骨髓间充质干细胞尾静脉移植脊髓损伤大鼠脑源性神经营养因子及神经生长因子的表达

背景：骨髓间充质干细胞移植对脊髓损伤有治疗作用,但其机制尚不完全清楚。 目的：应用免疫组织化学方法观察骨髓间充质干细胞静脉移植损伤脊髓局部脑源性神经营养因子及神经生长因子的表达,分析骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的作用途径。 方法：运用改良Allen法制备T10脊髓外伤性截瘫大鼠模型,假手术组6只,脊髓损伤组24只随机分为对照组和骨髓间充质干细胞移植组。骨髓间充质干细胞移植组、假手术组接受骨髓间充质干细胞单细胞悬液1 mL(1×106 cells)自大鼠尾静脉缓慢注射移植,对照组静脉注射PBS 1 mL。 结果与结论：脊髓损伤后损伤局部的脑源性神经营养因子、神经生长因子表达增加,骨髓间充质干细胞静脉注射移植后能促进脊髓损伤局部脑源性神经营养因子、神经生长因子更进一步的表达,这可能是促进神经结构及神经功能恢复的因素之一。     

骨髓基质细胞静脉移植治疗大鼠短暂性局灶性脑缺血

目的探讨骨髓基质细胞静脉移植治疗大鼠短暂性局灶性脑缺血的可行性及其机制。方法将大鼠骨髓基质细胞在体外纯化、扩增并经BrdU标记后,经尾静脉移植到局灶性脑缺血大鼠体内,通过神经缺损评分观察移植后大鼠神经行为学改善情况,通过组织学方法观察移植到脑内的骨髓基质细胞表达脑源性神经营养因子、缺血灶周围细胞凋亡及脑微血管密度的变化。结果骨髓基质细胞移植组大鼠的神经缺损评分显著低于对照组(P<0.05);移植到脑内的骨髓基质细胞主要选择性分布于缺血灶周围区域并表达BDNF;骨髓基质细胞移植组大鼠梗死灶周围的凋亡细胞明显少于对照组(P<0.01)、微血管密度显著高于对照组(P<0.001)。结论经静脉注射移植骨髓基质细胞能够明显促进局灶性脑缺血大鼠的神经行为功能恢复;抗凋亡及促微血管增生可能是骨髓基质细胞移植治疗局灶性脑缺血的机制之一。     

骨髓基质细胞立体定向移植治疗大鼠脑缺血损伤的实验研究

目的:观察骨髓基质细胞立体定向移植对大鼠脑缺血损伤后神经功能恢复的作用并探讨其作用机制。方法:制作SD大鼠大脑中动脉缺血模型(MCAO);体外培养骨髓基质细胞,观察其生物学特性以及立体定向移植后对脑缺血损伤后神经功能改善情况。结果:骨髓基质细胞体外可以长期传代、扩增,分泌NGF、VEGF等多种神经保护性因子;立体定向移植后,骨髓基质细胞在脑内存活、迁徙,小部分分化成具有神经元表面标志的细胞,与对照组相比,骨髓基质细胞移植组神经功能改善情况好于对照组。结论:骨髓基质细胞具有多向分化潜能,表达并分泌多种神经保护性营养因子。立体定向移植MSCs,对改善脑缺血损伤后的神经功能状况具有积极作用。     

本期导读

本期刊登科研论文13篇。“睡眠剥夺及睡眠恢复后大鼠中缝核群星形胶质细胞的反应及其与神经元的关系”文中,发现睡眠剥夺影响中缝核星形胶质细胞GFAP的表达及神经元Fos的表达,提示中缝核的星形胶质细胞和神经元可能共同参与睡眠调节。“大鼠骨髓基质细胞分泌胶质细胞源性神经营养因子的研究”文中,发现骨髓基质细胞具有分泌胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的能力,并受周围环境和自身生长状况的影响。“CGRP和NGF对脑局部缺血再灌注大鼠脑组织神经元凋亡及PKCmRNA表达的调节作用”文中,发现降钙素基因相关肽(CGRP)和神经生长因子(…     

移植胶质细胞源性神经营养因子基因修饰骨髓基质干细胞对脑出血大鼠的神经保护作用

背景：研究显示,细胞移植对脑出血脑损伤有保护作用,有学者在脑梗死后移植骨髓基质干细胞能促进大鼠神经功能恢复。 目的：观察移植胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的骨髓基质干细胞是否比单纯骨髓基质干细胞移植对脑出血有更好的保护作用。 方法：采用自体血制作大鼠脑出血模型,36只SD成年大鼠随机抽签法分为3组,每组按不同时间点分为２个亚组,每个时间点6只。胶质细胞源性神经营养因子/骨髓基质干细胞组、骨髓基质干细胞组分别在脑出血壳核注射胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的骨髓基质干细胞、骨髓基质干细胞20 μL/只;对照组注射生理盐水20 μL。分别在1,2周处死大鼠,免疫组织化学染色观察突触素和神经生长相关蛋白在脑出血周边区的表达。 结果与结论：各时间点胶质细胞源性神经营养因子/骨髓基质干细胞组的突触素和神经生长相关蛋白43免疫阳性产物比骨髓基质干细胞组和对照组显著增加(P < 0.05)。提示胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的骨髓基质干细胞比单一骨髓基质干细胞对大鼠脑出血有更好的保护作用。     

骨髓基质细胞源神经干细胞对大鼠局灶性脑缺血神经细胞凋亡及相关蛋白表达的动态影响

目的探讨骨髓基质细胞源神经干细胞对大鼠局灶性脑缺血神经细胞凋亡及相关蛋白表达的影响。方法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。32只健康Sprague-Dawley(SD)大鼠分为假手术组、缺血对照组、缺血骨髓基质细胞移植组和缺血骨髓基质细胞源神经干细胞移植组。分别在移植后7d和14d行脑灌注固定取材,应用免疫组化染色及原位细胞凋亡检测脑组织Bcl-2、Bax蛋白表达及凋亡细胞数。结果缺血移植组各时点的凋亡细胞数均少于缺血对照组(P<0.01),缺血移植14d组凋亡细胞数明显少于缺血移植7d组(P<0.01),骨髓基质细胞源神经干细胞移植组凋亡细胞明显少于骨髓基质细胞移植组(P<0.05)。缺血移植组Bcl-2表达显著高于缺血对照组(P<0.01)。缺血移植组Bax蛋白表达明显低于缺血对照组(P<0.01)。结论骨髓基质细胞源神经干细胞可能通过上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,对脑缺血再灌注损伤起保护作用。     

应用人骨髓基质细胞治疗大鼠缺血性脑梗塞的实验研究

目的　探索应用骨髓基质细胞治疗缺血性脑梗塞的途径 ,效果 ,机理。方法　从健康人肋骨取原代骨髓基质细胞后扩增。线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血模型 (n=5 6 ) ,2小时后再灌注。 2 4小时后治疗组 (n =2 8)尾静脉注射 3× 10 6 骨髓基质细胞 ,对照组 (n =2 8)尾静脉注射 1ml生理盐水。分别采用神经损伤评分 (NSS)检测大鼠神经系统功能 ,ELISA检测BDNF、NGF ,流式细胞仪检测细胞凋亡 ,免疫组化方法检测脑内骨髓基质细胞或骨髓基质细胞来源的细胞。结果　在 7,14 ,2 1,2 8天治疗组的NSS较对照组明显低 (P <0 0 5 ) ,治疗组的BDNF和NGF较对照组明显高(P <0 0 5 ) ,治疗组的凋亡细胞较对照组明显减少 (P <0 0 5 )。在缺血侧半球可以发现骨髓基质细胞 ,并且一部分骨髓基质细胞表达了神经细胞表面标志物。结论　静脉移植骨髓基质细胞治疗缺血性脑梗塞是一种简单有效的方法。骨髓基质细胞移植后缺血脑组织中生长因子的增加对神经功能的恢复起到了重要作用。     

高海拔地区骨髓源神经干细胞及BDNF联合移植对大鼠脑缺血再灌注模型的治疗

目的探讨高海拔地区大鼠骨髓源神经干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells-derived neural stem cells,BMSCs-NSCs)及脑源性神经生长因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)联合移植对大鼠脑缺血再灌注模型的疗效及其相关机理。方法 60只Wistar雄性大鼠,置西宁地区正常饲养,制备大鼠脑缺血-再灌注损伤模型;模型制备完毕后立体定向下进行细胞移植治疗,将大鼠分为3组,即A组:大鼠骨髓源性神经球组(BMSCs-NSCs组,n=20);B组:大鼠骨髓源性神经球联合BDNF组(BMSCs-NSCs+BDNF组,n=20),注射大鼠骨髓源性神经球细胞的同时,联合注射100ng BNDF;C组:对照组(仅注射DMEM/F12培养基,n=20);术后对其神经功能进行评定,并于术后24d取脑组织,行Nestin、GFAP、Map2免疫荧光检测。结果细胞移植后第3d,各组间神经功能评分无显著性差异;细胞移植后第14dBMSCs-NSCs+BDNF组神经功能评分显著优于BMSCs-NSCs组,BMSCs-NSCs组优于对照组;免疫组化检测发现,BMSCs-NSCS+BDNF组Nestin、GFAP、Map2的IOD值均显著高于BMSCs-NSCs组;BMSCs-NSCs+BDNF组、BMSCsNSCs组各检测指标水平均高于对照组;Nestin、GFAP、Map2的表达主要集聚于脑梗死灶与正常脑组织交界处。结论在西宁地区联合移植大鼠骨髓源神经干细胞及BDNF可显著促进大鼠大脑中动脉闭塞再灌注损伤模型的神经功能恢复。     

高海拔地区骨髓源神经干细胞及BDNF联合移植对大鼠缺血再灌注模型的治疗

目的 探讨高海拔地区大鼠骨髓源神经干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells-derived neural stem cells,BMSCs-NSCs)及脑源性神经生长因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)联合移植对大鼠脑缺血再灌注模型的疗效及其相关机理。方法 60只Wistar雄性大鼠,置西宁地区正常饲养,制备大鼠脑缺血-再灌注损伤模型; 模型制备完毕后立体定向下进行细胞移植治疗,将大鼠分为3组,即A组:大鼠骨髓源性神经球组(BMSCs-NSCs组,n=20); B组:大鼠骨髓源性神经球联合BDNF组(BMSCs-NSCs+BDNF组,n=20),注射大鼠骨髓源性神经球细胞的同时,联合注射100 ng BNDF; C组:对照组(仅注射DMEM/F12培养基,n=20); 术后对其神经功能进行评定,并于术后24 d取脑组织,行Nestin、GFAP、Map2免疫荧光检测。结果 细胞移植后第3 d,各组间神经功能评分无显著性差异; 细胞移植后第14 d BMSCs-NSCs+BDNF组神经功能评分显著优于BMSCs-NSCs组,BMSCs-NSCs组优于对照组; 免疫组化检测发现,BMSCs-NSCS+BDNF组Nestin、GFAP、Map2的IOD值均显著高于BMSCs-NSCs组; BMSCs-NSCs+BDNF组、BMSCs-NSCs组各检测指标水平均高于对照组; Nestin、GFAP、Map2的表达主要集聚于脑梗死灶与正常脑组织交界处。结论 在西宁地区联合移植大鼠骨髓源神经干细胞及BDNF可显著促进大鼠大脑中动脉闭塞再灌注损伤模型的神经功能恢复。     

亚低温对局灶性脑缺血-再灌注大鼠脑皮质脑源性神经营养因子表达及神经元凋亡的影响

目的 观察局灶性脑缺血-再灌注后亚低温干预对大鼠脑源性神经营养因子表达及神经元凋亡的影响，并探讨脑源性神经营养因子在亚低温脑保护机制中的作用。方法 采用线栓法制备成年雄性SD大鼠左侧大脑中动脉闭塞局灶性脑缺血-再灌注改良模型，缺血时间2h。随机分为常温缺血组和亚低温缺血组。常温时大鼠脑温控制于36．5℃～37．5℃，肛温为35．9℃～36．9℃；亚低温时脑温维持于32．5℃～33．5℃，肛温为32．2℃～33．1℃。两组大鼠分别于脑缺血一再灌注及亚低温干预后2、6、24和72h进行神经功能缺损评分，并同时行三苯基氯化四唑（1TC）染色、HE染色、TUNEL染色、免疫组化染色及免疫组化与TUNEL双重染色，从而评估大鼠神经功能缺损状况；检测脑梗死体积及脑源性神经营养因子表达水平；观察组织病理学变化和神经元凋亡数量。结果 与常温缺血组相比，亚低温缺血组大鼠神经功能缺损评分低（P〈0．01），脑梗死体积小（P〈0．01），缺血灶周围脑皮质中的脑源性神经营养因子表达水平增高（P〈0．01），而且神经元凋亡数量少（P〈0．01）。在脑源性神经营养因子免疫组化染色呈阳性反应的神经元细胞核中，未发现TUNEL染色阳性者。结论 亚低温干预治疗可促进缺血灶周围的脑皮质对脑源性神经营养因子的表达，从而抑制神经元凋亡，减少大鼠脑梗死体积，改善神经功能缺损体征。     

骨髓基质干细胞移植对缺血性卒中大鼠PSD-95表达的影响

目的 应用骨髓基质干细胞（BMSCs）治疗缺血性卒中大鼠,观察BMSCs的治疗效果,检测突触后密度蛋白-95（PSD-95）的表达水平,进而研究BMSCs治疗缺血性卒中的机制.方法 将40只成年雌性SD大鼠制备成大脑中动脉缺血2h再灌注24h动物模型,随机分为梗死对照组和BMSCs组,每组20只.每组再按梗死后3,7d分为2个亚组,每组10只.梗死对照组于缺血再灌注24 h后经尾静脉注射PBS液1ml,BMSCs组同时经尾静脉注射BMSCs 3×106.所有大鼠于梗死后1,3,7d分别进行神经功能评分,应用免疫组化法测定PSD-95表达水平,用TUNEL测定凋亡细胞水平.结果 （1）神经功能评分：梗死后3,7 d BMSCs组神经功能评分明显低于梗死对照组,差异有统计学意义（t分别为2.138,3.417;P＜0.05）.（2） PSD-95表达：BMSCs组在梗死后3d时PSD-95表达较梗死对照组的表达有增多,但差异无统计学意义;BMSCs组在梗死后7d时PSD-95表达明显多于梗死对照组,且差异有统计学意义（t=6.013,P＜0.05）.（3）TUNEL细胞凋亡染色：梗死后3d时梗死对照组大鼠缺血侧可见许多凋亡细胞,显多于BMSCs组,且差异有统计学意义（t=4.978,P＜ 0.05）.结论 BMSCs移植能促进缺血性卒中大鼠的神经功能的恢复.BMSCs移植后能明显增加缺血性卒中大鼠PSD-95的表达,减少细胞的凋亡,对缺血性卒中有保护作用.     

Effects of nerve growth factor and Noggin-modified bone marrow stromal cells on stroke in rats

Treatment with bone marrow stromal cells (BMSCs) ameliorates neurological functional deficits after stroke. Nerve growth factor (NGF) is a neurotrophic factor that supports the survival and growth of neural cells. Noggin, an antagonist of bone morphogenetic protein (BMP), promotes the differentiation of stem cells into neurons. In this study, we hypothesize that transfection of NGF and Noggin in BMSC treatment of stroke promotes BMSC neuronal differentiation and improves functional outcome after stroke. Adenovirus was used to trasfect NGF and Noggin and the transfection efficiency was measured by Western blot and immunostaining in vitro. The transfected BMSCs with NGF and/or Noggin were administered intravenously at 5 days after middle cerebral artery occlusion (MCAo) in rats. The neurological functional outcome and BMSC migration and differentiation in the ischemic brain were measured. The transplantation of BMSCs with NGF or Noggin elicited neurological functional improvement, promoted BMSCs present in the ischemic brain, and also up-regulated neuro-like cell differentiation as well as increased synaptophysin expression in the ischemic brain compared with nontreatment control animals (P< 0.05). Treatment of stroke with a combination of transfection of NGF and Noggin in BMSCs induced a synergistic effect on improved neurological functional outcome, BMSCs present in the ischemic brain, and synaptophysin expression in the ischemic brain compared with BMSCs transfected with an NGF- or Noggin-alone group (P < 0.05). These data demonstrate that increasing NGF or Noggin expression in BMSCs contributes to brain plasticity after stroke and that a synergistic effect is induced on the coexistence of NGF and Noggin in BMSCs treatment of stroke.     

Transplantation of Flk-1+ human bone marrow-derived mesenchymal stem cells promotes angiogenesis and neurogenesis after cerebral ischemia in rats

Transplantation of bone marrow‐derived mesenchymal stem cells (BMSCs) is a potential therapy for cerebral ischemia. Although BMSCs‐induced angiogenesis is considered important for neurological functional recovery, the neurorestorative mechanisms are not fully understood. We examined whether BMSCs‐induced angiogenesis enhances cerebral tissue perfusion and creates a suitable microenvironment within the ischemic brain, which in turn accelerates endogenous neurogenesis and leads to improved functional recovery. Adult female rats subjected to 2 h middle cerebral artery occlusion (MCAO) were transplanted with a subpopulation of human BMSCs from male donors (Flk‐1+ hBMSCs) or saline into the ipsilateral brain parenchymal at 3 days after MCAO. Flk‐1+ hBMSCs‐treated rats exhibited significant behavioral recovery, beginning at 2 weeks after cerebral ischemia compared with controls. Moreover, rats treated with Flk‐1+ hBMSCs showed increased glucose metabolic activity and reduced infarct volume. Flk‐1+ hBMSCs treatment significantly increased the expression of vascular endothelial growth factor and brain‐derived neurotrophic factor, promoted angiogenesis, and facilitated cerebral blood flow in the ischemic boundary zone. Further, Flk‐1+ hBMSCs treatment enhanced proliferation of neural stem/progenitor cells (NSPCs) in the subventricular zone and subgranular zone of the hippocampus. Finally, more NSPCs migrated toward the ischemic lesion and differentiated to mature neurons or glial cells with less apoptosis in Flk‐1+ hBMSCs‐treated rats. These data indicate that angiogenesis induced by Flk‐1+ hBMSCs promotes endogenous neurogenesis, which may cause functional recovery after cerebral ischemia.     

依达拉奉对脑缺血大鼠内源性神经干细胞的影响

背景：依达拉奉 (MCI-186)是一种新型自由基清除剂,已证实其能减轻急性脑梗死后的脑组织水肿、具有神经保护作用。 目的：探讨自由基清除剂MCI-186对大鼠缺血脑组织内源性神经干细胞的作用。 方法：Longa法构建SD大鼠大脑中动脉缺血2 h再灌注模型,分两组在动脉阻塞后立即开始予MCI-186或磷酸盐缓冲液治疗,在术后1,3 d和7 d,动态测定缺血周边脑组织丙二醛的含量以及脑源性神经生长因子蛋白和mRNA的表达,以及缺血脑区域Nestin阳性细胞Caspase-3阳性细胞表达,同时进行神经功能测定。 结果与结论：与假手术组相比,磷酸盐缓冲液组脑组织丙二醛水平明显升高,MCI-186治疗后明显降低(P均< 0.01);磷酸盐缓冲液组缺血后1 d,MCI-186组缺血后1,3 d脑源性神经生长因子 mRNA和蛋白的表达明显升高(P < 0.01)。缺血后 3 d和7 d MCI-186组Nestin阳性细胞明显高于磷酸盐缓冲液组(P < 0.05),Caspase-3阳性细胞显著低于磷酸盐缓冲液组 (P < 0.05)。缺血后7 d MCI-186组神经功能明显优于磷酸盐缓冲液组。结果提示,MCI-186能抑制脂质过氧化,增加缺血脑组织的脑源性神经生长因子分泌,保护神经干细胞,减少细胞凋亡。     

依达拉奉对局灶性脑缺血大鼠神经功能恢复及海马病理形态学改变的影响

目的 探讨大鼠局灶性脑缺血后神经功能恢复及海马病理形态学改变,评价依达拉奉的干预作用.方法 126只雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组(A组,6只),生理盐水组(B组,MCAO后6h、12h、24h、48h、72h、5d、7d7时点,各6只),依达拉奉处理组(C组,同B组),术后即刻予以依达拉奉干预.行神经功能缺损评分测定;TTC染色观察脑梗死体积改变;用HE染色方法观察病理形态学改变.结果 术后进行神经缺损评分发现,由于麻醉和手术创伤的影响,假手术组术后出现6～24h神经功能减退.与假手术组相比,在6～24h时间段盐水组神经功能下降明显(P＜0.05).依达拉奉组神经功能明显好于盐水组(P＜0.05).术后7d盐水组和依达拉奉组神经功能基本恢复.同时,在依达拉奉组和盐水组中,缺血24h脑梗死体积最大;与盐水组相比,术后6～24h依达拉奉组脑梗死体积明显减小(P＜0.05).HE染色显示术后6h在脑缺血区神经元细胞无明显改变,6h后缺血区脑组织逐渐出现肿胀与坏死;在依达拉奉组,脑水肿和神经元坏死病理损害明显较轻,在假手术组,脑组织无明显改变.结论 依达拉奉具有改善神经功能缺损、缩小脑梗死体积和减轻缺血性病理损害程度的作用;研究还提示依达拉奉对缺血性脑卒中早期神经功能恢复具有十分重要的临床意义.     

转染肝细胞生长因子的骨髓间质细胞治疗大鼠缺血性脑卒中

目的探讨转染肝细胞生长因子（HGF）的骨髓间质细胞（MSCs）治疗大鼠脑缺血的效果。方法制备大鼠一过性大脑中动脉缺血（MCAO）模型。MCAO后24h分别将磷酸盐溶液（PBS）、MSCs和转染HGF的MSCs（MSC—HGF）通过立体定向技术植人缺血脑组织。通过改良神经功能严重性评分（mNSS）评价神经功能,应用免疫组织化学染色分析脑组织HGF表达、缺血脑组织边缘带细胞凋亡及存活神经元。结果治疗后2周,MSC—HGF组mNSS明显低于PBS组和EMCs组（P〈0.05）。治疗后第1天MSC—HGF组病变脑组织中HGF蛋白表达明显高于PBS组和EMCs组（P〈0．05）。治疗后1周,与PBS组和EMCs组相比,MSC—HGF组在梗死边缘带凋亡细胞的百分比明显减少（P〈0．05）,存活神经元的百分比明显增加（P〈0.05）。结论转染HGF的MSCs治疗缺血性脑卒中具有抗细胞凋亡、神经保护作用。     

Distribution and differentiation of bone marrow-derived mesenchymal stem cells in vivo after intraperitoneal and tail vein injection into rats in the recovery phase of stroke Which path is better?

BACKGROUND:Stereotactic injection(striatum or lateral ventricle)and vascular injection(tail vein or carotid artery)are now often used in cellular therapy for cerebral infarction.Stereotactic injection can accurately deliver cells to the infarct area,but requires a stereotactic device and causes secondary trauma;vascular injection is easy and better for host neurological deficit recovery,but can cause thrombosis.OBJECTIVE: To compare the therapeutic potential of adult bone marrow-derived mesenchymal stem cells(BMSCs)transplantation by intraperitoneal versus intravenous administration to cerebral ischemic rats.DESIGN,TIME AND SETTING: A randomized controlled animal experiment was performed at the Cell Room and Pathology Laboratory,Brain Hospital Affiliated to Nanjing Medical University from November 2007 to September 2008.MATERIALS: BMSCs were derived from 20 healthy Sprague-Dawley rats aged 4-6 weeks.METHODS: Forty-five adult middle cerebral artery occlusion(MCAO)rats were randomly divided into control,intravenous and intraperitoneal injection groups,with 15 rats in each group.At 21 bromodeoxyuridine(BrdU)via intravenous or intraperitoneal injection.MAIN OUTCOME MEASURES: Angiogenin expression and survival of transplanted cells were measured by immunohistochemical staining of brain tissue in infarction hemisphere at 7,14 or 21 days after BMSC transplantation.Co-expression of BrdU/microtubule-associated protein 2 or BrdU/glial fibrillary acidic protein was observed by double-labeled immunofluorescence of cerebral cortex.Evaluation of nerve function using the neurological injury severity score and the adhesion-removal test was performed on the 1st and 21st day before and after MCAO,and at 3,7,14 or 21 days after BMSCs treatment.RESULTS: Angiogenin-positive new vessels were distributed in the bilateral striatum,hippocampus and cerebral cortex of each group of rats at each time point,most markedly in the intravenous injection group.There were significantly more BrdU-positive cells in the intravenous injection group than in the intraperitoneal injection group(P < 0.01).Co-expression of BrdU/ microtubule-associated protein 2 or BrdU/glial fibrillary acidic protein were almost only seen in theintravenous group by fluorescence microscopy.After transplantation,BMSCs significantly restored nerve function in rats,particularly in the intravenous injection group.CONCLUSION: BMSCs were able to enter brain tissue via the tail vein or peritoneal injection and improve neurological function by promoting the regeneration of nerves and blood vessels in vivo,more effectively after intravenous than intraperitoneal injection.     

人脐血间充质干细胞静脉移植治疗大鼠局灶性脑缺血的实验研究

目的 探讨来源于人脐血的间充质干细胞经静脉移植治疗大鼠局灶性脑缺血的可行性及其机制.方法 将人脐血间充质干细胞在体外纯化、扩增并经BrdU标记后,经尾静脉移植到局灶性脑缺血大鼠体内,通过神经缺损评分观察移植后大鼠神经行为学改善情况,通过组织学方法观察移植到脑内的人脐血间充质干细胞表达脑源性神经营养因子和缺血灶周围微血管密度变化的情况.结果 人脐血间充质干细胞移植组大鼠的神经缺损评分显著低于对照组(P＜0.05);移植到脑内的人脐血间充质干细胞主要选择性分布于缺血灶周围区域并表达脑源性神经营养因子,移植组大鼠梗死灶周围的微血管密度显著高于对照组(P＜0.01).结论 经静脉注射移植人脐血间充质干细胞能明显促进局灶性脑缺血大鼠的神经行为功能恢复,促进缺血灶周边区微血管增生可能是人脐血间充质干细胞移植治疗局灶性脑缺血的机制之一.     

高压氧联合骨髓间充质干细胞移植修复缺氧缺血性脑损伤

背景：单纯骨髓间充质干细胞移植对脑梗死组织的修复作用并不理想,需要结合药物及生物工程材料等手段进行综合治疗。 目的：验证高压氧结合骨髓间充质干细胞移植修复大鼠缺氧缺血性脑损伤的效果。 方法：体外培养大鼠骨髓间充质干细胞。应用线栓法建立大脑中动脉阻塞大鼠模型,按随机区组法分为3组,即对照组、骨髓间充质干细胞移植组及高压氧+骨髓间充质干细胞移植组。静脉移植后24 h,3 d及伤后1,2 周行Longa行为学评分,检测神经功能的损伤情况。移植2周后,应用RT-PCR法测定生长相关蛋白43 mRNA的表达,并以BrdU免疫组化和苏木精-伊红染色行梗死处组织学检查以证实恢复程度。 结果与结论：移植后1周,高压氧+骨髓间充质干细胞移植组大鼠神经功能障碍评分低于骨髓间充质干细胞移植组,骨髓间充质干细胞移植组低于对照组(P < 0.05)。2周后脑梗死周围组织生长相关蛋白43 mRNA的表达高压氧+骨髓间充质干细胞移植组高于骨髓间充质干细胞移植组,骨髓间充质干细胞移植组高于对照组(P < 0.05)。BrdU免疫组化和苏木精-伊红切片中的神经元数量高压氧+骨髓间充质干细胞移植组多于骨髓间充质干细胞移植组,骨髓间充质干细胞移植组多于对照组(P < 0.05)。提示高压氧联合骨髓间充质干细胞静脉移植治疗大鼠缺氧缺血性脑损伤可明显改善大鼠的神经功能,效果优于单纯骨髓间充质干细胞移植。