异位康冲剂治疗子宫内膜异位症的临床研究

目的研究新中药异位康冲剂对子宫内膜异位症（EMT）的临床疗效,并探讨中药治疗的作用机制。方法将100例EMT患者,随机分为中药治疗组（50例）和丹那唑治疗对照组（50例）。观察两组临床症状改善情况、血清内分泌激素、血液流变学、盆腔血流的变化,将两组临床总疗效和副作用进行比较。结果子宫内膜异位症患者体内存在广泛的内分泌和免疫功能紊乱．异位康冲剂临床总有效率为84％,具有缩小异位病灶、缓解症状、改善血液流变学和盆腔血流、镇痛等临床疗效。中药治疗组用药结束后FSH、LH、PRL、P、E2水平均比用药前明显降低,有统计学意义（P〈0．05）,尤其E2水平明显下降。丹那唑组用药后E2水平也较用药前下降明显,差异有显著性（P〈0．01）,但FSH、LH用药前后差异无显著性IP〉O．05）。治疗后E2水平中药治疗组较丹那唑组下降明显,两组比较差异有显著性（P〈0．05）。结论异位康冲剂对异位内膜有明显抑制作用,是治疗子宫内膜异位症的有效新药。     

子宫内膜异位症裸鼠模型的建立及内皮抑素治疗的实验研究

目的 建立人子宫内膜异位症(EMS)裸鼠皮下种植及腹腔注射模型,探讨内皮抑素在EMS治疗中的作用.方法 将4例确诊为EMS并行子宫切除患者的子宫内膜标本植入30只BALB/c雌性裸鼠体内,建立EMS裸鼠模型.其中皮下种植组20只,腹腔注射组10只,2周后比较两组的成模成功率.将皮下种植组成模裸鼠按随机数字表分为对照组(7只)与实验组(8只).实验组以2mg/(1kg·d)的剂量局部注射内皮抑索,对照组局部注射同体积PBS.注射后14d处死,采用免疫组化法检测裸鼠异位内膜中血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达水平.结果 腹腔注射组7只成模,皮下种植组15只成模,两组成模成功率分别为70%和75%(P>0.05).实验组异位病灶VEGF表达水平(0.73±0.13)较对照组(1.09±0.12)明显降低(P<0.05).结论 内皮抑素可通过抑制血管生成和降低VEGF的表达发挥治疗EMS的作用.     

内皮抑素基因抗血管生成治疗子宫内膜异位症的实验研究

目的研究重组腺病毒介导的鼠内皮抑素(mEndostatin)基因对子宫内膜异位症的抑制作用。方法构建携带mEn-dostatin基因的重组腺病毒载体,建立人子宫内膜异位症的裸鼠模型,随机分为Ad-mEndo组、Ad-lacZ组和PBS对照组3组(n=10),观察3组用药前后异位病灶的形态、组织学及微血管密度(MVD)变化。结果治疗20d后,Ad-mEndo组异位病灶体积(34·3±11·2mm3)明显小于Ad-LacZ组(93·3±10·7mm3)和PBS对照组(90·4±18·7mm3,P<0·01),也小于用药前病灶体积(103·3±13·1mm3,P<0·01)。Ad-mEndo治疗的异位病灶MVD(9·6±11·6),明显低于Ad-LacZ组(15·8±10·4)和PBS对照组(15·8±18·6,P<0·01)。光镜下可见Ad-mEndo组异位子宫内膜明显减少,腺腔狭窄,细胞稀疏,呈萎缩状态,或可见腺上皮细胞空泡变性。TUNEL法检测Ad-mEndo组有(30·8%±12·0%)细胞出现凋亡,高于Ad-LacZ组(12·2%±7·1%)和PBS组(15·5%±9·5%,P<0·01)。结论所构建的mEndostatin重组腺病毒可有效地表达具有生物活性的内皮抑素,可以使子宫内膜异位症种植块的血管生成减少,抑制种植块生长,为抗血管生成子宫内膜异位症的临床应用奠定基础。     

血管内皮生长因子受体KDR在子宫内膜异位症中的表达

 目的探讨血管内皮生长因子受体(VEGFR)胎肝激酶(KDR/flk-1)在子宫内膜异位症(内异症)患者中异位、在位子宫内膜及正常子宫内膜组织中的表达及意义.方法采用半定量RT-PCR(逆转录聚合酶链反应)和免疫组化(SABC法)方法,从基因和蛋白质水平检测44例内异症患者子宫内膜组织(卵巢子宫内膜囊肿32份)及30份在位内膜组织(研究组)中VEGFRKDR的阳性表达率.选择40例非内异症患者的正常子宫内膜组织作为对照组.结果两组多数异位及在位子宫内膜组织中均可检测KDR的表达,内异症组在位内膜和异位内膜KDR相对表达强度明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);不同月经周期KDR的表达,在增殖期KDR相对表达强度高于分泌期,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 VEGF受体KDR在内异症在位内膜和异位内膜中有明显表达,可能VEGF受体参与内异症血管生成,促使异位病灶远处转移种植、浸润;在位内膜增殖期KDR相对表达强度高于分泌期可能与卵巢激素相关.     

戊酸雌二醇对大鼠宫腔粘连形成的预防作用观察

目的 探讨雌二醇对大鼠宫腔粘连形成的预防作用及其机制.方法 30只雌性SD大鼠随机均分为5组,采用刮宫加感染双重损伤法制作大鼠宫腔粘连模型,实验处理因素为戊酸雌二醇灌胃.空白对照组(A)大鼠不予造模也不施加雌二醇处理;生理量雌激素组(B)造模但不给予雌二醇;低剂量雌激素组(C)、中剂量雌激素组(D)、高剂量雌激素组(E)于造模后分别给予剂量为0.206、0.514、1.028mg/(kg·d)的戊酸雌二醇灌胃.采用ELISA法测定各组大鼠戊酸雌二醇灌胃前后的血清雌二醇浓度,采用HE染色观察各组大鼠子宫内膜腺体数量,Masson染色计算子宫内膜纤维化面积,并通过免疫组化法检测子宫内膜组织中转化生长因子β(TGF-β)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达情况.结果 戊酸雌二醇灌胃后,C、D、E组血清雌二醇水平较A、B组明显增高(P＜0.05);随着灌胃戊酸雌二醇量增加,血清雌二醇水平也升高,差异有统计学意义(P＜0.05).与B组相比,C、D、E组子宫内膜腺体数目明显增多,纤维化面积比降低(P＜0.05),但D、E组间比较差异无统计学意义.与B组比较,C、D、E组子宫内膜TGF-β表达明显降低(P＜0.05),MMP-9表达明显升高(p＜0.05),但D、E组间差异无统计学意义.结论 雌二醇可减轻子宫内膜损伤后宫腔粘连的形成,在一定范围内随着雌二醇量的增加改善作用会更加明显.     

β-连接素和生存素在子宫内膜异位症患者异位内膜和在位内膜的表达及意义

目的探讨β-连接素(β-catenin)、生存素(survivin)两种蛋白在子宫内膜异位症(EMs)患者异位内膜和在位内膜的表达、分布及其在EMs发病中的作用与关系。方法应用免疫组织化学法检测31例子宫内膜异位症患者(EMs组)异位内膜和在位内膜及10例非子宫内膜异位症患者(正常对照组)在位内膜中β-连接素、生存素的表达,并检测两者的相关性。结果β-连接素在EMs组囊壁组织、在位内膜中表达的阳性率分别为87.1%(27/31)、83.9%(26/31);生存素在EMs组异位内膜、在位内膜中表达的阳性率分别为90.3%(28/31)、87.1%(27/31);β-连接素、生存素在正常对照组在位内膜表达的阳性率分别为40%(4/10)、30%(3/10)。EMs组异位内膜、在位内膜的β-连接素、生存素表达与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。EMs组异位内膜、在位内膜中β-连接素与生存素的表达有相关性(r分别为0.850,0.616,P<0.01)。结论子宫内膜β-连接素、生存素的高表达可能在子宫内膜异位症的发病过程中起重要作用。     

痹痛康丸对胶原性关节炎大鼠TNF-α的影响

目的观察痹痛康丸对患胶原性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响,探讨其治疗作用机制。方法建立Ⅱ型胶原加完全弗氏佐剂诱导的大鼠CIA模型,60只Wistar大鼠随机分为6组,痹痛康丸低、中、高剂量组[0.3 g/(kg.d)、3 g/(kg.d)、30 g/(kg.d)],尪痹冲剂组3 g/(kg.d),甲氨蝶呤片组每周1.2 mg/kg,采用药物溶解于2 ml生理盐水中,1次/d,连续灌胃给药4周,模型组灌服生理盐水2 ml/只。8周后处死大鼠,采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测CIA大鼠血清TNF-α浓度,观察各组大鼠TNF-α浓度水平的变化。结果痹痛康丸中剂量组TNF-α浓度水平(1190.84±177.02)、高剂量组TNF-α浓度水平(844.20±142.79)、MTX片组(1149.40±182.17)、尪痹冲剂组(1215.83±102.07)显著低于模型组(1724.67±247.26)(P=0.017,P=0.000,P=0.008,P=0.036)。痹痛康丸高剂量组血清TNF-α浓度水平显著低于痹痛康丸中剂量组、MTX片组、尪痹冲剂组,(P=0.006,P=0.018,P=0.009)。结论痹痛康丸能有效降低CIA大鼠血清TNF-α的表达,有抑制CIA大鼠滑膜炎性的作用。     

皮下移植和皮下注射构建子宫内膜异位症皮下模型的比较研究

目的 比较皮下移植和皮下注射两种方法建立裸鼠人子宫内膜异位症模型的效果及血管新生相关因子表达的差异.方法 雌性BALB/c裸鼠41只,随机分为皮下移植组(A组,n=22)和皮下注射组(B组,n＝19),分别采用皮下移植人子宫内膜块和皮下注射人子宫内膜碎屑的方式建模.每组又分为2、4周两个亚组,即A1、A2组和B1、B2组.采用SP法检测异位病灶血管内皮生长因子(VEGF)表达和微血管密度(MVD),并比较组间的异位病灶的体积和重量.结果 在相同时间点(2周或4周),两组异位病灶体积差异无统计学意义(P>0.05),A组异位病灶重量较B组明显增加(P<0.05),而两组病灶腺体和间质中VEGF表达、MVD差异无统计学意义(P>0.05).两组在2周时病灶腺体中VEGF表达及MVD均明显高于4周时(P<0.05).结论 两种方法均可成功构建裸鼠人子宫内膜异位症模型,并可观察血管新生情况,以皮下移植造模效果较好.     

中药茵栀清肝汤对四氯化碳大鼠急性肝损伤的保护作用

 目的研究茵栀清肝汤对四氯化碳诱导急性肝损伤大鼠的保护作用.方法Wstar大鼠随机分为正常组、急性肝损伤模型组、中药治疗低、中、高剂量组,中药组分别予以茵栀清肝汤3g/kg、6g/kg、12g/kg每日一次灌胃,共7 d.末次灌胃后除正常组外,其余所有大鼠予以50%四氯化碳5 ml/kg灌胃1次,24h后处死全部大鼠,收集肝组织及血清标本.对肝组织进行HE染色病理检查;生化方法检测大鼠血清天门冬氨酸氨基转移酶(Aspartate transaminase,AST)、谷氨酸氨基转移酶(Alaninetransaminase,ALT)的活性;测定大鼠血清超氧化歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)及丙二醛(Malondidehyde,MDA)的含量.结果中药茵栀清肝汤治疗组大鼠血清AST、ALT水平较模型组显著降低,显著改善肝组织病理.对急性肝损伤大鼠血清SOD,GSH-PX的活性有明显的升高作用并降低血清MDA的含量.茵栀清肝汤对急性肝损伤大鼠的保护作用呈剂量依赖模式,服用12g/kg剂量大鼠疗效最佳.结论茵栀清肝汤具有显著保护四氯化碳所致大鼠急性肝损伤的作用.     

口服咖啡因对早期妊娠小鼠胚泡植入的影响

目的 研究咖啡因对小鼠妊娠早期胚泡植入的影响.方法 将孕鼠随机分为4组(每组20只):低、中、高剂量咖啡因组(分别给予60、120、240mg/kg剂量的咖啡因)和对照组(给予等量生理盐水).观察口服不同剂量咖啡因的妊娠小鼠胚泡着床的变化,并进一步分析雌激素和孕酮的变化,以及着床点部位子宫内膜厚度、腺体发育和糖原含量的变化.结果 高剂量咖啡因组[240mg/(kg·d)]孕鼠着床率显著低于其他两个试验组和对照组(P<0.05),同时发现低剂量组[60mg/(kg·d)]和中剂量组[120mg/(kg·d)]雌激素水平显著高于对照组和高剂量组(P<0.05);中剂量组孕酮水平显著高于其他三组(P<0.05).低、中浓度咖啡因处理组着床点部位子宫内膜厚度比对照组显著增加,而高浓度咖啡因处理组着床点部位子宫内膜厚度则显著低于其他三组(P<0.05).与对照组和低、中浓度咖啡因处理组相比,高浓度咖啡因处理组子宫内膜腺腔直径缩小,腺体数量显著减少;另外还观察到着床点部位子宫内膜糖原含量的变化与血清激素水平的变化是一致的.结论 口服高剂量咖啡因可引起雌、孕激素分泌紊乱,阻滞子宫内膜的蜕膜化反应,进而影响早期妊娠小鼠的胚泡植入.     

子宫内膜异位症异位内膜细胞原代培养方法的改良

目的：建立一种简易的人异位子宫内膜细胞体外原代培养方法。方法：通过胰蛋白酶消化、贴壁纯化等技术,分离及培养10例子宫内膜异位症患者的异位子宫内膜细胞。在光学显微镜下观察细胞形态,以免疫细胞化学法鉴定细胞类型。结果：8份标本获得成功,培养的异位内膜细胞均有腺上皮细胞和间质细胞两种形态细胞。膜上皮细胞和基质细胞分别经角蛋白单抗和波形蛋白单抗免疫组化染色为阳性,腺上皮细胞平均生长时间为5周,间质细胞平均生长时间为14周。结论：成功建立了子宫内膜异位症异位内膜细胞体外原代培养方法,该改良培养法经济、简单、高效。     

基质金属蛋白酶MMP-1及其抑制因子TIMP-1在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的研究基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其抑制因子TIMP-1mRNA和蛋白在子宫内膜异位症(EM s)异位和在位内膜组织中的表达,探讨其在子宫内膜异位症发生发展中的作用。方法应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化S-P法检测43例EM s的异位和在位内膜及20例正常子宫内膜中MMP-1,TIMP-1mRNA及蛋白的表达水平。结果在EM s异位内膜中MMP-1mRNA及蛋白均呈高表达,TIMP-1mRNA及蛋白均呈低表达,与EM s在位内膜和正常内膜相比,差异有显著性,P<0.05。MMP-1/TIMP-1比值在异位内膜和在位内膜分别为1.46±0.57,1.15±0.38,均显著高于正常内膜(P<0.05);而且异位内膜中比值>1的几率(33/39,84.6%)明显高于在位内膜(P<0.05),两者呈显著负相关。异位内膜组织中MMP-1,TIMP-1mRNA及蛋白的表达无周期性变化,但与r-AFS临床分期有相关性(P<0.05)。结论异位内膜组织中MMP-1高表达,TIMP-1低表达,导致MMP-1/TIMP-1平衡失调,使异位内膜组织具有更强的侵袭能力,在EM s的发生发展中发挥重要作用。     

MMP-9蛋白和微血管密度在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的研究MMP-9和微血管密度（MVD）值在子宫内膜异位症（内异症）患者的异位内膜组织中的表达,探讨其与BMs发生发展的关系。方法用免疫组化方法检测45例患者异位子宫内膜组织和15例对照子宫内膜组织中MMP-9和微血管密度的表达。结果（1）异位内膜细胞中MMP-9的表达明显高于在位内膜和对照内膜;（2）微血管密度值在异位内膜中的表达明显高于在位内膜和对照内膜;（3）MMP-9与微血管密度在异位内膜中的表达没有相关性（P〉0．05）,在对照内膜中的表达也无相关性（P〉O．05）。结论MMP-9、微血管密度在子宫内膜异位症的异位内膜表达增高,这些结果可能与并位内膜的侵袭有关。     

抑癌基因PTEN在孕三烯酮诱导子宫内膜异位症细胞凋亡中的作用

目的　研究抑癌基因PTEN在孕三烯酮诱导体外培养的子宫内膜异位症细胞凋亡中的作用。方法　以不同浓度的孕三烯酮对体外培养人子宫内膜异位症细胞进行处理 ,MTT法测算孕三烯酮作用 0～ 4 8h对子宫内膜异位症细胞的抑制情况并绘制生长曲线 ;取 2 4h为作用时间 ,透射电镜观察细胞超微结构变化 ,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期 ,应用PTEN单克隆抗体经由流式细胞仪分析细胞内PTEN的表达。结果　细胞生长曲线显示孕三烯酮对子宫内膜异位症细胞的生长增殖有显著的抑制作用 ,且呈时间 剂量 效应关系 ;透射电镜观察发现 ,孕三烯酮可诱导子宫内膜异位症细胞发生典型的凋亡形态学改变 ;流式细胞仪检测显示 1× 1 0 -6mol/L和1× 1 0 -4mol/L浓度的孕三烯酮作用 2 4h后 ,子宫内膜异位症细胞的凋亡率分别为 1 3%和 1 5 0 % ,与对照组相比差异显著 ;同时细胞内PTEN的表达有不同程度的上调。结论　孕三烯酮能明显抑制子宫内膜异位症细胞的生长增殖 ,这一作用可能与上调PTEN的表达及诱导细胞凋亡有关     

Magnetic resonance imaging of cervical ectopic pregnancy in the second trimester

OBJECTIVE: To describe the magnetic resonance imaging findings of cervical ectopic pregnancy in the second trimester. CONCLUSIONS: Magnetic resonance imaging findings of cervical ectopic pregnancy in the second trimester include intracervical location of the fetus, endometrial hyperplasia within an otherwise empty endometrial cavity, and irregular placentation in the cervix. Correct recognition of the condition is critical because of the potential for catastrophic and life-threatening maternal bleeding.     

消氮颗粒对腺嘌呤所致大鼠慢性肾功能衰竭模型的影响

目的探讨消氮颗粒对腺嘌呤所致大鼠慢性肾衰的影响。方法除正常对照组外,其他各组大鼠采用腺嘌呤制备慢性肾衰模型。将模型大鼠随即分为模型组,消氮颗粒低、中、高剂量组和阳性对照组（给予尿毒清颗粒）,分别用相应的药物灌胃治疗30 d,观察各组大鼠血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）、尿酸（UA）、红细胞总数（RBC）、血红蛋白量（HGB）、血细胞比积（Hct）的变化。结果与模型组比较,阳性对照组和消氮颗粒低、中、高剂量组血清SCr、BUN、UA含量显著降低,RBC、HGB、Hct有所升高。结论消氮颗粒对腺嘌呤肾衰大鼠有治疗作用,作用与尿毒清颗粒类似。     

凋亡调节基因bcl—2,bax和fas在子宫内膜异位症中的表达

应用免疫组化法检测凋亡调节蛋白bcl 2 ,bax和fas在无异位症妇女的正常子宫内膜、腹腔液巨噬细胞与卵巢子宫内膜异位症患者在位子宫内膜、异位子宫内膜及腹腔液巨噬细胞中的表达。同时 ,用TUNEL法测出各种细胞的调亡率。结果表明 ,bcl 2在异位症患者在位、异位内膜及腹腔液巨噬细胞中的表达较无异位症者增强 ,差异有显著性意义 (P <0 0 1)。bax在异位症中的表达较低 ,差异有显著性意义 (P <0 0 5 )。fas在异位症患者在位及异位内膜中的表达较低 ,差异有显著性意义 (P <0 0 5 )。结果提示 ,子宫内膜异位症患者在位、异位内膜及腹腔液巨噬细胞中凋亡基因的表达与无异位症者不同 ,其凋亡率低 ,对凋亡的接受性降低 ,有利于异位内膜的种植、生存和发展。     

Logistic回归模型对不明位置妊娠患者早期异位妊娠的预测价值

目的:初步建立预测不明位置妊娠患者(PUL)早期异位妊娠(EP)的Logistic回归模型,评价该模型的应用价值。方法:对妊娠试验阳性的受检者常规进行经阴道能量多普勒超声检查(TV-PDU),对子宫内膜形态学及内膜下血流动力学参数进行测定,联合临床、生化资料行单变量非条件Logistic回归分析,筛选出有意义的变量,在此基础上行多变量Logistic回归,对有意义的研究因素采用逐步法,经优化组合后建立预测EP的Logistic回归模型并进行模型稳定性验证。利用ROC曲线确定诊断阈值和评估各单项指标及其不同指标组合的诊断价值。结果:最终197例(28.8%)为PUL患者,184例资料完整,62例(33.7%)确诊为EP,90例(48.9%)为宫内早孕,32例(17.4%)为宫内早孕流产。多变量Logistic回归分析显示只有4种超声参数对于鉴别EP有统计学意义(P<0.001),以此而建立了三个Logistic回归模型,Youden指数分别为81.2、95.2和97.6,以内膜形态 内膜厚度 对称性 内膜下动脉血流(M3)这一指标组合最优,联合评价诊断价值最高,模型稳定性较好,其ROC曲线下面积(AUC)最大,灵敏度98.4%,特异度99.2%,阳性预测值98.4%,阴性预测值99.2%。结论:Logistic回归分析为研究子宫内膜形态学、血流动力学与EP之间的关系提供了有效的方法,TV-PDU检查早期PUL患者子宫内膜的多变量Logistic回归模型可更早期地估测EP,在临床上无创性预测早期妊娠结局的危险性是可行的。     

血清β-HCG、孕酮联合阴道超声检测对早期异位妊娠的诊断价值

目的探讨血清绒毛膜促性腺激素(β-HCG)、孕酮(P)联合阴道超声检测对早期异位妊娠的临床诊断价值。方法对51例异位妊娠患者(异位妊娠组),48例正常早孕者(正常妊娠组),56例健康体检者(健康对照组)分别检测其血清β-HCG、P水平和子宫内膜厚度;比较血清β-HCG、P检测、阴道超声检测及三项联合检测的敏感性、特异性、准确性。结果血清β-HCG、P水平及子宫内膜厚度正常妊娠组均明显高于异位妊娠组(P<0.01),健康对照组又明显低于异位妊娠组(P<0.01)。而三项联合检测的敏感性、特异性和准确性分别提高至94.1%、95.7%和74.2%,高于各项的单独检测(P<0.05)。结论联合检测血清β-HCG、P和阴道超声有利于提高异位妊娠诊断的敏感性、特异性和准确性,对异位妊娠的早期诊断有重要意义。     

不同类型子宫内膜组织中GnRH及其受体的表达及意义

目的 在蛋白水平检测促性腺激素释放激素(GnRH)及其受体(GnRH-R)在不同类型子宫内膜组织中的表达,探讨其可能存在的意义。方法 采用免疫组化法检测子宫内膜异位症(EMS)的在位内膜和异位内膜以及子宫内膜增生、子宫内膜癌和对照组子宫内膜上GnRH及GnRH-R的表达及分布。结果 GnRH和GnRH-R在EMS和对照组在位内膜持续表达,阳性物质位于腺上皮和间质上皮胞浆内,分泌期染色最强;异位内膜组织中二者的表达率近50％;子宫内膜增生组织中GnRH和GnRH-R表达率分别为92．3％、92．3％,而子宫内膜癌组织中则分别为58．8％、82．4％。结论 在子宫内膜组织中存在着GnRH及GnRH-R的蛋白表达,其在异位内膜组织、内膜增生和内膜癌中的高表达可能成为临床诊断指标和治疗的靶点。