大鼠肝癌细胞系H4—ⅡE钙内流的检测方法

目的 利用大鼠肝癌细胞系Ｈ４Ⅱ－Ｅ建立一种适用于贴壁生长的细胞检测细胞内游离钙离子（〖Ｃａ＾２＋〗ｉ浓度的方法。原理 用荧光染料ｆｌｕｏ－３在细胞内能与ａ＾２＋结合。在一定波长的光激发下,可发出荧光,根据荧光的强度来检测细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度及钙内流的方法。方法 以Ｈ４－ⅡＥ细胞系为材料,通过Ｃａ＾２＋回加技术、荧光显微镜技术和ＵＭＡＮＳ计算机软件或Ａｘｏｎ计算机成像系统来记录图像和处理数据。结     

内毒素对内皮细胞钙,钙—钙调蛋白复合物的影响

本实验对内毒素(ET)作用前、后的传代内皮细胞(EC)的钙含量和钙-钙调蛋白复合物进行了定量及半定量测定。旨在探索ET对EC内钙含量和钙-钙调蛋白复合物的影响及其在治疗学上的意义。结果显示,ET能促使钙-钙调蛋白复合物解离;能使EC内钙含量显著性增加。     

星形胶质细胞钙调蛋白在损伤后胶质瘢痕形成中的作用

目的:探讨钙调蛋白对星形胶质细胞损伤后增生及胶质瘢痕形成的影响.方法:体外纯化培养星形胶质细胞,机械划痕法构建星形胶质细胞损伤模型,动态观察星形胶质细胞损伤前后钙离子浓度的变化,以及损伤后应用钙调蛋白抑制剂三氟拉嗪(Trifluoperazine dihydrochloride,TFP)处理,星形胶质细胞增生的主要标志物GFAP表达的变化.采用激光共聚焦观察细胞内游离钙离子浓度动态变化,免疫组织化学染色方法检测星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(Glia fibrillary acidic protein,GFAP)表达量的变化.结果:星形胶质细胞损伤后细胞内钙离子浓度迅速上升,2 min后明显下降至接近基础水平.星形胶质细胞损伤后钙调蛋白抑制剂能够抑制星形胶质细胞GFAP蛋白表达量的增加.结论:星形胶质细胞损伤后钙离子浓度明显变化,激活细胞内钙离子信号传导并参与星形胶质细胞损伤后的增生反应,而钙调蛋白抑制剂三氟拉嗪对星形胶质细胞损伤后的增生反应有显著的抑制作用.     

阿司匹林诱导肿瘤细胞凋亡促进钙网蛋白表达的研究

目的探讨阿司匹林对肿瘤细胞凋亡及肿瘤细胞钙网蛋白(calreticulin,CRT)表达的影响。方法选择人的肝癌细胞系Hep G2作为目标细胞,用不同浓度的阿司匹林培养目标细胞,光镜下观察细胞活性,采用MTT法检测肿瘤细胞的凋亡,免疫荧光方法检测肿瘤细胞钙网蛋白表达量。结果 5μmol/ml,10μmol/ml,15μmol/ml浓度下的阿司匹林培养的肿瘤细胞,其对应的肿瘤细胞的抑制率分别为17.9%±1.65%,33.25%±3.77%,61.25%±3.86%,同时,对应肿瘤细胞钙网蛋白的表达量呈递增趋势。结论阿司匹林可以抑制人肝癌细胞Hep G2的生长,促进肿瘤细胞钙网蛋白的表达量,从而为肿瘤的免疫治疗提供了一个新的思路。     

青春双歧杆菌菌液对肝癌腹水瘤细胞内某些钙稳态指标的影响

作者采用青春双歧杆菌菌液与小鼠肝癌腹水癌细胞系ＨＣａ／１６Ａ３－Ｆ相互作用，测定了作用前后肿瘤细胞线粒体钙及细胞核钙浓度的变化。发现二者钙水平对照组明显升高。即胞内贮钙增加，提示可能导致胞液钙水平下降。结果表明双歧杆菌菌液对小鼠肝癌腹水瘤细胞系ＨＣａ／１６Ａ３－Ｆ胞内钙稳态具有一定的影响，可为双歧杆菌的抗肿瘤作用提供一定的依据。     

大鼠肝癌细胞系H4-ⅡE钙内流的检测方法

目的利用大鼠肝癌细胞系H4-ⅡE建立一种适用于贴壁生长的细胞检测细胞内游离钙离子([Ca2+]i)浓度的方法.原理用荧光染料fluo-3在细胞内能与游离Ca2+结合.在一定波长的光激发下,可发出荧光,根据荧光的强度来检测细胞内游离Ca2+浓度及钙内流的方法.方法以H4-ⅡE细胞系为材料,通过Ca2+回加技术、荧光显微镜技术和UMANS计算机软件或Axon计算机成像系统来记录图像和处理数据.结果可检测、定量细胞内游离Ca2+的浓度,并可用以研究细胞钙信号的传递和传导机制.结论该方法较为简便、易行,相对费用较低,适用于国内实验室.     

容积性钙内流与花生四烯酸介导性钙内流之间的相互作用

目的：在人胚肾细胞（HEK293 cells）研究容积性钙内流和花生四烯酸激活性钙内流的相互作用。方法：采用荧光探针Fura2/AM技术测定HEK293细胞内钙对花生四烯酸、Thapsigargin反应变化。结果：容积性钙内流可被花生四烯酸明显抑制,花生四烯酸所致钙内流亦可被容积性钙内流激动剂所抑制,这种交互抑制并非由药物化学性互相影响,肌浆网钙泵的抑制,钙池耗竭,或来自于容积性钙内流本身。相反,这种抑制可能与容积性钙内流激活过程和花生四烯酸激活过程相互作用在关。结论：容积性钙内流与花生四烯酸所致的钙内流呈现相互抑制作用,这种抑制可防止细胞出现中毒性钙超载。     

大鼠肠肌间神经元胃动素受体的表达及胃动素引起神经元内钙信号的机制

目的观察大鼠肠肌间神经元胃动素受体(MTLR)的表达,并探讨胃动素引起神经元内钙信号的机制。方法采用免疫荧光双标技术观察大鼠肠肌间神经元MTLR的表达;应用激光共聚焦显微镜技术检测不同药物处理组胃动素引起的单个神经元内Ca2+荧光强度的变化。结果大鼠肠肌间神经元呈MTLR免疫反应阳性表达;在Hank's液中,10-6mol/L胃动素可引起神经元内Ca2+浓度的显著升高,其峰高(峰值减去静息值)为30.6±3.7,荧光强度相对变化百分比为(100.8±18.4)%。在D-Hank's液(去除细胞外Ca2+)中或用L型钙离子通道阻断剂维拉帕米预处理细胞后,胃动素可轻度升高胞内Ca2+浓度。与单独应用胃动素组相比差异有统计学意义(P<0.05)。当分别用G蛋白拮抗剂NEM和PLC抑制剂Compound48/80预处理细胞后再加入胃动素,胞内Ca2+浓度升高的程度明显降低,与单独应用胃动素组相比差异有统计学意义(P<0.05)。当用PKC抑制剂D-鞘氨醇预处理细胞后,再加入胃动素,其峰高和荧光强度相对变化百分比同单独应用胃动素组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论大鼠肠肌间神经元能自身表达MTLR。胃动素可明显升高神经元内Ca2+浓度,胞内Ca2+浓度的升高既源于外钙的内流又源于内钙的释放。外钙的内流主要通过L型Ca2+通道,G蛋白偶联型MTLR-PLC-IP3途径参与细胞内钙的释放。     

预防性应用钙拮抗剂以缺血大鼠心肌细胞和红细胞内钙变化的影响

利用大鼠氛缺血模型观察预防性应用钙拮抗剂尼莫地平对大鼠缺血心肌和红细胞内钙的影响发现，缺血时大鼠心肌细胞、心肌组织和红细胞摧均有钙积聚，红细胞膜钙活性下降；缺血前３０分钟给予尼莫地平可使红细胞内钙恢复至正常水平，红细胞膜钙泵活性升高；心肌细胞和心肌组织内钙虽较缺血鼠降低，但仍高于对照组，提示：（１）缺血时细胞的钙内流可能是全身性的；（２）预防性应用尼莫地平可阻滞或减轻细胞内钙超载，同时还可保护细胞     

细胞核内的钙及钙结合蛋白

<正>众所周知,钙离子是细胞浆中的第二信使,在细胞的信息传导中起着重要的作用。但对钙离子以及钙结合蛋白(Calcium binding proteins)在细胞核的信息传导和在核内活动的调节中所起的作用知之甚少。近年来,已有一些研究揭示了跨膜核内钙离子梯度的存在和核内钙结合蛋白的多样性,从而引导对钙及钙结合蛋白参与核内活动研究的深入。     

2001年我国医药研究的若干进展

随着国内外生命科学和生物技术等的飞速发展,我国医药技术在2001年取得了长足的进步。提前完成了我国所承担的人类基因组汁划中的1％测序任务,到2000年,中国科学家在功能基因研究和基因组多样性领域共完成研究论文1850篇,遍及医药各领域,研究手段和水平可于国际先进水平媲美,中国完全有条件在“后基因时代”成为主角之一。     

小儿耳鼻喉手术麻醉的新进展

因小儿耳鼻喉手术刺激强,时间短,且常与气道相关,故麻醉的控制有一定难度,现对国内外现阶段小儿耳鼻喉手术麻醉的改良方法及新观点进行评述,以期对临床工作有较好的指导意义。     

成都市属医院1，175例儿童支气管肺炎住院费用分析

为探讨成都市不同级别医疗机构儿童支气管肺炎单病种费用水平以及不同收费项目占总费用的比例特点及控制医疗费用的有效途径,为患者自主选择就诊医疗机构提供参考指导,对成都市卫生局所属不同级别医院儿童支气管肺炎住院医疗费用分析如下。1资料与方法1.1资料来自成都市卫生局2     

Malaria in children in Birmingham in the 1970s

Thirty-two children with malaria were admitted to Dudley Road Hospital, Birmingham, in the 1970s. None was admitted before 1974 and there was a rapid increase after that. All the infections were due to Plasmodium vivax and occurred in children of Asian immigrant families who had been born in or had visited India or Pakistan apart from one infant born in England who acquired the disease transplacentally. All presented within 12 months of entering or re-entering the United Kingdom. The clinical features of the 32 patients have been analysed and it is suggested that more effort should be made to educate travellers about the need for anti-malarial chemoprophylaxis and the necessity to continue it for one month after return.     

2005年广西流动人口疟疾监测结果分析

目的了解广西流动人员疟疾流行现状,进而提出针对性防治措施。方法收集全区网络直报疫情资料和各级疾病预防控制机构疟疾监测数据进行分析。结果2005年广西流动人口发热病人平均疟原虫阳性率为0·33%。80·62%的病人为本地居民外出到疟疾流行区务工感染所致。以从事护林/砍伐比例最高,占44·19%。结论加强返乡流动人口疟疾监测是巩固广西疟疾防治的关键所在。