秋水仙碱对肝纤维化大鼠肝脏基质金属蛋白酶—1及其抑制因 …

目的 观察秋水仙碱对纤维化肝脏基质金属蛋白酶－１（ＭＭＰ－１）、基质金属蛋白酶组织抑制因子－１（ＴＩＭＰ－１）表达的影响。从胶原降解的角度探讨秋水仙碱对肝纤维化有无逆转作用及可能存在的机制。方法 制备免疫性大鼠肝纤维化模型,并给予秋水仙碱治疗;通过ＲＴ－ＰＣＲ检测ＭＭＰ－１、ＴＰＭＰ－１的表达,并作Ⅰ、Ⅲ型胶原的免疫组化以及Ｍａｓｓｏｎ胶原染色。结果 发现秋水仙碱对肝纤维化大鼠ＭＭＰ－１的表达无明     

基质金属蛋白酶及其抑制因子与肝纤维化

基质金属蛋白酶是肝内细胞外基质降解酶的重要酶类肝内ＭＭＰ家族包括ＭＭＰ－１，ＭＭＰ－２，ＭＭＰ－３及其抑制因子ＴＩＭＰ－１，ＴＩＭＰ－２，ＴＩＭＰ－３，ＭＭＰ主要由肝脏间质细胞合成和分泌，ＴＩＭＰ可由肝实质及间质细胞合成和分履，肝纤维化早期时，肝组织间质胶原酶活性较高。纤维化晚期活性下降，而肝纤维化时肝组织中ＴＩＭＰ－１表达增强，慢性肝炎患者血清ＴＩＭＰ－１水平显著增高，并与肝纤维程度呈显著相关。     

基质金属蛋白酶—1,反义金属蛋白酶组织抑制因子—1表达质粒？…

目的 观察基质金属蛋白酶－１（ＭＭＰ－１）,反义金属蛋白酶组织抑制因子－１（ＴＩＭＰ－１）表达质粒对大鼠肝纤维经的影响。方法 运用重组ＤＮＡ技术,构建大鼠ＭＭＰ－１,反义ＴＩＭＰ－１,真核细胞表达质粒,经脂质包埋后,利用腹腔注射将其导入免疫性大鼠纤维化模型体内,观察其对大鼠肝纤维化的影响。结果 ＭＭＰ－１,反义ＴＩＭＰ－１表达质粒均可促进肝脏中Ⅰ,Ⅲ型胶原的降解（Ｐ〈０．０５－Ｐ〈０．０１）,且作     

反义金属蛋白酶组织抑制因子—1表达质粒对实验性大鼠肝纤维 …

观察反义金属蛋白酶组织抑制因子－１（ＴＩＭＰ－１）表达质粒对实验性大鼠肝纤维化的影响。方法运用逆转录巢式和重组ＤＮＡ技术,构建大鼠反义ＴＩＭＰ－１真核细胞表达质粒,经脂质体包埋后,利用腹腔注射将其导入免疫性大鼠肝纤维化模型体内;通过ＲＴ－ＰＣＲ,Ⅰ、Ⅲ型胶原的免疫组化及Ｍａｓｓｏｎ胶原染色观察反义ＴＩＭＰ－１表达质粒对大鼠肝纤维化的影响。结果反义原的免疫组化以及     

雌二醇对人成骨样细胞基质金属蛋白酶及其抑制因子的作用

目的 探讨雌二醇（Ｅ２对人成骨样ＭＧ－６３细胞基质金属蛋白酶（ＭＭＰ）及基质金属蛋白酶抑制因子（ＴＩＭＰ）的作用和雌激素缺乏致骨质疏松（ＯＰ）的发病机制。方法 ＭＭＰ和ＴＩＭＰ用酶联免疫吸了会法和免疫印迹法检测,ｍＲＮＡ用逆转录聚合酶链反应检测。ＭＭＰ活性用明胶酶谱法检测。结果 人成骨样ＭＧ－６３细胞在２４ｄ的培养中表达ＭＭＰ－１、ＭＭＰ－２、ＴＩＭＰ－１和ＴＩＭＰ－２,但不表达ＭＭＰ－３、ＭＭＰ     

改良免疫性肝纤维化大鼠模型建立及TIMP-1蛋白和基因表达的研究

了解基质金属蛋白酶组织抑制因子 1(ＴＩＭＰ 1)在正常及实验性肝纤维化大鼠肝组织中的定位及表达状态。用人血白蛋白免疫攻击的方法制备实验性免疫性肝纤维化大鼠模型 ,以正常大鼠为对照。采用免疫组织化学法及原位杂交技术分别检测肝脏中ＴＩＭＰ 1ｍＲＮＡ和相关抗原 ,同时ＰＣＲ技术检测肝脏中ＴＩＭＰ 1基因表达。结果表明 ,实验组肝脏中ＴＩＭＰ 1相关抗原表达在肌成纤维细胞、成纤维细胞 ,以汇管区及纤维间隔中最明显 ,阳性信号位于细胞胞浆中 ,未见细胞核表达。原位杂交检测结果也展示了上述相同的分布和定位。正常大鼠肝组织中可…     

基质金属蛋白酶组织抑制因子mRNA及蛋白在肝硬化组织中的定位研究

基质金属蛋白酶组织抑制因子 (ＴＩＭＰｓ)具有调节金属蛋白酶 (ＭＭＰｓ)活性的作用。为了探明ＴＩＭＰ 1和ＴＩＭＰ 2蛋白及ｍＲＮＡ在肝硬化组织中的表达情况及分布状态 ,从免疫病理学及分子病理学角度研究ＴＩＭＰ 1和ＴＩＭＰ 2在肝硬化发病机制中所起的作用。以抗ＴＩＭＰ 1和ＴＩＭＰ 2单克隆抗体和ＴＩＭＰ 1和ＴＩＭＰ 2ｃＤＮＡ探针为试剂 ,采用免疫组织化学法和原位杂交技术检测肝硬化组织中ＴＩＭＰ 1和ＴＩＭＰ 2蛋白及ｍＲＮＡ。结果表明 ,4 0例肝硬化患者肝组织中ＴＩＭＰ 1和ＴＩＭＰ 2蛋白以及ｍＲＮＡ表达的阳性率为 10 0…     

肝癌金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达增强

近来 ,基质金属蛋白酶 (ＭＭＰｓ)在肿瘤浸润、转移中的作用日益受到人们的关注。金属蛋白酶组织抑制因子 (ＴＩＭＰｓ)可抑制ＭＭＰｓ的活性 ,其有无阻止肿瘤转移的作用 ,对此报道尚少。我们采用逆转录定量ＰＣＲ方法研究了原发性肝癌患者中ＴＩＭＰ1基因表达的情况 ,现报道如下。一、对象和方法1.研究对象 :原发性肝癌患者 33例 ,男 2 6例 ,女 7例 ,平均年龄 (5 3± 6 )岁。所有患者均于术中取癌组织及癌旁组织 ,迅速投入液氮 ,在标本留取 1周内行ＲＮＡ提取。术后病理检查结果示 33例均为肝细胞癌。癌旁组织中 2 8例为肝硬化组织 ,5例为…     

金属蛋白酶抑制剂TIMP-2基因转染对胃癌细胞体内外生长侵袭与细胞外基质的相关性

目的探讨金属蛋白酶抑制剂（ＴＩＭＰ２）基因转染后胃癌细胞的体内外侵袭能力的改变及胶原与胶原酶的变化规律．方法将人全长ＴＩＭＰ２ｃＤＮＡ基因构建于改构的逆转录病毒载体ｐＬＭＴ，经基因转染法导入人胃癌细胞系ＳＧＣ７９０１，Ｇ４１８筛选获阳性细胞．利用裸鼠肾包膜下移植模型，采用免疫组化和原位杂交方法，观察肿瘤发展过程中的不同时期ＴＩＭＰｓ／ＭＭＰｓ（基质金属蛋白酶）ｍＲＮＡ，Ⅳ型胶原表达的情况．结果随着肿瘤移植后时间的延长，瘤细胞侵袭基底膜处Ⅳ型胶原缺失，瘤巢周围ＭＭＰｓ含量丰富．通过体外实验，观察到ＳＧＣ７９０１Ｔ２细胞ＴＩＭＰ２ｍＲＮＡ及蛋白活性均高于母系ＳＧＣ７９０１细胞，ＴＩＭＰ２可抑制基质金属蛋白酶的活性，减弱肿瘤细胞的侵袭体内外移动速度．结论ＭＭＰｓ的高表达是肿瘤细胞侵袭的关键因素，而ＴＩＭＰ２基因是恶性肿瘤侵袭和转移的负调控因子．     

缺氧对肝星状细胞基质金属蛋白酶Ⅱ表达及活性调节的影响

目的 研究缺氧对ＨＳＣ基质金属蛋白酶Ⅱ（ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ－２,ＭＭＰ－２）表达及活性调节的影响。方法 大鼠ＨＳＣ体外原代培养,以免疫细胞化学及ＥＬＩＳＡ法分别检测细胞内ＭＭＰ－２及基质金属蛋白酶组织抑制因子Ⅱ（Ｔｉｓｓｕｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ ｍｅｔａｌｌｏｐｏｒｅｉｎａｓｅ－２,ＴＩＭＰ－２）的表达,和培养上清流中两者的相对量,并以酶图法测培养上清液ＭＭＰ－     

大肠癌金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达的研究

目的 了解大肠癌患者金属蛋白酶组织抑制因子—1基因表达的情况。方法 50例大肠癌术中取癌组织及正常大肠组织；提取组织RNA；用逆转录共扩增定量PCR方法测定其金属蛋白酶组织抑制因子子-1(TIMP-1)基因表达水平。结果 大肠癌组织金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达水平明显高于正常大肠组织。局部淋巴结受累者TIMP-1基因表达水平明显低于局部淋巴结未受累者。结论 金属蛋白酶组织抑制因子-1在阻止大肠癌的浸润、转移中可能起重要作用。     

Immunohistochemical analysis on potential new molecular targets for esophageal cancer

Despite multimodal therapeutic options, esophageal cancer is still among the most deadly malignancies. In the past decade, targeted therapy has shown great potential in other cancers, but data on esophageal carcinoma are still rare. Five potential new molecular targets in esophageal adenocarcinoma (EAC) and esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) were investigated for their expression characteristics: vascular endothelial growth factor receptor (VEGFR)‐3, human epidermal growth factor receptor‐2, stem cell growth factor receptor, tissue inhibitors of metalloproteinase (TIMP)‐4 and TIMP‐3. One hundred seventy‐one EAC and ESCC tissue samples obtained from patients undergoing esophagectomy from 2000 to 2008 were included. Clinical data were evaluated retrospectively. Immunohistochemical staining was performed using tumor tissue with and without neoadjuvant treatment and healthy tissue. For samples without neoadjuvant treatment, expression of all targets was higher in tumor tissue than in healthy tissue except for VEGFR‐3 (>98% expression in both tissues). For TIMP‐4, TIMP‐3 and stem cell growth factor receptor, trends to higher expression in tumor tissue were also found in EAC and ESCC that had received neoadjuvant treatment. Using Matched‐pair analysis, we compared target expression in tumor tissue with and without neoadjuvant treatment. Only TIMP‐3 had significantly lower expression in neoadjuvant treated tumor tissue (EAC: P = 0.059, ESCC: P = 0.006). TIMP‐4, TIMP‐3 and VEGFR‐3 appear to qualify for targeted therapy in esophageal cancer because of their high expression in neoplastic tissue. TIMP‐3 appears to be downregulated in neoadjuvantly treated esophageal cancer, and VEGFR‐3 shows high expression in healthy mucosa leading to severe side effects by molecular targeting. Thus, TIMP‐4 seems the most promising target.     

Methylation of TIMP3 in esophageal squamous cell carcinoma

AIM： To measure the frequency of DNA methylation of the tissue inhibitor of metalloproteinase 3 （TIMP3） promoter and relate this to any change of gene expression in esophageal squamous cell carcinoma in patients from a region of high incidence in China. METHODS： Cancer cell lines were treated with or without the demethylating reagent 5-aza-2′-deoxycytidine. Methylation of the TIMP3 promoter was assessed in three regions by melt curve analysis and its expression was assessed by real-time RT-PCR. Tumors and proximal resection margins were obtained from 64 patients with esophageal squamous cell carcinoma from a region of high incidence in China. Methylation was assessed by melt curve analysis and expression by immunohistochemistry.
RESULTS： Methylation in one of the three promoter regions assessed correlated with gene silencing in esophageal cell lines. A degree of methylation of TIMP3 was found in only four esophageal squamous cell carcinomas, and partial loss of TIMP3 protein expression in just one.
CONCLUSION： Methylation and loss of expression of TIMP3 occurs infrequently in esophageal squamous cell carcinoma in a region of high incidence in China.     

血清学诊断肝纤维化新指标--金属蛋白酶组织抑制因子检测方法学建立及应用评价

目的：自行建立一种改良固相致敏红细胞吸附技术（SPASE）用于快速检测肝硬化病人血清中金属蛋白酶组织抑制因子－1，2（TIMP－1和TIMP－2），同时研究TIMP－1和TIMP－2在肝化病人肝组织中的定位及表达状态，以及肝组织TIMPs与血清TIMPs的相关性。探讨血清中TIMP－1和TIMP－2可否作为肝纤维化的血清学诊断新指标。方法：应用自行建立的SPASE检测1082例肝病病人（其中肝硬化310例）血清标本中的TIMP－1和TIMP－2。用原位杂交及免疫组织化学技术分别检测40例肝硬化病人活检肝组织中TIMP－1和TIMP－2 mRNA及相关抗原的表达，并与病人自身血清检测结果对比。另检测20例正常肝组织作为对照。结果：SPASE法特异性中和抑制试验示中和抑制率均在70％以上，检测310例肝硬化病人血清中TIMP－1和TIMP－2的阳性率分别为79．68％和65．16％。40例肝硬化病人肝组织中TIMP－1和TIMP－2 mRNA及相关抗原表达阳性率为100％，TIMP－1表达强度高于TIMP－2（P＜0．01）；阳性信号主要位于肝细胞胞质内，未见细胞核表达。40例肝硬化肝活检病人血清检测结果，TIMP－1阳性率为100％，TIMP－1阳性率为77．5％（31／40）。正常肝组织无一例有TIMPs相关抗原表达。结论：TIMPs定位于肝硬化病人的肝细胞胞质内，在肝硬化组织内呈程度不等的阳性表达；血清中TIMPs与肝组织中TIMPs表达有明显相关性，因而血清中TIMP－1和TIMP－2可作为肝纤维化较为有用的血清学诊断新指标，尤其是TIMP－1的诊断意义更大。SPASE法检测血清中TIMPs具有较好的特异性。     

基质金属蛋白酶-7在哈萨克族食管癌中的表达及其意义

目的 观察哈萨克族食管癌及癌旁组织中基质金属蛋白酶-7的表达,探讨其在哈萨克族食管癌发生、发展,浸润转移中的作用.方法 采用RT-PCR方法检测MMP-7 基因mRNA在20例哈萨克族食管癌组织及其癌旁组织标本中的表达,选取mRNA水平差异组织标本采用Western-bolt方法检测其在蛋白水平的表达情况.结果 20例癌组织中有11例表达阳性,占55%,20例癌旁组织中有8例表达,占40%,其中癌组织表达量明显高于癌旁组织的有8例,占40%;MMP-7蛋白在癌组织中表达高于其相应癌旁组织.结论 MMP-7在哈萨克族食管癌的发生发展中起到一定的作用.     

HspB1在新疆哈萨克族食管癌组织中的表达

目的:寻找与新疆哈萨克族食管癌发生、发展密切相关的基因,为早期诊断和治疗提供依据.方法:利用二维凝胶电泳(2-DE)和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术联用检测出新疆哈萨克族食管癌癌组织与远端正常组织的差异表达蛋白.对其中的HspB1基因进行RT-PCR验证.结果:2-DE结果显示新疆哈萨克族食管癌患者癌组织和远端正常组织在蛋白质水平有显著增高,而其mRNA表达在癌组织中为2.18±3.98,正常组织为3.06±4.69,并无显著升高(P>0.05),且与浸润深度、临床分期、分化程度无关(P>0.05),但HspB1的表达量在浸润深度组,T1-T2期T>N为7/11(63.6%),而T3-T4期T>N仅为14/37(37.8%);在分化程度组,低分化期T>N为5/9(55.6%),中高分化期T>N仅为16/39(41%).随着浸润深度和分化程度的逐步加深,由T>N向T相似文献   

p53 in epidermoid cancer of the esophagus.

BACKGROUND/AIMS: Wild type p53 protein has an inhibitory effect on cell proliferation and transformation. Mutation or deletion of the p53 gene can be the first point of malignancy. Abnormalities of the p53 protein gene have been linked with tumors of the esophagus. METHODOLOGY: In this study, we investigated the expression of the p53 gene in epidermoid carcinoma of the esophagus as well as in the basal layer near the tumor. We studied the expression of p53 in 24 esophageal tumors and in normal esophageal tissue near the tumor in 16 cases, using an immunohistochemical reaction. RESULTS: p53 was positive in 18 esophageal tumors (75%) and in 15 of the 16 (94%) normal samples of esophageal tissue. There was no correlation between expression of the p53 gene and age, sex, tobacco intake, alcoholism, and familiar history of cancer or clinical stage of the disease. The mean survival of the p53 patients (negative or positive) was similar. CONCLUSIONS: p53 accumulation was found in most cases of esophageal cancer as well as in samples of normal tissue close to the tumor. The positivity of p53 seems to be independent of clinical or pathological parameters and was not of any use in predicting prognosis in our study.     

食管癌组织中ABCG2的表达变化及意义

目的观察ABCG2在食管癌组织中的表达变化,并探讨其意义。方法收集80例食管癌患者的癌组织及癌旁正常食管组织,进行ABCG2的免疫组化染色及Western blot检测。结果 80例食管癌患者,其癌组织中ABCG2的表达较正常食管组织明显上调（P〈0.05）。患者的3年生存率与癌组织中ABCG2的表达量有关（P〈0.01）,癌组织中ABCG2的表达上调与术后早期复发密切相关（P〈0.05）。结论 ABCG2在食管癌组织中的表达上调,可以作为食管癌患者预后的预测因子之一。     

溃疡性结肠炎患者基质金属蛋白酶-2,9和抑制因子-1,2的表达及其意义

目的　在转录和蛋白水平检测基质金属蛋白酶 (MMP) 2 ,9和特异性组织抑制因子(TIMP) 1,2在溃疡性结肠炎 (UC)患者和正常志愿者肠粘膜中的表达情况及活性变化。方法　对病理证实的 2 2例UC和 2 0名健康志愿者在内窥镜下取活检 ,采用NorthernBlot和WesternBlot法分别对MMP 2 ,9及TIMP 1,2进行检测 ,并采用明胶酶谱法测定MMP 2 ,9活性。结果　MMP 2 ,9和TIMP 1在正常肠粘膜中均呈现低表达 ,在患者肠粘膜中表达显著升高 (P <0 .0 1) ,而TIMP 2在两种粘膜中的表达量无明显差别。明胶酶谱结果显示MMP 2 ,9在后者中的活性较前者中显著升高 (P <0 .0 5 ) ,且与炎症程度相关。结论　MMP 2 ,9在UC肠炎肠粘膜上皮重塑过程中具有重要作用 ,在疾病的发生和发展中可能起到促进作用