原发性肝细胞癌患者血清中微小RNA-21、微小RNA-122和微小RNA-145的表达及临床意义

目的探讨原发性肝细胞癌(HCC)患者血清中微小RNA-21(miR-21)、微小RNA-122(miR-122)和微小RNA-145(miR-145)的表达及临床意义。方法选择2014年9月至2016年9月铜川矿务局中心医院收治的HCC患者100例为HCC组,并选择体检健康者100例作为对照组。采用实时定量荧光聚合酶链反应检测血清中miR-21、miR-122和miR-145的表达水平,分析miR-21、miR-122和miR-145的表达水平与HCC患者临床特征的关系。结果HCC组患者血清中miR-21、miR-122表达水平显著高于对照组(P<0.05),miR-145表达水平显著低于对照组(P<0.05)。HCC患者血清中miR-21、miR-122和miR-145表达水平与组织分化程度、临床分期、肿瘤大小及肝硬化有显著相关性(P<0.05),与性别、年龄、乙型肝炎病毒抗原、丙型肝炎病毒抗体无显著相关性(P>0.05)。与高分化和中分化程度、临床分期低、肿瘤直径<5 cm和无肝硬化的患者相比,低分化程度、临床分期高、肿瘤直径≥5 cm和有肝硬化的患者血清中miR-21和miR-122表达显著升高,miR-145表达显著降低(P<0.05)。手术后HCC患者血清中miR-21、miR-122表达水平显著低于手术前,miR-145表达水平显著高于手术前(P<0.05)。结论 miR-21和miR-122表达上调及miR-145表达下调可能与HCC的发生、发展有关,联合检测血清中miR-21、miR-122和miR-145表达对HCC的诊断和病情评估具有重要意义。     

老年克罗恩病患者血清微小RNA-215、微小RNA-335表达及与肠道菌群的相关性

目的探究老年克罗恩病患者血清微小RNA-215(miR-215)、微小RNA-335(miR-335)表达及与肠道菌群的相关性。方法选择2019年4月至2021年4月佳木斯市中心医院收治的126例克罗恩病患者为观察组,同期体检健康者100例为对照组,比较两组血清miR-215、miR-335相对表达量及肠道菌群数量,比较缓解期和活动期患者血清miR-215、miR-335相对表达量,采用Spearman检验分析miR-215、miR-335与克罗恩病疾病活动度的相关性,采用Pearson检验分析miR-215、miR-335与克罗恩病患者肠道菌群的相关性。结果血清miR-215、miR-335在观察组中的相对表达量较对照组均显著降低(P<0.05);观察组乳酸杆菌数量和双歧杆菌数量显著少于对照组(P<0.05),观察组肠球菌数量和大肠杆菌数量显著多于对照组(P<0.05);活动期患者血清miR-215相对表达量显著低于缓解期患者(P<0.05),活动期患者血清miR-335相对表达量显著低于缓解期患者(P<0.05);miR-215、miR-335与克罗恩病疾病活动度均呈负相关(P<0.05);miR-215、miR-335与克罗恩病患者乳酸杆菌数量和双歧杆菌数量均呈正相关(P<0.05),miR-215、miR-335与克罗恩病患者肠球菌数量和大肠杆菌数量均呈负相关(P<0.05)。结论老年克罗恩病患者血清miR-215、miR-335呈低表达水平,其水平与疾病活动度及肠道菌群具有一定相关性,这两项指标有望成为克罗恩病诊治的相关指标之一。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中微小RNA-146a的表达

目的 采用生物信息学和分子生物学技术相结合,寻找在系统性红斑狼疮(SLE)中特异性表达的微小RNA,为进一步研究微小RNA在SLE发病机制中的作用打下基础.方法 查找与SLE发病相关的基因,采用微小RNA靶基因预测数据库预测SLE相关基因上的可能微小RNA靶位点,选择其相对应的微小RNA-146a,即hsa-miR-146a,采用实时荧光定量PER方法检测SLE患者与正常人外周血单个核细胞(PBMCs)中微小RNA的表达差异.结果 SLE患者外周血PBMCs中hsa-miR-146a的循环阈值的差值高于正常对照组(4.52±1.18比2.76±1.38,P=0.02),hsa-miR-146a的表达量显著低于正常对照组.结论 SLE患者PBMCs中hsa-miR-146a的表达水平降低,表明hsa-miR-146a在SLE发病机制中可能发挥一定的作用.     

急性缺氧诱导小鼠心肌细胞微小RNA-34a升高和凋亡实验研究

目的:探讨急性缺氧对心肌细胞miR-34a表达、蛋白磷酸酶1核靶向亚基(PNUTS)蛋白和凋亡的影响。方法:原代培养小鼠乳鼠心肌细胞，缺氧24 h造模，使用antimiR-34a纳米颗粒干预。将其随机分为三组：对照组、缺氧组、缺氧+antimiR-34a纳米颗粒组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测miR-34a表达，Western blot检测PNUTS蛋白表达，流式细胞术测凋亡率。结果:与对照组相比，缺氧24 h后miR-34a表达明显增高(P<0.05),PNUTS水平降低(P<0.05),凋亡率升高(P<0.05);与缺氧组相比，缺氧+antimiR-34a纳米颗粒组的miR-34a表达下降(P<0.05),PNUTS水平升高(P<0.05),凋亡率下降(P<0.05)。结论:急性缺氧上调小鼠心肌细胞miR-34a基因表达，下调其下游PNUTS蛋白表达，同时上调凋亡率；antimiR-34a纳米颗粒抑制急性缺氧诱导的小鼠心肌细胞miR-34a升高，PNUTS降低以及细胞凋亡。     

高分辨率MRI联合微小RNA-135a-5p、微小RNA-373对宫颈癌的诊断价值研究

目的探讨高分辨率MRI联合微小RNA-135a-5p（miR-135a-5p）、微小RNA-373（miR-373）对宫颈癌的诊断价值。方法选取2018年9月至2020年9月浙江省台州医院进行宫颈病理检查的患者132例,根据病理诊断结果将其分为宫颈癌89例（恶性组）与宫颈癌前病变43例（良性组）,所有患者均给予高分辨率MRI检查,记录检查参数并分析诊断价值,采用实时荧光定量（RT-PCR）检测两组患者血清miR-135a-5p、miR-373表达水平,分析高分辨率MRI、miR-135a-5p、miR-373表达水平与宫颈癌的关系,以及单项检测和3项联合检测的诊断价值。结果与良性组相比,恶性组miR-135a-5p、miR-373表达水平较高（均P＜0.05）。阳性高危型HPV、鳞癌、低分化、有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴血管间隙浸润及深浸润宫颈癌患者miR-135a-5p、miR-373表达水平均高于阴性高危型HPV、腺癌、高与中分化、无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴血管间隙浸润及无浸润与浅浸润宫颈癌患者,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。ROC曲线分析显示,与高分辨率MRI、miR-135a-5p、miR-373单项检测相比,3项联合检测对宫颈癌的诊断效能较高（P＜0.05）。结论高分辨率MRI可准确显示宫颈癌的征象,miR-135a-5p、miR-373在宫颈癌患者血清中呈异常高表达且与患者临床特征有关,3项联合检测对宫颈癌的诊断价值较高。     

结直肠癌患者血清微小RNA-107和微小RNA-34a的表达情况及其诊断结直肠癌的价值

目的 分析结直肠癌患者血清微小RNA-107(miR-107)和微小RNA-34a(miR-34a)的表达情况及其诊断结直肠癌的价值。方法 选取50例经病理诊断为结直肠癌的患者作为结直肠癌组，50例健康人群作为对照组。应用荧光定量PCR法检测两组受试者血清miR-107和miR-34a的相对表达量。比较不同临床病理特征的结直肠癌患者的血清miR-107和miR-34a相对表达量。采用受试者工作特征曲线分析血清miR-107和miR-34a的相对表达量对结直肠癌的诊断价值。结果 (1)结直肠癌组血清miR-107的相对表达量高于对照组，而miR-34a的相对表达量低于对照组(均P<0.05)。(2)Ⅰ期结直肠癌患者的血清miR-107相对表达量低于Ⅳ期患者，而血清miR-34a的相对表达量高于Ⅳ期患者(均P<0.05);高分化结直肠癌患者的血清miR-34a相对表达量高于低分化患者(P<0.05);有淋巴结转移的结直肠癌患者的血清miR-34a相对表达量低于无淋巴结转移患者(P<0.05)。结直肠癌患者的血清miR-107相对表达量与TNM分期呈正相关，血清miR...     

多发性骨髓瘤组织微小RNA-19表达及其临床意义

目的检测微小RNA-19(miRNA-19)在多发性骨髓瘤(MM)病人骨髓单个核细胞(BMMNC)中表达水平,探讨miRNA-19表达与MM发生、发展及预后的关系。方法收集43例MM病人及20例正常对照者的骨髓标本,采用D-S分期法对MM病人进行临床分期,Ficoll法获取BMMNC,实时荧光定量PCR方法检测BMMNC中miRNA-19表达,同步采集外周血,检测β2微球蛋白(β2-MG)的水平。结果 MM病人BMMNC中miRNA-19表达水平明显高于正常对照组,复发、难治组MM病人miRNA-19表达水平明显高于初治组MM病人,差异有显著性(t=5.82,P<0.05)。MM病人化疗后miRNA-19表达水平较化疗前明显降低(t=2.61,P<0.05),其中以化疗有效组降低最为明显(t=3.83,P<0.05),无效进展组miRNA-19表达水平化疗前后无明显改变。D-S分期Ⅲ期病人miRNA-19表达水平明显高于Ⅱ期病人(t=3.54,P<0.05)。β2-MG≥4.0mg/L病人miRNA-19表达水平较β2-MG<4.0mg/L组明显升高(t=4.09,P<0.05)。结论 miRNA-19过表达在MM的发病中发挥着重要作用,miRNA-19过表达与MM肿瘤细胞的增殖、化疗效果和疾病预后有密切关系;miRNA-19可能作为判断MM病人预后不良指标之一。     

振幅整合脑电图评分联合微小RNA-422a检测晚期早产儿脑损伤情况的临床研究

目的 分析振幅整合脑电图（amplitude-integrated electroencephalography,a EEG）评分联合微小RNA(mi RNA,mi R)-422a检测晚期早产儿脑损伤的效果。方法 回顾性分析2020年1月—2021年7月赣州市人民医院南院收治的100例晚期早产儿的临床资料,按照脑损伤情况将所有患儿分为脑损伤组45例与无脑损伤组55例,统计对比2组a EEG评分、miR-422a与新生儿20项行为神经评分法（neonatal behavioral neuroiogical assessment,NBNA）评分的差异;以Pearson相关性分析法分析a EEG评分、mi R-422a与NBNA评分间的相关性;另绘制受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve,ROC）,分析a EEG评分、mi R-422a二者单独或联合检测诊断晚期早产儿脑损伤的效能。结果 脑损伤组的a EEG评分为（7.04±1.21）分、mi R-422a为（1.69±0.45）分、NBNA评分为（30.22±2.09）分,低于对照...     

基于Wnt通路下调微小RNA-130a对颅脑损伤模型大鼠神经功能的修复作用

目的 探究基于Wnt通路下调微小RNA(miRNA)-130a对颅脑损伤模型大鼠神经功能的修复作用.方法 将30只SD健康雄性大鼠,随机分为正常组(10只)和干预组(20只),正常组不给予处理,对干预组大鼠采用Feeney自由落体硬膜外撞击法建立颅脑损伤大鼠模型,共有19只大鼠建模成功.将建模成功的大鼠随机分为模型组(9只)和下调miRNA-130a组(10只).下调miRNA-130a组大鼠每日给予经尾静脉注射单唾液酸四己糖神经节甘酯钠注射液,正常组、模型组大鼠每日给予腹腔注射同等剂量的生理盐水.3组大鼠均连续注射7 d.干预7 d后,比较3组大鼠海马组织Wnt3a、β-联蛋白(β-catenin)的mRNA及miRNA-130a相对表达水平;比较3组大鼠的血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)水平.结果 与正常组相比,模型组、下调miRNA-130a组海马组织Wnt3a mRNA、β-catenin mRNA相对表达水平、血清丙二醛、IL-6、TNF-α、MCP-1、NSE水平均升高,血清SOD、BDNF、NGF水平降低(均P<0.05);与模型组相比,下调miRNA-130 a组海马组织Wnt3 a mRNA、β-catenin mRNA及miRNA-130 a相对表达水平、血清丙二醛、IL-6、TNF-α、MCP-1、NSE水平均降低,血清SOD、BDNF、NGF水平升高(均P<0.05).结论 基于Wnt通路下调miRNA-130 a表达水平对颅脑损伤模型大鼠进行干预,能够降低炎症反应和氧化应激水平,减轻脑组织损伤,促进神经功能修复.     

依普利酮通过靶向微小RNA-192和微小RNA-29a/b/c 减轻糖尿病肾病模型大鼠肾损伤机制研究

目的:探讨依普利酮通过靶向微小RNA(miR)-192和miR-29a/b/c减轻糖尿病肾病(DN)大鼠肾损伤的机制。方法:将30只成年雄性SD大鼠分为对照组、模型组、依普利酮组,每组10只。通过实时定量PCR(RT-qPCR)分析各实验组大鼠肾脏组织中miR-192和miR-29a/b/c的mRNA表达水平。使用血糖仪检测大鼠血糖,并对大鼠整体和肾脏组织样本进行称重。通过相关商用试剂盒检测大鼠尿蛋白、肌酐和血尿素氮的浓度。通过蛋白印迹分析大鼠肾脏组织中转化生长因子β₁(TGF-β₁)、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Smad家族蛋白3(Smad3)的蛋白表达。通过免疫组化分析大鼠肾脏切片中TGF-β₁、Smad3和α-SMA的表达。结果:模型组miR-29a、miR-29b、miR-29c的mRNA表达水平低于对照组,miR-192的mRNA表达水平高于对照组(均P<0.05)。依普利酮组miR-29a、miR-29b、miR-29c的mRNA表达水平高于模型组,miR-192的mRNA...     

行维持性血液透析的尿毒症患者发生血管钙化与外周血微小RNA-21、微小RNA-155-5p表达的关系

目的 探讨行维持性血液透析(MHD)的尿毒症患者发生血管钙化与外周血微小RNA-21(miR-21)、微小RNA-155-5p(miR-155-5p)表达的关系。方法 选择100例行MHD的尿毒症患者,根据腹主动脉钙化评分(AACS)将其分为无血管钙化组43例和血管钙化组57例。检测两组患者代谢和炎症指标水平,外周血miR-21、miR-155-5p的相对表达水平,外周血单个核细胞(PBMC)中调节性T淋巴细胞(Treg)、辅助性T淋巴细胞(Th17)水平,以及Treg、Th17相关细胞因子水平。分析AACS与miR-21、miR-155-5p及代谢指标的相关性,以及miR-21、miR-155-5p与Th17/Treg比值的相关性。结果 血管钙化组患者血清磷、钙、骨形成蛋白2(BMP-2)、全段甲状旁腺激素(iPTH)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平均高于无血管钙化组(均P<0.05)。与无血管钙化组比较,血管钙化组患者外周血miR-155-5p相对表达水平、PBMC中Th17水平、Th17/Treg比值、血清白细胞介素(IL)-17和IL-6水平均升高...     

血清微小RNA-10a与IL-35水平评估脓毒症诱导急性肾损伤患者的预后价值

【】目的：通过分析脓毒症诱导急性肾损伤(AKI)患者血清微小RNA-10a (miRNA-10a)与白细胞介素-35(IL-35)水平的动态变化,并评估两种指标检测对患者病情程度及短期预后结局的预测价值。方法：选择我院ICU治疗的90例脓毒症患者,按有无伴发AKI分为：观察组,共42例,脓毒症诱导AKI;对照组48例,脓毒症未诱导AKI发生。在治疗第1、7、14、28天分别测定并比较两组外周血清miRNA-10a、IL-35、降钙素原(PCT)、肌酐(Scr)、肾损伤分子1(KIM-1)、胱抑素C(Cys-C)、序贯器官衰竭评分(SOFA)指标。采用Pearson相关分析分别评估血清miRNA-10a、IL-35与PCT、Scr、KIM-1、Cys-C及SOFA评分间的相关性。随访3个月,根据预后结局分为：生存组与死亡组,比较两组血清miRNA-10a及IL-35水平。应用多元Logistic回归分析上述各临床指标与生存率的相关性。绘制受试者工作特征曲线(ROC)评估血清miRNA-10a联合IL-35水平对脓毒症诱导AKI患者短期预后的判断价值。结果：对照组治疗前后血清miRNA-10a、IL-35、PCT、Scr、KIM-1、Cys-C及SOFA评分差异无统计学意义(P均>0.05),观察组miRNA-10a、IL-35、PCT、Scr、KIM-1、Cys-C及SOFA评分随治疗时间而逐渐降低(P均<0.05),但同一时间点观察组各指标均大于对照组(P均<0.05)。Pearson相关分析显示脓毒症诱导AKI患者血清miRNA-10a与血清PCT、Scr、KIM-1、Cys-C及SOFA评分正相关(r分别为0.818、0.725、0.571,P均<0.05),血清IL-35与上述各指标呈正相关(r分别为0.865、0.858、0.564,P均<0.05)。多元Logistic回归分析显示,血清miRNA-10a与IL-35为脓毒症诱导AKI患者预后的危险性因素(OR=3.157, P=0.016、OR=2.426, P=0.027)。随访3月,生存组的血清miRNA-155与IL-35显著低于死亡组(P均<0.05)。ROC曲线显示,血清miRNA-10a截断值为3.15及IL-35截断值为355pg/mL,预测脓毒症患者预后不良发生的AUC为0.852(P=0.033),灵敏度为85.6%(95%CI: 0.810～0.924),特异度为87.9%(95%CI: 0.826～0.941)。结论 血清miRNA-10a及IL-35水平检测能较好地预测脓毒症诱导AKI患者的病情及短期预后。     

人类微小RNA-208a的靶基因预测及生物学过程和信号通路的生物信息学分析

目的 采用生物信息学技术预测人类微小RNA-208a(hsa-miRNA-208a)靶基因及分析其可能参与的生物学过程及信号通路.方法 应用miRbase数据库和UCSC Genome Browser分析工具获取hsa-miRNA-208a的染色体定位、碱基序列和物种保守性等基本信息,利用miRanda、miRDB、TargetScan和miRwalk进行靶基因预测,采用miRwalk网站对靶基因取交集,合并有文献支持和经实验证实的靶基因作为基因集,对基因集进行功能富集分析(GO分析)和信号通路分析.结果 hsa-miRNA-208a序列在各物种间高度保守.对TargetScan、miRDB、miRanda和miRwalk预测的靶基因进行交集后共得到16个靶基因(CPEB2、CSNK2A2、DLD、MTF2、FBXO28、LEP、SMAD4、NLK、GPR88、VPS13D、ZNF215、CHD9、SLC7A5、C19orf44、SLC45A3、MAP4K4),miRwalk、DIANA Lab TarBase检索到已验证的靶基因分别为12个(CASP3、MRGPRX3、FPRL1、MED13、IL10、GATA4、HSH2D、MYH6、MYH7、TNNI3、CDKN1A、PAK3)和3个(SOX6、MTM1、TAB3).GO分析结果显示靶基因富集于心室肌组织发育、心室形态发育、心腔发育、心肌发育、心脏发育以及细胞发育等生物学过程(P＜0.05);信号通路分析结果显示靶基因富集于黏附连接、紧密连接、心肌收缩、Wnt信号通路以及病毒性心肌炎、肥厚型心肌病和扩张型心肌病的相关信号通路中(P＜0.05).结论 hsa-miRNA-208a参与心脏生长发育的生物学过程,与心肌疾病的发生密切相关.