急性肺损伤时肺泡上皮Na+通道研究的进展

急性肺水肿是急性肺损伤(ALI)的重要特征,肺泡上皮主动液体清除功能是影响ALI肺水肿的重要环节[1].研究表明肺泡上皮细胞钠离子通道(ENaC)是肺泡内液体主动转运的重要机制.肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)通过ENaC对肺泡腔的液体平衡进行调节[2-3].ALI导致肺水肿时,肺泡中的液体成分主要通过ENaC、Na+-K+-ATP酶(NKA) 和肺血管内皮细胞的水通道蛋白(AQP)重吸收.现主要对ALI时肺泡上皮ENaC的研究进展进行回顾.     

特布他林影响水通道蛋白4在大鼠急性肺损伤肺水代谢的作用

目的 油酸造成急性肺损伤(ALI) 初期,特布他林气管滴入治疗,根据肺损伤程度及测定血管外肺水的大小,评估病理状态下特布他林对肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ) 水通道蛋白4(AQP-4 )转运水能力的影响.方法 血气分析、肺组织病理学评分、透射电镜检测肺损伤程度;重力法测定血管外肺水(EVLW)含量;免疫组化法分析肺组织AQP-4的表达,急性分离纯化ATⅡ细胞,电子显微镜观察超微结构;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) 检测肺泡Ⅱ型上皮细胞AQP-4的mRNA 表达.结果 血气分析、光镜下肺损伤评分说明油酸致大鼠急性肺损伤,显微镜下ATⅡ细胞的数量较对照组无明显减少,但电镜下细胞的超微结构如板层小体排空,线粒体损伤等改变;特布他林治疗后血气分析、病理评分、电镜下细胞等损伤明显减轻(P<0.05);EVLW三组间有显著性差异(P<0.05),治疗组肺水下降明显;肺组织免疫组化观察到损伤后肺泡上皮细胞AQP-4表达增强,呈阳性,特布他林组表达呈强阳性;ATⅡ细胞AQP-4的mRNA 表达治疗组、油酸组较对照组有显著性差异(P<0.05),两者之间无显著性差异(P＞0.05).结论 特布他林可能通过上调肺泡上皮细胞和Ⅱ型细胞上AQP-4的表达,介导水转运减轻肺损伤时肺泡腔水肿.     

小鼠急性肺损伤后肺内CFTR和ENaC的表达变化

目的:探讨囊性纤维化跨膜调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)氯离子通道和上皮细胞钠通道(epithelial sodium channel,ENaC)蛋白在内毒素诱发急性肺损伤小鼠肺内的表达变化。方法:将内毒素经小鼠气管注入肺内后诱发急性肺损伤,24h、48h、72h后取肺组织,检测其CFTR和ENaC的mRNA浓度变化、肺泡液体清除率、湿干重比。结果:小鼠急性肺损伤后24h、48h、72h,CFTR在肺内的表达均降低(P0.05)。小鼠急性肺损伤后24h、48h、72h,α-ENaC在肺内表达均降低(P0.05);β-ENaC、γ-ENaC在急性肺损伤后24h、48h表达降低(P0.05),而在急性肺损伤后72h恢复正常。小鼠急性肺损伤后24h、48h、72h,肺泡液体清除率和肺湿干重比出现类似的改变。结论:内毒素诱发的小鼠急性肺损伤组织中,CFTR和ENaC的表达均下降,肺泡液体清除率与其一致,肺湿干重的变化与其相反。     

小鼠急性肺损伤时肺内CFTR和ENaC表达变化

目的：探讨CFTR氯离子通道和ENaC钠通道在内毒素诱发急性肺损伤小鼠肺内的表达变化。 方法：内毒素经小鼠气管内注入后诱发急性肺损伤,随后在24、48和72小时取肺组织进行分析,检测氯离子通道CFTR和钠通道ENaC的mRNA在肺内的浓度变化。肺泡液体清除率和湿干重比也在同样的时间点进行检测。 结果：小鼠急性肺损伤诱发后24小时时,CFTR氯离子通道在肺内表达显著降低（p<0.05）,48和72小时时也降低（p<0.05）。小鼠急性肺损伤诱发后24、48和72小时a－ENaC在肺内表达均显著降低（p<0.05）;同时ENaC另外两个?和r亚型在24和48h时表达显著降低（p<0.05）,而在72h时则恢复正常（p>0.05）。而在同样的时间点,肺泡液体清除率和肺湿干重比也出现类似的改变。 结论：内毒素诱发的急性肺损伤小鼠模型中,CFTR和ENaC在肺内表达均下降,与肺泡液体清除率和肺湿干重的变化一致。     

细胞因子和水钠通道蛋白在急性肾损伤致肺损伤中的作用

目的 通过双肾动静脉夹闭建立急性缺血性肾损伤大鼠模型,观察大鼠肺病理生理的变化,观察上皮细胞钠通道蛋白(α-ENaC)和水通道蛋白1(AQP1)在急性肾损伤所致肺损伤中的作用.方法 健康雄性Wistar大鼠60只.体质量300～ 320 g,随机(随机数字法)分成健康对照组(A组),急性肾损伤组(B组),每组30只.造模后,处死大鼠,苏木素伊红(HE)染色检查肺组织病理变化,计算肺W/D比值,支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白质量浓度.检测肺组织中水通道蛋白1、肺上皮钠通道蛋白的质量浓度.测定血清及BALF中IL-6与TNF-α的质量浓度.结果 B组大鼠在实验后6h动脉血pH值开始下降,酸中毒逐渐加重,与A组比较差异具有统计学意义(P＜0.05).B组与A组的氧分压各时间点之间相比差异无统计学意义(P＞0.05).与A组相比,B组在实验后2h肺泡灌洗液中蛋白水平、肺W/D值开始明显增加,差异具有统计学意义(P＜0.05).B组实验后8h肺泡上皮肿胀,肺泡壁增宽,肺泡间质水肿明显,肺泡内可见炎症细胞、红细胞和蛋白渗出,表现出急性肺损伤的病理改变.B组在实验后2h血清及肺泡灌洗液中TNF-、IL-6的质量浓度开始增加,肺组织中AQP1、α-ENaC表达开始逐渐减少,与A组比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 急性肾损伤早期肺泡上皮-内皮屏障功能已经受到了影响,急性肺损伤已经发生.急性肾损伤后早期体内TNF-α、IL-6含量明显增加,肺表达AQP1及α-ENaC的减少,可能是急性肾损伤早期引起肺损伤的原因之一.     

溺海肺损伤的发病机制和治疗的研究进展

溺海肺损伤的发病机制包括低氧血症和酸碱失衡、电解质紊乱、肺泡上皮细胞和肺微血管内皮细胞的直接损伤及水通道和离子通道改变、血流动力学和心功能改变、肺组织中内皮素、降钙素和血红素氧合酶改变、肺泡巨噬细胞和表面活性物质改变、血浆氧自由基、肿瘤坏死因子和白细胞介素-8等细胞因子改变.溺海肺损伤的治疗包括机械通气、糖皮质激素、高压氧治疗、NO吸入、肺灌洗和药物治疗.     

肺泡内液体清除与肺水肿的研究进展

肺水肿是急性肺损伤(ALI)病理进程中的中心环节,与肺泡毛细血管通透性增加和肺泡内液体清除减少有关。以往对肺泡毛细血管通透性导致的肺水肿研究较多,而对肺泡内液体清除在肺水肿形成中的作用关注不足。肺泡内液体清除受水通道蛋白、钠离子通道、钠钾ATP酶的影响。认识肺泡内液体清除机制有望能为临床医师治疗ALI提供参考。     

重型颅脑损伤继发肺水肿防治进展

神经源性肺水肿是重度颅脑损伤时严重的并发症,临床表现起病急,以急性呼吸困难和进行性低氧血症为主要特征,病死率高.冲击伤和渗透缺陷理论是目前神经源性肺水肿发生的公认理论,其病理生理机制复杂.目前认为与神经源性肺水肿形成有关的介质有内皮素、氧自由基、组胺、神经肽、中性粒细胞.而肺泡上皮细胞的钠水主动转运系统在肺水转运过程中起重要作用,增加其功能,可减轻肺水肿液生成.预防、早期诊断和治疗,可有效降低肺水肿的发生,降低病死率.     

骨髓间充质干细胞移植清除急性肺损伤大鼠的肺泡液体

背景:肺泡液体增多是急性肺损伤的重要病理生理改变,而修复受损的肺泡一毛细血管膜屏障是减轻肺水肿的有效途径.目的:探讨骨髓间充质干细胞移植对内毒素诱导急性肺损伤模型大鼠肺泡液体的清除作用.方法:采用改良的Peister法分离培养大鼠骨髓充质干细胞,传至第3代制成单细胞悬液.将大鼠随机分为3组,急性肺损伤组和骨髓间充质干细胞干预组采用腹腔注射内毒素建立急性肺损伤模型.成功造模1 h后,干预组经尾静脉注射骨髓间充质干细胞悬液0.5 mL(细胞数1×106个),对照组和损伤组同法予以等量生理盐水.各组在尾静脉注射后6,24,48 h,检测肺泡液体清除率、肺水含量程度测定,观察肺组织病理变化.结果与结论:肺水含量程度测定湿干比肺损伤组在24 h点与其他组比明显升高(P＜0.05);细胞移植组湿干比在各时间点与肺损伤组比明显降低(P＜0.05).细胞移植组在各时间点肺泡液体清除率与肺损伤组比明显升高(P＜0.05).苏木精一伊红染色光镜观察,肺损伤组6 h点表现为毛细血管充血,肺泡腔内炎性细胞浸润,24 h点加重;细胞移植组6 h点肺泡腔内炎性细胞浸润较肺损伤组轻,24 h点继续减轻,48 h点基本接近正常对照组.提示,骨髓间充质干细胞移植可能通过能修复受损的肺泡一毛细血管膜屏障从而增加急性肺损伤大鼠肺泡液体清除.     

角质细胞生长因子受体转基因对急性肺损伤时肺泡上皮细胞钠离子通道的影响

目的 观察角质细胞生长因子受体(KGFR)腺病毒表达载体在大鼠急性肺损伤前后对肺泡Ⅱ型上皮细胞钠离子通道表达的促进作用,从而验证基因治疗急性肺损伤的效果.方法 将雄性SD大鼠40只分成4组:正常对照组(n=8),致伤对照组(n=10),正常转基因组(n=10),致伤转基因组(n=12).用脂多糖(LPS)造成急性肺损伤模型,以肺组织明显肿大病变为制模成功标准.正常转基因组和致伤转基因组均通过大鼠尾静脉注射KGFR基因的腺病毒表达载体应用液1 mL,72 h后致伤转基因组和致伤对照组分别通过大鼠尾静脉以5 mg/kg注射LPS,正常转基因组和正常对照组则注射等量的生理盐水.过48 h后,断头处死所有实验组大鼠,取肺组织进行实验.通过免疫组化和免疫电镜检测各组大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞钠离子通道的表达情况.数据采用完全随机区组设计的方差分析,行LSD-t检验,以P<0.05为差异具有统计学意义.结果 肺泡Ⅱ型上皮细胞钠离子通道表达水平(免疫组化)由高到低依次为:正常对照组(PU值=47.7±3.33),正常转基因组(PU值=46.9±5.21),致伤转基因组(PU值=29.19±4.11)和致伤对照组(PU值=5.1±2.3);致伤转基因组的钠离子通道表达水平低于正常转基因组(t=9.134,P<0.001)和正常对照组(t=10.601,P<0.001),但明显高于致伤对照组(t=16.466,P<0.001).结论 KGFR腺病毒表达载体转基因效果明显,能够在LPS致伤情况下有效促进钠离子通道的表达,缓解肺泡腔内钠水潴留,达到转基因治疗肺损伤的效果.     

急性肺损伤时一氧化氮与宗气关系的探讨

急性肺损伤(ALI)是临床常见危重急症,是由多种肺外致病危险因子导致的、以肺毛细血管内皮细胞和肺泡上皮细胞损伤造成弥漫性肺间质及肺泡水肿,引起急性低氧性呼吸功能不全或衰竭,进而发展为急性呼吸窘迫综合征(ARDS),其发病机制复杂,现仍不十分清楚.     

内毒素对大鼠肺内钠通道表达的影响

目的通过测定内毒素（LPS）对肺内钠通道（ENaC）表达的影响,探讨ENac在急性肺损伤（ALI）发病机制中的作用。方法16只雄性Wistar大鼠腹腔麻醉后随机分为对照组（Nc组）和内毒素组（LPS组）,分别静脉注射生理盐水8ml／kg、LPS 8mg／kg后6h处死。比较两组PaO2、肺病理切片肺水肿程度,Real-time PCR半定量检测肺组织钠通道α、β、γ-ENaC mRNA表达,免疫组化方法检测α-ENaC蛋白在肺内表达。结果LPS组肺病理切片可见间质增宽、水肿,中性粒细胞浸润,正常肺泡结构破坏。以Nc组α、β、γ-ENaC mRNA基因表达量为100％,则LPS组α、β、γ-ENaC基因相对表达量为28％、40％、59％。LPS组α-ENaC蛋白在气管上皮细胞、支气管腺体、血管内皮细胞的表达无明显下降,主要是肺泡上皮细胞表达下降。结论ENaC基因和蛋白表达下调可能是Au发生肺水肿的重要机制之一。     

急性呼吸窘迫综合征肺容积减少的机制与肺开放策略的选择

急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是各种肺内外病因引起的肺毛细血管内皮细胞和肺泡上皮细胞损伤,由此导致的急性非心源性低氧性呼吸衰竭。肺容积减少是ARDS最重要的病理生理改变之一,也是当前ARDS机械通气治疗的主要着眼点和难点。肺组织自身重量增加导致肺泡塌陷,肺泡水肿,心脏和腹腔导致的压迫性肺不张是ARDS患者肺容积减少的原因。肺容积减少机制导向性的肺开放策略有助于达到改善氧合和减少呼吸机相关肺损伤的最佳平衡。     

硫化氢对急性肺损伤大鼠肺泡上皮细胞内质网应激的调节

目的 探索内源性硫化氢对于油酸诱导的急性肺损伤大鼠肺泡上皮细胞内质网应激的调节作用.方法 雄性Sprague Dawley大鼠随机(随机数字法)被分入正常对照组、油酸组、油酸+硫氢化钠组及硫氢化钠对照组.每个组进一步分为2、4和6h3个时间点.对肺组织进行肺组织损伤半定量评分,检测肺组织湿、干质量比和匀浆硫化氢含量.通过免疫组化染色和蛋白印迹法检测内质网应激的标志蛋白(GRP78和elF2α)的表达.结果 肺损伤大鼠肺组织损伤半定量评分及湿、干质量比明显升高,而肺组织硫化氢含量,肺泡上皮细胞GRP78及eIF2α的表达明显降低.在硫氢化钠预处理的大鼠中,肺损伤半定量评分及肺组织湿、干质量比明显降低,而肺组织硫化氢含量,肺泡上皮细胞GRP78及eIF2α的表达明显升高.结论 内源性硫化氢可以通过促进肺泡上皮细胞内质网应激反应进而在肺损伤过程中起到保护作用.     

水通道蛋白1在大鼠肺泡Ⅱ型细胞上的表达

目的 观察大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞水通道蛋白1(AQPl)的表达。方法 对肺泡Ⅱ型上皮细胞进行分离、纯化，通过免疫组化及免疫电镜方法检测AQPl在该细胞上的表达。结果 大鼠肺泡Ⅱ型细胞免疫组化AQPl呈阳性，免疫电镜细胞膜上可见高电子密度阳性反应。结论 AQPl存在于大鼠肺泡Ⅱ型细胞膜上，对呼吸系统水转运可能起到重要作用。     

特布他林对急性肺损伤大鼠肺泡液体清除功能影响的实验研究

目的 :测定不同 p H值条件下酸性溶液对肺泡上皮屏障的损伤 ;观察特布他林对急性肺损伤大鼠肺泡液体清除功能的影响。方法 :向大鼠肺内滴注等渗酸溶液 ,机械通气 1小时后测定通过肺泡上皮屏障的双向蛋白流和肺泡液体清除率。结果 :随滴注液 p H值的降低 ,通过肺泡上皮屏障的双向蛋白流明显增加。当滴注液的 p H值由 7.0降到 1.5时 ,渗入血浆的肺泡蛋白示踪剂由 (5± 4) %增至 (33± 2 ) % ,进入肺泡腔内的血浆蛋白示踪剂由 (5± 1) %逐渐增至 (2 5± 2 ) %。当滴注液 p H≥ 3.5时 ,特布他林组 (1× 10 - 4 m ol/ L)的肺泡液体清除率较对照组高 2 1%～ 36 % (P<0 .0 5 ) ,但其作用随滴注液 p H值降低而减小 ;当 p H值≤ 2 .5时 ,特布他林对大鼠的肺泡液体清除功能无明显作用。结论 :酸溶液可损伤肺泡上皮 ,增加肺泡上皮屏障对蛋白质的通透性 ,降低肺泡上皮对液体的清除 ;特布他林通过激活肺泡上皮钠通道 ,增加肺泡液体的清除 ,进而改善急性肺损伤的病理生理变化 ,但其作用随气道 p H值降低而逐渐减小     

重症急性胰腺炎相关肺损伤危险期的确立

目的 通过对重症急性胰腺炎模型小鼠肺组织含水量、Ⅱ型肺泡上皮细胞的超微结构及数目、活性氧代谢产物的动态演变研究和临床资料的分析,从基础和临床的角度综合确立重症急性胰腺炎相关肺损伤的危险期.方法 ICR清洁级小鼠雨蛙素腹腔内注射50 μg/kg,每小时1次,共7次,于雨蛙素注射结束后腹腔内注射LPS 15 mg/kg来创建重症急性胰腺炎小鼠模型,设定研究点为制模前、制模后6 h、12 h、1 d,4 d、7 d,对肺组织含水量、Ⅱ型肺泡上皮细胞的超微结构和数目以及肺组织活性氧代谢产物进行了动态研究.同时回顾性分析215例来自于浙江大学医学院附属第一医院1998年1月至2006年12月收治在消化内科、胰腺外科和ICU的重症急性胰腺炎患者伴肺损伤患者(纳入标准为PaO2<60 mmHg)肺损伤的时期.样本均数差异采用F检验,P<0.05为差异有统计学意义.结果 重症急性胰腺炎小鼠肺组织含水量以制模后1 d和4 d最严蕈,Ⅱ型肺泡上皮细胞的线粒体和板层小体损伤程度以制模后1 d,4 d最为明显,Ⅱ型肺泡上皮细胞数目下降以制模后1 d最显著,肺组织活性氧代谢产物亦以制模后1 d明显升高,较其他研究点有显著性差异.临床上重症急性胰腺炎患者出现肺损伤的时间为(3.1435±1.0199)d.结论 重症急性胰腺炎相关肺损伤的危险期在重症急性胰腺炎病程的第1天至第4天之间.     

特普他林对油酸性肺损伤鼠肺泡液体清除功能的影响

目的：观察特普他林对油酸致伤大鼠肺损伤后肺泡上皮液体清除能力的影响。方法：采用大鼠油酸型肺损伤模型。大鼠伤后２４小时经气管滴注特普他林（１×１０－ ４ ｍ ｏｌ／Ｌ）溶液５ ｍ ｌ／ｋｇ;１ 小时后检测肺泡内液体清除率（ＡＬＣ）、总肺水量（ＴＬＷ）、肺血管外肺水量（ＥＶＬＷ）和动脉血气参数。结果：大鼠伤后２４ 小时ＡＬＣ降低４９．２％ ,ＴＬＷ 和ＥＶＬＷ 明显增加〔分别由（３．１４±０．１４）ｍ ｌ／ｇ 和（２．２５±０．１１）ｍ ｌ／ｇ 增至（４．０４±０．１３）ｍ ｌ／ｇ和（４．３２±０．１１）ｍ ｌ／ｇ〕,严重的低氧血症〔ＰａＯ２ 为（６．５５±０．２３）ｋＰａ（１ ｋＰａ＝ ７．５ ｍ ｍ Ｈｇ）〕。特普他林组ＡＬＣ较油酸致伤组增高６３．７％ ,ＴＬＷ 和ＥＶＬＷ 显著减少〔分别为（３．３９±０．１６）ｍ ｌ／ｇ 和（２．９４±０．１２）ｍ ｌ／ｇ〕。钠转运特异性抑制剂 阿咪洛利或哇巴因能部分抑制特普他林刺激肺泡内液体清除的作用。结论：特普他林通过上调钠主动转运机能,促进肺水肿液的吸收,从而改善换气功能,对急性肺损伤后肺水肿有一定的治疗作用     

急性肺损伤的中医药治疗进展

急性肺损伤(ALI)是急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的早期阶段.常在严重感染、休克、创伤及烧伤等非心源性疾病过程中,由于肺毛细血管内皮细胞和肺泡上皮细胞受损,形成弥漫性肺间质及肺泡水肿,从而导致的急性低氧性呼吸功能不全或衰竭,是1种常见而严重的呼吸急症.     

表面活性物质在创伤性肺水肿的作用

肺表面活性物质具有降低肺泡表面张力，维持肺泡结构稳定性，防止肺萎陷和肺水肿，调节肺顺应性，阻止肺毛细血管内液体深入肺间质和肺泡内，促进肺泡内液体清除等重要功能，是维持肺正常生理功能的基础。PS系统异常与肺损伤的发生与发展密不可分，它既是肺损伤的结果，同时也是肺损伤过程中的重要内在因素。肺部伤导致的肺水肿中存在PS功能异常，创伤性肺水肿后PS含量和功能降低，其又通过多种机制加重肺水肿情况。本文着眼于创伤性肺水肿PS的变化和作用进行了综述，为临床综合治疗创伤性肺水肿提供新思路。