磷脂酶A_2抑制剂的研究──粉防己碱对U937细胞磷脂酶A_2和前列腺素生成的影响

探讨粉防己碱对培养的Ｕ９３７细胞中花生四烯酸瀑布系统产生前列腺素的影响。以Ｕ９３７细胞株为模型,加入内毒素（ＬＰＳ）处理,以及粉防己碱预处理后再加入ＬＰＳ处理,观察Ⅱ－型磷脂酶Ａ２（Ⅱ—ＰＬＡ２）、胞液型磷脂酶Ａ２－（ｃＰＬＡ２）和环氧合酶－２（ＣＯＸ—２）以及前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）的变化。结果发现ＬＰＳ可刺激Ｕ９３７细胞中Ⅱ－ＰＬＡ２、ｃＰＬＡ２和ＣＯＸ—２以及ＰＧＥ２的产生增加,粉防己碱则可不同程度地抑制它们的增高。粉防己碱具有降低内毒素引发的Ⅱ—ＰＬＡ２、ｃＰＬＡ２和ＣＯＸ—２以及ＰＧＥ２产生的作用。     

粉防己碱对大鼠缺氧性肺动脉高压磷脂酶A2及前列腺素的影响

目的：采用急性缺氧制备大鼠肺动脉高压模型，观察了粉防己碱（Ｔｅｔ）对缺氧性肺动脉高压的影响以及与前列腺素类物质的关系。方法：实验大鼠分为对照组、急性缺氧组、急性缺氧＋Ｔｅｔ（２００ｍｇ．ｋｇ＾－１ｉｖ）组，观察了Ｔｅｔ对平均肺动脉压（ｍＰａＰ），磷脂酶Ａ２（ＰＬ－Ａ２），血栓素ＢＧ２（ＴＸＢ２），前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）变化，以及Ｔｅｔ对平均肺动脉压（ｍＰａＰ），磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２），血栓素Ｂ２     

粉防己碱在急性缺血性肾损伤中的作用及与磷酯酶A2的关系

采用双肾完全缺血４５大鼠模型，观察粉防己碱在急性缺血性肾损伤中的保护性作用及其与磷脂酶Ａ２的关系。结果表明：肾损伤治疗组血清磷脂酶Ａ２、肌酐尿素氮水平均明显低于缺血肾损伤组，肾小球滤过率及肾血浆血流量则明显高于缺血肾损伤组；     

生物活性蛋白钙调素与磷脂酶A2的高效毛细管电泳纯度分析

采用高效毛细管电泳对猪脑中提取的钙调素与猪胰腺中提取的磷脂酶Ａ２进行分离分析。以Ｂｉｏ－Ｒａｄ２０ｃｍ×２５μｍｃｏａｔｅｄ石英毛细管为分离柱，ＵＶ２００ｎｍ为检测波长，选择０．０５ｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液（ｐＨ３．５）为钙调素电泳分离缓冲液体系，０．０５ｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液（ｐＨ２．５，内含０．１％ＨＰＭＣ）为磷脂酶Ａ２电泳分离缓冲液体系，对多步分离纯化获得的钙调素与磷脂酶Ａ２进行纯度分析，同时为进一步研究钙调素与磷脂酶Ａ２的生物活性提供了有效的检测手段。     

蛇毒磷脂酶A2的两种测定方法比较

蛇毒富含磷脂酶Ａ２，磷脂酶Ａ２具有许多重要的生理功用和广泛的药理学效应。测定磷脂酶Ａ２的活性由于采用的测定方法不同，差别很大，本文用酸碱滴定和电位滴定方法对长白山白眉蝮蛇毒磷脂酶Ａ２进行测定，并对两种方法的准确度、重复性进行了比较。１　材料与方法１．１　材料：长白山白眉蝮蛇毒由本室提供；ＤＩ－２型自动电位滴定仪为上海第二分析仪器厂产品；所用化学试剂均为国产分析纯。１．２　方法１．２．１　底物溶液的配制：称取卵磷脂５００ｍｇ，溶于１０ｍｌ乙醚中，加少量水混匀。５０℃保温２０ｍｉｎ，冷至室温后加入１…     

磷脂酶A2激活倡导中性粒细胞凋亡

目的 探讨磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）活性的变化对中性粒细胞凋亡的影响。方法 采用光镜、电镜、ＤＮＡ电泳和ＦＡＣＳ等方法，分析了磷脂酶Ａ２内外源性激活剂和掏剂对大鼠中性粒细胞凋亡影响。结果 脂多糖（ＬＰＳ１μｇ／ｍｌ）和钙离子载体（Ａ２３１８７１μｍｏｌ／Ｌ）等ＰＬＡ２激动剂分别在共同培养６ｈ和１２ｈ之内促进中性粒细胞凋亡，而ＰＬＡ２阻断剂４－溴苯甲酰溴甲烷（ｐ－ＢＰＢ０．０１～１ｍｍｏｌ／Ｌ）可明显     

Bcl—2基因增强表达对TNF诱导U937细胞凋亡的效应

目的：探讨Ｂｃｌ－２基因增强表达对肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）诱导的Ｕ９３７细胞凋亡的生物学效应。方法：用磷酸钙沉淀法将Ｂｃｌ－２基因转染到Ｕ９３７细胞，用Ｇ４１８筛选稳定转染子，用不同剂量ＴＮＦ处理后观察未转染细胞的存活率。结果：用Ｂｃｌ－２稳定转洒的Ｕ９３７细胞经ＴＮＦ处理，存活率明显高于未转染细胞，结论：Ｂｃｌ－２基因增强表达阻抑ＴＮＦ诱导的Ｕ９３７细胞凋亡。     

人胰磷脂酶A2纯化及单克隆抗体的制备

为建立磷脂酶Ａ２免疫检测法，纯化ＰＩ２Ａ２，将胰组织匀浆加热、离心去除沉积，上清过ＣＭ－ｓｅｐｈａｄｅｘＣ－２５ｓｙｇｇ，ｎｈ ｗｙｓ ｅ ＰＬＡ２的部分，纯化ＰＬＡ２样品经ＳＤＳ－ＦＡＤＥ电 一条区带。纯分的ＰＬＡ２作为抗原免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，抗体产生后与骨髓瘤细胞融合，在ＰＧＥ－４０００促融下，融合为杂交瘤细胞株经ＥＬＩＳＡ法鉴定筛选出分泌抗ＰＬＡ２的细胞株，扩大培养后将杂交瘤细胞注射小鼠腹     

Bcl-2基因增强表达对TNF诱导U937细胞凋亡的效应

目的：探讨Ｂｃｌ－２基因增强表达对肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）诱导的Ｕ９３７细胞凋亡的生物学效应。方法：用磷酸钙沉淀法将Ｂｃｌ－２基因转染到Ｕ９３７细胞，用Ｇ４１８筛选稳定转染子，用不同剂量ＴＮＦ处理后观察转染与未转染细胞的存活率。结果：用Ｂｃｌ－２稳定转染的Ｕ９３７细胞经ＴＮＦ处理，存活率明显高于未转染细胞。结论：Ｂｃｌ－２基因增强表达阻抑ＴＮＦ诱导的Ｕ９３７细胞凋亡     

肿瘤坏死因子诱导的U937细胞凋亡与Bcl-2基因表达的关系

目的 探讨肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）诱导的Ｕ９３７细胞凋亡与Ｂｃｌ－２基因表达的关系。方法 首先用ＴＮＦ处理Ｕ９３７细胞,提取小片段ＤＮＡ进行ＤＮＡ断裂分析,并通过ＲＴ－ＰＣＲ检测细胞的Ｂｃｌ－２基因ｍＲＮＡ表达,继而以磷酸钙沉淀法将Ｂｃｌ－２基因转染到Ｕ９３７细胞,用Ｇ４１８筛稳定转染子,然后用不同剂量ＴＮＦ处理后观察转染与未转染细胞的存活率。结果 ＴＮＦ诱导的Ｕ９３７细胞Ｂｃｌ－２基因的ｍＲＮＡ表     

磷脂酶A2及其对机体的病理生理作用

综述了磷脂酶Ａ２的来源，分布，生化特征及其调节因素，着重论述了磷脂酶Ａ２对多系统，多组织的病理生理作用，并对其抑制剂进行了分类，归纳。     

磷脂酶A2的活力测定与临床初步应用

磷脂酶Ａ２（ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＡ２，ＰＬＡ２）是能催化和水解膜磷脂的磷脂酶中的一种，几乎存在于所有的细胞中，在血清、胰液、精浆、唾液、滑膜液中都可测得。酶蛋白由１２５个氨基酸的单一多肽链组成，分子量１２０００～１５０００，等电点是９．２，最适...     

哮喘豚鼠磷脂酶A2的变化及其抑制剂的作用

目的：探讨磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）在哮喘和气道高反应发生中的作用及机理。方法：采用卵蛋白致敏豚鼠哮模型，观察支气管泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中ＰＬＡ２活性变化及气管平滑肌条最大收缩反应性（Ｅ－ｍａｘ）的关系，以及ＢＡＬＦ中细胞数、ＬＰＯ、蛋白质含量的变化及ＰＬＡ２抑制剂的防治作用，结果：哮组ＢＡＬＦ中ＰＬＡ２活性及Ｅｍａｘ显著增高，ＢＡＬＦ中细胞计娄航ＬＰＯ、蛋白质含量也显著升高；ＢＡＬＦ中ＰＬＡ２活性与     

具强杀菌活性的兔Ⅱ型磷脂酶A2互补DNA克隆及其顺序确定的 …

目的：确定具强杀菌活性的兔Ⅱ型磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）ｃＤＮＡ和蛋白质的一级结构，了解其杀菌功能与蛋白质一级结构的关系。方法：用ＰＣＲ方法从兔骨髓ｃＤＮＡ库中克隆出Ⅱ型磷脂酶Ａ２ｃＤＮＡ并确定ＤＮＡ顺序，推断出这的蛋白质一级结构；并与其它一些动物ＰＬＡ２的结构进行比较。结果：成功获得了该磷脂酶Ａ２和ｃＤＮＡ和蛋白质一级结构。它是目前上百种已知蛋白一级结构的磷脂酶Ａ２中碱性最强的蛋白，氨基酸组成中碱性     

哺乳生物血小板型磷脂酶A2分子的进化

目的：了解具杀菌活性的哺乳生物血小板型磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）分子进化的特点。方法：将所有已知哺乳生物的血小板型和胰腺型ＰＬＡ２的ｃＤＮＡ和基因资料进行收集并加以统计和分析。结果：哺乳生物血小板型ＰＬＡ２基因突变的频率较胰腺型ＰＬＡ２高，碱基取代中非同义取代数高于同义取代数。血小板型ＰＬＡ２的蛋白质结构中可形成对酸不稳定的肽键的氨基酸明显较少，而易被发酵产物乙酰基不可逆化修饰的精氨酸明显高于胰腺型。     

分泌型磷脂酶A2 cDNA与载体pRc／CMV定向克隆及表达

为了构建分泌型磷脂酶Ａ２（ｓｅｃｒｅｔａｒｙ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＡ２,ｓＰＬＡ２）ｃＤＮＡ的有效表达系统,该文从无效表达的重组体ｓＰＬ０Ａ２－ｐＧＥＭ７中制备ｓＰＬＡ２片段,将其插入中间载体Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ＢＳＳＫＲ的ＥｃｏＲ１位点,利用ｓＰＬＡ２－ＢＳＳＫ重组体转化ＤＨ１感染态细胞,筛选ａｎｔｉｓｅｎｓｅ ｓＰＬＡ２－ＢＳＳＫ重组体,应用Ｘｂａｌ、Ｈｉｎｇｄ３双酶消化该重组体并回收     

多脏器衰竭患儿血清磷脂酶A2及肿瘤坏死因子水平的研究

采用ＥＬＩＳＡ法检测了脏器衰竭患儿３６例，健康儿２０例血清磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）及肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）含量，并监测病儿脏器功能及动脑海因气，探讨血清ＰＬＡ２及ＴＮＦ－α在多脏器衰竭（ＭＯＦ）发生、发展中的作用及意义。结果：血清ＰＬＡ２及ＴＮＦ－α含量在ＭＯＦ组明显高于单衰组，死亡组显著高于治愈组；ＰＬＡ２与ＴＦＮ－α、动脉血氧分压呈要关关系。提示：ＰＬＡ２及ＴＮＦ－α参与了ＭＯＦ病理过程，动     

外源性胰磷脂酶A2对大鼠中枢作用的研究

目的 探讨胰磷脂酶Ａ２（ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ Ａ２,ＰＬＡ２）在胰性脑损害发生发展中的作用。方法 对ＳＤ大鼠进行ＰＬＡ２血管内及脑内注射,应用苏木精－伊红染色、髓鞘特染（Ｋｌｕｒｅｒ ａｎｄ ｂａｒｒｅｒａ,ＫＢ法）及电镜检查研究观察ＰＬＡ２对动物脑脊髓的作用。结果 ①以每１００ｇ体重８０Ｕ ＰＬＡ２经血管内注射后,６ｈ脑脊髓即见局灶性脱鞘,板层结构局部紊乱及神经元固缩等;２４ｈ病变达高峰,     

胰磷脂酶A2对血脑屏障作用的实验研究

研究了胰磷脂酶Ａ２对大鼠血脑屏障通透性的影响，同时用蛇毒ＰＬＡ２作比较；用伊文氏蓝示踪，肉眼和切片观察脑组织ＥＢ蓝染情况，作为ＢＢＢ通透性增高的一般指示剂。结果表明，当血中ＰＬＡ２达一定浓度、作用一定时间后动物脑组织出现ＥＢ颗粒，且其密度和范围随该酶浓度的增加而不断扩大、加深，对照组动物脑组织则未见蓝染；同样浓度的蛇毒ＰＬＡ２作用强于胰ＰＬＡ２。     

腰椎间盘突出症与磷脂酶A2的关系

通过对腰椎间盘突出症与磷脂酶Ａ２（ｐＬＡ２）的关系，旨在了解腰椎间盘突出症的可能病因。以２０例腰椎间盘突出症患者为实验组，男１３例，女７例；平均年龄（４８．２±１２．７）岁，并采用１１点数字评分法（李仲廉．临床痛疼治疗学．天津：科学技术出版社，１９９...