荧光定量聚合酶链反应与免疫印迹法检测人巨细胞病毒

目的比较荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）与免疫印迹法（IBT）检测人巨细胞病毒效果。方法分别应用FQ-PCR和IBT检测疑似人巨细胞病毒（HCMV）感染小儿和成人各42例尿HCMV DNA和血清HCMV IgM。结果 42例疑似人巨细胞病毒感染小儿尿HCMV DNA阳性检出率为57.14%,血HCMV IgM阳性检出率为35.71%。前者的诊断阳性率高于后者,差异有统计学意义（χ^2=3.88,P〈0.05）;42例成人尿HCMV DNA阳性检出率为14.29%,血HCMV IgM阳性检出率为71.43%。后者的诊断阳性率显著高于前者,差异有统计学意义（χ^2=28,P〈0.005）;84例患者尿HCMV DNA阳性检出率38.10%,血HCMV IgM阳性检出率48.81%。2种方法检测HCMV活动性感染的差异无统计学意义（χ^2=1.96,P〉0.1）。结论 FQ-PCR检测HCMV DNA是早期诊断小儿HCMV感染的有效的方法;免疫印迹法检测血清HCMV IgM水平对于判断成人HCMV活动性感染具有一定意义;做人群HCMV普查时,免疫印迹法有较好的应用价值。     

婴幼儿人巨细胞病毒感染154例PCR与ELISA检测比较

目的:探讨采用不同的定量方法及不同的标本检测婴幼儿人巨细胞病毒(HCMV)感染阳性率。方法:采用荧光定量PCR法和ELISA定量法分别对154例疑感染HCMV住院患儿进行HCMV DNA和HCMV IgM抗体的定量检测,其中对73例患儿的血及尿标本同时进行HCMV DNA的检测。结果:血和尿HCMV DNA同时检测,尿检出率明显高于血;血和尿HCMVDNA检出率明显高于血清HCMV IgM;两种方法的联合检测进一步提高阳性率。结论:两种方法同时检测可提高HCMV的检出率;尿标本HCMV DNA的检出率明显高于血标本,采用尿标本更方便,且阳性率高。     

PCR法检测白血病患儿HCMV DNA的临床意义

收集31例白血病患儿晨尿，10例患儿EDTA抗凝血。对照组取自未患白血病且免疫功能正常的儿童，包括10例晨尿和12例EDTA抗凝血。用PCR法检测HCMVDNA。结果白血病患儿晨尿中检出2例阳性，对照组检出1例阳性，阳性检出率分别为6．5％和10％，两者之间无差异(0．75＞P＞0．5)。白血病患儿血液中，检出3例阳性，而对照组血液无1例检测为阳性，阳性检出率分别为30％和0％，两者之间有差异(0．025＜P＜0．05)。认为白血病患儿在急性期易出现HCMV活化现象，用PCR法检测HCMVDNA，可在临床表现出现前作出HCMV感染的诊断，但要注意区分活动性感染与潜伏性感染。     

肺癌与人类巨细胞病毒感染关系的初步研究

目的：探讨肺癌与人类巨细胞病毒（HCMV）感染的关系。方法：对88例肺癌及117例肺非癌患者，用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清HCMV－IgG，IgM抗体，用聚合酶链反应（PCR）法检测尿HCMV－DNA。同时检测其中64例肺癌及67例肺非癌患者的病灶局部冲洗或支气管肺泡灌洗回收液HCMV－DNA。对肺癌组中抗癌化疗的患者于每一化疗周期复查血清HCMV－IgM，尿HCMV－DNA。结果：肺癌组血清HCMV－IgM阳性率26．1％，病灶局部冲洗或支气管肺泡灌洗回收液HCMV－DNA阳性率26．6％，均显著高于肺非癌组（P＜0．01）；血清HCMV－IgG及尿HCMV－DNA阳性率两组未见明显差别。42例肺癌到化疗第二周期时，血清HCMV－IgM16例由阴性转阳性，尿HCMV－DNA6例转阳性。结论：肺病与HCMV感染有统计学上的相关性；抗癌化疗使肺癌患者HCMV活动性感染明显增多，值得重视。     

荧光定量聚合酶链反应法和液体培养法检测新生儿解脲支原体的临床意义

目的探讨荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）法和液体培养法检测新生儿解脲支原体（Uu）的临床意义。方法采用FQ—PCR法和液体培养法检测新生儿痰中Uu,比较两者阳性检出率,及治疗后Uu含量的变化。结果FQ—PCR法、液体培养法Uu阳性检出率分别为32．87％、22．69％,FQ—PCR法明显高于液体培养法（χ^2=5．58,P〈0．05）。治疗后Uu阳性检出率为8．33％,且拷贝数明显下降。Uu对大环内酯类克拉霉素敏感率最高,为93．88％;对喹诺酮类环丙沙星耐药率最高,为89．80％。结论FQ—PCR联合液体培养法检测Uu对诊治新生儿Uu感染有临床指导意义。     

人巨细胞病毒感染与婴儿肝炎综合征及肝功能损害的相关性研究

目的：探讨人巨细胞病毒（HCMV）感染与婴儿肝炎综合征（IHS）和肝功能损害的关系。方法采用荧光定量 PCR对236例 IHS 患儿和对照组健康婴儿行尿 HCMV DNA 检测,并对254例 HCMV 感染阳性的患儿行肝功能回顾性分析。结果236例 IHS 患儿尿 HCMV DNA 阳性率为62．7％（148／236）。 IHS 患儿 HCMV DNA 和 HCMV IgM 阳性率明显高于对照组,差异有统计学意义（P＜0．01）。254例 HCMV 感染阳性的患儿肝功能指标：血清总胆红素（TBIL）、谷氨酰转肽酶（GGT ）、总胆汁酸（TBA）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST ）和丙氨酸氨基转移酶（ALT ）均高于正常参考范围,差异均有统计学意义（P ＜0．01）。结论广西地区 IHS 患儿 HCMV 检出率高,HCMV 是 IHS 的重要病原体,对婴儿肝功能有损害。     

肝、肾移植术后受者人巨细胞病毒巢式PCR检测

目的 探讨巢式PCR（Nest PCR)检测器官移植术后受体人巨细胞病毒（HCMV）DNA，并与传统ELISA法作方法学对照。方法 巢式PCR针对HCMV AD169株IEA基因设计内外两对引物，对59例肝、肾移植术后受体（肝移植27例、肾移植32例）血、尿标本进行HCMV DNA检测。分离血清作ELISA检测IgG、IgM。结果 血液Nest PCR阳性率肝移植62.9%，肾移植46.8%；ELISA法阳性率：IgG35.5%,IgM27.1%,IgG IgM18.6%，IgM阳性标本（16例）DNA检测皆为阳性，6例IgG、IgM皆阴性标本DNA检测仍为阳性。结论 巢式PCR是一种敏感特异、简便快速诊断HCVM感染的方法，灵敏度及特异性高于传统ELISA，能弥补ELISA的假阴性，更适用于临床检测器官移植术后HCMV感染。     

输卵管妊娠与人巨细胞病毒、弓形虫感染的相关性研究

目的　研究人巨细胞病毒、弓形虫感染与输卵管妊娠的相关性。方法　采用酶联免疫吸附测定 (ELISA)方法和聚合酶链反应 (PCR)技术检测输卵管妊娠患者与对照组血清人巨细胞病毒 (HCMV)和弓形虫 (TOXO)抗体以及生殖道HCMV和TOXODNA。结果　病例组血清HCMVIgG抗体阳性检出率为 31 9% ,明显高于对照组15 8% (P <0 0 5 ) ;HCMVIgM抗体、TOXOIgG、IgM抗体检出率均高于对照组 ,在统计学上无明显差异 (P >0 0 5 ) ;病例组宫颈、宫腔及输卵管组织中均分离到HCMVDNA和TOXODNA ,且宫颈HCMVDNA阳性检出率为14 3% ,明显高于对照组 (P <0 0 5 )。结论　输卵管妊娠与HCMV感染有关 ,TOXO感染为输卵管妊娠的可疑因素。     

HIV感染者血浆与尿液中巨细胞病毒检出率的差异性比较

目的:分析HIV感染者血浆与尿液中巨细胞病毒检出率的差异性。方法:选取60例HIV感染者,所有患者均经过沙坪坝区疾病预防控制中心确诊,分析比较患者血浆与尿液中巨细胞病毒的检出率、HIV感染者出现的临床症状及HIV感染者巨细胞病毒阳性检出者外周血中CD+4T淋巴细胞数量情况。结果:尿液中巨细胞病毒核酸阳性检出率低于血浆检出率,差异有统计学意义(P<0.05);血、尿HCMVDNA(+)与单独尿HCMVDNA(+)、血、尿HCMVDNA(-)比较差异有统计学意义(P<0.05)差异显著;25例阳性患者共出现14例典型的临床症状。结论:HIV感染者血浆中HCMV检出率高于尿液,由于HCMV造成的并发症,给患者带来严重的影响,且患者体内CD+4T淋巴细胞数量可直接影响HIV感染者预后的恢复,所以,需严密检测患者CD+4T淋巴细胞计数。     

复发性阿弗他溃疡与病毒感染的相关性研究

目的 探讨复发性阿弗他溃疡（RAW）与人巨细胞病毒（HCMV）和单纯疱疹病毒（HSV）感染的相关性。方法 采用酶联免疫分析法（ELISA）和聚合酶链反应技术（PCK）联合检测176例RAU患者和120例健康对照者HCMV和HSV血清IgM抗体及溃疡组织或脱落上皮细胞中的病毒DNA，并进行综合分析。结果 RAU患者组病毒阳性率（71．02％），明显高于健康对照组（7．50％,P〈0．05）。其中单项HCMV的阳性率为47．16％，HSV的阳性率为52.27％，二者复合感染的阳性率为28．41％，三者与对照组相比，均具有显著性差异（P〈0．05）。但HCMV与HSV二者之间的阳性率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 HCMV和HSV感染与RAU的发病密切相关，是其病因中的重要致病因素。RAU患者不只是一种病毒感染，而且存在着不同病毒感染状态，病毒的复合感染也占有一定比例；联合检测HCMV和HSV的IgM抗体与病毒DNA。可显著提高病毒感染的阳性检出率，有利于RAU的病因诊断和治疗。     

汕头地区健康献血者人巨细胞病毒抗体及DNA检测结果的评价

目的：了解汕头地区健康献血者人巨细胞病毒（HCMV）感染情况,并探索一种比较可靠的检测方法。方法：采用酶联免疫吸附试验检测健康献血者血清（450份）中HCMV-IgM和．IsG抗体,并对12份疑似HCMV感染（HCMV-IgM、HCMV-IgC双阳性）、278份HCMV-IgM阴性而HCMV-IgG73性及10份HCMV-IgM、HCMV-IgG双阴性的血浆样本进行荧光定量PCR（FQ-PCR）检测。并对两种检测方法的结果进行比较分析。结果：汕头地区健康献血者HCMV-IgM、HCMV-IgG阳性率分别为2．7％和93．8％;FQ-PCR对HCMV-DNA的检出率高于HCMV-IgM阳性率（P〈0．05）。结论：汕头地区健康献血者HCMV阳性率与国内其他地区学者所报道相近,FQ-PCR定量检测血清HCMV-DNA的方法能够更灵敏地反映HCMV活动性感染,FQ-PCR对献血者HCMV感染的诊断有重要作用。     

冠心病与巨细胞病毒初期感染的相关性研究

目的探讨人类巨细胞病毒初期感染与冠心病发生发展的关系。方法用捕获ELISA法检测血清HCMV—IgM,酶法检测血脂4项,免疫比浊法检测C-反应蛋白（CRP）,并进行比较。结果冠心病组（61例）、健康对照组（44例）和其他疾病组（48例）的HCMV—IgM阳性率分别为8．20％、2．27％和4．17％,冠心病组与对照组之间无统计学差异（P〉0．05）;冠心病组血脂4项和CRP均高于健康对照组,有统计学差异（P〈0．05）。结论尚不能认为冠心病与巨细胞病毒初期感染有关。     

FQ-PCR与IFA检测HCMV感染效果比较

目的比较检测孕妇HCMV-DNA与HCMV-pp65对诊断HCMV感染的效果。方法采用荧光定量PCR（FQ-PCR）检测孕妇血浆HCMV-DNA及采用间接免疫荧光染色法（IFA）检测其外周血白细胞HCMV-pp65抗原,比较两者的诊断效果。结果 100例孕妇HCMV-DNA的阳性为9例,阳性率为9%,HCMV-pp65阳性为8例,阳性率为8%,两者均阳性为6例。两检测方法一致率为95%,两者之间的阳性检出率无显著性差异（χ^2=0.064,P〉0.05）。结论应用HCMV-DNA及HCMV-pp65抗原检测的两种联合监测,能更有效地提高孕妇早期HCMV活动性感染的诊断水平,对预防及降低胎儿宫内感染有着较好的临床价值。     

血清学IgM检测在儿童呼吸道感染中的临床意义

目的对呼吸道感染患儿的几种常见病原体进行血清学检测,从而评价血清学IgM检测的临床意义。方法选取360例呼吸道感染的患儿作为调查对象,用酶联免疫吸附测定（ELISA）法对血清IgM进行检测,测定患儿血清中CMV-IgM、HSV-IgM、EBV-IgM、RSV-IgM、MPM-IgM的情况,分析抗体阳性率、不同性别和不同年龄组抗体阳性率的差异。结果本次研究检测出IgM抗体阳性率为76.7%,其中,CMV-IgM阳性率为17.2%,HSV-IgM阳性率为9.7%,EBM-IgM阳性率为9.2%,RSV-IgM阳性率为20.8%,MPM-IgM阳性率为19.7%,各类抗体的阳性率比较差异有高度统计学意义（χ2=35.98,P〈0.01）。男性患儿阳性率为72.4%,女性患儿阳性率为82.7%,男性患儿与女性患儿的阳性率差异无统计学意义（χ2=0.58,P〉0.05）。〈1岁组检测各类抗体合计IgM阳性率为85.3%,1-〈4岁组为85.3%,4-6岁组为62.3%,〉6岁组为78.0%,不同年龄组间抗体的阳性率差异具有高度统计学意义（χ2=19.14,P〈0.01）。CMV-IgM、HSV-IgM及EBM-IgM的阳性率在不同年龄组间差异无统计学意义;RSV-IgM的阳性率在各年龄组间有差异（χ2=11.37,P〈0.01）,1-〈4岁组的阳性率（37.04%）高于其他年龄组;MPM-IgM的阳性率在各年龄组间也有差异（χ2=28.48,P〈0.01）,〉6岁组的阳性率（49.30%）高于其他年龄组。结论血清学IgM检测能够作为儿童呼吸道感染患儿的早期指标,在临床合理用药、降低患者不必要经济损失方面具有重要的临床意义。     

人巨细胞病毒感染与系统性红斑狼疮的相关性

目的：分析人巨细胞病毒（HCMV）在系统性红斑狼疮（SLE）患者中的感染状况及与SLE临床指标的相关性。方法：采集并分离60例SLE患者和111例健康体检者的外周血白细胞及血清标本,建立细胞内HCMVUL55及UL138基因高度敏感特异的PCR方法,并检测SLE患者及健康体检者外周血白细胞内HCMVUL55及UL138基因,以确定HCMV感染情况,利用罗氏公司电化学发光法试剂盒检测血清HCMVIgG和IgM,比较SLE患者与健康体检者外周血白细胞内HCMVUL55、UL138检测及血清IgG、IgM检测的阳性率和相关性,统计分析外周血白细胞内HCMV感染与SLE常见临床指标的关系。结果：琼脂糖凝胶电泳及测序结果显示,建立的PCR方法能特异地检测外周血白细胞内HCMVUL55及UL138基因;血清HCMVIgG及细胞内HCMVUL138基因检测几乎全部呈阳性,SLE患者与健康体检者之间差异无统计学意义（P＞0.05）;血清HCMVIgM检测阳性率低,SLE患者血清HCMVIgM检测阳性率（为6.67%）略高于健康体检者（为0.90%）（P=0.052）;SLE患者外周血白细胞内HCMVUL55基因检测的阳性率明显高于健康体检者（P＜0.01）。HCMV感染4种检测方法的相关分析显示,细胞内HCMVUL138检测结果与血清HCMVIgG检测有较好的一致性。分析SLE患者外周血白细胞内HCMV感染状况与临床指标的相关性显示,与UL138基因不同,细胞内HCMVUL55检测呈阳性的SLE患者与检测呈阴性的SLE患者比较,存在多项明显差异的临床指标。结论：HCMV感染与SLE存在一定的相关性,但不同检测方法结果差异显著。     

5985名学生乙肝疫苗接种后免疫效果分析

目的探讨中小学生乙肝疫苗接种后免疫应答状况,为制定有效的乙肝预防措施提供科学依据。方法应用ELISA法测定中、小学生血清三项乙肝感染标志（HBsAg、HBeAg、HBeAb）,对三项标志全阴性者再应用时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）测定血清二项感染标志（HBsAb、HBcAb）。结果血清三项感染标志（HBsAg、HBeAg、HBeAb）全阴性者其HBsAb阳性率为81.27%,中学生阳性率为80.27%,小学生阳性率为82.50%,差异有统计学意义（χ2=4.82,P〈0.05）。HBsAb有应答者HBcAb阳性率为5.12%,中学生阳性率为8.82%,小学生阳性率为0.68%,差异有非常显著性（χ2=164.58,P〈0.01）。HBsAb无应答者HBcAb阳性率为21.14%,中学生阳性率为19.73%,小学生阳性率为7.68%,差异有非常显著性（χ2=87.70,P〈0.01）。HBsAb有应答者和HBsAb无应答者其HBcAb阳性率差异有非常显著性（χ2=313.48,P〈0.01）。结论该地区学生HBsAb阳性率较低,免疫效果不理想,小学生HBsAb阳性率较高,中学生HBcAb阳性率较高,提示学生中乙肝疫苗接种需加强和改进。     

呼吸道九联检IgM检测对儿童急性下呼吸道感染的早期诊断价值

目的 探讨昆明地区小儿急性下呼吸道感染（ALRI）主要病原体及其流行特点,分析本地区小儿ALRI病原体与年龄的相关性,同时,评价呼吸道九联检IgM检测对ALRI的早期诊断价值.方法 ALRI患儿625例,按年龄将患儿分为3组：～1岁（婴儿组）,～3岁（幼儿组）,＞3岁,～ 10岁（儿童组）.同时,健康儿童100例作为对照组.应用间接免疫荧光法（IFA）检测九项主要病原体的IgM抗体,包括嗜肺军团菌（LP）、肺炎支原体（MP）、Q热立克次体（COX）、肺炎衣原体（CP）、腺病毒（ADV）、呼吸道合胞病毒（RSV）、甲型流感病毒（IFA）、乙型流感病毒（IFB）及副流感病毒1、2和3型（PIVS）.结果 625例ALRI患儿中,检出病原体感染345例,总检出率为55.2％.单一病原体感染132例,占阳性病例数的38.26％,以MP最多,其次为IFV、RSV和ADV,检出率依次为62.88％、27.27％、5.30％及4.55％;2种病原体混合感染148例,阳性检出率为69.48％;3种及以上混合感染65例,阳性检出率为30.52％.单一呼吸道病原体感染中,随着年龄增长,MP和IFB感染率呈上升趋势,而RSV和ADV感染率呈下降趋势,但3个年龄组间仅RSV差异有统计学意义（x^2=8.143,P=0.017）;而在2种/≥3种病原体混合感染中,随着年龄增长,感染率呈上升趋势,3个年龄组间差异有统计学意义（x^2=26.899,P＜ 0.001）/（x^2=6.138,P＜0.046）;而且,随着年龄增长,总的混合感染（2种及≥3种）趋势更明显,各组间差异统计学意义（x^2=30.930,P＜0.001）.结论 九项呼吸道病原体IgM抗体联合检测对明确昆明地区ALRI的病原体种类、流行病学特点、早期诊断和治疗很有帮助,具有经济、高效、便于操作和易于判读结果等优点。     

三种方法在检测泌尿生殖道淋病奈瑟菌感染中的比较研究

目的比较反向线点杂交技术（RLB）、实时荧光PCR（FQ-PCR）及培养法在检测泌尿生殖道淋病奈瑟菌（Neisseria gonorrhoeae,NG）感染中的应用情况。方法同时采集158例患者2份泌尿生殖道标本,提取其中1份标本NG-DNA,PCR扩增NG 16SrRNA基因,然后与固定在尼龙膜上的特异性寡核苷核探针反向线点杂交;同时运用FQ-PCR检测NG的感染情况;另1份标本及时进行NG巧克力培养。结果 PCR扩增NG 16SrRNA基因的片段长度为412bp,具有较好的特异性,RLB检测158例标本中NG阳性为45例,阳性率为28.48%;FQ-PCR检测NG阳性为50例,阳性率为31.65%,二者比较差异无统计学意义（P＞0.05）;而培养法检测NG阳性为25例,阳性率为15.82%,明显低于RLB和FQ-PCR（P〈0.01）。结论与培养法相比,RLB与FQ-PCR在检测NG方面具有简便、快速且敏感性高等优点,且二者无明显差别。     

血管内皮细胞生长因子和血管生成素-2在喉癌中表达及意义

目的：检测血管内皮细胞生长因子和血管生成素-2在喉癌中的表达,探讨它们与喉癌生物学行为及临床病理学特征间的关系。方法：采用免疫组织化学S-P法,检测喉癌84例、不典型增生5例及声带息肉5例组织中VEGF和Ang-2表达。统计分析其表达与喉癌临床病理因素的关系及相关性。结果：喉癌84例中VEGF总阳性率70.2%。增加不同组间表达率,不同分化程度喉癌间的表达差异有统计学意义（χ2=17.323, P＜0.05）;不同分期喉癌间表达差异有统计学意义（χ2=11.489, P＜0.05）;有无淋巴结转移两组间差异有统计学意义（χ2=18.748, P＜0.05）。Ang-2总阳性47例（56.0%）。高、中、低分化喉癌中阳性率分别为38.8%、68.8%和100%;不同分化程度喉癌间的表达差异有统计学意义（χ2=22.330, P＜0.05）;淋巴结转移组和无淋巴结转移组阳性率分别为78.6%和48.6%组比较差异有统计学意义（χ2=14.880, P＜0.05）。结论：喉癌中VEGF与Ang-2呈正相关,两者联合检测有助于揭示喉癌发生、发展、转移的机制。