五子衍宗丸对实验性少弱精子症大鼠的保护作用与机制研究

目的:观察五子衍宗丸对实验性少弱精子症大鼠的保护作用与机制研究。方法:取60只雄性SD大鼠,随机分成正常组、模型组、阳性药组(生精胶囊1.6 g/kg),五子衍宗丸低、中、高剂量组(1、2、4 g/kg),除正常组外,其他各组灌服雷公藤多苷30 mg/(kg·d),连续6周,建立少弱精子症模型。从造模的第3周开始,各组按剂量灌胃给药,连续给药4周后计算睾丸和附睾脏器指数,检测附睾精子质量、精子凋亡率、精子线粒体通透性转换孔(MPTP)开放情况,HE染色观察大鼠睾丸病理组织学改变,Hochest染色观察大鼠睾丸细胞凋亡情况。结果:五子衍宗丸能提高少弱精子症大鼠睾丸和附睾脏器指数,增加附睾精子浓度、精子活力和精子活率,降低精子凋亡率,抑制MPTP异常开放;HE染色显示五子衍宗丸能增加少弱精子症大鼠睾丸生精小管内各级生精细胞层次和数量,Hochest染色显示五子衍宗丸明显抑制睾丸生精小管内生精细胞凋亡。结论:五子衍宗丸能明显提高少弱精子症大鼠精子质量,降低少弱精子症模型大鼠的各级生精细胞(包括精子)凋亡率,其机制可能与抑制大鼠精子线粒体MPTP开放有关。     

葆生精改善少弱精子症模型大鼠生殖功能的实验研究

目的研究葆生精对奥硝唑所致少弱精子症模型大鼠生殖功能的保护作用。方法取34只雄性SD大鼠,将大鼠按体质量随机分为溶剂对照组(7只)、少弱精子症模型组(8只)、生理盐水对照模型组(9只)和葆生精治疗模型组(10只)。除溶剂对照组外,其他各组灌服奥硝唑400 mg/(kg·d)。从奥硝唑灌胃的第15天开始,葆生精治疗模型组加用葆生精514 mg/(kg·d),生理盐水模型组加用葆生精等体积的生理盐水,连续给药三周。观察各组大鼠附睾精子浓度、活力和运动参数等指标变化,睾丸作HE染色观察组织形态学改变,检测睾丸中抗氧化酶SOD、GSH-Px酶活性,抗凋亡蛋白Bcl-2和凋亡蛋白Caspase-3的表达变化。结果与溶剂对照组相比,少弱精子症模型组大鼠附睾精子密度明显降低[(16.92±1.31)×10~6/m L vs (31.62±4.44)×10~6/m L],活力也明显降低[(54.13±2.58)%vs (88.33±4.04)%],差异均有统计学意义(P均0.01)。葆生精治疗模型组大鼠附睾的精子密度和活力比少弱精子症模型组明显增加,两组的密度分别为(26.34±3.16)×10~6/m L和(16.92±1.31)×10~6/m L,两组的活力分别为(78.4±2.43)%和(54.13±2.58)%,两组比较,P均0.01,而生理盐水对照组与少弱精子症模型组无明显差异,各组中直线速率、曲线速率等精子运动参数也表现为相同趋势。少弱精子症模型组大鼠睾丸组织中部分生精细胞脱落,层次排列紊乱,生精上皮细胞变薄,管腔内精子数量明显减少;葆生精治疗组大鼠睾丸中虽然各级生精细胞排列略稀疏,但生精上皮形态基本恢复,各级生精细胞及管腔内精子数目都有明显增加。与溶剂对照组相比,少弱精子症模型组大鼠睾丸中SOD和GSH-Px的酶活力均明显降低,分别为[(10.71±1.34) U/mg vs (30.02±5.42) U/mg和(58.33±20.23) U/mg vs (175.00±27.9) U/mg,差异均有统计学意义(P均0.01),葆生精治疗组两种酶活力均明显增加,分别为(34.30±8.24) U/mg和(220±55.41) U/mg。同时我们观察到与对照组相比,少弱精子症模型大鼠睾丸组织中抗凋亡蛋白Bcl-2的表达有所下降而凋亡蛋白Caspase-3的表达明显增加,葆生精治疗组Bcl-2表达增加而Caspase-3的表达下降。结论葆生精可通过提高少弱精子症模型大鼠的抗氧化能力,修复生殖系统的氧化损伤,抑制生精细胞凋亡,从而提高精子密度和活力,发挥对生殖系统的保护作用。     

不同剂量昆明山海棠对雄大鼠生殖系统的形态学研究

雄性SD大鼠60只,随机分成6组,二组对照,其余4组用昆明山海棠稀醇提取物(ATH)灌胃给药,每日分别为2.0g/kg;1.0g/kg;及0.3g/kg(二组),每周六次。用药6周至完全不育后剖杀用药的前三组及一组对照。取睾丸、附睾、心、肝、脾、肺、肾、胃,行常规HE及PAS+苏木素染色,部分鼠做DNA、RNA组化反应。取附睾尾评价精子数据。0.3g/kg组及另一组对照继续以每日0.2g/kg的维持量灌胃16周以保持不育,停药5周后证实其生育力恢复后剖杀,观察指标同前。结果表明:2.0g/kg组曲细精管平均损伤率为55.4%,1.0g/kg组曲细精管损伤明显少于前组(损伤率6.2％),小剂量鼠无论给药6周或22周睾丸和附睾形态与对照无异。结果提示:大鼠睾丸曲细精管的损伤范围和损伤的程度与ATH的剂量大小有关,而与作用时间的长短关系不大。最低抗生育剂量时,对ATH最敏感的部位是变态期精子细胞及附睾精子,以此剂量长期给药对睾丸附睾无明显影响,所致不育可以恢复。     

卵泡刺激素和干细胞因子对大鼠非梗阻性无精子症模型生精功能的影响

目的探讨卵泡刺激素(FSH)、干细胞因子(SCF)对Wistar大鼠非梗阻性无精子症(NOA)动物模型生精功能的影响。方法使用白消安15mg/kg单次腹腔注射制作Wistar大鼠NOA动物模型,抽样检查模型制造成功后。随机抽取72只大鼠分为两组:治疗组给予大鼠后腿肌肉注射FSH 250mU/次和SCF 150ng/次,每3d重复注射1次,共注射19次;对照组予以等量的生理盐水行大鼠后腿肌肉注射。治疗组和对照组均于用药后19d、38d和57d摘取一侧睾丸制成石蜡病理切片,采用Johnsen法评价其生精功能;取一侧附睾计数附睾尾精子数,每组每次12只。结果治疗组用药19d、38d和57d睾丸组织切片Johnsen评分均显著高于对照组(P均0.05);用药后19d和38d治疗组睾丸内曲细精管排列较对照组紧密、整齐;管腔内各级生精细胞数量亦多于对照组;用药后57d治疗组睾丸内曲细精管与正常睾丸基本一致,而同期对照组内有不少曲细精管局部呈现"空泡样"结构。用药后19d,两组附睾内均未见精子;用药38d时治疗组附睾内精子数[(77.55±55.18)个/ml]显著高于对照组[(41.05±29.20)个/ml](P0.05);用药57d时治疗组附睾内精子数[(122.13±80.67)个/ml]亦显著高于对照组[(58.50±26.15)个/ml](P0.05)。结论 FSH联合SCF肌注能够促进Wistar大鼠NOA模型生精功能的恢复。     

小鼠无精子症动物模型的构建

目的:建立一种稳定的小鼠无精子症动物模型。方法:60只清洁级C5BL/6小鼠,分为化疗组(1次性腹腔注射白消安10mg/kg体重、环磷酰胺120mg/kg体重)、激素组(每日皮下注射苯甲酸雌二醇40mg/kg,连续注射15d),每组30只。注射后4、12、20周,观察小鼠睾丸生精小管结构的变化以及终止干预后生精功能恢复的情况。结果:化疗组化疗后第4周,睾丸生精小管内精子及精子细胞消失,20周时仍保持无生精状态;激素组连续注射苯甲酸雌二醇后第4周,生精小管内精子及精子细胞消失,但20周时部分生精小管内可以找到精子细胞和精子。化疗组小鼠睾丸重量明显低于激素组(P<0.05)。结论:经过化疗处理的小鼠无精子症模型稳定,雌二醇皮下注射的无精子症模型形成慢而不稳定。相对于雌激素注射方法,化疗是构建小鼠无精子症动物模型比较可靠的方法。     

雷公藤多甙抑制大鼠精子发生的研究

目的探讨雷公藤多甙对大鼠精子发生的抑制作用及其可能的信号通路。方法成年雄性大鼠给予雷公藤多甙(16 mg/kg)灌胃,每日1次,在2及6周检测血清睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和可的松水平;光镜观察睾丸组织的形态学变化;原位末端标记法(TUNEL)观察睾丸生精细胞凋亡;免疫组织化学法观察凋亡通路相关蛋白Bax/Bcl-2的表达。结果给药组与对照组相比,性激素、肾上腺皮质激素均无显著变化(P均>0.05);给药2周后精子数下降和畸形率上升(P<0.05),给药4和6周精子数下降和畸形率升高更显著(P<0.001);组织学检查给药组大鼠生精小管内各级精母细胞和精子细胞数明显减少,生精细胞排列紊乱,原始精原细胞和支持细胞(Sertoli细胞)未见明显改变。与正常对照组相比,生精小管内生精细胞凋亡显著增加(2周P<0.05,4和6周P<0.001)。凋亡相关蛋白Bax表达明显上调,Bcl-2表达无显著差异。结论雷公藤对大鼠精子发生的抑制作用表现为增加生精细胞凋亡,导致精子计数下降,精子的畸形率升高。雷公藤多甙使睾丸Bax表达增加,与诱导生精细胞凋亡相关,可能是相关的信号通路之一。进一步研究雷公藤多甙作用的分子信号机制有助于今后降低剂量、减少毒副作用,探讨其作为一种安全的男性避孕药可能性。     

生精胶囊中冬虫夏草替代物及生精的相关药效研究

目的:对生精胶囊进行二次开发,对处方中冬虫夏草进行替代物筛选研究,并对替代后的新生精胶囊进行抗生精障碍药理研究,为其临床用于治疗男性不育症及性功能障碍症提供实验依据。方法:取雄性昆明种小鼠192只,随机均分为对照组,模型组,发酵虫草菌粉高、中、低剂量(1.60、0.80、0.40 g/kg)组,虫草头孢菌粉高、中、低剂量(1.60、0.80、0.40 g/kg)组,虫草被孢菌粉高、中、低剂量(1.60、0.80、0.40 g/kg)组,发酵冬虫夏草菌粉高、中、低剂量(1.60、0.80、0.40 g/kg)组,生精胶囊组(0.80 g/kg),维生素E组(0.25 g/kg),除对照组外,其他各组小鼠腹腔注射环磷酰胺注射液60 mg/kg,每天1次,连续5 d建立环磷酰胺致生精障碍小鼠模型,观察各组小鼠体重、性腺脏器系数、精子数、精子活力、精子畸形率。取健康雄性SD大鼠70只,随机分为对照组,模型组,新生精胶囊高、中、低剂量组,生精胶囊组(0.56 g/kg),维生素E组(0.18 g/kg),每组10只大鼠,除对照组外,其余各组动物灌胃腺嘌呤200 mg/kg,每日1次,连续5周制备生精障碍大鼠模型,观察各组大鼠体重,性腺器官及肾脏脏器系数、血清生殖激素、睾丸形态结构、生育力。结果:各给药组可不同程度的改善环磷酰胺所致小鼠体重增长缓慢现象,在提高小鼠睾丸和附睾脏器系数,增加精子数、提高精子活率、增强精子活力、减少精子畸形率方面具有统计学意义(P0.05或P0.01),综合观测以维生素E(0.25 g/kg)、生精胶囊(0.80 g/kg)和虫草头孢菌粉组(1.60、0.80、0.40 g/kg)作用较为显著,拟定虫草头孢菌粉作为原方最优替代,按原生产工艺制备成新生精胶囊;新生精胶囊(1.60、0.80、0.40 g/kg)可增加腺嘌呤模型大鼠的体重、性腺器官及肾脏脏器系数,增加血清FSH、LH、T、E2的含量(P0.05或P0.01),产生抗氧化损伤作用并改善睾丸病理形态损伤,促使雌性大鼠受孕率及平均产仔数上升,发挥抗腺嘌呤致大鼠生精功能障碍作用。结论:以虫草头孢菌粉替代后制成的新生精胶囊对雄性大鼠具有促生育、改善生育及逆转受损生殖能力的作用,为验证虫草头孢菌粉作为冬虫夏草替代品的正确性与可行性提供一定指导意义,也为其临床用于男性不育及性功能障碍提供了实验依据。     

抗肿瘤药物环磷酰胺对大鼠睾丸和精原干细胞相关因子表达的影响分析

目的 探讨抗肿瘤药物环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)对雄性大鼠睾丸、精原干细胞及相关因子八聚体结核转录因子4(OCT-4)、胶质细胞源神经营养因子(glial cell line derived neurotrophic factor,GDNF)表达的影响.方法 选取16只8周龄Wister雄性大鼠采用随机数字表法分为CTX组和对照组各8只,CTX组采取连续3d腹腔注射CTX(50 mg/kg),对照组采取等量生理盐水,对比两组大鼠给药后1、2、4周的精子细胞凋亡数及S期细胞所占比例的变化;对比两组大鼠给药4周后的睾丸、附睾重量、生精小管直径差异;采用免疫组化染色检测两组睾丸OCT-4、GDNF蛋白的表达情况.结果 CTX组大鼠在给药后1、2、4周的生精细胞凋亡数均显著的高于同期的对照组(P＜0.05);CTX组大鼠在给药后1、2、4周的生精细胞S期所占细胞比例均显著的低于同期的对照组(P＜0.05);CTX组大鼠在给药4周的睾丸、附睾重量显著地低于同期的对照组(P＜0.05);两组大鼠的生精小管直径差异无统计学意义(P＞0.05);CTX组大鼠睾丸组织中GDNF蛋白阳性表达显著地低于对照组大鼠(P＜0.05);两组大鼠的OCT-4蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 CTX具有诱导精原细胞凋亡的作用,干扰精原细胞增殖分化功能,可能与下调睾丸组织中GDNF有关.     

补肾生精方促进少弱精症大鼠精子发生的作用机制研究

目的：研究补肾生精方对腺嘌呤诱导的少弱精症大鼠精子发生的作用机制。方法：采用腺嘌呤灌胃诱导SD大鼠制备少弱精症大鼠模型,将48只SD大鼠随机分为空白组、模型组、五子衍宗丸组（1 g/kg）和补肾生精方高、中、低剂量组（2.8 g/kg、1.4 g/kg、0.7 g/kg）,给药3周。干预结束后采用放射免疫法测定血清睾酮水平;利用计算机辅助精子分析系统评估精子密度、活动力;苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠睾丸组织病理形态学改变;免疫组织化学（IHC）检测大鼠睾丸组织支持细胞中波形蛋白表达水平。结果：与模型组相比,给药组的大鼠睾丸病理损伤有所改善,睾丸组织部分生精小管增厚,细胞排列紧密,部分管腔缩小,生精细胞和精子数量增加。与模型组相比,五子衍宗丸组及补肾生精方各剂量组血清睾酮水平均上调（P<0.05）,其中,五子衍宗丸组、补肾生精方高剂量组上升明显（P<0.05）,差异有统计学意义。与模型组相比,给药后大鼠精子质量有所改善,精子活动力差异有统计学意义（P<0.05）,同时,补肾生精方高剂量组在改善精子密度方面优于模型组（P<0.05）;补肾生精方高剂量组在改善精子...     

环磷酰胺干扰精原干细胞功能的初步研究

目的:初步探讨环磷酰胺对精原干细胞分化功能的干扰作用。方法:根据W istar大鼠生精细胞发育不同阶段分为1、3、9周龄组,每组24只,随机均分为实验组和对照组,实验组腹腔内注射环磷酰胺100 mg/(kg.体重),对照组注射等量生理盐水,24 h后用原位缺口末端标记法检测生精细胞凋亡。另取仅有精原干细胞的1周龄W istar雄性大鼠60只,随机均分为实验组和对照组(给药方法同上),在给药后24 h、3周、9周分别用免疫组化法检测c-K it蛋白,流式细胞仪分析细胞周期。结果:环磷酰胺干预后,1周龄实验组与对照组大鼠生精细胞凋亡差异无显著性(P>0.05),其余各周龄组实验组生精细胞凋亡均显著增高(P<0.01)。1周龄实验组大鼠睾丸在环磷酰胺处理后不同时间点的细胞周期S期细胞比例、精原细胞c-K it蛋白表达水平均明显低于对照组(P<0.01)。结论:环磷酰胺诱导精原干细胞凋亡不明显,可能更重要的是干扰精原干细胞的增殖分化功能。     

中药生精冲剂对生精障碍小鼠治疗作用的实验研究

目的:研究生精冲剂对环磷酰胺所致生精障碍小鼠的治疗作用。方法:46只雄性昆明小鼠随机分为正常组(n=10)、模型组(n=12)、对照组(n=12)和中药组(n=12),后3组腹腔注射环磷酰胺,建立生精障碍模型。造模完成后,中药组和对照组分别灌胃中药生精冲剂[16 g/(kg.d)]和克罗米芬[21.6 mg/(kg.d)],正常组与模型组每天灌胃等量生理盐水,连续15 d。次日,测量睾丸重量,并计算睾丸指数;放射免疫法测定血清FSH、LH、T水平;对睾丸组织进行组织学观察。结果:中药组小鼠血清T[(7.046±0.291)nmol/L]、FSH[(2.947±0.587)mIU/ml]、LH[(3.254±0.492)mIU/ml]、睾丸指数[(3.958±0.342)g/kg]与模型组各检测值相比[(6.231±0.317)nmol/L、(5.428±0.719)mIU/ml、(5.155±0.460)mIU/ml、(3.525±0.462)g/kg]差异有显著性(P<0.05)。组织学观察中药组睾丸生精小管生精细胞层数及管腔内精子数明显高于模型组。结论:生精冲剂治疗小鼠生精障碍有效。     

环磷酰胺诱导少精子/无精子症大鼠模型所致睾丸、附睾IGF-I的变化

目的:探讨环磷酰胺(CP)对大鼠附睾和睾丸组织中胰岛素样生长因子I(IGF-I)表达的影响;方法:96只8周龄成年雄性SD大鼠,分为6组,每组16只。第1~5组分别给予CP 10、20、40、80、100 mg/(kg.d),第6组为对照组,给予生理盐水2 m l。胃管给药2周和4周后,处死大鼠,采用ELISA法对附睾组织洗脱液IGF-I进行定量检测;同时采用SP免疫组化法检测睾丸组织IGF-I的表达。结果:随着CP处理时间的延长和剂量的增加,IGF-I在大鼠附睾中的浓度逐渐下降,大鼠睾丸组织中IGF-I的表达也降低。结论:CP在引起大鼠少精子/无精子症的同时,可以显著降低大鼠附睾、睾丸IGF-I的含量和表达水平。IGF-I的降低与CP降低大鼠生精功能明显相关。     

The changes of IGF-I in testis and epididymis on a rat model with oligozoospermia/azoospermia induced by cyclophosphamide]

OBJECTIVE: To evaluate the effect of the levels of IGF-I in the epididymis and the expression of IGF-I in the testis of adult male rat after the administration of cyclophosphamide. METHODS: Ninety-six male adult rats (8 weeks age) were divided into 6 groups. The doses given to the rats of the groups 1 to 5 were 10, 20, 40, 80 and 100 mg/(kg x d), respectively. The remaining group was served as control. All those rats were sacrificed and IGF-I were quantitatively determined by ELISA techniques 2 and 4 weeks after the administration of the drug (by gastric fudge). Immunohistochemical SP technique was used to examine expression of IGF-I in rat testis. RESULTS: The levels of cell factors (IGF-I) in the epididymis of the rats were gradually reduced with the increasing time and dose after administration of the drug. In the mean time the expression of IGF-I in the tissues of the testis of those rats were also gradually reduced. CONCLUSION: In the time of oligozoospermia/azoospermia induced by the administration of cyclophosphamide, the expression levels of IGF-I in the genetic system were significantly reduced. The possible mechanism of these changes could be attributed to the lower spermatogenesis function of the testis caused by the administration of cyclophosphamide.     

异丙苯过氧化氢体内致大鼠睾丸和附睾过氧化的初步研究

目的:建立异丙苯过氧化氢(cHP)体内过氧化模型,探讨cHP体内过氧化对大鼠睾丸组织和附睾精子的影响,及对精子核DNA断裂的影响。方法:90日龄雄性W istar大鼠52只,设cHP 1/10 LD50、1/6 LD50、1/4 LD503个剂量组和对照组,cHP 1/10 LD50、1/6 LD50组和对照组每组大鼠12只,1/4 LD50组大鼠16只。用无菌生理盐水稀释70%cHP水剂配制,按2 m l/kg经腹腔每日1次注射,对照组给同体积生理盐水,观察一般中毒症状和体征。连续1周,最后1次给药24 h后处死动物。分光光度法测定睾丸组织匀浆、附睾头部和尾部精子丙二醛含量,用单细胞凝胶电泳检测睾丸生精上皮细胞、附睾头部和尾部精子核DNA断裂发生率,计数附睾尾部精子活动率,睾丸和附睾常规石蜡切片,苏木精-伊红染色观察病理变化。结果:给予cHP大鼠活动稍差,无死亡,1/6 LD50、1/4 LD50 cHP组体重降低明显(P<0.001)。1/6 LD50、1/4 LD50 cHP组大鼠睾丸和附睾精子丙二醛浓度均明显高于对照组,附睾尾部精子活动率均明显降低,睾丸生精上皮细胞和附睾头部精子核DNA断裂发生率明显高于对照组,附睾尾部精子核DNA断裂的发生率与对照组差异无显著性(P>0.05)。1/10 LD50 cHP组大鼠体重变化、睾丸丙二醛浓度、附睾尾部精子活动率、睾丸生精上皮细胞和附睾精子核DNA断裂与对照组比较,差异均无显著性(P>0.05)。结论:1/6 LD50、1/4 LD50 cHP能在体内使大鼠睾丸和附睾精子发生过氧化,并使细胞核DNA发生断裂,核DNA断裂的主要部位可能在睾丸组织,对附睾尾部精子核DNA断裂无明显影响。     

环磷酰胺诱导少精子/无精子症大鼠模型所致睾丸、附睾bFGF的变化

目的 探讨环磷酰胺(CP)对大鼠附睾中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)浓度和睾丸组织中bFGF表达的影响.方法 96只8周龄成年雄性SD大鼠,分6组,每组16只.第1-5组为实验组,分别给予CP10、20、40、80、100mg/kg·d~(-1).第6组为对照组,给予生理盐水2ml.胃管给药2周和4周后,处死大鼠,采用ELISA法对附睾组织洗脱液进行细胞因子bFGF定量检测;采用S-P免疫组化法检测上述模型睾丸组织细胞因子bFGF的表达.结果 与对照组比较,10、20、40、80、100mg/kg·d~(-1)组2周后bFGF分别下降了28.5%、49.1%、52.8%、57.6%、59.4%,4周后bFGF分别下降了57.8%、66.3%、77.5%、83.0%、83.8%:随着CP处理时间的延长和剂量的增加,细胞因子bFGF在大鼠附睾中的浓度逐渐下降(P<0.05).大鼠睾丸组织中细胞因子bFGF的表达随着CP处理时间的延长和剂量的增加而降低(P<0.05).结论 CP在引起大鼠少精子,无精子症的同时,可以显著降低大鼠附睾、睾丸bFGF的含量和表达水平.bFGF的降低与CP诱导大鼠生精功能明显相关.     

精索静脉曲张诱导的大鼠不育模型中E—cadherin和α—catenin在的表达

评价精索静脉曲张诱导的不育发展过程中E—cadhering和α-catenin的作用。本文分析了E—cadherin／α—catenin的表达与临床／病理参数之间的关联。取30只10周龄雄性大鼠,将左肾静脉结扎后致精索静脉曲张模型,作为实验组。取30只大鼠腹部切开处理作为对照组,取10只大鼠未做处理,作为基线组。分别记录各组大鼠4周和8周后的左睾丸的重量,血清中活性氧（ROS）,睾酮,促黄体激索（LH）,促卵泡激素（FSH）和生精小管的退行性改变。采用免疫组织化学法OHC）染色色Westernblot法分析E—cadherin和α—catenin的表达。与对照组和基线组相比,8周后实验组ROS增加（两组均P〈0．001）。此外,与对照组相比,478（P=0．013）和8周（P=0．032）后实验组的FSH显著增加。所有实验组中大鼠生精小管发生退行性改变的比例增加。免疫组织化学染色法的结果表明,4周和8周的实验组中E—cadherin和α-catenin的表达有所下降。Westernblot法的实验结果与免疫组化法的实验结果相近。E—eadherin和α—catenin的表达与ROS和生精小管的退行性改变是密切相关的。实验结果表明,血睾屏障（BTB）的损伤与精索静脉曲张诱导的男性不育有相关性,ROS可能会损坏血睾屏障。     

The protective effects of nitric oxide on the contralateral testis in prepubertal rats with unilateral testicular torsion

OBJECTIVE: To investigate histological changes in the contralateral testis of rats with unilateral testicular torsion and the protective effects of nitric oxide (NO) on possible damage. MATERIAL AND METHODS: Twenty-eight prepubertal male Sprague-Dawley rats were divided into four equal groups. Group 1 underwent a sham operation of the right testis under general anaesthesia. Group 2 underwent a similar operation but the right testis was rotated 720 degrees clockwise for 6 h, maintained by fixing the testis to the scrotum, and saline infused during the procedure. Group 3 underwent similar torsion but L-arginine methyl ester (a precursor of NO) was infused during the procedure. In Group 4, NG-nitro-L-arginine-methyl ester, a NO synthase inhibitor, was infused separately during the administration of L-arginine methyl ester and torsion. All the left (untwisted) testes were removed from rats 21 days after surgery and evaluated histologically, assessing seminiferous tubule diameter, loss of sperm and spermatids, loss of germ cell layers, disarray of germ cell layers, rupture of tubules, Leydig cell proliferation and reaction in the ruptured tubules, and oedema. RESULTS: There was a significant difference in the indicators of histological damage between groups 2 and 4 and groups 1 and 3, except for the Leydig cell reaction in the ruptured tubules and oedema. The damage was significantly less in group 3 than in groups 2 and 4. CONCLUSION: These results suggest that long-term histopathological changes in the contralateral testes are important after unilateral testicular torsion and that NO has a protective effect on the contralateral testis.     

Testosterone administration promotes regeneration of chemically impaired spermatogenesis in rats

AIM: It has been proposed that gonadotropin-releasing hormone (GnRH) analog administered after testicular damage stimulates the recovery of spermatogenesis. However, GnRH analogs suppress the function of sex accessory organs. In this study, we investigated whether testosterone also stimulates the regeneration of rat spermatogenesis after exposure to busulfan. METHODS: Male Fisher rats were divided into three groups of five each and all rats were treated with busulfan, 25 mg/kg, intraperitoneally at week 0. Group A served as the control. The other two groups received testosterone enanthate, 8 mg/kg, subcutaneous injections at 3 week intervals two times before (group B) or three times after (group C) busulfan. States of spermatogenesis were evaluated by histology and by the number of spermatid nuclei per testis at week 25. RESULTS: The mean percentage of 'recovered' seminiferous tubules plus or minus standard deviation was 10.3 +/- 7.8% in group A and 2.1 +/- 1.2% in group B. In both groups, more than 80% of the tubules remained degenerated. However, testes of group C rats showed an improvement of up to 37.1 +/- 20.5% (P < 0.05). The significant recovery of spermatogenesis was also demonstrated in group C by counting the number of spermatid nuclei per testis ([78.8 +/- 57.5] x 106). However, the count was only (7.6 +/- 13.5) x 106 and (0.52 +/- 1.0) x 106 in group A and B, respectively. CONCLUSIONS: Testosterone administration after severe testicular damage enhanced the regeneration of spermatogenesis in rats. We assumed that supplementary doses of testosterone would be more practical for clinical application than GnRH analogs, because exogenous testosterone maintains androgenicity.     

藏药鲁堆多吉水提物对雄性幼年大鼠生殖系统的影响

目的:研究藏药鲁堆多吉对雄性幼年大鼠生殖系统的影响。方法:将32只SD雄性幼年大鼠分为对照组、鲁堆多吉水提物低、中、高剂量组,灌胃2周后处死,用放射免疫法检测大鼠血清中睾酮(T)的含量,用ELISA试剂盒测量大鼠血清中LH和FSH的含量,称量大鼠的睾丸重量,计算体重增加量、睾丸脏器系数和精子浓度。将高剂量组大鼠血清在57℃水浴锅中灭活后,按0(对照组)、10%、15%、20%的体积分数加到培养的大鼠睾丸间质细胞中,分别用台盼蓝染色法和MTT检测细胞活率和活力,用放免法检测睾丸间质细胞培养液中T的含量,用大鼠环磷酸腺苷(cAMP)ELISA试剂盒检测睾丸间质细胞内cAMP的变化。结果:与对照组相比,低、中、高剂量的鲁堆多吉水提物能使幼年雄性大鼠的血清T水平[(1.22±0.32)、(1.06±0.29)、(0.57±0.18)nmol/L vs(3.09±0.42)nmol/L,P0.01]、睾丸重量[(0.96±0.09)、(0.92±0.11)、(0.91±0.08)g vs(1.40±0.16)g,P0.01]和精子浓度[(0.19±0.07)、(0.17±0.08)、(0.16±0.07)×106/ml vs(1.03±0.16)×106/ml,P0.01]显著降低,并且呈剂量依赖性。与对照组相比,中、高剂量给药组血清中的LH[(14.69±0.12)、(14.93±0.28)ng/L vs(13.62±0.89)ng/L,P0.01]、FSH[(4.77±0.23)、(4.89±0.38)IU/L vs(4.32±0.18)IU/L,P0.05]显著上升;睾丸脏器系数[(51.39±3.09)、(52.28±4.86)、(54.13±6.06)mg/10 g vs(42.22±3.02)mg/10 g,P0.01]显著提高。与对照组相比,鲁堆多吉水提物含药血清能显著抑制睾丸间质细胞内cAMP水平[(4.39±0.06)、(4.28±0.07)、(4.11±0.10)nmol/L vs(5.51±0.12)nmol/L,P0.01]和T的合成[(1.42±0.15)、(1.12±0.18)、(0.88±0.21)nmol/L vs(1.85±0.18)nmol/L,P0.01]。结论:鲁堆多吉水提物可能通过PKA途径抑制大鼠睾丸间质细胞中T的合成,从而抑制睾丸发育和精子生成,影响雄性幼鼠生殖系统的发育。