鳖卵带菌情况与实验感染霍乱弧菌的研究Ⅰ.一批鳖卵抽检样品中所见细菌的记述

[目的]了解鳖卵携带霍乱弧菌的0况,探讨其在病原菌特别是霍乱弧菌传播上的作用。[方法]对鳖卵内容物进行细菌的分离鉴定。[结果]从22枚样品卵中全数分离出细菌．卵内带菌率100％。共分离出73株细菌,其中已定种46株,分布于11个菌属15个生物种,另有27株菌尚未能定种。卵中以嗜麦芽寡养单胞菌(6／22)和非O1／非O139群霍乱弧菌、弗劳地枸橼酸杆菌多见(各占4／22)。有18枚卵带2～3种细菌,1枚带4种菌。根据每枚卵的带菌情况,可归纳为19种带菌模式。[结论]该批鳖卵存在卯内带菌现象．具有带菌率高、菌种类别分布广、多重带菌普遍和带菌谱复杂等特点,有的卵还携带有非O1／非O139群霍乱弧菌。     

鳖卵带菌情况与实验感染霍乱弧菌的研究Ⅲ. O139群霍乱弧菌污染鳖卵的实验观察

[目的]实验观察鳖卵携带或感染0139霍乱弧菌的情况。[方法]用0139霍乱弧菌菌悬液浸泡或经染有该菌的湿沙污染鳖种卵。[结果]2种污染方法都能在全部或大多数实验卵的外壳和约1／4(10／40)卵内容物中检出O139霍乱弧菌。[结论]鳖种卵外壳不仅能机械携带O139霍乱弧菌,该菌还能穿过卵壳进入卵内,形成卵内带菌或使卵受感染。     

人群中非O1群霍乱弧菌检测及耐药性分析

[目的]了解宁波市食品及公共场所从业人员、腹泻病人等人群中非O1群霍乱弧菌携带、感染情况及其菌株的耐药性.[方法]用过筛法筛选、VBO诊断血清作血清分型,K-B法作药敏试验.[结果]从人群中筛检出非O1群霍乱弧菌236株,检出率1.3%（236/18 416）;能被VBO分型的有188株,总分型率79.7%（188/236）,分属25个血清型;检出株对头孢他啶、氯霉素和阿米卡星等抗生素敏感,对氨苄西林等青霉素耐药性较高,有15.3%（36/236）对弧菌抑制剂O/129纸片（10 μg、150μg.）有抗性,涉及11个血清型.[结论]筛检方法适用于非O1群霍乱弧菌检测VBO2为腹泻病人的优势血清型;常用抗生素大多具有良好的敏感性,病人分离株的耐药性高于从业人员,未发现多重耐药菌株;检出菌对弧菌抑制剂O/129的抗性增高,鉴定时应考虑到该因素.     

鳖卵带菌情况与实验感染霍乱弧菌的研究Ⅳ.种卵污染O139/O1霍乱弧菌后在孵化期和稚鳖初期该菌的检出情况

[目的]探讨鳖卵污染O139／O1霍乱弧菌后的带菌时间。[方法]采用菌液浸泡种卵后人工孵化,及菌液与沙混合后埋入卵直接孵化2种方法。孵化期间对沙、卵外壳、卵内容物,及稚鳖、养鳖用水进行O139／O1 VC检测。[结果]在孵化期(39d)内,O139VC浸泡卵基本阳性(仅沙和卵壳各1次阴性),卵内容物多数阳性(8／14);O1VC浸泡卵上述3项均阳性(8／8)。染菌湿沙孵化的种卵,沙及卵外壳孵化期阳性检出时间较浸泡组短,仅1枚卵内容物阳性,其它检次均阴性。从第1只稚鳖孵出的3～56d,检鳖10只(包括对照2只),检水8次,均未检出O139／O1VC。[结论]如不考虑鳖卵在沙中的重复感染因素,卵外壳和卵内O139／O1VC的带菌时间至少可达39d,但未见延续至稚鳖出壳后。     

镇海区市售小水产品中弧菌、气单胞菌带菌情况调查分析

目的：了解市售的外地和本地海涂养殖小水产品中致病性弧菌、气单胞菌的携带分布情况。以指导市民合理食用小水产品，预防此类食物中毒事件的发生。方法：病原菌分离参照《卫生部临床检验操作规程》和《致病性嗜水气单胞菌检验方法》。结果：156份小水产品检样中检出致病性弧菌11种、气单胞菌6种，平均每份检出1．29株，其中56份本地海涂养殖的小水产品份均检出1．43株。副溶血性弧菌总检出率46．15％，其中第三季度高达61．29％。结论：副溶血性弧菌是市售小水产品中最主要的致病性弧菌，第三季度是引起副溶菌食物中毒的最危险季节；气单胞菌也是本地食物中毒的重要致病菌；本地海涂养殖的小水产品中非01群霍乱弧菌携带率显著高于非本地产品。     

霍乱弧菌多重PCR检测方法的建立和运用

[目的]建立一种快速检测霍乱弧菌O1群、O139群、非O1非O139群及是否产毒株的方法。[方法]以霍乱弧菌的外膜蛋白基因（ompW）、编码O1群O抗原基因（O1rfb）和编码O139群O抗原基因（O139 rfb）、霍乱肠毒素A亚单位基因（ctxA）为目的基因,建立一种多重PCR方法对霍乱弧菌进行检测和分型。[结果]根据相关基因携带情况分为6种型别,并分产毒株和非产毒株。以该法对140株霍乱弧菌分型结果与血清学诊断结果相一致,而其它弧菌和肠杆菌等均未检出相关基因。[结论]该方法快速、特异,可应用于霍乱弧菌的检测和分型。     

广州海珠地区非O1/非O139群霍乱弧菌流行状况调查及生物学特征研究

目的 了解广州海珠地区2001-2009年非O1/非O139群霍乱弧菌的流行、分布状况及生物学特征,为防控该类病原菌引起的急性腹泻病提供科学依据.方法 参照<霍乱防治手册>(第5版)中的检测方法,对本区珠江河水、饮用水、养殖水、各种海(水)产品、市售熟食等外环境标本764份、健康人群标本189份及肠道门诊腹泻患者标本3398份,共计4351份标本进行非O1/非O139群霍乱弧菌的检定.结果 4351份标本共检出非O1/非O139群霍乱弧菌101株,总检出率为2.32%;其中有66株可分型,分属于26个血清型,分型率为65.3%;VBO9、VBO38和VBO76为优势菌.外环境与腹泻患者标本中分离到9株同型别非O1/非O139群霍乱弧菌,提示两者可能存在关联.结论 非O1/非O139群霍乱弧菌在本地区的血清型分布呈现多样性,在人群中有一定的感染率;外环境中该类菌群广泛存在,对人群是一个潜在的危害因素.     

温州口岸外环境水体中致病性弧菌的监测

〔目的〕了解温州口岸外环境水体中致病性弧菌的分布情况,为预测霍乱疫情以及制定防治策略和措施提供科学依据。〔方法〕收集口岸内有代表性的外环境水样(包括淡水、沿海水域、下水道排放口和集中式供水网点),进行弧菌科的分离鉴定,并对调查资料进行统计分析。〔结果〕(1)96份样品中55份检出了弧菌科,总检出率为57.3%。检出弧菌共分2属7种85株,其中弧菌属68株(80%);气单胞菌属17株(20%);优势菌为溶藻弧菌、河流弧菌和创伤弧菌。(2)4类外环境水样中弧菌检出率由高到低顺序为:淡水、海域水、下水道排放口、集中式供水网点,其中集中式供水网点无致病性弧菌检出。淡水、海域水、下水道排放口3类水的检出率和构成比之间差异无显著性(P检出率=0.37,P构成比=0.99);(3)6个月中,共检出2株非O1、非O139群霍乱弧菌。〔结论〕在温州口岸外环境水体中未检出所监测的O1群O139群霍乱弧菌,但检出了非O1/非O139群霍乱弧菌。     

烟台市食品行业从业人员肠道致病菌的检测及意义

目的:对烟台市从事食品行业人员的肠道致病菌进行检测,为当地食品安全的危险性评估提供依据。方法:检测2009年-2011年烟台市25600名从事食品行业的服务人员的肠道致病菌;检测方法按照国家标准GB/T4789-2003《食品卫生检验方法微生物学部分》的规定;检测菌群范围包括:沙门菌、志贺菌、豚鼠气单胞菌、致泻性大肠杆菌、溶藻弧菌、嗜水气单胞菌、霍利斯弧菌、非O1群霍乱弧菌、副溶血弧菌。结果:(1)根据生化鉴定结果表明其生化谱线符合率为93.8%～99.9%;(2)检出肠道细菌254份,阳性率为0.99%,其中弧菌科细菌为144株(含117株副溶血弧菌,12株溶藻弧菌,6株温和气单胞菌,5株非O1群霍乱弧菌,2株豚鼠气单胞菌,1株嗜水气单胞菌,1株霍利斯弧菌),占检出肠道细菌的56.69%;肠道杆菌细菌为110株(含76株沙门菌6,株志贺菌,9株致病性大肠杆菌,14株侵袭性大肠杆菌,5株产毒性大肠杆菌,占检出肠道细菌的43.30%。肠道致病菌的阳性率呈现出逐年下降的趋势,差异有显著的统计学意义;(3)检出的肠道致病菌中,以副溶血弧菌(46.06%)和沙门菌(29.90%)阳性率为最高。结论:食品行业服务人员病原菌携带的肠道致病菌以肠道弧菌为主要的病原菌。对该人群进行健康携带病原细菌调查,有利于找出微生物引起食源性疾病的关键控制点,从而采取针对性措施来规范相关人员健康检查的工作以保障食品卫生安全。     

平湖市市售水产品中致病性弧菌检测结果

目的了解平湖市市售水产品中副溶血性弧菌、创伤弧菌和霍乱弧菌的污染状况及其致病力,为预防食源性疾病并制定防控措施提供依据。方法采集2016—2017年平湖市海鲜批发市场、农贸市场及大型超市的海水产品和淡水产品,采用弧菌显色法进行副溶血性弧菌、创伤弧菌和霍乱弧菌定性检测,并进行毒力基因、血清型和药敏试验。结果 239份市售水产品中,副溶血性弧菌检出率为51.46%,创伤弧菌检出率为0.84%,O1群和O139群霍乱弧菌未检出。副溶血性弧菌血清型以O1、O2、O4和O5为主,分别占13.01%、26.02%、17.07%和17.07%,所有菌株均携带tlh基因,未携带tdh、trh基因,均为非毒力株,氨苄西林耐药率为69.57%;2株创伤弧菌均携带vvhA毒力基因,且对头孢西丁耐药。结论平湖市市售水产品中的致病性弧菌以副溶血性弧菌为主,均为非毒力株,不具有致病力。     

南昌市青山湖区2007—2009年霍乱监测结果分析

[目的]了解南昌市青山湖区外环境水体中O1和O139群霍乱弧菌的存在和水产品污染状况,及时发现霍乱病例,为指导防治提供依据。[方法]2007—2009年的4~10月在全区选择监测区域,对外环境水体、水产品及腹泻病人标本进行监测。[结果]采集各类标本共3 710份,检出O1和O139群霍乱弧菌18份(0.5%),其中水体占0.4%,水产品占0.6%,腹泻病人粪便标本占0.3%。2008年阳检率(0.7%)高于2007年(0.4%)和2009年(0.3%)。标本来源:水产品11份(61.1%),水体5份(27.8%),腹泻病人粪便标本2份(11.1%);血清学分型:9份稻叶型,占阳性菌株50.0%,8份O139型,占44.4%,1份小川型,占5.6%。除2份腹泻病人的O139血清型含毒力基因外,其余血清型均不含毒力基因。[结论]青山湖区外环境水体及水产品存在O1和O139群霍乱弧菌,是外环境水体中的正常菌群,应继续加强监测,及时发现致病菌及传染源,以采取相应防控措施。     

2005～2007年莱州市外环境水体霍乱弧菌检测情况报告

[目的]了解菜州市外环境水体霍乱弧菌的存在及分布情况,为监督监测和预防霍乱提供科学依据.[方法]对2005～2007年莱州市外环境水体504份按<霍乱防治手册>规定方法进行霍乱弧菌检测.[结果]在外环境水体标本中检出不典型O1群霍乱弧菌2株,非O1、O139群霍乱弧菌145株.[结论]外环境水体存在非O1、O139群霍乱弧菌,应加强霍乱监测工作,避免霍乱疫情的发生.     

烟台地区非O1/O139群霍乱弧菌致病性分析

目的了解烟台地区非O1/O139群霍乱弧菌致病性现状。方法分别于2020年7月和11月、2021年的1月和4月对烟台市某两条河入海口采集样本32份, 获得22株非O1/O139群霍乱弧菌分离菌株, 采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对分离菌株进行分子分型, 采用聚合酶链式反应(PCR)方法对该22株分离菌株的毒力基因ctxA、ctxB、ace、cep、zot、rtxA、hlyA、toxR、tcpA和cri进行检测分析。结果 22株非O1/O139群霍乱弧菌菌株间的条带相似度为23.0%～100.0%, 分为17个PFGE型, 呈高度的多态性带型分布。22株非O1/O139群霍乱弧菌分离株主要携带3种毒力基因(rtxA、tcpA和zot), 其中携带rtxA和tcpA最多, 均为17株, 其次是zot, 共14株。14株菌株同时携带rtxA、tcpA和zot, 5株不携带上述毒力基因。结论烟台地区入海口流行的非O1/O139群霍乱弧菌株污染情况多样化, 主要携带具有黏附、毒素以及损伤小肠表皮细胞等方面的致病基因。     

宁波市人群中非O1群霍乱弧菌携带及其毒性研究

目的：非O1群霍乱弧菌是我市感染性腹泻的常见病原菌，通过研究其在人群中携带频度和产生毒素的种类，有利于对该疾病采取针对性措施。方法：用筛检方法分离菌株，经系统生化血清分型确定型别，K-B法测定菌株的耐药性，用PCR、ELISA和动物等试验测定细菌的毒性。结果：从18416份标本中检出O1群霍乱弧菌236株，检出率为1．28％，其中腹泻病人检出率为8．3％，健康人群为0．3％，分属于25个血清型、9个噬菌体，除对青霉素有较高的耐药性外，其他常用抗生素敏感在67．6％-100．0％之间，发现有15．3％的菌株对弧菌抑制剂O／129抗性。92．0％的非O1群霍乱弧菌对小鼠有毒性，CT毒素检出率为1．3％；ST毒素检出率为78．8％；溶血素血平板法阳性率为94．4％、试管法阳性率为88．9％；未检出耐热性溶血素、Vero毒素等多种。结论：宁波市人群中携带一定数量的非O1群霍乱弧菌，腹泻病人中检出率较高，健康人群携带率稍低，与报道一致。7-10月份为检出高峰，与疾病流行规律相符。菌株的生化和药敏特征未发现变异，但抗弧菌抑制剂O／129现象较严重，在鉴定、鉴别时应加以关注。从细菌中检出多种致病毒素，并对小鼠的有较强的致病作用。说明该菌的综合毒力较强。结果提示我们，非O1群霍乱弧菌的致病因子复杂程度高于O1群霍乱弧菌，应引起我们的重视。     

广东省2011—2013年腹泻病例非O1/O139群霍乱弧菌耐药性及分子特征

目的分析2011—2013年广东省腹泻病例非O1/O139群霍乱弧菌的耐药性及分子特征,为霍乱防控提供依据。方法选取2011—2013年广东省腹泻病例非O1/O139群霍乱弧菌分离株20株,以及同时期海水产品分离株4株,采用抗菌药物敏感试验、毒力基因PCR检测和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型方法,分析其耐药性及分子特征。结果抗菌药物敏感性试验结果显示,分离株对复方新诺明、萘啶酸和四环素的耐药率分别为70.8%(17/24),37.5%(9/24)和20.8%(5/24);对头孢曲松和阿米卡星则完全敏感。毒力基因PCR检测结果显示,所有的菌株均携带hly A和toxR基因,而所有菌株均未检出ctxA、tcp A、ace、zot、st等5种毒力基因。菌株经NotⅠ酶切后的PFGE型别表现出明显的多样性,病例菌株与海水产品分离株的带型差别较大。结论广东省非O1/O139群霍乱弧菌毒力基因和遗传特征复杂多样,菌株对多种抗菌药物高度耐药,耐药率较高,需加强腹泻病例中非O1/O139群霍乱弧菌的菌株型别变异及耐药监测。     

鸭绿江中上游水中70株非O_1群霍乱弧菌的血清学分型和药敏分析

目的对鸭绿江中上游水中70株非O1群霍乱弧菌进行实验研究。方法采用手工生化和全自动细菌鉴定/药敏系统相结合的方法,进行血清学分型和药敏测定。结果 41株能被非O1群霍乱弧菌诊断血清(VBO)分型,其中16株有生化变异,12株生化结果全部符合非O1群霍乱弧菌但未确定血清型别。70株非O1群霍乱弧菌对环丙沙星全部敏感,对氨苄青霉素、红霉素有较高的耐药性,对其他12种抗生素敏感率为37.7%～95.7%。结论本研究为非O1群霍乱弧菌感染防治提供科学依据。     

宁波市发现非O1群霍乱弧菌抗0／129磷酸盐特性的初步研究

O/ 12 9(二氨基二异丙基喋啶磷酸盐 )是一种弧菌抑制剂 ,长期以来 ,被用作鉴别弧菌科细菌、气单胞菌科细菌及邻单胞菌属细菌种间的一项重要试验。目前认为 ,弧菌属细菌对15 0 μgO/ 12 9均敏感 ,而霍乱弧菌还对 10 μgO/ 12 9敏感。我们在对分离自饮服业从业人员的非O1群霍乱弧菌进行鉴定时发现其抗O/ 12 9,因此 ,对这些菌株作了初步研究 ,现将结果报告如下 :1　材料与方法1.1　菌株来源　 4株菌株均来自饮服业从业人员 ,按文献[1]方法分离 ,其生物学特性为葡萄糖产酸不产气 ,在无盐胨水和3%盐胨水中生长 ,6 %盐胨水不生长 ,动力阳性 ,鸟…     

非O1群霍乱弧菌检测及其毒性分析

非O1群霍乱弧菌是指除O1群霍乱弧菌和O139群霍乱弧菌以外的霍乱弧菌的总称，是引起我市夏、秋季腹泻和食物中毒的主要病原菌，一般认为食用受该类细菌污染的水产品等是诱发腹泻疾病的主要因素，其发病率超过沙门菌、志贺菌。有研究显示，该类弧菌很可能是新型霍乱弧菌产生的重要来源，是一个潜在的病原微生物库。其重要性正被重新认识。为此，本文对人群中的非O1群霍乱弧菌携带及其毒性进行研究。现将结果报告如下。     

抗O/129弧菌抑制剂的非O1群霍乱弧菌特征

非O1群霍乱弧菌的鉴定常用生化、血清学等试验来确定，其中二氨基二异丙基喋啶磷酸盐(O1／129弧菌抑制剂)试验是鉴别非O1群霍乱弧菌等弧菌科细菌与其他细菌的特异性试验。常作为细菌命名的重要依据，在重要的微生物学检验专著上都认为弧菌属细菌对O／129弧菌抑制剂10，150μg敏感。本文对从业人员和腹泻病人中检出的非O1群霍乱弧菌抗O／129弧菌抑制剂菌株进行耐药性、毒力等检测，探讨其与致病力的相关性。现将鉴定结果报告如下。     

市售甲鱼带菌引发霍乱疫情病原学研究

[目的]弄清O139群霍乱弧菌在我市引起突发公共卫生事件的原因及传播来源,找到防控措施。[方法]用碱性胨水对所采样品进行增菌,四号琼脂平板作病原菌分离,Cpi20E作生化学鉴定,O139诊断血清作菌群诊断,同时用PCR作菌株毒力测定,引物是CtxA,用KB法作药物敏感试验。[结果]我市O139群霍乱疫情共作样本215件,检出42株病原性弧菌,并从相关食物链甲鱼中检出3株,生化鉴定率为99.9%,从病人及甲鱼中检出的O139群霍乱弧菌生化反应一致,毒力基因相同。对青霉素等数10种抗生素耐药、先锋类及复哌酸敏感。[结论]我市O139群霍乱疫情由外地输入甲鱼带染所致,病人及甲鱼中检出O139群霍乱弧菌具有同源性。