RP - HPLC 法测定钩藤中钩藤碱和异钩藤碱的含量简

目的 建立钩藤中钩藤碱和异钩藤碱含量测定方法.方法采用反相高效液相色谱法（RP-HPLC法）测定,色谱柱为Phenomenex Luna C18（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈（A）和0.3‰三乙胺水溶液（B）,采用线性梯度洗脱：0 min：40% A,5 min：50% A,21 min：67% A,25 min：100% A;流速1 mL/min;柱温为室温.DAD检测器,检测波长 254 nm.进样量10 μL.结果 钩藤碱和异钩藤碱分别在10~80 μg/mL范围内,线性关系良好（r=0.9999,1.0）,钩藤碱的平均回收率为103.1%,RSD为2.7%（n=9）,异钩藤碱的平均回收率为99.2%,RSD为3.2%（n=9）.结论该测定方法操作简便、结果准确,可以用于钩藤药材的质量控制.     

中药钩藤中钩藤碱含量的测定

目的 建立优化钩藤药材中钩藤碱的提取及含量测定方法.方法 采用甲醇冷浸超声法处理钩藤药材,Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,流动相及梯度:甲醇∶0.01 mol/L醋酸铵缓冲液(氨水调pH=6.0)0～20 min内比例由25∶75递增至50∶50;流速:1.0 ml/min;柱温:25 ℃;检测波长:245 nm;进样量:20 μl.结果 钩藤碱在0.25～64.0 μg/ml范围内线性良好,回归方程为y=3.64×104x-2.13×104(r=0.999 5),相对回收率为95.95%～114.40%,重复性试验RSD为6.50%,稳定性试验钩藤碱高、中、低浓度溶液室温5 d内RSD为4.62%、2.65%和4.58%.结论 本测定方法准确可靠,重复性好,可应用于钩藤药材中钩藤碱含量的测定.     

酚氨咖敏颗粒含量测定方法的改进

目的：建立HPLC法同时测定氨酚咖敏颗粒中对乙酰氨基酚、咖啡因、氨基比林的含量。方法：采用HPLC法,色谱柱：Kromasil C18（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相：1%醋酸溶液（用三乙胺调pH为3.5）-甲醇-乙腈（65∶10∶25）;流速：1.0 ml/min;检测波长：273 nm;柱温：30℃。结果：对乙酰氨基酚检测浓度的线性范围为12.3～123.2μg/ml（r=0.999 6）,平均回收率为98.65%,RSD=0.31%（n=3）;咖啡因检测浓度的线性范围为2.44～24.42μg/ml（r=0.999 8）,平均回收率为99.15%,RSD=0.15%（n=3）;氨基比林检测浓度的线性范围为8.23～82.34μg/ml（r=0.999 9）,平均回收率为98.40%,RSD=0.39%（n=3）。结论：本法灵敏,可靠,简单可行,可用于氨酚咖敏颗粒中对乙酰氨基酚、咖啡因、氨基比林的含量测定。     

HPLC法测定柏枝前列通颗粒中盐酸小檗碱的含量

目的：建立柏枝前列通颗粒中盐酸小檗碱含量的测定方法。方法：色谱柱为Nova-PakC18柱（3.9mm×150mm,4μm）;乙腈-0.025mol/LNaH2PO4（32.8∶67.2）为流动相;检测波长为345nm;流速为1ml/min;柱温30℃。结果：盐酸小檗碱在12.0～72.0μg/ml的范围,浓度与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9994）,平均回收率为97.88%,RSD为0.87%。结论：该方法准确、重现性好,可有效控制本制剂的质量。     

钩藤药材中钩藤碱含量测定方法的建立

目的：建立钩藤药材钩藤碱含量HPLC测定方法。方法：分别对HPLC的色谱柱、流动相、检测波长等色谱条件进行摸索,对样品索式、回流和超声提取方法进行摸索,并采用正交设计的方法考察超声提取的药材破碎度、溶剂浓度、溶剂量和时间。结果：HPLC色谱条件为色谱柱：Gemini C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相∶甲醇—水（含0.002 mol/L三乙胺,冰乙酸调pH至7.5）（64∶36）,流速：1.0 mL/min,检测波长：254 nm。样品供试液制备方法为：药材破碎度为过60目筛的粉末,提取溶剂为75%甲醇,溶剂加入量为15 mL,超声处理40 min。该方法钩藤碱在0.020 9-1.672 0μg范围内有良好线性关系,平均回收率为98.96%,RSD=0.69%（n=6）。结论：建立的含量测定方法简易、准确,可作为钩藤药材钩藤碱含量测定方法。     

HPLC-DAD法同时测定延胡索中4种生物碱的含量

目的：采用高效液相色谱-二极管阵列检测器（high performance liquid chromatography-diode array detection,HPLC-DAD）,建立同时测定延胡索药材中4种生物碱含量的方法,并比较不同产地中4种生物碱含量的差异。方法：采用 Agilent Eclipse XDB-C18（5 μm,4.6 mm×250 mm）色谱柱,以乙腈-0.05%磷酸（pH 6.0）为流动相进行梯度洗脱,流速 1.0 ml/min,检测波长分别为巴马亭、紫堇碱270 nm,延胡索乙素和四氢小檗碱 280 nm。结果：巴马亭在 1～10 μg/ml、紫堇碱在10～100 μg/ml、延胡索乙素在 5～30 μg/ml,四氢小檗碱在 1～10 μg/ml浓度范围内线性关系良好,高、中、低３种浓度平均加样回收率在 98.2%～101.3%之间。结论：本方法操作简单、稳定、重复性好,可用于同时测定延胡索中 4种生物碱的含量。     

RP-HPLC法测定钩藤煎剂中钩藤碱含量及变化

[目的]测定钩藤中钩藤碱在沸水后下煎药法中煎出量及变化规律。[方法]采用RP-HPLC法,HypersilBDSC18柱,(150mm×4.6mm,5μm),以甲醇∶水(70∶30)为流动相,流速1.0ml/min,波长254nm,柱温25℃。[结果]钩藤碱在0.19μg～0.95μg范围内与峰面积线性关系良好r=0.9990。[结论]钩藤在沸水后下煎药法中,其钩藤碱在汤药中的含量在11.4min达高峰,其后汤药中钩藤碱的含量逐渐降低。     

HPLC-ELSD法测定中药钩藤中钩藤碱的含量

目的建立中药钩藤中钩藤碱的高效液相色谱-蒸发散射检测器法(HPLC-ELSD)的测定方法。方法采用甲醇冷浸超声法处理钩藤药材,经0.22μm的滤膜过滤后进样分析;色谱柱为Diamonsil C18(4.6mm×200mm,5μm),流动相组成,乙腈:0.01mol/L醋酸铵=20∶80,采用梯度洗脱方式,乙腈比例在20min内从20%变为60%,流速为1.0mL/min,柱温为室温30℃,进样量为20μL。ELSD参数:飘移管温度105℃,载气(N2)流速3.0mL/min。结果钩藤碱测定的浓度范围内呈良好线性(r=0.999 0),加标回收率大于96.1%,日内、日间变异系数均小于8.0%,重复性试验RSD为4.7%,稳定性试验钩藤碱高、中、低浓度溶液室温48h内RSD为6.8%、7.2%、9.1%。结论该方法成功地应用于钩藤碱含量的测定,成为一个全面评价钩藤质量的新方法。     

HPLC法同时测定强氯滴眼液中氯霉素和醋酸泼尼松龙含量分析

目的：建立强氯滴眼液中氯霉素及醋酸泼尼松龙含量测定的高效液相色谱方法。方法：采用依利特C18（250mm×4.6mm,5mm）为色谱柱。流动相为甲醇-乙腈-水（60∶10∶30）,流速为0.8 ml/min,检测波长为254nm。结果：氯霉素检测浓度在60.08-240.32μg/ml范围内线性关系良好（r=0.9992）,平均回收率为99.96%（RSD=0.55%）,醋酸泼尼松龙检测浓度在61.24-244.96μg/ml范围内线性关系良好（r=0.9992）,平均回收率为99.88%（RSD=1.65%）。结论：本实验建立的同时测定强氯滴眼液中两组分含量的方法简便、灵敏、准确,可用于该制剂的质量控制。     

RP-HPLC法测定当归芍药散中芍药苷的含量

目的：建立测定当归芍药散中芍药苷含量的方法。方法：采用反相高效液相色谱法,色谱柱为ODS Diamon-silTMC18（150mm×4.6mm,5μm）,流动相为甲醇-0.5%醋酸（30∶70）,检测波长为230nm,流速为1.0ml/min。结果：芍药苷在20～100μg/ml浓度范围内有良好的线性关系（r=0.9996）;平均回收率为（99.9±1.6）%,RSD为1.14%。结论：本法测定当归芍药散中芍药苷的含量,结果准确、可靠。     

LC-MS/MS法同时测定Beagle犬血浆中柚皮苷和新橙皮苷的含量

目的:建立同时测定Beagle犬血浆中柚皮苷和新橙皮苷的LC-MS/MS分析方法。方法:以芦丁为内标,血浆样品经乙腈沉淀蛋白处理,采用Diamonsil C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水(25:75)为流动相,流速为0.4 ml/min,柱温20℃;采用ESI(+)离子源,MRM扫描检测离子对为柚皮苷m/z 581→273、新橙皮苷m/z 611→303、芦丁(内标)m/z611→303。结果:血浆中柚皮苷在0.025～2.5μg/ml、新橙皮苷在0.015～1.5μg/ml浓度范围内线性关系良好,二者的方法回收率均近100%,分析方法的日内日间精密度RSD值均小于10%,内源性物质不干扰样品测定。结论:本方法简便、准确、灵敏度高、专属性好,适用于Beagle犬血浆中柚皮苷和新橙皮苷测定及其体内药代动力学的研究。     

高效液相色谱法测定大鼠组织样品中马兜铃酸A的含量

目的建立用高效液相色谱法（HPLC）测定大鼠脾虚模型组织与血浆样品中马兜铃酸A含量的方法。方法色谱条件为HypersilODS2柱（4．6mm×250mm,5μm）,柱温30℃,流动相为甲醇：乙腈：水（0．6％冰醋酸,pH=3．60）（30：30：40）,流速为1ml／min,检测波长为250nm,20μl进样。结果空白血浆中马兜铃酸A在0．05～25μg／ml范围内与峰面积线性关系良好（Y=57672X-10065,R^2=0．9994）,提取回收率为83．46％～94．13％,方法回收率为99．67％～106．43％。低、中、高3个浓度的日内精密度RSD分别为6．28％、3．36％、1．88％,日间精密度RSD分别为9．67％、4．27％、4．56％。血浆中马兜铃酸A的最低检测浓度为0．05μg／ml,组织中最低检测浓度为0．31ng／g。结论建立的HPLC法准确、稳定、重复性好、灵敏度高,可应用于大鼠脾虚模型组织和血浆样品中马兜铃酸A的含量测定。     

反相高效液相色谱法测定血浆中利福喷丁的浓度

目的建立反相高效液相色谱法测定人血浆中利福喷丁的浓度。方法以Kromasil 1850mm×4．6mm,5μm）为分析柱,甲醇：0．02mol／L,KH2P02（磷酸调pH5．2,65：35v／v）为流动相,流速为1．0ml／min,检测波长为335nm,利福平为内标,测定血浆中利福喷丁的浓度。结果在0．316～20．2μg/ml浓度范围内,利福喷丁和内标峰的面积比值与浓度呈良好的线性关系（r=0．9991）。利福喷丁高、中、低3个浓度的平均回收率分别为：103．80％,98．53％,102．65％;日内、日间RSD均小于10％。结论该方法简便、快速准确、重现性好,可用于药代动力学以及生物等效性研究。     

RP—HPLC测定拉莫三嗪和苯巴比妥的血药浓度

目的：建立RP—HPLC法同时测定人血清中抗癫痫药拉莫三嗪和苯巴比妥浓度的方法。方法：采用AgilentZorbax XDB—C18（4．6mm×150mm,5μm）色谱柱;流动相：0．1％乙酸-乙腈,梯度洗脱;检测波长：240nm;流速：1．0ml／min。结果：拉莫三嗪和苯巴比妥的血药浓度分别在0．02-1．00μg、0．02-3．00μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为97．62％和97．96％,拉莫三嗪2．0、20．0、40．0μg/ml日内精密度（RSD,n=5）分别为4．3％、3．9％和2．9％,日间精密度（RSD,n=5）分别为5．1％、5.4％％和3．9％;苯巴比妥5．0、20．0和50．0μg/ml日内精密度（RSD,n=5）分别为3．5％、4．2％和3．6％,日间精密度（RSD,n=5）分别为5．0％、4．7％和4．2％。结论：本方法简便、准确、重现性好,可用于临床上常规监测拉莫三嗪和苯巴比妥的血药浓度。     

HPLC法测定人血浆中比阿培南的浓度及其药动学研究

目的：建立人血浆中比阿培南的高效液相色谱检测方法。方法：色谱柱为Agilent ZORBAX Bonus-RP（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为甲醇和0.03%醋酸水溶液,采用梯度洗脱法;流速为1.00 ml/min;检测波长为300 nm,血浆样品处理选用5-羟基吲哚乙酸为内标,采用硫酸锌沉淀蛋白。结果：比阿培南在0.2～50.0μg/ml范围内线性良好,HPLC测定定量下限为0.2μg/ml,比阿培南和内标在血浆的保留时间分别为3.9 min和9.7 min,出峰迅速。比阿培南浓度分别为0.5、5.0和40.0μg/ml,血浆样本回收率分别为101.8%、100.8%、100.4%;精密度试验日内和日间RSD均小于15%,稳定性试验结果表明血浆样品在样品处理过程中较稳定（RSD〈15%）。结论：本方法灵敏度高,操作简便,快速,重复性好,适用于比阿培南血浆浓度的测定。     

HPLC法测定氯雷他定片含量

目的：建立测定氯雷他定片中氯雷他定含量的高效液相色谱法。方法：采用色谱柱为Diamonsil C18（200 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液（用磷酸调节pH值至3.0）（70∶30）,流速为1.0 ml/min,检测波长为247 nm,柱温为25℃。结果：回归方程为Y=760 965X-82 937,r=0.999 2（n=6）。表明进样量在0.80～4.80μg范围内有良好的线性关系,平均回收率为99.60%,RSD为0.39%（n=9）。结论：本法测定氯雷他定片的含量简单、灵敏、重现性好,能够准确地控制药品质量。     

睡眠呼吸暂停综合征儿童手术前后血浆食欲素A及感觉统合能力的变化

目的探讨睡眠呼吸暂停综合征（obstructivesleepapnea—hypopneasyndrome,OSAHS）儿童手术治疗前后血浆食欲素A（Orexin—A）水平变化及与感觉统合能力的关系。方法接受扁桃体切除和／或腺样体刮除术的儿童OSAHS患者120例,正常对照组30例。并按呼吸暂停低通气指数（apneahypopneain—dex,AHI）将OSAHS组分为轻度组（5次／h≤AHI〈20次／h,n=13）;中度组（20次／h≤AHI〈40次／h,n=76）;重度组（AHII〉40次／h,n=31）。同时按感觉统合能力评分还将OSAHS组分为正常组30名、轻度失调组47名、中度失调组28名、重度失调组15名。术前及术后6个月进行血浆Orexin—A水平测定及儿童感觉统合能力评定。结果OSAHS组患儿血浆Orexin—A浓度[（0．41±0．06）μ/ml]高于正常对照组[（0．31±0．04）μg／ml],差异有统计学意义CP〈0．01）;不同严重程度OSAHS患儿手术前后血浆Orexin—A浓度比较,轻度组[术前（0．33±0．02）μg／ml,术后（0．28±0．03）μ/ml]、中度组[术前（0．39±0．04）μ/ml,术后（0．29±0．03）μ/ml]、重度组[术前（0．49±0．04）μ/ml,术后（0．32±0．02）μg／ml]差异均有统计学意义（P〈0．01）。AHI指数与术前血浆Orexin—A浓度显著相关（r=0．803,P〈0．01）。感觉统合测评分值与术前血浆Orexin—A浓度也存在显著相关（r=-0．812,P〈0．01）。结论血浆Orexin—A浓度与儿童OSAHS严重程度及其行为认知能力改变关系密切,可能成为儿童OSAHS诊断和预后的血浆标志物。     

HPLC法测定上感合剂中黄芩苷的含量

目的：建立用高效液相色谱（HPLC）法测定上感合剂中黄芩苷含量的方法。方法：用Diamonsil（钻石）C18（4.6 mm×250 mm,5μm）柱,甲醇-0.4%磷酸溶液（50∶50）为流动相,检测波长为278 nm,流速为1.0 ml/min。结果：进样量在30～180μg范围内具有良好的线性关系;黄芩苷的平均回收率为99.14%,RSD为0.39%（n=6）。结论：该方法快速、方便,能准确检出上感合剂中黄芩苷的含量。     

高效液相-串联质谱方法测定法罗培南的血浆药物浓度

目的采用高效液相-串联质谱方法测定血浆中法罗培南的药物浓度。方法色谱柱为ZORBAX Eclipse Plus（100mm×2.1mm,3.5μm）,流动相：乙腈与5mmol/L醋酸铵缓冲液（含0.1%甲酸）体积比为35：65,流速为0.3ml/min,文拉法新为内标。结果法罗培南的血浆浓度在0.1～20μg/ml范围内线性良好,标准曲线方程为Y=0.2700c＋0.00242（r=0.9955,n=8）,定量下限为0.1μg/ml,日内精密度〈5.4%,日间精密度〈7.9%,回收率为99.0%～113%。结论该方法处理操作简单,结果准确,专属性强,灵敏度高,适用于法罗培南人体药动学研究及生物等效性研究。