缺氧条件下梭曼中毒对大鼠心肌M2受体mRNA表达的影响

目的 探讨缺氧条件下梭曼中毒大鼠心肌M2胆碱能受体表达的变化。方法 采用半定量RT－PCR法分别检测缺氧、梭曼中毒以及缺氧条件下梭曼中毒大鼠心肌M2受体mRNA的表达。结果 与正常对照组比较，缺氧组大鼠心肌M2受体mRNA表达增强，但相差并不显著；单纯梭曼中毒组和缺氧中毒组大鼠M2受体在致伤后各时间点表达明显减弱，但与单纯梭曼中毒组比较，缺氧中毒组大鼠心肌M2受体mRNA的表达在致伤后12h和24h明显增强（P＜0.05)。结论 M2受体对有机磷毒剂非常敏感，缺氧条件下大鼠心肌M2受体的表达相对于平原中毒组有所增强，可能是高原战区神经性毒剂加重心脏功能损害的一个重要原因。     

高原缺氧条件下梭曼中毒大鼠心肌Gi α mRNA表达的变化

目的探讨高原缺氧条件下梭曼中毒大鼠心肌抑制性G蛋白α亚基(Giα)mRNA表达的变化.方法实验大鼠随机分为正常对照组、高原缺氧组、平原中毒组和高原中毒组.采用半定量RT-PCR技术检测各组大鼠心肌GiαmRNA表达的变化.结果缺氧、梭曼中毒单一或复合致伤均可引起心肌GiαmRNA表达降低,与平原中毒组比较,高原中毒24h时大鼠心肌Giα mRNA的表达降低4.1%(P＜0.05).结论高原中毒组大鼠心肌GiαmRNA表达的降低,可能是高原缺氧条件下梭曼中毒大鼠心功能损害加重的重要原因之一.     

模拟高原缺氧条件下梭曼中毒的神经毒作用

通过模拟高原缺氧复合梭曼中毒，观察缺氧，梭曼中毒复合效应的神经毒作用。方法：通过低压舱模拟３０００ｍ高原缺氧；梭曼皮下注射中毒造成不同程度的高原缺氧复合梭曼中毒的实验动物模型，以惊厥活动的定量分析为指标，观察神经毒效应，通过梭紧中毒有，无惊厥大鼠血气变化的对比研究，探讨惊厥与缺氧，代谢性酸中毒的关系。结果：１．单纯模拟３０００ｍ米高原缺氧６ｈ在小鼠未诱发严重惊厥；２．梭曼皮下注射中毒５０ｍｇ／ｋｇ     

缺氧复合梭曼中毒大鼠脑损伤的药物保护研究

目的　研究抗胆碱能药物解磷复方和红景天对低压缺氧复合梭曼中毒大鼠脑损伤的作用效果。方法　 72只Wistar大鼠分为缺氧对照、缺氧复合梭曼中毒、解磷复方治疗和解磷复方与红景天复方治疗等共 4组。动物梭曼 ( 72 μg kg ,sc)中毒后置低压舱内 ( 62kPa)缺氧 48h ,于 12、2 4、48h等时间点处死动物取脑组织。用生化法测脑组织伊文思蓝(evansblue ,EB)含量和磷脂酶A2 (phospholipase ,PLA2 )活性 ,放射免疫法测钙调蛋白 (Calmodulin ,CaM)含量。结果　缺氧复合梭曼中毒明显升高大鼠脑组织EB含量、PLA2 活性和CaM含量。抗胆碱能药物解磷复方能明显降低缺氧复合梭曼中毒引起的大鼠脑组织EB含量、PLA2 活性和CaM含量变化 ,解磷复方和红景天组成的抗毒复方进一步加强上述作用。结论　解磷复方和解磷复方加红景天复方均可对抗缺氧复合梭曼中毒引起的脑损伤 ,后者作用比前者强     

缺氧条件下梭曼中毒对培养大鼠心肌细胞的影响

目的：探讨缺氧与梭曼中毒单－或复合作用对培养大鼠心肌细胞的损伤特点和可能机制。方法：培养的大鼠心肌细胞在缺氧条件下暴露于含不同浓度梭曼的培养液中,观察细胞存活率和培养液肌酸磷酸激酶（ＣＰＫ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）及谷草转氨酶（ＧＯＴ）等心肌酶含量变化,同时用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光负载测定心肌细胞内游离钙浓度（［Ｃａ＾２＋］ｉ）变化。结果：缺氧与梭曼中毒均可导致培养的大鼠心肌细胞存活率下降,培养液中     

缺氧复合梭曼中毒对PC12细胞凋亡及IL-1β、IL-6水平的影响

目的观察缺氧复合梭曼中毒对PC12细胞的毒性效应及IL-1β、IL-6的变化规律.方法制备缺氧复合梭曼中毒细胞模型,以MTT比色、流式细胞仪、ELISA和放免法分别测定细胞存活率、凋亡率及培养液IL-1β和IL-6活性.结果梭曼中毒和缺氧致伤组细胞存活率明显下降,细胞凋亡率明显升高,复合致伤组细胞存活率和凋亡率变化更为明显,且与梭曼中毒组相比具有显著性差异(P＜0.05);梭曼中毒和缺氧致伤后IL-1β、IL-6活性均明显增加,梭曼中毒组在致伤后12 h达到高峰,缺氧致伤组在伤后6 h即达到高峰,而后逐渐下降,至伤后24h仍显著高于对照组;复合致伤组IL-1β和IL-6活性升高更为明显,在致伤后6 h达到高峰,显著高于正常对照组(P＜0.01)和同时相点梭曼中毒组(P＜0.05),较同时相点梭曼中毒组IL-1β和IL-6活性增加1.25和2.16倍.结论缺氧复合梭曼中毒导致PC12细胞凋亡增加,复合致伤所致的IL-1β和IL-6水平的升高在缺氧复合梭曼中毒的毒性效应中具有重要作用.     

缺氧复合梭曼中毒PC12细胞中［Ca2+］、cAMP、CaM和Ca2+/CaM-PK Ⅱ的变化

目的 观察缺氧复合梭曼中毒的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞内游离钙的浓度［Ca∧2 ］、cAMP、钙调蛋白（CaM）和钙调蛋白Ⅱ（Ca∧2 /CaM-PK Ⅱ）的变化。方法 采用放免技术,从细胞水平进一步观察缺氧复合梭曼中毒对PC12细胞的毒性、细胞内［Ca∧2 ］变化、cAMP、CaM和Ca∧2 /CaM-PK Ⅱ的变化。结果 缺氧中毒组PC12细胞cAMP、CaM含量在中毒后24h明显高于单纯中毒组、缺氧对照组和正常对照组;缺氧中毒组PC12细胞Ca∧2 /CaM-PK Ⅱ活性在中毒后24h明显低于单纯中毒组、缺氧对照组和正常对照组。结论 ［Ca∧2 ］、cAMP、CaM和Ca∧2 /CaM-PK Ⅱ在缺氧复合梭曼中毒PC12细胞损伤机制中起了重要的作用。     

缺氧条件下梭曼中毒大鼠心脏毒性效应胆碱能机制的研究

目的 探讨胆碱能系统在缺氧复合梭曼中毒心脏毒性效应增强机制中的作用。方法 实验大鼠随机分为正常对照组、高原缺氧组、平原中毒组和缺氧中毒组。利用RT—PCR技术检测心肌m2受体mRNA的表达，Western blot检测抑制性G蛋白含量，放射免疫法测定cAMP浓度及酶放射化学分析测定AC、PKA活性。结果 与平原中毒组相比，缺氧条件下梭曼中毒m2受体表达增强，Gi含量明显降低，cAMP浓度及AC、PKA活性显著升高。结论 复合损伤引起的m2受体表达增强和cAMP—PKA信号系统的异常升高，可能是高原缺氧条件下棱曼中毒心脏毒性效应增强的重要原因之一。     

梭曼中毒对大鼠心功能的影响

观察梭曼对心脏的直接作用，探讨梭曼中毒对动物心的损伤特点，方法采用大鼠离体灌流心脏为模型，通过向心脏直接灌注梭曼，研究急生梭曼中毒后离体工作心脏功能的变化。     

缺氧条件下梭曼中毒对大鼠脑M受体的影响

目的 探讨高原缺氧条件下梭曼中毒大鼠脑组织乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）活性和毒蕈碱性乙酰胆碱（Ｍ）受体变化规律。方法 以ＤＴＮＢ法和受体放射性配基结合法检测大鼠皮层、海马及纹状体ＡＣｈＥ活性和Ｍ受体密度及亲和力。结果 缺氧使大鼠脑组织ＡＣｈＥ活性不同程度升高,缺氧２４ｈ海马和纹状体Ｍ受体 分别增加１０．４％和２５．３％,Ｍ受体的亲和力分别增加５５．６％和３０．３％。单纯梭曼中毒和缺氧复合梭曼中毒均显著     

缺氧和梭曼单一或复合作用对PC12细胞的细胞毒效应

目的：缺氧与梭曼中毒能引起不可逆性脑损伤认识已久，然而，缺氧与梭曼中毒复合对脑的作用所少甚少，本研究应用ＰＣ１２细胞损伤模型，探讨缺氧和梭曼单一或复合作用对神经瘤细胞的损伤，方法：培养的ＰＣ１２细胞暴露于含不同氧是分比的空气及含不同浓度梭曼的培养液，测定细胞乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）的释放及细胞存活率的变化，用以指标细胞毒效应的量效，时效关系，用ｔ检验及双因素方差分析判别统计差别显著性及缺氧，梭曼双因素     

M乙酰胆碱受体在缺氧复合梭曼中毒大鼠脑损伤中的作用研究

目的探讨毒蕈碱样乙酰胆碱受体(M受体)在缺氧复合梭曼中毒脑损伤中的作用。方法实验大鼠随机分为正常对照组、梭曼中毒组、缺氧组和缺氧复合梭曼中毒组。利用受体放射性配基结合法、Western blot、放射免疫和酶放射化学分析分别检测皮层、海马和纹状体M受体密度和亲和力、Gia蛋白含量、cAMP浓度及PKA活性。结果与平原中毒组相比,缺氧复合梭曼中毒组皮层和纹状体Bmax增加,海马和纹状体Kd值降低;复合致伤组皮层、海马和纹状体Gia蛋白含量分别比单纯梭曼中毒组降低了15．48％、8．56％和28．20％;各脑区cAMP浓度及PKA活性显著升高,分别较梭曼中毒组升高了79．51％、84．75％、52．92％和78．93％、44．32％、39．05％;M受体阻断剂阿托品可部分阻断梭曼中毒和／或缺氧所致的PKA活性的升高。结论复合致伤引起的M受体上调,cAMP-PKA信号系统的异常增强,在缺氧复合梭曼中毒脑损伤中可能是缺氧复合梭曼中毒毒性效应增强的重要原因之一。     

缺氧复合梭曼中毒对PC12细胞中IL-4、IL-8和TPK活性的影响

目的研究缺氧复合梭曼中毒PC12细胞中白介素-4、白介素-8(IL-4、IL-8)和酪氨酸蛋白激酶(TPK)活性的变化.方法采用ELISA法和放射免疫技术检测缺氧复合梭曼中毒PC12细胞的IL-4、IL-8和TPK活性.结果单纯梭曼中毒PC12细胞胞浆、胞核的TPK以及IL-4、IL-8活性在中毒2 h升高,12 h活性水平最高,24 h活性降低.缺氧复合梭曼中毒组PC12细胞胞浆、胞核的TPK以及IL-4、IL-8活性在缺氧中毒2 h升高,6 h最高,12 h活性降低,各时相点均明显高于正常对照组.结论提示酪氨酸蛋白激酶、IL-4、IL-8参与缺氧复合梭曼中毒所致脑损伤的发病机制.     

磷脂酶A2在模拟高原梭曼中毒性脑损伤中的变化

目的 探讨磷脂酶A2（PLA2）在缺氧复合梭曼中毒脑损伤的作用机制。方法 应用微量滴定，放免法从动物整体水平观察了高原缺氧，梭曼中毒单一与复合致伤后12、24、48h大鼠脑组织含水率（WCB）、伊文思蓝（EB）含量，PLA2的活性，环磷酸腺苷（cAMP)含量的变化。结果 高原中毒组脑组织伊文思蓝含量，PLA2的活性，ADP、AMP、cAMP含量在中毒后24、48h明显高于平原中毒组，高原对照组和正常对照组，应用钙通道阻断剂尼莫地平可明显降低PLA2活性，减轻缺氧中毒后脑组织水肿。结论 磷脂酶A2、腺苷酸环化酶的激活可能参与高原缺氧复合梭曼中毒脑损伤。     

谷氨酸在模拟高原梭曼中毒性脑损伤的作用研究

目的 探讨谷氨酸（Chutamic acid.Glu)在缺氧复合梭曼中毒脑损伤的作用机制。方法 采用氨基酸分析和放免技术，研究高原缺氧，梭曼中毒单一与复合致伤后12、24、48h脑组织Glu和CaM含量的变化以及钙／钙调蛋白激酶Ⅱ（Ca^2 /CaM-PKⅡ）活性的影响及其机制。结果 缺氧复合梭曼中毒组脑组织Glu,CaM含量在中毒后24h明显高于单纯中毒组、缺氧对照组和正常对照组；缺氧中毒组脑组织Ca^2 /CaM-PKⅡ活性在中毒后24h明显低于单纯中毒组、缺氧对照组和正常对照组；而N－甲基－D－天冬氨酸（NMDA）受体损坏抗剂地佐环平（MK－801）和钙通道拮抗剂尼莫地平（Nimodipine)可对抗这种改变。结论 高原缺氧复合梭曼中毒后Glu的兴奋毒引起脑损伤和Ca^2 /CaM-PKⅡ的活性下降，主要由NMDA受体介导和胞外Ca^2 内流增加有关。     

缺氧条件下梭曼中毒大鼠脑G蛋白及cAMP-PKA信号系统的变化

目的 探索G蛋白及cAMP－PKA信号系统在缺氧条件下梭曼毒性升高机制中的作用。方法 Western blot检测Giα、Gqα含量、cAMP浓度及PKA活性升高，Giα下降，缺氧条件下梭曼中毒与单纯梭曼中毒组有显著差别；阿托品可对抗PKA活性的升高。在所观察的三个脑区中，以纹状体变化最为明显。结论 G蛋白及其介导的cAMP－PKA信号系统参与了缺氧条件下梭曼毒性升高的形成机制。     

梭曼中毒复合缺氧损伤对PC12细胞游离钙的影响

目的：探索钙在梭曼中毒神经细胞损伤中的作用及其机理。方法：采用Ｃａ＾２＋指示剂Ｆｕｒａ－２作为细胞内钙离子荧光探针，检测了梭曼中毒复合缺氧损伤时ＰＣ１２细胞内「Ｃａ＾２＋」的变化。结果：单纯梭曼对细胞内「Ｃａ＾２＋」，无明显影响，在乙酰胆碱和／或谷氨酸存在的情况下，梭曼中毒明显升高「Ｃａ＾２＋」，单纯缺氧也可使「Ｃａ＾２＋」升高，梭曼中毒复合缺氧损伤「Ｃａ＾２＋」升高更加明显。尼莫地平可对抗梭中毒     

缺氧复合NaCN中毒对大鼠心脏病理和cyt-c活性的影响

目的 研究缺氧复合氰化钠(NaCN)中毒对大鼠心功能的损伤.方法 雄性SD大鼠共108只,随机均分为平原实验组和高原实验组.平原实验组大鼠在常规实验室内进行实验;高原实验组大鼠置4 000m低压舱中预处理3d后开始实验.两组各取6只大鼠麻醉后进行气管和左侧颈总动脉插管,术后静待30min后,背部皮下注射NaCN 3.6mg/kg,以RM 6240生理信号采集处理系统记录平均动脉压(mean arterial blood pressure,mAP)、心电图(ECG);再各取18只大鼠,背部皮下注射NaCN(3.6mg/kg)中毒,不同时相点取大鼠心脏,测定细胞色素C氧化酶(cytochrome C oxidation enzyme,cyt-c)活性.再各取30只大鼠,背部皮下注射氰化钠(3.6mg/kg)中毒后,制作心脏常规光镜切片.结果 与平原实验组比较,高原实验组大鼠NaCN中毒后mAP、ECG和cyt-c活性变化更为明显,较难以恢复正常;心肌组织病理切片也发现缺氧复合NaCN中毒后心肌组织的损伤更严重,且更难于恢复正常.结论 高原缺氧后NaCN中毒会产生复合效应,对大鼠心脏功能的损伤更为严重,需要进一步探索相应的防治措施.     

VE，VA对梭曼致大鼠过氧化损伤的保护作用

目的　研究梭曼（soman）对大鼠急性中毒的自由基损伤作用及VE/VA的抗氧化保护作用. 方法　雄性大鼠40只,按体质量随机分为阴性组（正常对照组）、阳性组（损伤对照组）,VE组（加VE保护组）和VA组（加VA保护组）. 观察每组大鼠血清、大脑、肝脏中VE、总抗氧化力（T-AOC）和一氧化氮合成酶（NOS）的变化. 结果　梭曼中毒后,T-AOC水平、VE含量下降,NOS活性提高. 中毒前后大鼠肝脏中VE质量分数从(0.83±0.02) mg.g-1下降至(0.45±0.06) mg.g-1;T-AOC从(122.7±14.0) mol.s-1.kg-1下降至(70.4±5.4) mol.s-1.kg-1;NOS从(19.6±2.4) mol.s-1.kg-1上升至（39.3±5.5） mol.s-1.kg-1,有显著差异(P<0.05). 而VE/VA较有效地抑制其变化. 结论　梭曼中毒有明显的过氧化损伤作用,VE/VA对梭曼中毒有一定的抗氧化保护作用.     

化学中毒与急性缺氧的双因素联合效应的实验研究

目的 研究化学中毒与急性缺氧两因素的联合效应。方法 建立常压常氧、常压缺氧和低压缺氧3种模型，以梭曼(Soman)、氰化钠(NaCN)和4-DMAP(4-dimethylaminophenol)为代表，测定大鼠、小鼠、家猫、PC12细胞、兔血红细胞等在3种模型条件下对毒物药物的行为、生化和生理指标变化。结果梭曼单独作用可导致动物协调运动下降、脑等组织含水率增加、脑组织AChE活性降低、MR下调、NE和cAMP含量增加。急性缺氧单独作用也可引起动物协调运动及自主活动的降低、脑等组织含水率的增加、外周血和脑组织AChE活性升高、MR受体上调、NE和cAMP含量增加、4-DMAP药效升高。化学中毒与急性缺氧同时作用，上述变化更加复杂。结论 化学中毒与急性缺氧两种因素同时作用于机体，对机体产生广泛而复杂的损伤作用。此种作用为两因素的联合效应。缺氧引起的机体功能下降对联合效应的增加部分贡献较大。急性缺氧既可使重要的组织成分发生质或量的变化，也会影响某些抗毒剂的作用强度。