青藤碱对豚鼠单个心室肌细胞膜钠、钙离子通道的阻滞作用

应用膜片钳全细胞记录技术研究青藤碱 (Sin)对酶解分离的豚鼠单个心室肌细胞膜钠离子电流 (INa)、L型钙电流 (ICa L)的影响。发现 1,5 ,10 μmol/L的Sin分别使INa峰值 (INamax)较用药前下降 2 3.2 %、36 .1%和 6 0 % (n =8,P均 <0 .0 5 ) ;使ICa L峰值 (ICa Lmax)较用药前下降了 12 .8% ,35 .9%和 46 .9% (n =8,P均 <0 .0 1)。Sin使INa及ICa L电流 电压曲线上移 ,但不使其峰值电位偏移。Sin还浓度依赖性减慢钠通道灭活后恢复过程。当刺激频率分别为 0 .5 ,1,2Hz时 ,5 μmol/LSin使INamax较用药前分别下降了 36 .1%、41.5 %和 48.0 % (n =8,P均 <0 .0 1)。结果表明 ,Sin对INa具浓度和频率依赖性阻滞作用 ,可能作用于其失活状态 ;Sin对ICa L具浓度依赖性阻滞作用。这可能为其抗心律失常的重要机制。     

乙酰胆碱对离体豚鼠心室肌的直接作用机制探讨

目的 :研究乙酰胆碱 （ACh）对离体豚鼠心室肌的直接负性作用及机制。方法 :采用标准玻璃微电极细胞内记录技术记录动作电位 （AP）及肌力换能器记录心肌收缩力 （FC）的方法观察 ACh对离体豚鼠心室肌的作用 ,并观察几种受体或通道水平的阻断剂阿托品、氯化铯 （Cs Cl）、氯化镉 （Cd Cl2 ）对 ACh直接作用的影响。结果 :10 - 5 mol/LACh对心室肌动作电位持续时间 （APD）及 FC的抑制率分别为 7.31%和 37.5 7% （P<0 .0 5 ） ,10 - 5 mol/L阿托品和 2 0 m mol/L Cs Cl可阻断该作用 ,0 .1m mol/L Cd Cl2 对该作用无影响。结论 :10 - 5 m ol/L ACh对离体豚鼠心室肌有直接负性作用 ,ACh的作用与毒蕈碱型胆碱受体及 K+电流有关 ,而与 Ca2 +电流的关系可能不大。     

青藤碱对豚鼠单个心室肌细胞膜钠,钙离子通道？…

应用膜片钳全细胞记录技术研究青藤碱对酶解分离的豚鼠单个心室肌细胞膜钠离子电流（ＩＮａ）,Ｌ型钙电流（ＩＣａ－Ｌ）的影响。发现１,５,１０μｍｏｌ／Ｌ的Ｓｉｎ分别使ＬＮａ峰值（ＩＮａｍａｘ）较用药前下降２３．２％,３６．１％和６０％（ｎ＝８,Ｐ均〈０．０５）,使ＩＣａ－Ｌ峰值（ＩＣａ－Ｌｍａｘ）较用药前下降１２．８％,３５．９％和４６．９％。     

丹参素对豚鼠心室肌细胞L-型钙通道的影响

目的　研究丹参素对豚鼠心室肌细胞膜L 型钙通道的影响 ,探讨丹参素在离子通道水平的药理机制。方法　急性酶解法获得豚鼠的单个心肌细胞 ,用标准的全细胞膜片钳技术记录钙电流。结果　在保持电位 (Holdingpoten tial,HP)为 - 80mV ,预先去极化至 - 4 0mV ,再去极化至0mV ,波宽为 30 0mS的刺激参数下 ,可记录到一具有电压和时间依赖性内向的电流 ,当用含 1μmol/L硝苯地平的台氏液灌流时该电流被迅速消除 ,在灌流液中加入丹参素 1mg/mL和 10mg/mL ,1mg/mL组对钙电流无明显改变 (P >0 0 5 ,n =5 ) ,10mg/mL组使钙电流减少 [- (7 76± 0 85 )pA/pFvs - (2 6 2 6± 0 5 9)pA/pFP <0 0 5 ,n =8],并使心肌细胞钙电流 -电压曲线上移 ,原有的电流 -电压依赖特征不变。结论　丹参素浓度依赖性地抑制心肌L 型钙通道     

乙酰胆碱对豚鼠心房、心室直接作用及其机制的比较研究

目的:自主神经系统是哺乳动物心脏的重要调节因素之一。一般认为,交感神经支配心脏的各个部位,而副交感神经则主要支配室上性组织。副交感神经递质乙酰胆碱(ACh)激活突触后膜上的毒蕈碱型胆碱受体(M- Ch R) ,对心房和心室产生不同的作用。ACh主要通过毒蕈碱敏感性钾通道(KACh)对心房产生直接负性作用,对心室则在β-肾上腺素受体被预先激动后产生间接的抑制作用。ACh对哺乳动物的心室肌无直接负性变力作用,雪貂、大鼠例外。对于豚鼠的心室肌来说,资料显示结果不一。而且ACh对心房、心室作用的比较以及收缩力与动作电位时程(APD)的关系…     

外源性磷酸肌酸对缺血豚鼠心室肌细胞L型钙通道电流的影响

目的:观察不同浓度外源性磷酸肌酸(exogenous phosphocreatine,PCr)对豚鼠缺血心室肌细胞L型钙通道(ICa.L)电流的影响,探讨其治疗缺血性心力衰竭的电生理学机制。方法:单个心室肌细胞经酶解从豚鼠左心室获得,采用膜片钳全细胞模式记录ICa.L电流,通过灌注模拟缺血液并充以95%N2+5%CO2的混合气体建立缺血模型,将PCr加入模拟缺血液中分别配成5,10,20,30 mmol/L浓度。将细胞分成6组,分别予模拟缺血液,含有5,10,20,30mmol/L浓度PCr的模拟缺血液,台氏液灌流,后者充以95%O2+5%CO2的混合气体。10 min后记录各组的峰电流及电流密度。结果:与台氏液组相比,模拟缺血液组ICa.L峰电流密度降低(80.6±5.2)%(P0.05),含有5,10,20,30 mmol/L浓度PCr的模拟缺血液组ICa.L峰电流密度分别降低(53.8±6.7)%(P0.05);(41.8±8.2)%(P0.05);(38.1±7.4)%(P0.05);(36.6±9.7)%(P0.05)。10,20,30 mmol/L 3种浓度对ICa.L峰电流密度的影响无统计学差别。结论:PCr能明显增加缺血时受抑制的ICa.L峰电流及电流密度,这可能是其治疗缺血性心力衰竭的电生理学机制。PCr在低浓度(0～10 mmol/L)对ICa.L电流及电流密度的影响呈现明显的量效关系,浓度大于10mmol/L量效关系不明显。     

肿瘤坏死因子α抑制豚鼠急性缺血心室肌细胞L型钙通道电流

为探讨肿瘤坏死因子α对正常及模拟缺血状态下豚鼠心室肌细胞L型钙通道电流的影响。全细胞膜片技术记录豚鼠心室肌细胞单个L型钙通道电流。肿瘤坏死因子α(100、300和500 ku/L)对豚鼠心室肌细胞L型钙通道电流峰值的影响与对照组均无明显差异(P>0.05),但模拟急性缺血时,同浓度的肿瘤坏死因子α却明显抑制豚鼠心室肌细胞L型钙通道电流峰值并呈浓度依赖性,抑制率分别为46.5％±3.5％、62.7％±3.0％和80,7％±3.7％,与对照组和单纯缺血组相比差异明显(均P<0.05)。正常灌流液中不同浓度的肿瘤坏死因子α对豚鼠心室肌细胞峰值L型钙通道电流无明显影响;但模拟急性缺血时其却呈浓度依赖性地增强缺血对豚鼠心室肌细胞的L型钙通道电流峰值抑制作用。     

盐酸关附甲素对豚鼠心室肌细胞膜钠通道的阻断作用

目的 研究盐酸关附甲素（GFA）对分离的单个豚鼠心室肌细胞钠电流（ⅠNa）的影响，旨在探讨其抗心律失常机制。方法 用急性酶解法分离获得单个豚鼠心室肌细胞。用标准的全细胞膜片钳技术记录离子通道电流，观察不同浓度的GFA对豚鼠心室肌细胞ⅠNa的影响。结果 在测试电压-20mV的条件下，50、150、500、750μmol／LGFA使ⅠNa峰值电流密度与用药前比较分别降低了24．24％±2．78％、42．84％±1．39％、61．23％±1．34％和100％±0，各浓度用药前后对比差异均有统计学意义，P〈0．05；GFA对ⅠNa半数抑制浓度（IC50）为184．38μmol／L150μmol／LGFA使ⅠNa的电流密度-电压（I-U）曲线上移，但不改变其激活、峰值和反转电位，不影响ⅠNa的稳态激活曲线；150μmol／LGFA使氏。的稳态失活曲线左移，即向更负的方向移动；150μmol／LGFA使ⅠNa的失活后恢复曲线明显右移，明显减慢钠通道失活后恢复过程；150μmol／LGFA抑制ⅠNa呈使用依赖性。结论 GFA在50～750μmol／L范围内对ⅠNa具有浓度依赖性阻滞作用，而且该作用具有使用依赖性；GFA对钠通道激活态无影响；GFA抑制ⅠNa是作用于失活态而发挥作用；GFA减慢钠通道失活后恢复过程。GFA对ⅠNa的阻滞作用为其抗心律失常作用的主要机制。     

氧化苦参碱对豚鼠心室肌细胞膜L-型钙通道的影响

研究氧化苦参碱 (Oxy)对豚鼠心室肌细胞膜L 型钙通道的影响 ,探讨Oxy在离子通道水平的药理作用机制。用急性酶解法分离豚鼠心室肌细胞 ,应用膜片钳全细胞记录技术 ,观察不同浓度的Oxy对L 型钙通道的影响。结果 :用 0 .0 1 ,0 .1 ,1 ,1 0 μmol/L可浓度依赖性地增加L 型钙电流 (ICa L)。在 0 .1 μmol/L时 ,给药后电流密度增加约 31 %(P <0 .0 1 ) ,可使心肌细胞钙电流 电压曲线下移 ,但激活电位、峰电位及反转电位无改变 ;Oxy使激活曲线向负电位方向变化 ,半数激活电压增加 ;对失活曲线无明显影响 ,未改变ICa L失活特性。结论 :Oxy可浓度依赖性和电压依赖性地增加心肌细胞膜L 型钙通道电流     

普罗帕酮对豚鼠心室肌细胞离子通道活性的影响

应用膜片钳全细胞技术研究普罗帕酮对单个心室肌细胞膜离子通道的影响。结果表明：普罗帕酮灌流浓度为１×１０－６，６×１０－６Ｍ时，钠峰值电流分别下降３５．０％、５２．８％，Ｐ均＜０．０１；灌流浓度为１×１０－６，３×１０－６，６×１０－６Ｍ时，Ｌ型钙电流的峰值电流分别下降１８．５％、２８．８％、４５．３％，Ｐ均＜０．０５；对内向整流性钾流基本无影响。可见普罗帕酮不单纯是钠通道阻滞剂，对钙通道也有较强的阻滞作用     

不同旋体氨氯地平对大鼠心室肌细胞L型钙离子流和细胞内钙离子浓度的影响

目的探讨不同旋体氨氯地平(Aml)对大鼠心室肌细胞L型钙离子流(ICa-L)及细胞内钙离子浓度的影响。方法采用酶消化法分离大鼠心室肌细胞,以全细胞膜片钳技术分别记录加入0.1,0.5,1,5和10μmol/L左旋、右旋和混旋Aml后大鼠心室肌细胞ICa-L及通道动力学参数的变化;采用荧光探针Fura-2/AM测定细胞内钙离子浓度,观察加入1,5,10,50和100μmol/L左旋、右旋和混旋Aml后细胞内钙离子浓度的变化。结果加入不同浓度左旋和混旋Aml后,随着浓度增加,ICa-L及峰值电流呈浓度依赖性阻滞、I-V曲线上移、稳态激活曲线和稳态失活曲线左移、失活后恢复时间延长(P<0.05);细胞内钙离子浓度逐渐降低,左旋和混旋Aml对细胞内钙离子浓度影响的半效抑制浓度分别为8.13和16.19μmol/L(P<0.05),但不同浓度右旋Aml对ICa-L、通道动力学参数和细胞内钙离子浓度均无影响(P>0.05)。结论左旋和混旋Aml对ICa-L有阻滞作用,而右旋Aml对ICa-L无阻滞作用。     

短期快速心房激动对L型钙通道mRNA表达的影响

目的 :观察短期快速心房激动对L型钙通道α1c亚基mRNA表达的影响。方法 :新西兰大耳白兔 36只 ,随机分为 6组 ,经颈内静脉切开置入电极导管 ,于右心房分别给予 0、0 .5、1、2、4、8h快速心房起搏 ,停止起搏后立即取右心房组织 ,应用半定量逆转录 聚合酶链式反应测定L型钙通道α1c亚基mRNA表达的相对水平 ,组间比较行t检验。结果 :0 .5～ 8h不同时点的快速心房起搏使L型钙通道α1c亚基mRNA表达水平 (分别为 0 .77±0 .0 3、0 .76± 0 .0 2、0 .77± 0 .0 5、0 .73± 0 .0 4、0 .6 7± 0 .0 5、0 .6 7± 0 .0 3)逐渐下调 ,致起搏后 4h较起搏前差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结论 :短期快速心房激动使L型钙通道α1c亚基mRNA表达下调     

冠状动脉平滑肌细胞大电导钙离子激活钾通道电流的特点

Objective To investigate characteristics of large conductance Ca2+ -activated K+ currents ( BK currents) in normal rat coronary smooth muscle cells. Methods Coronary smooth muscle cells were isolated by enzyme digestion. Potassium channels in coronary smooth muscle cells were identified by applications of different potassium blockers. BK currents were recorded by patch clamp in whole ce11 and single channel configuration,respectively. BK currents amplitude and conductance were calculated. Voltage-sensitive and calciumsensitive characteristics of BK currents and changes with IBTX,a specific blocker,were observed. Results BK currents in normal smooth muscle cells accounted for 65% ± 4% of total potassium currents( n = 12), BK current conductance was (258 ± 42) pS ( n = 6), and current densities were ( 275 ± 40 ) pA/pF at voltage 150 mV ( n = 8). Open probabilities ( NP0 ) of BK channels at calcium 1 μmol/L in external solution and test potentials at 0,20,40,60,80,100,120,140 and 160 mV were 0,0. 0002,0. 0016 ± 0. 0005,0. 0283 ± 0. 0081,0. 05694 ±0. 0102,0. 3533 ± 0. 0514,1. 4922 ± 0. 1578,2. 5975 ± 0. 3632, and 4. 6041 ± 0. 7834, respectively (P＜0.05,n =5). NP0 of BK channels at test potential 60 mV,and calcium in external solution at 0,0. 001,0. 01,0. 1,1,10,50 and 100 μmol/L were 0,0.0001,0.0031 ± 0.0008,0.0042 ± 0.0090,0.0808 ± 0.0105,0.7591 ±0. 1274,2.7242 ±0.4612,and 3.2366 ±0.5728,respectively(P ＜0.05,n =6). Conclusion BK channels are widely distributed in normal coronary smooth muscle cells, have voltage-sensitive and calcium-sensitive characteristics, and play an important role in regulation of coronary vascular tension.     

冠状动脉平滑肌细胞大电导钙离子激活钾通道电流的特点

目的探讨正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞大电导钙离子激活钾通道（BK通道）电流的特点,为研究疾病状况下冠状动脉平滑肌细胞BK通道电流异常变化提供正常对照。方法酶消化法分离大鼠冠状动脉平滑肌细胞;采用不同阻滞剂,对冠状动脉血管平滑肌细胞上钾通道进行鉴定;采用全细胞和单通道膜片钳实验技术分别记录冠状动脉平滑肌细胞BK通道电流,计算开放幅度和电导,观察BK通道电压敏感性和钙敏感性及加入特异性BK通道阻滞剂IBTX后BK通道电流的变化。结果正常冠状动脉平滑肌细胞BK通道电流约占总钾离子流65％±4％（t／,=12）,BK通道电导为（258±42）pS（n=6）,在刺激电位150mV时,电流密度为（275±40）pA／pF（n=8）;在电极外液钙离子浓度为1μmol／L,刺激电位为0、20、40、60、80、100、120、140和160mV条件下,BK通道开放概率（NP0）分别为0、0．0002、0．0016±0．0005、0．0283±0．0081、0．05694±0．0102、0．3533±0．0514、1．4922±0．1578、2．5975±0．3632和4．6041±0．7834（P〈0．05,n=5）;在刺激电位60mV,电极外液钙离子浓度为0、0．001、0．01、0．1、1、10、50和100μmol／L条件下,BK通道NP。分别为0、0．0001、0．0031±0．0008、0．0042±0．0090、0．0808±0．0105、0．7591±0．1274、2．7242±0．4612和3．2366±0．5728（P〈0．05,n=6）。结论BK通道广泛分布于冠状动脉平滑肌细胞上,具有电压敏感性和钙敏感性,对冠状动脉血管张力调节起重要作用。     

Hepatic stellate cells express Ca2+ pump-ATPase and Ca2+-Mg2+-ATPase in plasma membrane of caveolae

Intracytoplasmic free calcium ions (Ca²⁺) are maintained at a very low concentration in mammalian tissue by the extrusion of Ca²⁺ across a steep extracellular Ca²⁺ gradient, mainly through the activity of plasma membrane Ca²⁺ pump-ATPase. The present study aimed to identify, by electron cytochemical and electron immunogold methods, the ultrastructural localizations of two types of plasma membrane Ca²⁺-ATPase; Ca²⁺-Mg²⁺-ATPase and Ca²⁺ pump-ATPase, in hepatic stellate cells. Liver tissues and isolated hepatic stellate cells (HSCs) were studied. The ultrastructural localization of Ca²⁺-Mg²⁺-ATPase activity was examined by the electron cytochemical method of Ando. The localization of Ca²⁺ pump-ATPase was identified by immunofluorescence. The ultrastructural localization of Ca²⁺ pump-ATPase was identified by the electron immunogold method. The cytochemical reaction products of Ca²⁺-Mg²⁺-ATPase activity were localized on the outer (cavity) side of the plasma membrane of caveolae. Immunofluorescence of Ca²⁺ pump-ATPase was seen as small dots along the cell edge in HSCs. Immunogold particles indicating the presence of Ca²⁺ pump-ATPase were identified on the inner (cytoplasmic) side of the plasma membrane of caveolae. We localized Ca²⁺ pump-ATPase on the inner side of the plasma membrane caveolae and Ca²⁺-Mg²⁺-ATPase on the outer leaflet of the caveolar plasma membrane in stellate cells, suggesting that Ca²⁺ pump-ATPase may play a key role in the Ca²⁺ reflux. Received: March 7, 2000 / Accepted: July 7, 2000     

Efonidipine Hydrochloride: A Dual Blocker of L‐ and T‐Type Ca2+ Channels

T‐type Ca²⁺ channels have properties different from those of the L‐type and are involved in cardiac pacemaking and regulation of blood flow, but not in myocardial contraction. Efonidipine is an antihypertensive and antianginal drug with dihydropyridine structure that was recently found to block both L‐ and T‐type Ca²⁺ channels. In isolated myocardial and vascular preparations, efonidipine has potent negative chronotropic and vasodilator effects but only a weak negative inotropic effect. In experimental animals and patients, reduction of blood pressure by the drug was accompanied by no or minimum reflex tachycardia leading to improvement of myocardial oxygen balance and maintenance of cardiac output. Efonidipine increased glomerular filtration rate without increasing intraglomerular pressure. By relaxing both the afferent and efferent arterioles, efonidipine markedly reduced proteinuria. Thus, efonidipine, an L‐ and T‐type dual Ca²⁺ channel blocker, appears to have an ideal profile as an antihypertensive and antianginal drug with organ‐protective effects in the heart and kidney.     

钙激活性钾通道是人小肠上皮细胞的容积调节性通道(英文)

目的 :研究细胞容积调节机制 ,探讨人类小肠上皮细胞调节性容积减小 （RVD）过程中离子通道的作用及其种类。方法 :膜片钳全细胞记录和单通道记录法记录培养的人类小肠上皮细胞 RVD过程中电流的变化 ,细胞容积测定法观察 RVD过程中特异性钙激活性钾通道阻断剂 （clotrimazole）的作用。结果 :全细胞记录法证实细胞 RVD过程中 K+通道和 Cl-通道电流同时被激活 ,该 K+通道电流具有明显的钙依赖性并可被 clotrim azole阻断。单通道记录法进一步证实 RVD过程中激活的 K+通道为 Interm ediate- conductance钙激活性钾通道。结论 :人类小肠上皮细胞在低渗溶液作用下具有 RVD过程 ,钙激活性钾通道在 RVD过程中具有十分重要的作用。