HPLC法同时测定博落回不同部位原阿片碱、别隐品碱的含量

目的 采用HPLC法同时检测博落回不同部位原阿片碱、别隐品碱含量。方法采用Luna-C18色谱柱（150min×4．6mm,5μm）,以0．1％磷酸加三乙胺缓冲溶液（pH3．5）-乙腈（78：22）为流动相,流速为0．8mL／min,柱温25℃,检测波长284nm。结果原阿片碱、别隐品碱含量测定方法的线性关系良好,线性范围和相关系数分别为4．2-52μg／mL（r=0．9994）,6．9-86μg／mL（r=0．9999）;平均回收率分别为99．2％、99．4％;RSD分别为0．9％、1．8％（n=6）。结论该方法操作简便、准确、灵敏度高,适合于博落回中原阿片碱、别隐品碱含量的同时测定．不同部位两种生物碱均存在一定的差异。     

RP-HPLC法测定小果博落回中7种异喹啉类生物碱

目的 建立同时测定小果博落回中7种生物碱的高效液相色法。方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为Waters XBridge C-18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相：(A)乙腈,(B)0.5%三乙胺缓冲液(磷酸调pH=2.5),梯度洗脱,体积流量0.8 mL/min,进样量5 μL,柱温35 ℃,检测波长 284 nm。结果 7种生物碱均能达到良好的分离,原阿片碱、别隐品碱、血根碱、小檗碱、白屈菜红碱、二氢白屈菜红碱、二氢血根碱的线性范围分别为0.11～22.0、0.424～84.7、0.433～86.6、0.380～75.9、0.498～99.6、0.523～104.5、0.508～101.5 μg/mL;平均回收率分别为97.8%、97.0%、98.9%、102.2%、98.6%、101.8%、102.9%。结论 本方法操作简便、准确、灵敏度高,为该类药材资源的质量评价提供了一定的科学依据。     

白屈菜中季苯并类生物碱的抗炎作用

白屈莱(Chelidonium majus)系罂粟科多年生植物,分布欧亚大陆.其茎根的橙色浆汁中的季苯并菲啶类生物碱,特别是白屈菜碱、白屈菜红碱和血根碱含量较高.本文对白屈菜季苯并菲啶类生物碱和其主要成份血根碱、白屈菜红碱的抗炎作用进行了研究。结果表明:血根碱抑制大鼠角叉菜胶足蹠肿胀的作用比白屈菜红碱强.皮下给药比灌胃给     

血水草中血根碱和白屈菜红碱的分离制备研究

目的:从血水草中分离血根碱和白屈菜红碱。方法:用干燥的血水草粉末选用浸泡、超声、微波或渗漉提取,用大孔吸附树脂分离。比较不同提取方法,不同萃取剂、洗脱剂等因素对提取的影响。结果:浸渍提取和微波提取效率较高,但是渗漉提取所得的提取物中生物碱的含量较高,血根碱含量为:80.10±3.68 mg/g,白屈菜红碱含量为:44.31±0.28 mg/g。盐酸提取率明显高于其它酸。依次用20%、60%、90%的甲醇水溶液、100%的乙醇溶液洗脱分离效果最好。结论:渗漉提取是分离血水草中血根碱和白屈菜红碱的一种有效方法。     

用正交试验法优选小果博落回生物碱的提取工艺

小果博落回Macleaya microcarpa (Maxim)Fedde系罂粟科博落回属植物,其地上部分具有清热解毒、杀虫止痒之功效[1],文献报道[2]其有效成分主要为血根碱(sanguinarine)、白屈菜红碱(chelerythrine)等多种生物碱.目前有关小果博落回生物碱提取工艺的研究未见报道,本研究在前期工作基础上,对乙醇回流提取小果博落回生物碱工艺进行优化.     

关黄柏中生物碱类成分的“一测多评”

目的 建立同时测定关黄柏中小檗碱、巴马汀和药根碱的HPLC方法,在此基础上,建立“一测多评”法的方法学考察方式,验证该方法在关黄柏质量控制中应用的可行性和技术适用性。方法 以关黄柏中主要成分小檗碱为指标,建立其与药根碱、巴马汀间的相对校正因子,并用该校正因子计算药根碱和巴马汀的量,对“一测多评”法的计算值与外标法实测值进行比较。结果 建立了关黄柏中3种生物碱类成分“一测多评”法方法学的考察模式;“一测多评”法对不同的色谱柱和仪器的计算值与外标法实测值之间没有显著性差异。结论 同时测定小檗碱、巴马汀和药根碱3种生物碱的“一测多评”法方法可靠,结果准确,可用于控制关黄柏药材及饮片的质量。     

一测多评法在复方血栓通胶囊8种成分检测中的应用

目的 建立一测多评法同时测定复方血栓通胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd、哈巴俄苷、隐丹参酮和丹参酮Ⅰ等8种成分的含量,验证该方法在制剂中应用的准确性和可行性.方法 以复方血栓通胶囊为研究对象,203 nm测定波长下以三七皂苷R1为内参物,通过测定该成分与人参皂苷Rg1、Re、Rb1和Rd间的相对校正因子,计算成分的含量;270 nm测定波长下以隐丹参酮为内参物,通过测定该成分与哈巴俄苷和丹参酮Ⅰ间的相对校正因子,计算成分的含量,实现一测多评,同时对一测多评的计算值与外标法实测值进行比较,以验证一测多评法的准确性和可靠性.结果 20个批次复方血栓通胶囊中各成分采用校正因子计算的含量值与外标法实测值之间无显著性差异.结论 在对照品缺乏的状况下,采用一测多评法可实现复方血栓通胶囊多个成分的含量测定,但复方血栓通胶囊中的8个成分需要选择2个内参物才能准确定量.     

齐齐哈尔地区白屈菜中白屈菜红碱的含量测定

目的：测定齐齐哈尔地区白屈菜中白屈菜红碱的含量。方法采用紫外分光光度法在418 nm测定吸光度,并计算白屈菜中白屈菜红碱的含量。结果齐齐哈尔地区白屈菜中白屈菜红碱的含量为0．023％。结论齐齐哈尔地区白屈菜中白屈菜红碱含量符合2010版《中国药典》的要求。     

一测多评法测定丹参中4种丹参酮类成分

目的 建立测定丹参中4种丹参酮类成分的一测多评法。方法 采用HPLC法,以丹参酮II_A为对照品,外标法测定其在丹参中的量,同时测定丹参酮II_A与丹参酮I、隐丹参酮、二氢丹参酮的相对校正因子,用获得的相对校正因子计算后3种成分的量,实现一测多评;用外标法测定丹参中丹参酮I、隐丹参酮和二氢丹参酮的量,比较其与采用相对校正因子计算值之间的差异。结果 各相对校正因子重现性良好;各成分采用相对校正因子计算的量值与外标法测定值之间无显著差异。结论 一测多评法在丹参中4种丹参酮类成分的测定中具有适用性和可行性。     

一测多评法测定十味柴黄合剂中多种指标成分的含量

目的建立十味柴黄合剂中测定多种指标成分含量的一测多评方法。方法以黄芩苷为内参物,确定栀子苷、芍药苷、橙皮苷相对于黄芩苷的相对校正因子,比较一测多评法与外标法含量测定结果的差异,评价一测多评法的可行性和准确性。结果十味柴黄合剂中各指标成分的相对校正因子重现性良好,一测多评法与外标法测定的结果无显著差异。结论本实验所建立的一测多评方法可用于十味柴黄合剂的质量评价。     

博落回药材的提取工艺研究

目的：研究博落回药材的提取工艺。方法：采用正交试验法，以白屈菜红碱得率及固形物为指标，考察乙醇浓度（A）、提取温度（B）、pH值（C）三个因素对博落回提取工艺的影响。结果：优化的博落回提取工艺为A2B1C2，即取博落回药材以80%乙醇、调节pH=5.0、60℃温浸提取。结论：本研究确定的最佳工艺可行。     

博落回抗肿瘤作用及诱导人体端粒DNA形成G-四链体分子机制研究

目的 从博落回的2个主要活性成分血根碱（San）和白屈菜红碱（Che）入手研究博落回的抗肿瘤作用分子机制。方法 采用MTT法测定San与Che对3种肿瘤细胞（肺癌细胞A-549、结肠癌细胞HCT-8、肝癌细胞Bel-7402）的IC₅₀值,从而确定这两种成分是否为博落回的抗肿瘤活性成分;采用UV-vis、FL、CD法研究San和Che与人体端粒DNA（HT4）的相互作用。结果 San与Che对肿瘤细胞有不同能力的杀伤作用,说明该2种成分是博落回的抗肿瘤活性成分;San和Che能够与HT4相互作用,可以得出San与HT4的结合常数为5×10⁸,并能诱导单链HT4完全形成反平行结构,而Che与HT4的结合常数为930,并能诱导单链HT4部分形成反平行结构。结论 博落回含有的2种活性成分San和Che具有诱导人体端粒DNA形成G-四链体结构的能力,从而抑制端粒酶活性,达到抑制肿瘤细胞增殖的目的,这可能是博落回抗肿瘤的分子机制之一。     

别隐品碱抗肝纤维化作用

目的 探讨别隐品碱（allocryptopine）对实验性肝纤维化的防治作用。方法 采用CCl₄复合因素诱导大鼠肝纤维化与血吸虫致小鼠肝纤维化模型,观察别隐品碱在造模同时（预防给药）和造模后（治疗给药）给药对脏器指数、肝功能、纤维化血清指标、脂质过氧化指标、肝组织胶原（CoI、CoIII）及羟脯氨酸（Hyp）表达的影响,并进行肝脏病理学检查。结果 对CCl₄所致肝纤维化大鼠模型,各剂量别隐品碱预防给药均能不同程度地降低肝指数及CoI表达（P＜0.05、0.01）,其中高剂量明显降低CoIII表达（P＜0.01）,中剂量明显降低脾指数、丙氨酸氨基转移酶（AST）的量（P＜0.05）;别隐品碱治疗组大鼠的肝指数、天冬氨酸氨基转移酶（ALT）的量、CoIII表达明显降低（P＜0.05、0.01）;预防给药与造模后给药均不同程度地减轻模型大鼠肝纤维化程度。对血吸虫致肝纤维化小鼠模型,别隐品碱预防给药显著降低小鼠ALT的量与Hyp水平（P＜0.05）,高剂量别隐品碱治疗给药能明显降低肝指数,降低血清PCIII、碘透明质酸（HA）、ALT的量（P＜0.05、0.01）,中剂量组肝指数、PCIII、HA的量明显降低（P＜0.05）;治疗给药组大鼠肝脏病变明显减轻。结论 别隐品碱对实验性肝纤维化大鼠有较好的保护肝细胞、改善肝功能、抗肝纤维化作用。     

血根碱对宫颈癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移能力影响机制研究

目的 探讨血根碱对宫颈癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移能力的影响机制.方法 分别用MTT法、流式细胞仪、细胞划痕实验、Transwell小室检测血根碱作用后的宫颈癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭能力.Western blot检测经血根碱作用后宫颈癌细胞中E-Cadherin、PTEN、β-catenin、MMP2的蛋白表达水平.结果 0.6、0.8μmol/L血根碱对宫颈癌细胞增殖具有抑制作用.0.8 μmol/L血根碱作用48 h后宫颈癌细胞HeLa和Siha凋亡率高达(45.68±2.26)％和(31.89±3.80)％.0.8μmol/L血根碱作用3 h后宫颈癌细胞HeLa和Siha黏附率仅有(67.45士2.13)％和(73.59±2.61)％.0.8μmol/L血根碱作用16 h后宫颈癌细胞HeLa和Siha侵袭数目仅有(39.64±1.98)个和(43.87±2.83)个.经血根碱作用后的宫颈癌细胞中E-Cadherin和PTEN的表达量增加,β-catenin和MMP2的表达量减弱.结论 血根碱对宫颈癌细胞具有抑制增殖及促凋亡作用,其机制可能与黏附蛋白E-Cadherin、β-eatenin和PTEN、MMP2有关.     

原子荧光光谱法测定隔山消中砷、汞、镉、铅的含量

目的 建立中药隔山消中砷、汞、镉、铅的原子荧光光谱检测方法.方法 采用原子荧光分光光度法测定隔山消中砷、汞、镉、铅4种元素的含量,并对测定方法进行方法学考察.结果 对于所测元素,标准曲线的相关系数r＞0.999 3,回收率为99.4%～102.3%,RSD＜5%,隔山消中的砷、汞、镉、铅4种重金属含量符合2005年版<中华人民共和国药典>中重金属的限量标准.结论 该方法快速、简便、准确且灵敏度高、效果满意,为隔山消中重金属含量测定提供了较好的方法.     

鱼腥草白绢病发生发展规律及防治方法研究

目的通过对鱼腥草白绢病的发生发展规律和防治方法的研究,为该病的综合防治提供一定的依据。方法采用田间调查、田间试验和室内实验相结合的方式。结果种茎处理以多菌灵的效果最好,发病率最低,产量最高;PDA平板测定表明木霉对鱼腥草白绢病拮抗作用极强,优于常用农药处理;在3个木霉菌剂质量浓度中,20g/m2的防治效果最好,其防治效果达到了60.28%。结论采用多菌灵处理鱼腥草种茎和20g/m2木霉制剂处理土壤能较好地防治鱼腥草白绢病。     

高效液相色谱法测定广西产匙羹藤果中牛弥菜醇A的含量

目的 建立匙羹藤果中牛弥菜醇A含量的测定方法,并对广西产匙羹藤果中的牛弥菜醇A含量进行测定.方法 采集广西7个产地的匙羹藤果进行检测.确定高效液相色谱法(HPLC)的测定条件,并采用正交实验优选牛弥菜醇A的提取方案.结果 以NH2柱(4.6 mm ×250 mm,5 μm)为色谱柱,乙腈-水(85 ∶15)为流动相,流速为1.0 ml·min-1,检测波长为207 nm,柱温为30℃,作为HPLC的测定条件.选择甲醇40%、超声时间提取60 min、溶剂体积60 ml作为提取方案.牛弥菜醇A在进样量为0.4004~20.02 μg之间呈良好的线性关系,平均回收率为100.43%.广西7个地产的匙羹藤果中中牛弥菜醇A的平均含量为34.24~56.57 mg/g,平均相对标准偏差为0.03%~2.37%.结论 所建立的含量测定方法可用于测定匙羹藤果中牛弥菜醇A的含量,为匙羹藤果质量标准的制定提供参考.     

基于Oncomine数据库研究PDE4D基因在卵巢癌中的表达及血根碱的调控作用

目的 通过深度挖掘Oncomine数据库中PDE4D在卵巢癌的研究数据,分析PDE4D基因在卵巢癌中的表达变化,并进行细胞实验研究血根碱对卵巢癌细胞中PDE4D基因表达的影响.方法 PharmMapper数据库查询与血根碱药效基团匹配的作用靶点,收集Oncomine数据库PDE4D在卵巢癌中的研究数据,进一步分析PDE...     

藿砂合剂制备工艺及质量标准的控制

对水提醇沉工艺中不同浓缩度的水煎液醇沉，醇沉后沉淀是否用醇洗涤这２个因素对合剂中浸出物含量的影响进行了实验研究。结果表明影响较大，采用薄层层析法鉴别藿香，砂仁，规定了藿砂合剂出物含理范围，从而控制了合剂质量。     

别隐品碱对家兔实验性心肌梗塞心功能及血流动力学的影响

结扎兔冠状动脉左室支,造成急性心肌梗塞(AMI)模型,观察别隐品碱(Allocryptopine、Ap)5mg/kg、Img/kg、4mg/kg 分别对 AMI 范围(MIE)、心电图、血清 CPK 和 LDH-同功酶水平,心功能、血流动力学、大鼠复灌心律失常进行了研究。结果表明,AP 显著缩小 MIE,明显减轻心电图型的缺血和坏死性变化,降低血清 CPK 及 LDH-同功酶水平.减慢心率(HR)、降低动脉收缩压(SBP)和舒张压(DBP)、左室内压(LVP)、抑制左室收缩与舒张功能、缩短室性心律失常持续时间和室颤发生数。提示:AP 能减轻缺血损伤程度,具有抗心肌梗塞的作用。