抗结核药物对非结核分枝杆菌菌种鉴定的试验

报告２２种非结核分枝杆菌典型株对１２种抗结核药物的敏感性试验结果,２２种非结核分枝杆菌在食ＴＨ１３２１,ＴＢ１,ＰＡＳ,ＩＮＨ培养其呈现不同程度耐药性,胞内分枝杆菌等１３种非结核分枝杆菌在含ＳＭ,ＥＭＢ,ＲＦＰ培养基呈现不同程度耐药性,鸟分枝杆菌等６种非结核分支杆菌在含ＮＦＬＸ,ＯＦＬＸ,ＣＦＬＸ培养基呈现不同程度耐药性,海分枝杆菌等３种非结核分枝杆菌在含ＣＰＭ培养其呈现不同程度耐药性,龟分枝杆菌     

结核分枝杆菌快速培养方法的建立及临床应用初步观察

目的 观察结核分枝杆菌在自制培养基上的生长情况，建立快速培养方法。方法将改良罗氏培养基的成分进行改进，自制5种培养基，每种3支，每支接种菌量10-3mg，观察结核分枝杆菌标准株生长情况。并以第5号培养基3种成分不同浓度做正交叉实验，得出最佳浓度。收集临床标本，在自制培养基上培养观察。结果 结核分枝杆菌标准株在5种自制培养基上，菌落开始生长天数及典型菌落出现天数均比改良罗氏培养基短，两者差异均具有显著性（P〈O．01）。第5号培养基以25％牛肉浸液，20％当归浸液，20％党参浸液的浓度最佳，结核分枝杆菌标准株接种后第3～5d开始生长，第7～9d出现典型的“菜花状”菌落。临床标本接种在改良罗氏及自制培养基上，阳性分离率差异无显著性（f—O．09，P〉O．05），两种培养基上典型菌落形成的平均天数差异有显著性（f一6．828，P〈O．001）。结论 结核分枝杆菌标准株在自制第5号培养基上生长快，培养时间短，为该菌培养提供了一种新的快速培养基，在临床上有一定的实用价值，值得进一步研究、推广。     

平菇双相培养基用于结核杆菌培养的研究

目的 以平菇浸出液为基础成分,研制培养结核分支杆菌的一种新型双相培养基。方法 经用H37Rv基础试验及对351份临床标本用酸性罗氏培养基对照。结果 两种培养基总阳性数为172份（49％）,其中平菇双相培养基166份（＋）,阳性检出率为47．3％。酸性罗氏培养基144份（＋）,阳性检出率为41．03％。分别占总阳性数的96．51％和83．72％,并且大多数结核杆菌在平菇双相培养基上的初生长时间明显快于酸性罗氏培养基时间。结论 结果表明平菇双相培养基成分来源丰富,价格低廉,制作方便,操作简单,适合于我国广大基层医院和结核院所使用。     

发展中国家使用固体和液体培养基进行结核分枝杆菌培养的费用和成本效益研究

背景：发展中国家已经提出通过开展结核分枝杆菌（以下简称结核分枝杆菌）培养来加强结核病（TB）控制工作。目的：研究赞比亚国家结核病参比实验室自制的和商业生产的改良罗氏培养基（HLJ和CLJ）,以及自动和手工的液体培养基（AMGIT和MMGIT）费用和成本效益。方法：费用是从供应商的角度根据每月平均结核分枝杆菌培养标本量来进行估算的。成本效益的估计是建立在研究期间收益。结果：4种培养方法,每个标本培养成本相当（均在28-32美元之间）。发现1个结核分枝杆菌阳性样本,使用手动液体培养MMGIT、自动液体培养AMGIT、商业生产的改良罗氏培养CLJ和实验室自制的改良罗氏培养HLJ,成本分别为197美元,202美元,312美元和340美元。4种培养方法,当培养标本量达到最大时,发现1个结核分枝杆菌阳性样本成本均高于95美元。当仅对涂片阴性的样本进行检测时,应用手动液体培养MMGIT确定1个额外的结核分枝杆菌阳性样本需要487美元,其他方法价格更高。结论：基于成本效益的理由,液体培养基相比传统的固体培养基更好,特别是液体培养基的产量大大高于传统罗氏培养基。结果表明：总体上,结核分枝杆菌培养成本较高,将培养扩展到标本量较低的基层防治机构可能会导致更高的成本。     

两种固体培养基培养结核杆菌的比较

为提高结核菌培养阳性率,缩短培养时间,我科在1978年对本院门诊和住院病人的300份临床标本同时接种两种固体培养基进行比较。自1979年即使用上述两种培养基作结核菌常规培养,至1982年3月共培养了临床标本1192份。现将结果报告如下: 材料和方法一、培养基 1. 罗～琴氏培养基; 2.加入0.1％丙酮酸钠、0.25％葡萄糖,去甘油的改良罗氏培养基(下简称丙酮酸钠培养基)。二、标本来源 1.300份标本来源:本院结核病人痰258份,尿9份,胸水2份,胆汁1份。 2.1192份常规标本来源:本院结核病人痰1131份,尿42份,胸水9份,脓4份,便4份,脑脊液2份。     

建立长期保存结核分支杆菌的方法

结核分支杆菌的生存主要依靠培养基的各种营养物质,培养基质量的优劣直接关系到细菌寿命的长短、生长的状况和是否产生变异.多次转种不同质量的培养基,也可使细菌产生变异.因此,寻找结核分支杆菌长期保存方法是十分重要的课题.     

平菇双相培养基用于结核杆菌培养的研究

目的　以平菇浸出液为基础成分,研制培养结核分支杆菌的一种新型双相培养基。方法 经用H₃₇R_v基础试验及对351份临床标本用酸性罗氏培养基对照。结果 两种培养基总阳性数为172份(49%),其中平菇双相培养基166份(+),阳性检出率为47.3%。酸性罗氏培养基144份(+),阳性检出率为41.03%。分别占总阳性数的96.51%和83.72%,并且大多数结核杆菌在平菇双相培养基上的初生长时间明显快于酸性罗氏培养基时间。结论 结果表明平菇双相培养基成分来源丰富,价格低廉,制作方便,操作简单,适合于我国广大基层医院和结核院所使用。     

鉴别人型及牛型结核分支杆菌的方法比较

本文对４４７株结核分支杆菌，用ＴＣＨ鉴别培养基、硝酸还原和烟酸试验３种方法进行人型及牛型结核分支杆菌的鉴别比较，３种方法的鉴别结果有明显统计学差异，（Ｐ＜０．０５～０．０１）。提示应用一种方法进行鉴别的准确性不可靠。因此，鉴别时，可使用ＴＣＨ鉴别培养基和烟酸试验两种方法，当结果不一致时应补作硝酸还原试验。这样可提高鉴别的可靠性。     

二种结核分枝杆菌药物敏感试验方法的评估

结核分枝杆菌药物敏感试验通常采用L-J常规法中的绝对浓度法,即在固体改良罗氏培养基中加入各种抗结核药物,药物分低浓度和高浓度两种浓度,根据细菌在培养基上的生长情况判断药物敏感试验的结果。目前,许多单位采用BACTEC法,即在12B培养基中加入各种抗结核药物,根据结核分枝杆菌的生长指数 (GI值)判断药物敏感试验的结果,此法与比例法有所相同。本院实验室对300例住院初、复治病人的痰标本分离培养后的结核分枝杆菌,进行了上述二种方法的药物敏感试验,观察二种方法对抗结核药物耐药性的符合率及耐药性的检出率。     

永磁场对结核分枝杆菌生长影响的初步观察

近年来，不少学者致力于结核分枝杆菌快速培养的研究，但大多着眼于培养基本身的改变，即需加入若干种特殊的成份。我们在常规的改良罗氏培养基的基础上，将一定强度的永磁场作用于结核分枝杆菌，收到了明显的培养效果，现报告如下。     

福建省肺非结核分枝杆菌临床分离株的菌种鉴定（英文）

目的对2005-2011年间,福建省福州市胸科医院分离获得的非结核分枝杆菌临床菌株进行菌种鉴定。方法分别使用传统鉴别培养基法和多位点PCR、hsp65-PRA与rpoB-PRA,以及hsp65、rpoB、16srRNA和ITS基因测序等分子生物学方法,对全部菌株进行菌种鉴定。结果 450株被初步鉴定为非结核分枝杆菌的临床分离菌株中,有45株被鉴定为结核分枝杆菌,其余405株被鉴定为23种不同的非结核分枝杆菌和1株支气管戈登菌。结论在该地区有多种非结核分枝杆菌传播和流行,其中,6种非结核分枝杆菌和支气管戈登菌为在福建省内首次发现。     

永磁场对结核分枝杆菌生长影响的初步观察

近年来,不少学者致力于结核分枝杆菌快速培养的研究,但大多着眼于培养基本身的改变,即需加入若干种特殊的成份^[1-3]。我们在常规的改良罗氏培养基的基础上,将一定强度的永磁场作用于结核分枝杆菌,收到了明显的培养效果,现报告如下。     

抗结核药物诱导结核分支杆菌形成L型及其特性的观察

目的 观察常用抗结核药物对结核分支杆菌L型的诱导作用以及结核分支菌L型在非高渗透压培养基内的某些特性及其抗菌药物敏感性,探讨结核分支菌L型形成的机制及其在结核病的发生、诊断及治疗上的意义。方法 将结核分支杆菌接种于含有利福平、异烟肼、乙胺丁醇的非高渗透压培养基内,逐日在显微镜下观察结构分支杆菌L型的形成情况。L型形成后将培养物过滤,获得结核分支杆菌L型纯培养物并对其形态、培养、抗菌药物敏感性、结核分支杆菌特异性基因等进行观察。结果 结核分支杆菌在常规药敏试验浓度的利福平、异烟肼、乙胺丁醇的作用下均可形成L型。结核分支杆菌L型对这些抗结核药物不再敏感,但对链霉素、红霉素、氧氟沙星、诺氟沙星等抗菌药物均敏感。结核分支杆菌L型在非高渗透压培养基内呈圆球或不规则形态的细胞,单个、成双或链状排列,沉于培养基底部生长,不粘附瓶壁,不运动,抗酸染色阴性,革兰染色阴性或阳性,保留了结核分支杆菌特异性PCR引物基因序列。结论 利福平、异烟肼、乙胺丁醇虽然能够杀灭结核分支杆菌细菌型,但也能够诱导其形成L型而造成这些抗结核药物对结核治疗无效。非高渗培养基传代培养的结核分支杆菌L型保留了与其亲代细菌型一致的PCR引物基因序列,以致可用结核分支杆菌特异性PCR鉴定。根据结核分支杆菌L型的药物敏感性特点,建议在使用抗结核药物治疗中须注意其L型的形成和联合使用结核分支杆菌L型敏感的抗菌药物进行治疗。     

福建省肺非结核分枝杆菌临床分离株的菌种鉴定

目的 对2005-2011年间,福建省福州市胸科医院分离获得的非结核分枝杆菌临床菌株进行菌种鉴定.方法 分别使用传统鉴别培养基法和多位点PCR、hsp65-PRA与rpoB-PRA,以及hsp65、rpoB、16s rRNA和ITS基因测序等分子生物学方法,对全部菌株进行菌种鉴定.结果 450株被初步鉴定为非结核分枝杆菌的临床分离菌株中,有45株被鉴定为结核分枝杆菌,其余405株被鉴定为23种不同的非结核分枝杆菌和1株支气管戈登菌.结论 在该地区有多种非结核分枝杆菌传播和流行,其中,6种非结核分枝杆菌和支气管戈登菌为在福建省内首次发现.     

结核分支杆菌植物激素培养基的研究

本文报道了一种促进结核分支杆菌快速生长的植物激素培养基并与改良罗氏培养基比较结果:试验菌H_(37)R_a在此培养基上,菌落初生长时间为3.3天(10~(-2)mg接种量)和9.3天(10~(-5)mg接种量),改良罗氏培养基分别为7.6天和13.6天。H_(37)R_a菌在上述两种培养基上的增代时间分别为13.1小时和16.1小时。经临床618例结核病病人痰培养比较,激素培养基出现阳性结果时间平均为10.6天,改良罗氏培养基平均为22.6天,两种培养基有极显著差异。     

酸性罗氏培养基加大豆汁快速培养结核分枝杆菌的研究

结核分枝杆菌生长缓慢,营养要求比较高。为了能较快地分离出结核分枝杆菌,国内外科研机构和临床试验室都在不断探索,改良、研制、合成组分不同的结核分枝杆菌分离培养基^[1]。我们发现用大豆汁取代蒸馏水制备的酸性罗氏培养基培养结核分枝杆菌生长较快,菌落典型,时间大为缩短,具有一定的实用价值,现报告如下。     

微孔板Alamar blue显色法检测结核分枝杆菌氧氟沙星耐药性的研究

目的 评价微孔板Alamar blue显色法检测结核分枝杆菌氧氟沙星耐药性的可行性。方法 用微孔板Alamar blue显色法对78株结核分枝杆菌检测氧氟沙星的最小抑菌浓度,记录获得结果时间,利用ROC曲线确定氧氟沙星的最佳耐药阈值,并和传统的药物敏感性实验罗氏培养基比例法进行比较。结果 微孔板Alamar blue显色法获得结果平均时间为8 d,氧氟沙星的最佳耐药阈值为2 μg/mL,以罗氏培养基比例法为金标准,氧氟沙星的灵敏度和特异度分别为88.6%和94.1%。结论 微孔板Alamar blue显色法是一种简便、敏感、快速的药物敏感性检测方法,可用于结核分枝杆菌氧氟沙星耐药性的快速检测。     

酸性罗氏培养基加大豆汁快速培养结核分枝杆菌的研究

结核分枝杆菌生长缓慢，营养要求比较高。为了能较快地分离出结核分枝杆菌，国内外科研机构和临床试验室都在不断探索，改良、研制、合成组分不同的结核分枝杆菌分离培养基。我们发现用大豆汁取代蒸馏水制备的酸性罗氏培养基培养结核分枝杆菌生长较快，菌落典型，时间大为缩短，具有一定的实用价值，现报告如下。     

结核分枝杆菌胶体金法快速鉴别试剂盒的临床应用观察

目前,传统的分枝杆菌菌种鉴定方法需在改良罗氏L-J培养基、硝基苯甲酸PNB和2-噻吩羧酸肼(TCH)鉴别培养基上初步鉴定结核分枝杆菌(MTb)和非结核分枝杆菌(MOTT)后,再观察细菌菌落形态、生长速度、生长温度和色素,并进行一系列生化试验,操作繁琐、费时,影响因素多;其他,如BACTEC-TB系统的NAP试验和Gen-Probe系统的结核分枝杆菌直接检测(MTD)试验等也可快速鉴别结核分枝杆菌复合群(MTC)和MOTT,但试剂仪器价格昂贵,难以在普通实验室广泛开展。     

结核分枝杆菌126株药敏结果分析

在日常工作中．我们发现有些结核分枝杆菌有药物依赖现象．尤其是耐多药菌．其菌落生长旺盛程度和数量．往往是高浓度药物培养基大于(或等于)低浓度药物培养基以及大于(等于)对照组培养基。为此特进行试验研究．以分析结核分枝菌依赖抗结核药物的发生率及特点。