠心肌细胞模拟缺血再灌注损伤后心肌细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2、bax的mRNA与蛋白水平表达的影响.方法 利用原代培养的Wistar乳鼠心肌细胞建立模拟心肌缺血再灌注模型,分正常培养组、模型组、脂肪乳组、乳化异氟醚(终浓度0.28 mmol/L).各组心肌细胞做相应分组处理后,利用倒置显微镜观察心肌细胞的生长状态和搏动频率,并用透射电镜观察细胞超微结构改变;流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率;RT-PCR检测心肌细胞凋亡基因bcl-2 mRNA、box mRNA的表达.Western blot定量检测Bcl-2、Bax蛋白表达.结果 乳化异氟醚组和脂肪乳组均可显著降低细胞凋亡率(P＜0.05),但乳化异氟醚组与脂肪乳组比较降低更明显(P＜0.05).乳化异氟醚可显著上调Bcl-2表达(P＜0.05)、下调Bax表达(P＜0.05);脂肪乳对Bcl-2和Bax表达无影响(P>0.05).结论 乳化异氟醚及其其中的成分之一脂肪乳可抑制模拟缺血再灌注损伤心肌细胞的凋亡;乳化异氟醚对缺氧复氧损伤的抗凋亡作用与其心肌细胞Bcl-2表达上调和Bax表达下调有关.