固定液种类和固定时间对免疫组化染色的石蜡切片中抗原检测效果的影响

采用３种不同的固定液（１０％中性缓冲福尔马林、乙醇、Ｂ－５固定液）及固定时间，分别对３种含有不同抗原的组织进行固定，应用石蜡切片免疫组化染色比较他们的结果，发现：固定时间以６～１２ｈ最佳；而检测不同抗原应选择不同的固定液，检测Ｂ淋巴细胞Ｌ２６抗原，应首选Ｂ－５固定液，检测Ｖｉｍｅｎｔｉｎ及ＥＨＦＶ抗原以１０％ＮＢＦ最佳。     

不同固定液对大鼠肝脏组织石蜡切片质量的影响

目的 探讨不同固定液对大鼠肝脏组织石蜡切片HE染色效果.方法 应用SD大鼠肝脏组织分别在动物空腹和空腹条件下,选择三种常规的固定液：体积分数10％甲醛固定液、Bouin＇s固定液和改良Davidson＇s固定液,对肝脏组织进行固定、石蜡包埋、切片和HE染色,观察动物空腹与未空腹条件下组织固定对切片质量的影响,以及不同固定液对肝脏组织切片质量的影响.结果 在未空腹的条件下,肝脏组织结构显示不清晰,呈水样变性的形态改变;Bouin＇s固定液和改良Davidson＇s固定液固定的组织结构更清晰,但是切片色泽不如体积分数10％甲醛固定液的鲜亮.结论 大鼠是否处于空腹状态对肝脏组织结构影响很大,三种固定方法对大鼠肝脏组织切片质量影响差异不大.     

组织检材的PCR性别鉴定研究

作者用引物Ｙ３、Ｙ４通过ＰＣＲ技术对微量陈旧的组织检材进行了扩增，扩增的靶序列位于Ｙ染色体ＤＮＡ特异３．４Ｋｂ重复序列中，产物为４４６ｐｂ。检材是新鲜组织、甲醛固定组织、石蜡包埋组织和ＨＥ染色切片组织。检材的保存时间从凡小时到五年。结果表明：新鲜组织，１０％中性缓冲甲醛固定一年以下的组织和石蜡包埋３年以下的组织均可做为ＰＣＲ性别鉴定的良好检材。     

组织检材的PCR性别鉴定研究

作者用引物Ｙ３、Ｙ４通过ＰＣＲ技术对微量陈旧的组织检材进行了扩增，扩增的靶序列位于Ｙ染色体ＤＮＡ特异３．４Ｋｂ重复序列中，产物为４４６ｐｂ。检材是新鲜组织、甲醛固定组织、石蜡包埋组织和ＨＥ染色切片组织。检材的保存时间从几小时到五年。结果表明：新鲜组织，１０％中性缓冲甲醛固定一年以下的组织和石蜡包埋３年以下的组织均可做为ＰＣＲ性别鉴定的良好检材。     

三种固定液对眼球组织固定效果的比较研究

目的从甲醛-戊二醛混合液、Davidoson液和10％福尔马林三种固定液中优选一种,用于对眼球组织的固定。方法取SD大鼠和新西兰兔的双侧眼球,分别用三种固定液固定,然后做成5μm厚的切片并HE染色,观察各自的组织结构及染色效果。结果用甲醛一戊二醛混合液固定的眼球组织,大鼠眼球切片厚度5μm,而新西兰兔切片时厚度8μm,才能切出完整的切片;Davidoson液和10％福尔马林固定的眼球,切片厚度5μm即可。HE染色后,10％福尔马林固定的眼球组织结构不完整,而Davidoson液固定后的眼球,结构清晰、组织完整。结论Davidoson液对大鼠和新西兰兔的眼球固定效果均佳,甲醛-戊二醛混合液对大鼠眼球固定效果也较佳。     

豫医无毛小鼠主要免疫器官组织学观察

目的：观察不同月龄豫医无毛小鼠主要免疫器官的组织结构。方法：取１月龄，２月龄，８月龄３个年龄组，颈椎脱臼处死，剖取主要免疫器官，１０％甲醛固定，行石蜡切片，ＨＥ染色。结果；１月龄，２月龄，８月龄豫医无毛小鼠的脾脏，腋下淋巴结正常，各组无明显差别。８月龄肠道未见明显的淋巴小结。     

两种固定液对肺组织固定效果的比较

目的:比较Bouin和10%甲醛两种固定液对正常肺组织的固定效果。方法:取正常小鼠肺组织,分别用Bouin和10%甲醛两种固定液,按料液比1∶20固定24 h,常规制备肺组织石蜡切片,HE染色;光镜下分别在100倍和400倍比较两种切片的组织结构和染色情况并统计高倍镜下清楚细胞数;应用t检验进行统计分析。结果:Bouin固定的肺组织在低倍镜下见解剖结构无分离,组织着色均匀,细胞内外结构清晰,高倍镜下支气管上皮细胞核与质界限分明,Ⅰ型、Ⅱ型肺泡细胞清晰且易于辨别;10%甲醛固定的肺组织切片染色后,在低倍镜下观察效果与Bouin固定的肺组织切片无显著差异,高倍镜下支气管上皮细胞核与质界限不清,Ⅰ型、Ⅱ型肺泡细胞结构模糊,经t检验两者差异有统计学意义(P<0.001)。结论:Bouin固定的肺组织其HE染色效果较好,为肺组织切片的制备提供参考。     

一种优化的大鼠视网膜组织石蜡切片制作方法

目的针对大鼠视网膜石蜡切片过程中易出现标本脱离及断裂分离的问题,寻找并优化大鼠视网膜石蜡切片的制作方法并评估效果．方法分别用10％多聚甲醛固定液;4％多聚甲醛固定液;单独固定及使用4％多聚甲醛、95％酒精、冰醋酸混合固定液（FAA固定液）;预处理后再使用10％多聚甲醛分别固定等4种方法对大鼠视网膜组织进行固定,HE染色后显微镜下进行观察．结果单独使用10％多聚甲醛以及4％多聚甲醛固定均出现视网膜脱离及各层结构断裂分离现象,但经FAA固定液预处理的视网膜切片HE染色后颜色鲜明均匀,虽部分区域视网膜偶有脱离,但不易脱片,各层结构完整,未出现断裂分离．结论经FAA固定液及多聚甲醛处理过的视网膜石蜡切片固定效果明显优于单独使用多聚甲醛,甲醛浓度对HE染色结果无明显影响．     

去氧核糖核酸Feulgen染色方法的改进

Ｆｅｕｌｇｅｎ染色是经典显示去氧核糖核酸的方法 ,该法要求用Ｃａｒｎａｙ氏液固定的新鲜组织效果最好 ,洒精———甲醛液次之 ,单纯甲醛固定欠佳 ,效果不满意。我们在给研究生作“心肌缺血再灌注的保护用”课题时 ,在甲醛固定的组织作Ｆｅｕｌｇｅｎ染色过程中 ,增加了Ｃａｒｎａｙ氏液再固定程序 ,提高了反应效果 ,结果比较满意。改进后用 0 .0 5 %光绿作对比染色效果极佳 ,现将改进方法介绍如下。1　材料与方法1.1　取材料片小白鼠心肌组织 8块 ,用 10 %甲醛固定 ,石蜡包埋 ,常规制片 ,切片 4 μｍ ,每块切片 5张 ,1张作Ｈ·Ｅ染色 ,2…     

固定液种类和固定时间对免疫组化染色的石蜡切片中抗原检测…

采用３种不同的固定液及固定时间，分别对３种含有不同抗原的组织进行固定，应用石蜡切片免疫组化染色比较他们的结果。发现：固定时间以６－１２ｈ最佳。而检测不同抗原应选择不同的固定液，检测Ｂ淋巴细胞Ｌ２６抗原，应首选Ｂ－５固定液，检测Ｖｉｍｅｎｔｉｎ及ＥＨＦＶ抗原以１０％ＮＢＦ最佳。     

周围神经一次性延长的病理学变化

目的：观察大鼠坐骨神经一次性离体延长的病理变化。方法；采用组织学的HE染色、Luxalfastblue及美蓝髓鞘染色法，免疫组织化学的s-100雪旺细胞染色和SMI-31轴索染色。结果：保持原长度的神经纤维走行迂曲；10％延长后，神经纤维走行顺直，郎飞结结构清晰，无轴索及髓鞘的断裂；20％延长后，可见神经纤维在郎飞结处断开及轴索在髓鞘内不连续的组织像。结论：大鼠坐骨神经一次性延长达20％，将出现神经轴索的急性断裂，神经被牵拉后受损的顺序首先为轴索，髓鞘的破坏在其后。     

骨髓间充质干细胞治疗皮肤深Ⅱ度烧伤的实验研究

目的：观察骨髓间充质干细胞（MSCs）对皮肤深Ⅱ度烧伤的疗效。 方法：体外培养扩增雄性豚鼠骨髓MSCs,以2×10⁶•mL^-1、2×10⁷•mL^-1细胞密度,移植给皮肤深Ⅱ度烧伤的雌性受体鼠创面,对创面的愈合面积进行计算,用HE、Masson染色进行组织形态学观察。 结果：治疗组的皮肤创面修复较好,HE染色结果显示治疗组的真皮与表皮结构清晰,表皮各层清楚,而对照组的皮肤创面细胞各层次不清楚。Masson染色结果显示治疗组皮肤创面新生被覆上皮内,胶原纤维排列较整齐;对照组胶原增粗、排列不规则。2×10⁶•mL^-1、2×10⁷•mL^-1不同细胞密度的治疗侧之间比较差异无显著性。 结论：骨髓MSCs可促进皮肤深Ⅱ度烧伤的愈合,对皮肤深Ⅱ度烧伤具有明显的疗效。     

新生血管性青光眼视乳头筛板结构的研究

采用正常死者眼球和新生血管性青光眼的筛板组织, 研究高眼压对视乳头筛板和结缔组织的作用． 正常眼球１２ 只, 新生血管性青光眼眼球１２ 只, 摘除眼球后用１０ ％ 福尔马林溶液固定, 切取视乳头组织约２ ｍ ｍ ×２ ｍｍ , 石蜡包埋, 苏木素－ 伊红染色, 免疫细胞化学 Ａ Ｂ Ｃ 法染色． 结果： 正常人筛板的横纵切面具有特定形态, 新生血管性青光眼筛板孔板变形, 筛孔周围结缔组织断裂, 丧失了筛板结构． 结果表明：高眼压下筛孔板和结缔组织的改变, 造成对筛板孔神经纤维的挤压, 阻滞了神经纤维轴浆的运输, 导致神经纤维功能上的损害和相应的视野缺损．     

具有良好细胞相容性的脱细胞血管支架的制备

目的制备具有良好细胞相容性的脱细胞血管支架材料，为构建组织工程血管奠定基础。方法用含有脱氧胆酸钠、SDS、EDTA的低渗液和等渗液以及核酸酶对猪的胸主动脉进行脱细胞处理．使用HE、Movat五色法、DAPI染色及电镜观察处理结果。以MTT法分析脱细胞溶液的细胞毒性，通过种植内皮和平滑肌细胞，分析支架的细胞相容性。结果上述方法使用的脱细胞溶液细胞毒性低；经该法处理后，血管的细胞成分完全去除，胶原纤维、弹性纤维、糖蛋白等主要基质成分充分保留，组织结构完整，内皮细胞和平滑肌细胞可以在上面黏附生长，形成完整的细胞层。结论利用脱氧胆酸钠、SDS、EDTA和核酸酶联合消化的方法．可制备出基质成分充分保留、细胞相容性优良的脱细胞血管支架．适于构建组织工程血管。     

卡氏肺孢子虫病动物模型建立和虫体形态观察

采用醋酸可的松诱发Wistar大鼠、BALB/C小鼠和家兔感染卡氏肺孢子虫,比较不同动物对卡氏肺孢子虫的易感性。经姬氏染色法、哥氏银染色法等染色后进行虫体形态观察,结果显示,Wistar大鼠卡氏肺孢子虫惑染率最高(100%),虫体量多。不同给药方式对Wistar大鼠卡氏肺孢子虫的感染率无显著性意义。各种染色法可显示肺组织印片或切片的滋养体或包囊。姬氏染色法是显示印片中虫体的可靠方法。改良哥氏银染色法和快速焦油紫法是显示肺组织石蜡切片中包囊的可靠方法。伦氏荧光桃红——肼黄法能良好地显示切片中的滋养体和囊内小体。     

诊断早期心肌缺血三种组织学染色方法的比较

目的 探讨检验早期心肌缺血的最佳组织学染色方法，方法 对45例经尸体解剖病理诊断为冠心病的心肌组织分别进行HE染色，Heidenhain染色，光镜下观察。结果 Heidenhain染色方法可以准确检验发病过程在0.5h内的缺血心肌纤维。结论 Heidenhain染色方法可使早期缺血的心肌纤维出现明显的反应，效果优于HE染色方法和HBFP染色方法，特异性强，操作简便易行，可以将其作为诊断早期心肌缺血的一个首选染色方法加以应用。     

荧光染色技术检测宫颈沙眼衣原体

采用荧光染色技术对１９２例临床患有宫颈炎的病例进行宫颈涂片检查，检出宫颈上皮细胞内和中性粒细胞内衣原体包涵体３２例（阳性率为１６．６％），这些阳性标本分别进一步用姬姆萨和苏木精－伊红（ＨＥ）染色进行研究。结果表明，衣原体包涵体在姬姆萨染色的标本上得到证实；在ＨＢ染色的涂片上则不易发现；然而，在荧光方法染色的标本上，衣原体包涵体所发荧光的颜色明显不同于细胞结构发出的荧光颜色，在低倍荧光镜下就能识别．而且，该染色法对滴虫和癌细胞的识别亦具有一定的优越性。     

尖锐湿疣组织中人乳头瘤病毒感染的免疫组化研究

应用免疫组化方法对６０例尖锐湿疣病人组织中人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）感染状况进行组织切片和细胞涂片检测。结果显示７０％的组织切片和１０％细胞涂片中可见到ＨＰＶ阳性细胞。阳性细胞主要见于具有诊断特征的空泡细胞中，细胞空泡程度越明显其阳性程度越强。表明空泡细胞是ＨＰＶ感染后上皮细胞出现的形态学改变。含有成熟的病毒颗粒。组织切片中ＨＰＶ检出率明显高于细胞涂片。在不同性别和不同年龄的患者中ＨＰＶ的检出率无明显差异。     

核因子κB在大肠腺癌及腺瘤组织中的表达

目的 :探讨核因子κB (NF κB)表达与大肠腺癌生物学行为的关系。方法 :应用免疫组织化学方法检测NF κBp6 5在 5 2例大肠腺癌、2 1例大肠腺瘤及 10例正常大肠粘膜中的表达情况。结果 :5 2例大肠癌中 34例NF κBp6 5阳性 ,阳性产物主要定位于肿瘤细胞胞浆。 2 1例大肠腺瘤中 10例NF κBp6 5阳性 ,10例正常大肠组织中NF κBp6 5无 1例阳性表达。大肠腺瘤与大肠癌间NF κBp6 5的阳性表达率差异无显著意义。NF κBp6 5的表达与患者的性别、大肠癌组织学分型、淋巴结转移、Dukes分期无关。结论 :NF κBp6 5是大肠癌相关的一种癌蛋白 ;NF κBp6 5蛋白表达可能是大肠癌形成的一个早期事件 ,NF κBp6 5蛋白可能为大肠癌的一个新的肿瘤标志物     

NF-κBp65在肝癌血管生成中的作用

目的本实验通过对肝细胞癌(HCC)组织、癌旁组织、肝硬化组织及正常肝组织中NF-κBp65蛋白表达和微血管密度(MVD)进行检测,探讨NF-κBp65的蛋白表达与HCC新生血管生成的关系,初步阐述NF-κBp65在HCC血管生成中的机制。方法选用45例肝细胞癌组织和32例癌旁肝组织、15例肝硬化组织、10例正常肝组织标本作对照,采用免疫组化法(SABC)检测NF-κBp65的表达和MVD值,并结合患者的临床病理指标进行统计学分析。结果NF-κBp65在HCC中的表达及MVD值显著高于癌旁肝组织、肝硬化组织和正常肝组织(P<0.05);HCC组织中NF-κBp65阳性表达组显著高于阴性表达组(P<0.05);血管侵犯组显著高于无血管侵犯组(P<0.05)。结论NF-κBp65在HCC组织中的表达高于癌旁肝组织、肝硬化组织和正常肝组织;HCC中NF-κBp65的表达与肝癌血管生成有关。