重症监护病房患者医院感染产-内酰胺酶和头孢菌素酶的肺炎克雷伯菌耐药性及基因型研究

目的 探讨重症监护病房(ICU)患者医院感染产-内酰胺酶(ESBLs)和头孢菌素酶(AmpC酶)的肺炎克雷伯菌耐药基因型及对常用抗菌药物的耐药特性,为临床合理用药提供参考依据。 方法 细菌鉴定采用VITEK-60型全自动微生物鉴定仪鉴定;ESBLs和药敏试验K-B纸片法按CLSI推荐的方法;产AmpC酶菌株筛选采用头孢西丁纸片扩散法;产AmpC酶菌株确证试验采用三维试验;通过酶粗提物头孢西丁三维试验、PCR测序等实验分析该菌株的基因型。 结果 97株肺炎克雷伯菌ESBLs和AmpC酶总检出率分别为31.96%和13.40%,其中,单产AmpC酶、同产AmpC酶+ESBLs及单产ESBLs菌株检出率分别为7.22%、6.19%和25.77%;13株产AmpC酶阳性菌株的耐药基因型均为DHA-1;产酶菌株对抗菌药物耐药率明显高于非产酶株。同产AmpC酶+ESBLs菌株耐药现象更为严重。 结论 ICU患者肺炎克雷伯菌产AmpC酶和ESBLs菌株检出率较高,AmpC酶基因型均为DHA-1型,产AmpC酶和ESBLs菌株对多种抗菌药物呈耐药状态。     

耐头孢西丁肺炎克雷伯菌ESBLs和AmpC酶的检测及耐药基因分析

目的 了解浙江省台州地区肺炎克雷伯菌ESBLs和AmpC -内酰胺酶产生情况及AmpC酶的耐药基因型别特征。 方法 采用VITEK-AMS60全自动细菌鉴定仪鉴定细菌,按CLSI推荐的确证试验检测ESBLs,采用头孢西丁纸片扩散法筛选疑产AmpC酶阳性菌株,通过酶粗提物三维试验确证产AmpC酶,并经PCR测序等实验分析该菌株的基因型。 结果 在对头孢西丁不敏感的86株肺炎克雷伯菌中,ESBLs和AmpC酶检出率分别为88.37%和77.91%;以同产ESBLs和AmpC酶为主要形式,占47.67%,单产ESBLs和单产AmpC酶分别占40.70%和30.23%;AmpC酶阳性菌株的耐药基因型:62株为DHA-1型、5株为ACT-1型。 结论 台州地区肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶检出率较高,AmpC酶以DHA-1型为主。     

产超广谱β-内酰胺酶及AmpC酶的阴沟肠杆菌的耐药性分析

目的 分析产超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum β lactamases,ESBLs）及AmpC酶的阴沟肠杆菌的分布情况及耐药特征.方法 选择49株阴沟肠杆菌,采用纸片扩散法进行药物敏感试验,按美国临床实验室标准化协会推荐的确证试验检测产ESBLs阳性菌株;头孢西丁纸片扩散法初步筛选产AmpC酶阳性菌株,采用PCR检测AmpC酶基因.结果 抗生素敏感试验结果显示阴沟肠杆菌对头孢西丁、替卡西林/克拉维酸、头孢曲松、氨曲南的耐药率均达79.6％以上,对美罗培南敏感率较高,达91.8％.49株阴沟肠杆菌中对头孢西丁耐药的菌株46株（93.9％）;产ESBLs菌株29株（59.2％）,PCR 扩增产AmpC酶的阴沟肠杆菌36株（73.5％）,同时产两种酶的菌株为13株（26.5％）.结论 产ESBLs 及AmpC酶阴沟肠杆菌普遍且耐药现象严重.     

阴沟肠杆菌产AmpC酶和ESBLs的检测及耐药性分析

目的明确阴沟肠杆菌产头孢菌素酶(AmpC酶)和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况,分析细菌产酶与药物耐药间的关系,指导临床合理用药。方法非重复阴沟肠杆菌共174株采用Microscan walkaway-40SI全自动细菌鉴定与药敏分析仪进行细菌鉴定及药敏试验;采用多底物协同-拮抗法(MSSAT)检测ESBLs和AmpC酶。结果 174株阴沟肠杆菌中,单产AmpC酶92株(52.87%),其中高诱导型25株,部分去阻遏型33株,完全去阻遏型22株;同时产AmpC酶和ESBLs 54株(31.03%);单产ESBLs 1株(0.57%);AmpC酶和ESBLs均不产有27株(15.52%);阴沟肠杆菌产酶株的耐药率明显高于不产酶株的耐药率(P0.05),同时产AmpC酶和ESBLs菌株的耐药率高于单产AmpC酶株的耐药率(P0.05);产AmpC酶和ESBLs菌株对头孢曲松、头孢噻肟、哌拉西林的耐药率均高于92.0%,对氨曲南耐药率高达88.9%,对阿米卡星耐药率较低(14.8%),对亚胺培南耐药率为0%。结论阴沟肠杆菌以产AmpC酶为主,单产ESBLs菌株少,同时产AmpC酶和ESBLs的菌株对三代头孢菌素、单环类、青霉素类具有高度耐药性,对碳青霉烯类药物敏感;碳青霉烯类抗菌药物依然是治疗多重耐药阴沟肠杆菌感染的首选。     

产AmpC酶和ESBLs阴沟肠杆菌的临床分布及耐药性分析

目的了解阴沟肠杆菌的耐药特性及其产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的情况。方法对2005年4月-2007年7月的各类标本进行阴沟肠杆菌的分离培养,用VITEK32全自动微生物分析系统进行细菌鉴定及药敏试验。ESBLs检测采用NCCLS纸片确证试验,用酶提取三维试验检测AmpC酶。结果在63株阴沟肠杆菌中,20．6％的菌株单产AmpC酶;38．1％的菌株单产ESBLs;9．5％的菌株同时产生AmpC酶和ESBLs;31．8％的菌株均不产AmpC酶和ESBLs。产酶株的耐药性明显高于非产酶株,耐药现象在同时产生AmpC酶和ESBLs的菌株中尤为严重。结论本地区阴沟肠杆菌产AmpC酶和ESBLs的流行处于一个相对较高的水平。产AmpC酶及ESBLs的细菌耐药性不完全相同,产酶类型不同,需选用不同类型的抗菌药物。     

阴沟肠杆菌、奇异变形杆菌AmpC酶和ESBLs的检测及其耐药性研究

目的了解本地区阴沟肠杆菌、奇异变形杆菌AmpC酶和ESBLs的流行分布及对临床常用抗菌药物的耐药情况,为临床合理用药提供依据。方法阴沟肠杆菌和奇异变形杆菌的鉴定及药敏使用西门子MicroScan WALKAWAY96全自动细菌鉴定及药敏分析系统进行,采用酶提取物三维试验方法检测AmpC酶,使用表型确证试验纸片扩散法测定ESBLs。结果 76株阴沟肠杆菌中,产AmpC酶菌株为15株(19.74%),产ESBLs菌株为24株(31.58%),同时产两种酶的菌株为11株(14.47%)。43株奇异变形杆菌中,产AmpC酶菌株为7株(16.28%),产ESBLs菌株为18株(41.86%),同时产两种酶的菌株为6株(13.95%)。对其药敏结果分析显示产AmpC酶和ESBLs的菌株耐药性明显高于不产酶菌株。结论产AmpC酶和ESBLs是阴沟肠杆菌和奇异变形杆菌产生耐药的重要机制,碳青霉烯类药物是治疗这两种细菌感染的首选药物。     

阴沟肠杆菌产AmpC酶和ESBLs的检测及其耐药机制研究

目的了解阴沟肠杆菌临床分离株AmpC酶和ESBLs的产生情况并分析其耐药特性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法采用改良的酶提出物三维试验法对186株阴沟肠杆菌进行AmpC酶和ESBLs检测,用K-B法对14种常用抗菌药物进行药物敏感试验。结果186株阴沟肠杆菌中,产AmpC酶的菌株63株,占33．9％;产ESBI_s的菌株有28株,占15．1％;同时产AmpC酶和ESBLs的菌株有18株,占9．7％。药敏结果显示,186株阴沟肠杆菌对头孢唑林、氨苄西林、头孢西丁等抗菌药物的耐药率较高,对亚胺培南、舒普深的耐药率较低。结论阴沟肠杆菌已呈现出多重耐药性,其耐药机制较为复杂,可表现为阻遏高产AmpC酶、产ESBLs,也可表现为同时产AmpC酶和ESBLs等多种耐药表型。     

革兰阴性杆菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的:了解革兰阴性杆菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及其耐药特征,为临床合理用药提供参考依据.方法:采用VITEK-32系统鉴定细菌;K-B法测定细菌对抗菌药物的敏感性;标准纸片扩散法检测ESBLs;三维试验法检测AmpC酶.结果:在650株革兰阴性杆菌中,检出单产AmpC酶、单产ESBLs及同时产AmpC酶和ESBLs细菌分别为101株、212株和26株,总检出率分别为15.5%、32.6%、4.0%,其中阴沟肠杆菌AmpC酶检出率最高,为54.5%,肺炎克雷伯菌ESBLs检出率最高,为56.7%.产酶菌株对前三代头孢菌素、磺胺类药物、单环类抗生素氨曲南及含酶抑制剂复合制剂均高度耐药,其耐药率均高于80%,但对亚胺培南和头孢吡肟仍保持高度敏感性,其耐药率分别为0%和20%左右,另外对环丙沙星和阿米卡星亦有一定的敏感性.产酶菌株耐药率明显比非产酶菌株高.结论:革兰阴性杆菌产ESBLs和AmpC酶的状况已十分突出,其多重耐药机制严重影响各类抗菌药物的治疗,给临床抗感染治疗带来很大困难.及时、准确的检测AmpC酶与ESBLs菌株,为临床提供细菌的耐药分析,指导临床合理应用抗生素,延缓耐药的产生,控制耐药株传播等具有十分重要的意义.     

多药耐药阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶的检测

目的调查川北医学院附属医院临床分离的多药耐药阴沟肠杆菌（E.cloacae）超广谱β-内酰胺酶（extended-spectrum β-lactamases,ESBLs）、AmpC酶的流行情况。方法随机收集2005～2008年经法国生物梅里埃VITEK-32系统GNI＋卡和GNS132卡鉴定为多药耐药阴沟肠杆菌的不重复菌株30株,同时用纸片扩散法（K-B法）补做氨曲南（AZT）、头孢西丁（FOX）、复方新诺明（SXT）、头孢匹美（FEP）等药敏试验,利用改良三维试验检测ESBLs和AmpC酶。结果 30株多药耐药阴沟肠杆菌产ESBLs的有21株,占70.0%;产AmpC酶的有3株,占10.0%;30株菌均对亚胺培南全敏感,对氨苄西林、头孢西丁100.0%耐药。结论本次试验检测出我院多药耐药阴沟肠杆菌以产ESBLs为主（70%）,产AmpC酶较少（10%）。     

产ESBLs和AmpC酶阴沟肠杆菌的检出率及耐药性监测

目的研究产ESBLs和AmpC酶阴沟肠杆菌的检出率及耐药性。方法对我院2005年1月-2007年1月间,确认为阴沟肠杆菌感染及产ESBLs和AmpC酶阴沟肠杆菌的检出率及耐药性进行分析。结果 81株阴沟肠杆菌中,29株产ESBLs,检出率35.0%;31株产AmpC酶,检出率38.3%;14株同时产生此二类酶,检出率约17.3%。酶抑制剂联合制剂头孢哌酮/舒巴坦细菌耐药率为3%,细菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为1和2%。结论阴沟肠杆菌为医院感染常见病原菌之一,产ESBLs、AmpC酶已成为阴沟肠杆菌耐药的二大主要因素。碳青霉烯类抗生素、第四代头孢菌素头孢吡肟及头孢哌酮/舒巴坦,对AmpC酶和ESBLs均稳定的β内酰胺类抗生素,可用于治疗产ESBLs菌引起的重症感染。     

某地区分离自呼吸系统感染患者产ESBLs、AmpC酶肠杆菌科细菌耐药性检测

目的 分析肠杆菌科细菌临床分离株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和头孢菌素酶(AmpC酶)情况,及其与肠杆菌科细菌耐药性的关系.方法 收集该地区12家医院2009～2010年分离自呼吸系统感染患者呼吸道标本的肠杆菌科细菌1 612株,双纸片增效法检测ESBLs、三维试验检测AmpC酶、K-B纸片法检测菌株耐药性,采用χ2检验进行统计学分析.结果 1 612株细菌中,产ESBLs和AmpC酶菌株检出率分别为45.0%(726/1 612)和11.6%(187/1 612),产酶株对多种抗菌药物的耐药率高于非产酶株;未检出碳青霉烯类抗菌药物耐药菌株.结论 分离自该地区呼吸道感染患者呼吸道标本的产ESBLs和AmpC酶肠杆菌科细菌具有多药耐药性,应加强细菌耐药性监测,采取有效措施防止耐药性的水平传播.     

阴沟肠杆菌临床感染分布特征及耐药性分析

目的了解川北地区阴沟肠杆菌的临床分布特征及耐药情况。方法回顾性分析临床分离59株阴沟肠杆菌的临床感染分布情况,琼脂稀释法进行药敏试验,改良三维试验检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和产AmpCβ-内酰胺酶(AmpC),敏感、中介、耐药的判定采用美国临床实验室标准化协会(CLSI)2006年公布的标准。结果 59株阴沟肠杆菌在痰液和尿液标本、重症监护病房和呼吸科检出率高,且全部菌株除对亚胺培南耐药率极低外(3.39%),对其他11种抗菌药物的耐药率均大于20%;59株细菌中,检出产ESBLs和AmpC共计34株,单产ESBLs、同时产AmpC和ESBLs、单产AmpC菌株检出率分别为30.5%、8.47%、18.65%,ESBLs阳性菌株的检出率为38.97%,且ESBLs阳性菌株对除亚胺培南之外的其他11种抗菌药物显示了极高耐药率(44.45%~100%)。结论川北地区阴沟肠杆菌以引起危重患者的呼吸道和泌尿道感染为主,阴沟肠杆菌具有较高的ESBLs检出率,且多重耐药严重。     

下呼吸道感染细菌产AmpC酶和超广谱β内酰胺酶的检测

目的：了解临床下呼吸道感染标本常见革兰阴性杆菌分离株中AmpC酶和超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的检出情况。方法：通过酶提取物三维试验检测单产AmpC酶、同时产AmpC酶和ESBLs菌株；采用美国国家临床实验室标准委员会(NC—CLS)表型筛选和确认试验检测单产ESBLs菌株。结果：从临床下呼吸道标本分离对第一、二代及一种以上第三代头孢菌素耐药的226株常见革兰阴性杆菌，包括阴沟肠杆菌、弗劳地枸橼酸杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中，分别检出单产AmpC酶、同时产AmpC酶和ESBLs及单产ESBLs细菌34株、15株、109株，总检出率分别为15．0％、6．6％、48．2％。AmpC酶检出率在阴沟肠杆菌中最高，为57．9％；ESBLs检出率以肺炎克雷伯菌最高，其次为大肠埃希菌，分别为78．5％、77．8％。结论：下呼吸道产AmpC酶和ESBLs细胞感染常见，前以阴沟肠杆菌为主，后多见于肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌。     

革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶头孢菌素酶状况及耐药性研究

目的了解本院目前常见的革兰阴性杆菌菌种分布及产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和头孢菌素酶（AmpC）情况,分析产酶菌耐药谱特征。方法用法国生物梅里埃公司的VITEK-2细菌鉴定与药敏系统对革兰阴性杆菌进行鉴定,对可疑产ESBLs、AmpC的菌株,用标准纸片扩散法和三维试验法进行两种酶的表型确证,再用纸片扩散法行药物敏感性检测。结果检出单产ESBLs、单产AmpC、同时产ESBLs和AmpC的细菌分别为175株（43.8%）、54株（13.5%）和28株（7.0%）。ESBLs检出率以肺炎克雷伯菌最高,为60.3%;AmpC检出率在阴沟肠杆菌中最高,为46.7%。单产ESBLs菌株对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦以及哌拉西林/三唑巴坦的敏感性较高,耐药率分别为2.3%、26.3%和33.1%;单产AmpC菌株对亚胺培南和头孢吡肟具有较高的敏感性,耐药率分别为3.7%和29.6%;同时产AmpC和ESBLs的菌株仅对亚胺培南敏感,未发现耐药株。结论革兰阴性杆菌产ES-BLs、AmpC率较高,该类菌对大多数新型广谱β-内酰胺类抗生素耐药,对亚胺培南敏感。     

产超广谱β内酰胺酶和高产AmpC酶革兰阴性杆菌耐药性检测

目的了解铜陵地区产ESBLs和高产AmpC酶革兰阴性杆菌的耐药性.方法2003年10月至2004年9月铜陵地区临床分离的革兰阴性杆菌270株,用Kirby-Bauer法进行药敏试验,根据NCCLS 2002年判断标准分析结果.结果270株革兰阴性杆菌中检出产ESBLs或（和）高产AmpC酶68株,检出率25.2%,其中单产ESBLs 49株,以肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌中检出率最高,分别为31.6%和31.0%：单产AmpC酶3株,均为阴沟肠杆菌,同时产AmpC酶和ESBLs16株,其中鲍曼不动杆菌8株.产酶株对头孢菌素耐药率明显高于非产酶株,产ESBLs菌株对替卡西林-克拉维酸、头孢哌酮-舒巴坦等含酶抑制剂的抗菌药物耐药率在50%以上,对亚胺培南敏感性好.结论ESBLs和高产AmpC酶是导致革兰阴性杆菌耐药的主要两类酶,产酶株对多种抗菌药物耐药,仅对亚胺培南敏感.     

阴沟肠杆菌高产AmpC酶和ESBLs的检测及其多重耐药机制的研究

目的探讨深圳地区多重耐药阴沟肠杆菌的流行状况及耐药机制。方法研究者对临床分离82株阴沟肠杆菌采用超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型确证试验和氟氯西林(FCC)双抑制剂扩散协同试验法(DIDST)分别检测ESBLs、持续高产AmpC酶。结果从82株临床分离的阴沟肠杆菌中,检出33株(占40.2%)产去阻遏持续高产AmpC酶,25株(占30.5%)产ESBLs,14株(占17.1%)同时表达AmpC酶和ESBLs,10株(占12.2%)两种酶都不表达。结论高产AmpC酶和ESBLs是阴沟肠杆菌对头孢菌素耐药的主要机制,高产AmpC酶和ESBLs的产生与β酰胺类抗菌药物的广泛应用有着直接关系,临床治疗多重耐药阴沟肠杆菌应首选碳青霉烯类药物。     

产AmpC酶阴沟肠杆菌耐药与ampR调节基因的研究

目的对阴沟肠杆菌产AmpC酶菌株的检出率、耐药性及ampR调节基因序列进行分析，探讨阴沟肠杆菌产AmpC酶菌株的耐药性与ampR调节基因的关系。方法采用琼脂稀释法对阴沟肠杆菌进行药敏试验，酶粗提物头孢西丁三维试验检测AmpC酶，经表型筛选法筛选，对其中2株去阻遏高产突变株和1株高度诱导株产AmpC酶的ampR基因行PCR扩增并对产物序列进行分析。结果阴沟肠杆菌产AmpC酶株的检出率为26．1％。产AmpC酶株中检出去阻遏高产突变株9株，高度诱导株2株，阴沟肠杆菌去阻遏高产突变株ampR基因的氨基酸序列Asp-135→Asn发生突变。结论产AmpC酶细菌多呈多重耐药，亚胺培南是治疗产AmpC酶细菌感染的较可靠的药物。阴沟肠杆菌ampR基因突变可能与其去阻遏表达有关。     

产ESBLs及AmpC酶阴沟肠杆菌的检测及耐药性分析

目的调查该院阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpCβ-内酰胺酶(AmpC酶)的情况,以及其对常用抗菌剂的耐药性,为临床用药治疗提供依据。方法采用法国生物梅里埃ATB分析仪进行细菌鉴定,K-B法做体外药敏实验,并同时进行AmpC酶及ESBLs的检测。结果 91株阴沟肠杆菌中共检出产酶菌株39株(42.8%),其中产AmpC酶21株(23.1%),产ESBLs 13株(14.3%),同时产AmpC酶及ESBLs 5株(5.5%)。产酶菌株感染分布以老年病科及ICU为主。药敏结果显示,阴沟肠杆菌对抗菌剂耐药性严重,除亚胺培南100.0%敏感外,产酶菌株对其他抗菌剂的耐药率明显高于非产酶菌株(P<0.05)。结论阴沟肠杆菌对常用抗菌剂具有较高耐药性,临床应合理使用抗菌剂,加强对阴沟肠杆菌耐药性监测,碳青霉烯类抗菌剂可作为阴沟肠杆菌严重感染的首选抗菌剂。     

用纸片双抑制剂平行抑制试验分析阴沟肠杆菌AmpC酶

目的建立一种能快速有效分析阴沟肠杆菌AmpC酶的方法。方法分别以大肠埃希菌(ATCC 25922)、肺炎克雷伯菌(ATCC 700603)、阴沟肠杆菌(029、029M和1194E)为β-内酰胺酶阴性对照、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、普通型阴沟肠杆菌、持续高产型AmpC酶、高诱导型AmpC酶标准菌株,用纸片双抑制剂平行抑制试验(DDIST)对华山医院连续的不重复的58株阴沟肠杆菌临床菌株进行AmpC酶分析,用三维试验检测高产AmpC酶以验证：DDIST。结果三维试验法从58株阴沟肠杆菌中检出持续高产型AmpC酶产株21株,DDIST检出持续高产型AmpC酶产株18株、高诱导型AmpC酶产株6株。结论DDIST是一种能快速有效分析阴沟肠杆菌AmpC酶的方法。     

头孢西丁纸片筛选产AmpC酶革兰阴性杆菌

目的评价头孢西丁纸片筛选产AmpC酶革兰阴性杆菌的可靠性.方法头孢西丁纸片抑菌圈直径＜18mm为可疑产AmpC酶株,采用头孢西丁三维试验作为确证实验.结果头孢西丁纸片检测的57株产AmpC酶株中,有27株为非产酶株假阳性率为49.1%(27/57).阴沟肠杆菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的假阳性分别为60%(15/25)、33.3%(6/18)和50%(7/14).有1株产AmpC酶肺炎克雷伯菌漏检.结论头孢西丁纸片筛选产AmpC酶阴沟肠杆菌和肺炎克雷伯菌特异性差,检测大肠埃希菌产AmpC酶株尚可.