十堰地区2007～2011年手足口病监测分析

目的了解湖北省十堰地区近5年来手足口病的流行状况与病原动态分布变化,针对该市手足口病的流行特征,探求防控对策。方法收集十堰地区2007～2011年的手足口病908例患者的疱疹液或咽拭子标本,提取病毒RNA,以RT-PCR和荧光定量PCR进行核酸检测分型;同时分析该市2007～2011年手足口病临床诊断病例的资料。结果该市手足口病病原以CoxA16和EV71型为主;疱疹标本检出率明显高于咽拭标本,荧光定量PCR明显高于RT-PCR;手足口病全年均可在该市各地流行,以4～8月为主;年龄分布:以<5岁散居或幼托儿童为主。结论该市手足口病例有逐年上升趋势,有明显的年龄和季节差异。建议采用以采集疱疹液为主、咽拭子为辅,用荧光定量PCR进行核酸检测的检测方案,在每年的4～8月应重点加强对全市<5岁儿童手足口病的防控。     

2007-2008年北京地区儿童手足口病的病原学分析

目的 通过病毒分离和鉴定了解2007-2008年春夏北京地区手足口病的病原学特征,为手足口病防治工作提供科学依据.方法 分别于2007年4-8月及2008年5-9月收集256例手足口病患儿的咽拭子和疱疹液标本共356份,其中咽拭子255份(包括10份重症患儿标本),疱疹液标本101份.将所有标本接种Vero细胞进行病毒分离,分离阳性的毒株用RT-PCR进行鉴定;对10份重症患儿标本除病毒分离外,还直接进行RT-PCR检测病毒核酸.结果 256例被检测患儿中188例为肠道病毒阳性,阳性率为73.4%.356份标本中共分离到239株肠道病毒,总阳性率为67.1%.其中疱疹液标本分离阳性率为75.2%(76/101),咽拭子标本分离阳性率63.9%(163/255),但两种标本接种细胞后出现病变的速度没有差别.重症患儿标本病毒分离阳性率50%(5/10).2007年的45例病毒分离株经肠道病毒通用引物PCR检测均为阳性,分型PCR显示,其中CA16占95.6%(43/45),EV71占4.4%(2/45);而2008年的143例病毒分离株经肠道病毒通用引物PCR检测142例为阳性,PCR分型显示,EV71占82.4%(117/142),CA16占16.8%(24/142).10份重症患儿标本直接分型检测结果均为EV71.结论 北京儿童手足口病病原体以EV71和CAV16为主,2007年与2008年流行的优势型别不同,2007年主要为CA16,而2008年主要为EV71.本组重症手足口病患儿的病原均为EV71.     

2007-2008年北京地区儿童手足口病的病原学分析

目的 通过病毒分离和鉴定了解2007-2008年春夏北京地区手足口病的病原学特征,为手足口病防治工作提供科学依据.方法 分别于2007年4-8月及2008年5-9月收集256例手足口病患儿的咽拭子和疱疹液标本共356份,其中咽拭子255份(包括10份重症患儿标本),疱疹液标本101份.将所有标本接种Vero细胞进行病毒分离,分离阳性的毒株用RT-PCR进行鉴定;对10份重症患儿标本除病毒分离外,还直接进行RT-PCR检测病毒核酸.结果 256例被检测患儿中188例为肠道病毒阳性,阳性率为73.4%.356份标本中共分离到239株肠道病毒,总阳性率为67.1%.其中疱疹液标本分离阳性率为75.2%(76/101),咽拭子标本分离阳性率63.9%(163/255),但两种标本接种细胞后出现病变的速度没有差别.重症患儿标本病毒分离阳性率50%(5/10).2007年的45例病毒分离株经肠道病毒通用引物PCR检测均为阳性,分型PCR显示,其中CA16占95.6%(43/45),EV71占4.4%(2/45);而2008年的143例病毒分离株经肠道病毒通用引物PCR检测142例为阳性,PCR分型显示,EV71占82.4%(117/142),CA16占16.8%(24/142).10份重症患儿标本直接分型检测结果均为EV71.结论 北京儿童手足口病病原体以EV71和CAV16为主,2007年与2008年流行的优势型别不同,2007年主要为CA16,而2008年主要为EV71.本组重症手足口病患儿的病原均为EV71.     

荧光定量RT—PCR检测手足口病病原及其临床分析

【目的】采用荧光定量RTPCR法检测手足口病患儿病原,并对手足口病临床特点分析。【方法】利用荧光定量PCR核酸检测试剂盒对,临床诊断手足口病的咽拭子、粪便标本32份进行总肠道病毒和EV71、CoxA16检测,并对所致的临床特点分析。【结果】在32份样本中,肠道病毒通用核酸阳性22份,肠道EV71病毒核酸阳性10份,其他肠道病毒核酸阳性12份,无CoxA16核酸阳性;EV71与其他肠道病毒的早期临床特点和辅助检查结果基本相同。【结论】荧光定量RT-PCR法可早期对手足口病的病原学诊断,不同病原早期临床特点和辅助检查结果基本相同。     

2011年贵阳地区手足口病病原学检测结果分析

目的:了解贵阳地区2011年4-10月手足口病流行期间婴幼儿手足口病病原学分布情况及流行特征.方法:对2011年4-10月在我院住院期间临床诊断为手足口病病例采集肛拭子标本1 379份,运用荧光定量PCR法进行肠道通用型、肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(CoxA16)核酸检测.结果:肠道病毒通用型核酸、EV71和CoxA16核酸检出率分别为46.99％、5.80％、2.18％.手足口病发病以幼儿为主,在5岁以下儿童是疾病高发年龄段,4～6月为发病高峰期,肠道病毒阳性检出率男性高于女性;其他肠道病毒和EV71为主要病原,重症病例和非重症病例感染的主要病原体型别有差异.其他肠道病毒和CA16为轻症病例的主要病原,EV71则为重症病例的主要病原.结论:贵阳地区儿童手足口病的主要病原体是未知的其他肠道病毒和EV71,EV71更易引起重症病例的发生.     

2013-2016年柳州市手足口病病原监测结果分析

目的 掌握柳州市2013-2016年手足口病病原学流行特征及病原谱变化情况,为制定柳州市手足口病预防控制措施提供科学依据.方法 收集柳州市2013-2016年医院和县级疾病预防控制中心送检的手足口病病例咽拭子、肛拭子及疱疹液标本,应用实时荧光定量-聚合酶链反应(real-time PCR) 技术对标本中的肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16 型(CoxA16)及非EV71和CoxA16的其他肠道病毒(EV)进行核酸检测.结果 2013-2016年共收集临床诊断手足口病病例标本3 503份,实验室确诊EV阳性标本2 720份;2013-2016年柳州市每年手足口病主要病原体均有变化,除EV71和CoxA16外,还存在着较高比例的EV;手足口病发病有明显季节性,主要集中在每年3-9月;5岁以下儿童为主要发病的人群,其中1～3岁儿童发病最多,男性发病例数高于女性;EV71为引起重症及死亡手足口病的主要病原体,死亡病例未见CoxA16.结论 EV是引起柳州市2013-2016年手足口病流行的主要病原体,但每年病原谱在不断变化,EV71是引起重症及死亡手足口病的主要病原体.     

手足口病患者柯萨奇病毒核酸检测结果分析

目的探讨手足口病患者柯萨奇病毒核酸检测的临床应用价值。方法利用实时荧光聚合酶链反应技术,以EV71/CA16基因组编码区的高度保守区为靶区域,设定特异性引物及荧光探针,通过一步法RT-PCR扩增对EV71RNA/CA16RNA进行检测。结果在428份患者标本中,EV71-RNA阳性136份,CA16-RNA阳性6份,其中有1例患者既是EV71-RNA咽拭子和肛拭子均阳性又是CA16-RNA咽拭子阳性。而有40例(80份标本)患者EV71-RNA咽拭子和肛拭子均阳性,46份EV71-RNA单独肛拭子阳性,10份EV71-RNA单独咽拭子阳性。在6份CA16-RNA阳性患者标本中,4份为肛拭子阳性,2份为咽拭子阳性。结论手足口病患者柯萨奇核酸检测对重症患者判断预后有重要的指导意义,对指导临床合理制订治疗方案有重要的参考价值,值得推广应用。     

长春市2013年手足口病病原学监测结果及分析

目的了解2013年长春市手足口病流行的病原学及分布特征,为今后手足口病防治工作提供参考依据。方法用实时定量PCR(Real-time PCR)法对临床诊断手足口病例标本进行核酸检测。结果 2013年1月-12月共采集病例标本376例手足口病例的标本,阳性率为68.94%,96.05%的病例在6岁以下,高发期在5月-9月。结论 2013年长春市手足口患者以小于6岁的儿童为主,其主要病原是柯萨奇6型(CA6),其次是肠道病毒71型(EV71)。     

1728例手足口病病原学检测结果分析及临床意义

目的：了解宜春市手足口病病原学特征，为手足口病的防控提供实验室依据。方法收集全市各区县所采集的手足口病标本及其流行病学资料，运用Real-Time PCR(PCR-荧光探针法)对所采集标本进行EV71、CA16型以及其它EV通用型的核酸检测。结果宜春市手足口病1728例患者中，检出阳性病例数共计1062例，阳性率为61.5%；EV71、CA16和EV通用型核酸阳性率分别为23.9%、15.2%、22.3%；在核酸检测阳性病例中，男性占63.3%，女性36.7%；阳性者年龄以1岁～3岁为主；重症病例的EV71、CA16和EV通用型核酸阳性率分别为55.0%、0.2%、10.0%。结论对手足口病原体的流行病学分析有助于做好手足口病的防控工作。     

107例儿童手足口病临床及病原学分析

目的了解2009年手足口病流行期间患病儿童的病原类型,并探讨RT～PCR荧光探针法检测手足151病流行期间病毒的可行性。方法采用RT—PCR荧光探针法对107例手足口病患儿血标本进行检测。结果本组107例手足口病患儿以EV71病毒感染为主,占72．9％,CA16占27．1％;好发于4岁以下儿童,占72．9％;应用RT—PCR荧光探针法检出率高,可早期、快速检测手足口病病原体。结论2009年5～6月间本院收治的手足口病患儿以EV71病毒感染为主;好发年龄1～4岁。应用RT—PCR荧光探针法特异性强,可早期、快速、准确的检测出病原体,达到早发现、早治疗、早控制的目的,是手足口病流行期间大批量标本检测的首选方法。     

EV71病毒载量与手足口病病情严重程度的相关性

目的：探讨肠道病毒71型（EV71）手足口病患儿病毒载量拷贝数与病情轻重程度的关系。方法收集2013年5月至7月实验室确诊为EV71型手足口病患儿154例,其中重症109例,普通型45例。采集患儿的咽拭子标本,用荧光定量RT-PCR法进行肠道病毒71型（EV71）病毒核酸定量检测。比较分析重症EV71手足口病患儿与普通型EV71手足口病患儿咽拭子病毒载量的差异;同时比较两组患儿在年龄、性别、高热天数及体温峰值上的差异。结果重症EV71手足口病患儿与普通型EV71手足口病患儿在病毒载量方面差异无统计学意义（P〉0.05）;在高热天数及体温峰值方面差异无统计学意义（P〉0.05）;而在性别和年龄方面差异有统计学意义（P〈0.05）。结论在EV71型手足口病患儿中,病毒载量拷贝数与病情轻重程度无关;患儿发热持续时间及发热程度与病情轻重程度无关;而小年龄、男性患儿更易发生重症手足口病。     

2012～2013年杭州市萧山区手足口病病原谱及临床特征分析

目的：了解杭州市萧山区手足口病（H FM D ）病原谱及临床特征。方法采用荧光定量反转录聚合酶链反应,对2012年5月至2013年7月就诊的208例H FM D疑似患儿咽拭子标本（45份）和粪便标本（208份）进行病原体检测,结合患儿临床资料分析检测结果。结果208例患儿中,肠道病毒（EV ）检出率为83．17％,其中EV71、柯萨奇病毒A16（CoxA16）和其他EV亚型所占比例分别为55．49％、13．29％和31．21％;男、女性患儿EV检出率比较差异无统计学意义（P＞0．05）。5岁及其以下患儿以EV71感染为主,5岁以上患儿以其他EV亚型感染为主。HFMD患儿临床症状主要为发热伴疱疹,各种类型临床症状患儿均以EV71感染为主。粪便标本EV检出率高于咽拭子标本（P＜0．05）。结论 EV71和其他EV亚型是该地区 HFMD患儿常见病原体,CoxA16感染流行趋势有所下降。加强EV、EV71和CoxA16检测有助于 HFMD的预防和控制。     

2008-2011年湖北省宜昌市手足口病的流行特征分析

目的 了解湖北省宜昌市手足口病的流行特征, 为手足口病的综合防治提供科学依据。 方法 收集2008-2011年宜昌市包括各县(市、区)报告的手足口病疫情病例和聚集性病例的相关标本, 采用荧光定量RT-PCR方法进行检测。 结果 在473份标本中, 男女性别比为1.26:1,手足口病发病高峰在春末和夏初;疱疹液的阳性检出率高于咽拭子(2=8.026,P0.01)和口漱液(2=12.67,P0.01);共检测到肠道通用病毒阳性标本298份, 总检出率为73%,其中肠道病毒71型(EV71)阳性标本191 份,柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)阳性标本78份,其他肠道病毒为29份,EV71的检出率高于Cox A16(2=86.517,P0.01)和其他肠道病毒(2=189.089,P0.01)。 结论 宜昌市手足口病的病原体主要是EV71(64.1%)和Cox A16(26.2%), 随不同年份优势毒株稍有差异,EV71是引起宜昌市2008-2011年手足口病病例的主要优势毒株类型。     

肠道病毒71型感染手足口病患儿的肠道排毒时间及传播机制的初步探讨

目的 探讨肠道病毒71型(EV71)感染手足口病患儿的肠道排毒时间及传播机制,为科学防控手足口病提供参考. 方法 采集咽拭子或粪便标本用实时荧光定量反转录聚合酶链反应法进行病毒核酸检测,对实验室确诊的65例EV71感染手足口病患儿进行追踪和随访,直至患儿大便病毒转阴为止.同时调查与58名EV71核酸阳性患儿有密切接触史家庭成员(每位患儿2名)116人,其中36人采集咽拭子,80人采集粪便标本.采集手足口病病区医务人员粪便标本31人,其中医生10人,护士21人. 结果 25例普通型EV71感染患儿第1~6周大便病毒核酸阳性率分别为100%、88.4%、59.4%、22.3%、22.3%、0,持续最长时间为6周.40例EV71重症组患儿第1～10周大便病毒核酸阳性率分别为100%、97.0%、79.5%、60.6%、35.3%、25.2%、16.8%、16.8%、8.4%、0,持续最长时间为10周.31名医务人员粪便未检出EV71及柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)核酸.80名有患儿密切接触史人员中,22份粪便标本EV71核酸阳性,占27.5%;36份咽拭子标本除1例EV71核酸阳性其余均阴性,阳性者均无自觉症状. 结论 EV71感染手足口病患儿恢复期肠道排毒时间长,成为隐性感染者,易造成手足口病流行和传播.建议延长手足口病患者,特别是重症手足口病患者管理时限.EV71感染手足口病患儿家庭成员易成为隐性感染者,可造成手足口病传播.     

2008-2011年辽宁省锦州市手足口病病原监测结果分析

目的 了解辽宁省锦州地区手足口病的病原学特征及变化趋势,为手足口病防治工作提供参考依据。 方法 日常监测工作中收集2008-2011年锦州地区294例手足口病临床确诊患儿的330份样本检测结果,其中咽拭子274份,粪便标本56份,进行病原学检测。 结果 294例被检测患儿中246例为肠道病毒阳性,阳性率为83.67％,其中肠道病毒71型(EV71)阳性率30.61%,柯萨奇A组16型(Cox A16)阳性率32.31%,EV71、Cox A16混合感染阳性率0.34%,其他肠道病毒阳性率20.41%。330份标本中咽拭子阳性率82.12％(225／274),粪便阳性率71.43%(40/56)。2008-2011年病例的咽拭及粪便标本采用不同检测方法、不同试剂的阳性检出率差异无统计学意义(P﹥0.05)。 结论 锦州市儿童手足口病病原体以EV71和Cox A16为主,每年略有不同,近年其他肠道病毒感染率逐年增高。手足口病患者的咽拭和粪便标本的阳性检出率无差异。     

2010年广东省深圳市首例手足口病死亡病例的病原学研究

目的 对广东省深圳市2010年首例临床诊断为手足口病死亡患儿的粪便和咽拭子标本进行病原体型别鉴定,从而追踪其病原的可能来源。 方法 先用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(rRT-PCR)方法检测病毒核酸,再用细胞培养方法从粪便和咽拭子标本中分离病毒,并将分离到的毒株提取核酸后,用普通RT-PCR方法分别扩增肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)的VP1区全长基因并进行序列测定,序列测定结果与不同国家和地区的肠道病毒株A、B、C基因型代表株进行同源性比较和进化树分析。 结果 该病例的2份标本均为EV71核酸阳性,Cox A16核酸阴性;毒株基因经过核苷酸和氨基酸同源性分析,确定该病例病原体为EV71 C4亚型。 结论 2010年深圳市首例手足口病死亡病例的病原体为EV71的C4亚型。     

一步法实时RT-PCR快速检测手足口病肠道病毒

目的探讨实时荧光RT-PCR在手足口病(HFMD)肠道病毒快速检测中的应用价值。方法以实时荧光RT-PCR检测64例临床初诊为HFMD患儿标本中总肠道病毒(EV)、柯萨奇病毒A组16型(CA16)和肠道病毒71型(EV71),用RD细胞、Vero细胞和Hep-2细胞进行病毒分离培养,以免疫荧光法鉴别分离培养的EV71。结果64例标本中,EV(+)/EV71(+)为23.4%(15/64)、EV(+)/CA16(+)为48.4%(31/64)、EV(+)/EV71(-)/CA16(-)为10.9%(7/64)、EV(-)/EV71(-)/CA16(-)为17.2%(11/64)。实时荧光RT-PCR检测为EV71且病毒分离培养出现细胞病变效应的培养细胞经抗EV71单克隆抗体免疫荧光检测均为阳性,未发生细胞病变效应或非EV71的培养细胞均为阴性。结论实时荧光RT-PCR检测HFMD病原具有特异和快速等优点,与病毒分离培养具有较高的一致性,可用于手足口病的早期诊断和鉴别诊断。