曲古霉素A对食管癌细胞系EC9706细胞凋亡的作用及机制

目的探讨曲古霉素A（TSA）对食管癌细胞系EC9706细胞凋亡的影响及机制。方法用AnnexinV-FITC和PI进行双染色,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测TSA对食管癌细胞凋亡相关基因表达的影响。结果 1.0μmol/L的TSA诱导EC9706细胞凋亡率增加（P〈0.05）,且呈浓度依赖性;0.5μmol/L的TSA作用48 h后细胞凋亡率增加（P〈0.05）,呈时间依赖性。TSA处理的EC9706细胞Bax蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达减少;TSA诱导EC9706细胞caspase-8及caspase-9裂解活化,且随作用时间延长逐步升高。结论一定量的TSA可以诱导EC9706细胞凋亡,凋亡原因与Bax表达增强、Bcl-2减少以及凋亡细胞中caspase-8及caspase-9介导的caspase-3活化有关。     

铁对人肺腺癌A549细胞凋亡的体外影响

目的了解加铁、去铁对体外培养人肺腺癌细胞株A549细胞凋亡的影响,探讨铁代谢与肺癌发生发展的关系。方法体外培养人肺腺癌细胞株A549细胞,采用不同浓度的去铁胺(DFO)及三氯化铁(FeCl3)以及生理盐水作用A549细胞,通过观察细胞形态学变化、流式细胞术(FCM)检测、TUNEL三种方法检测细胞凋亡的变化。结果①不同浓度的FeCl3作用于A549细胞后,在同一时间点随浓度升高细胞凋亡率(APO%)呈下降趋势;②不同浓度FeC l3作用于A549细胞后,仅150μmol/L组48 h出现凋亡梯带,其余浓度均无凋亡梯带出现。③流式细胞仪(FCM)检测各组APO%分别为:10μmol/L FeCl3组6.7%,50μmol/L FeCl3组4.7%,100μmol/L FeCl3组2.5%,150μmol/L FeC l3组12.6%。④浓度为100μmol/L DFO作用于A549细胞,6、12、24、48h FCM检测APO%为:5.2%、17.5%、42.9%、56.8%。浓度为10、50、100、150μmol/L 24hAPO%分别为10.4%,26.2%,42.9%,48.3%。结论三氯化铁可抑制A549细胞凋亡,去铁胺可诱导A549细胞凋亡,铁螯合剂可成为一种有效的抗肿瘤药物。     

曲古菌素A对人胰腺癌PaTu-8988细胞增殖和细胞周期的影响

目的 观察曲古菌素A(tfichostatin A,TSA)对人胰腺癌PaTu-8988细胞增殖及细胞周期的影响.方法 不同浓度(0.1、0.5、2.0 μmol/L)TSA处理人胰腺癌PaTu-8988细胞,并设空白对照组.采用WST-8法检测细胞存活率;流式细胞仪检测细胞周期的变化;实时定量PCR检测细胞周期相关基因p21和cyclin DI mRNA的表达.结果 对照组、TSA 0.1μmol/L、0.5μmol/L和2.0μmol/L组的细胞存活率分别为(100.0±4.2)%、(88.5±4.2)%、(79.7±5.0)%和(64.3±7.2)%,各TSA组均显著低于对照组(P<0.01).TSA 0.1μmoL/L、0.5μmol/L组的细胞以G1期居多,2.0μmol/L组(50.29±7.53)%细胞阻滞在G2/M期.TSA各组p21 mRNA表达值分别为5.29±1.16、7.79±0.41、8.61±0.73,较对照组l,00±0.08显著升高(P<0.01);cyclin DI mRNA表达值分别为1.13±0.12、0.42±0.06、0.19±0.06,较对照组1.00±0.07表达降低(P<0.05).结论 TSA通过上调p21及下调cyclin D1基因的表达,导致细胞周期阻滞.     

阿托伐他汀对人肺腺癌细胞的凋亡作用及其调控机制研究

目的研究阿托伐他汀对人肺腺癌(A549)细胞的抑制作用,并探讨可能的作用机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度(0、10、20、40μmol/L)阿托伐他汀对A549细胞增殖的影响; AnnexinV-FITC/PI双染后流式细胞术检测不同浓度阿托伐他汀(0、10、20、40μmol/L)对A549细胞凋亡的影响;分光光度法检测不同浓度阿托伐他汀(0、10、20、40μmol/L)对A549细胞caspase-3活性的影响。结果阿托伐他汀抑制A549细胞的增殖,随着浓度的增加,时间的延长,其抑制作用逐渐增强(P0.01)。阿托伐他汀能有效地诱导A549细胞的凋亡,随着浓度的增加,凋亡率增加。阿托伐他汀显著增加A549细胞的caspase-3酶的活性,且呈剂量相关性。结论阿托伐他汀抑制人肺癌A549细胞增殖,促进其凋亡,并且呈明显的时间和剂量依赖,阿托伐他汀通过增加细胞Caspase-3的活性诱导A549细胞凋亡。     

红花多糖对人非小细胞肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨不同浓度的红花多糖(safflower polysaccharide,SPS)对人非小细胞肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响。方法根据台盼蓝染色法绘制细胞生长曲线及计算细胞活力;用不同浓度(0.04,0.08,0.16,0.32,0.64,1.28,2.56mg/m L)的红花多糖处理A549细胞24、48、72h后在倒置显微镜下观察细胞形态学改变;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度(0.04,0.08,0.16,0.32,0.64,1.28,2.56mg/m L)的红花多糖对人非小细胞肺癌细胞体外生长的抑制作用,Annexin V-FITC/PI荧光双标流式细胞术检测细胞凋亡率。结果台盼蓝染色后发现在第2-6天细胞呈对数生长,在第3-5天细胞活力最好;不同浓度SPS处理24,48,72h后,各时间点均以0.64mg/m L的SPS抑制率最高;不同浓度SPS处理48h后,倒置显微镜下A549细胞表现为皱缩、变圆等细胞凋亡性;各浓度组A549细胞的凋亡率增加呈剂量依赖性,而1.28mg/m L组除外。结论红花多糖能明显抑制人非小细胞肺癌A549细胞的增殖,诱导A549细胞的凋亡,在SPS浓度为0.64mg/m L最为显著。     

曲古抑菌素A对CNE2鼻咽癌细胞增殖及凋亡的影响

目的研究曲古抑菌素A（TSA）在体外对人鼻咽癌细胞的影响,为鼻咽癌的药物治疗提供依据。方法将鼻咽癌CNE2细胞经0.125%胰酶处理制成细胞悬液,培养24 h。试验设TSA1～TSA5组及对照组,TSA1～TSA5组分别加入TSA200、300、400、500、600 nmol/L,对照组加入等量生理盐水;6、12、24、36 h后MTT法计算细胞抑制率。将CNE2细胞接种于25 ml培养瓶中,分为TSA1～TSA3组及对照组,TSA1～TSA3组分别加入300、400、500nmol/L TSA处理24 h;对照组加入等量生理盐水;流式细胞仪检测分析细胞周期及细胞凋亡率。结果 TSA可明显抑制CNE2细胞生长,同时点细胞抑制率对照组〈TSA1组〈TSA2组〈TSA3组〈TSA4组〈TSA5组,并呈剂量时间效应关系,P均〈0.05。TSA干预后CNE2细胞G2/M期细胞明显增多,出现G2/M期阻滞,细胞凋亡率明显升高,且呈浓度依赖性。结论 TSA能明显抑制CNE2细胞增殖,诱导细胞凋亡,并具有G2/M期阻滞效应,是治疗鼻咽癌的潜在药物。     

盐酸氨溴索对非小细胞肺癌A549细胞Bcl-2和Bax基因表达的影响

目的研究盐酸氨溴索对非小细胞肺癌A549细胞增殖及凋亡的影响,探讨其在抗非小细胞肺癌中的作用机制。方法对肺腺癌细胞(A549)进行体外培养,采用终浓度分别是0(对照组)、20、60、120μg/m L的盐酸氨溴索干预组对A549细胞进行处理24 h后,运用相差显微镜观察A549细胞的形态结构;运用MTT法、流式细胞仪分别测定A549细胞生长活性及凋亡率;采用蛋白质印迹法(Western Blot)及逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)测定B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、BCL2-Associated X的蛋白质(Bax)等凋亡相关蛋白和基因的表达。结果盐酸氨溴索对A549细胞增殖的抑制率随着作用剂量的增大而增大。20、60、120μg/m L的盐酸氨溴索处理A549细胞24 h后,120μg/m L的盐酸氨溴索可诱导细胞凋亡,其余剂量则未发生凋亡;且120μg/m L的盐酸氨溴索组细胞凋亡率明显大于对照组(P0.05)。不同剂量盐酸氨溴索处理A549细胞24 h后,120μg/m L的盐酸氨溴索组促凋亡蛋白Bax为9.341±0.165,较对照组(4.523±0.152)表达增加;抑凋亡蛋白Bcl-2为4.975±0.126,较对照组(7.482±0.194)表达减少,差异有统计学意义(P0.05)。120μg/m L的盐酸氨溴索组Bax mRNA为(6.947±0.502),较对照组(3.566±0.382)表达增加;Bcl-2 mRNA为(2.932±0.287),较对照组(4.763±0.554)表达减少,差异有统计学意义(P0.05)。结论盐酸氨溴索对A549细胞生长具有抑制作用,能够促进该细胞发生凋亡,其作用机制可能跟上调Bax及下调Bcl-2的表达密切相关。推测通过Bax/Bcl-2信号通路促进肺癌癌细胞发生凋亡可能是盐酸氨溴索的一种重要的抗肺癌作用机制。     

人参皂苷CK与顺铂联用对人肺腺癌A549细胞株的抑制作用及其机制探讨

目的探讨人参皂苷CK与顺铂联用对人肺腺癌A549细胞株的抑制作用及其作用机制。方法不同浓度(50、25、12.5、6.241、3.125、1.562 5μg/m L)人参皂苷CK单独或加不同浓度顺铂(20、10.5、2.5、1.251、0.625μg/m L)作用于A549细胞,MTT法测定人参皂苷CK与顺铂单用或联用对A549细胞的抑制率,流式细胞术检测各细胞周期所占百分比及细胞凋亡率;ELISA法检测A549细胞VEGF水平。结果人参皂苷CK和顺铂联用对A549细胞增殖的抑制效应呈浓度依赖关系;两药大剂量(50μg/m L人参皂苷CK+20μg/m L顺铂)联用时合用指数(CI)≈1,为相加效应,小剂量联用(1.562 5μg/m L人参皂苷CK+0.625μg/m L顺铂)时CI>1,为拮抗效应;两药大剂量联用时A549细胞出现明显的凋亡峰,细胞周期被阻滞在G0/G1期,两药联用凋亡率高于单用人参皂苷CK或顺铂(P均<0.05);两药联用时A549细胞培养上清液中的VEGF水平低于单用人参皂苷CK或顺铂(P均<0.05)。结论人参皂苷CK与顺铂大剂量联用对人肺腺癌A549细胞株的抑制效应为相加效应,小剂量联用时为拮抗效应;大剂量联用可明显诱导A549细胞凋亡,其抗肿瘤机制与减少内源性VEGF分泌有关。     

姜黄素抗人肺腺癌A549/DDP细胞增殖及诱导凋亡的作用

目的 研究姜黄素对人肺腺癌A549/DDP细胞增殖的抑制作用及其对细胞凋亡的影响.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)测定细胞对顺铂的敏感性和姜黄素对细胞增殖的抑制作用;倒置相差显微镜和荧光显微镜下观察细胞形态学的变化;应用原位末端标记(TUNEL)染色及流式细胞仪检测细胞凋亡情况;以Western blot分析凋亡相关蛋白表达变化.结果 实验中所用的A549/DDP细胞对顺铂耐药,耐药指数为10.82.姜黄素对A549及A549/DDP细胞增殖均有抑制作用,并且呈时间、浓度依赖性(P＜0.05),对两细胞株的半数抑制浓度分别为16.28/μmol/L和18.06μmol/L,差异无统计学意义(P＞0.05).姜黄素处理A549/DDP细胞后,细胞变形、缩小、脱落.Hoechst染色显示A549/DDP细胞核缩小、变形,致密浓染,荧光成团块分布.TUNEL法以及流式细胞仪分析结果示细胞凋亡率呈明显剂量依赖关系(P＜0.05).Western blot结果显示,随姜黄素浓度的增加,天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶8(cysteinyl aspartate-specific protease-8,caspase-8)p10蛋白水平增加.结论 A549/DDP细胞对姜黄素无抗药性,姜黄素对人肺腺癌A549/DDP细胞增殖具有抑制作用,并能诱导细胞凋亡.caspase-8的活化是其中的机制之一.     

华蟾素联合多柔比星通过Fas/线粒体通路促进肺癌A549细胞凋亡

目的探究华蟾素联合多柔比星对肺癌A549细胞凋亡及Fas/线粒体通路的影响。方法用不同浓度华蟾素(0、0. 1、0. 2、0. 4、0. 8μg/m L)、不同浓度多柔比星(0、0. 25、0. 5、1. 0、2. 0μg/m L)或联合用药(多柔比星0. 5μg/m L分别与华蟾素0、0. 1、0. 2、0. 4、0. 8μg/m L联合使用)处理A549细胞。四甲基偶氮唑(MTT)法检测华蟾素联合多柔比星对A549细胞增殖的影响;流式细胞仪检测华蟾素联合多柔比星对A549细胞凋亡的影响;蛋白质印迹(Western blot)技术检测A549细胞Fas/线粒体凋亡通路相关蛋白的表达变化。结果 MTT结果显示,华蟾素和多柔比星对A549细胞均具有增殖抑制作用(P 0. 05),且呈时间-剂量依赖关系。0. 5μg/m L多柔比星分别与0. 1、0. 2、0. 4、0. 8μg/m L华蟾素联合处理下,A549细胞的增殖抑制率呈时间-剂量依赖性。(2)流式细胞仪结果显示,与空白对照组比较,单用0. 4μg/m L华蟾素或0. 5μg/m L多柔比星处理后A549细胞凋亡率显著上升(P 0. 05);与单独用药比较,两药联合处理后A549细胞凋亡率显著上升(P 0. 05)。(3)Western blot结果显示,与空白对照组比较,单用0. 4μg/m L华蟾素或0. 5μg/m L多柔比星处理后A549细胞Fas、Fas L、TNF-R1、Bax及Cyt-c表达显著上调、Bcl-2表达显著下调、裂解型Caspase-3/8/9显著增多(P 0. 05);与单独用药比较,两药联合处理后A549细胞Fas、Fas L、TNF-R1、Bax及Cyt-c表达显著上调、Bcl-2表达显著下调、裂解型Caspase-3/8/9显著增多(P 0. 05)。结论华蟾素联合多柔比星可显著促进肺癌A549细胞凋亡,其机制可能与Fas/线粒体凋亡通路强化有关。     

重楼皂苷Ⅶ对耐顺铂人肺腺癌A549/DDP细胞增殖的抑制作用

目的探讨重楼皂苷Ⅶ对耐顺铂人肺腺癌A549/DDP细胞增殖的抑制作用。方法 MTT法测定重楼皂苷Ⅶ对A549/DDP细胞的增殖抑制率;流式细胞术检测重楼皂苷Ⅶ对A549/DDP细胞的细胞凋亡率及细胞周期时相分布的影响。结果重楼皂苷Ⅶ对A549/DDP细胞的增殖有明显抑制作用,抑制率随药物浓度增加而增高,具有明显的量-效关系(P<0.05)。同时发现,重楼皂苷Ⅶ对A549/DDP细胞作用48 h及72 h组与24 h组比较细胞增殖抑制率均明显提高(P<0.05),但72 h组与48 h组比较,无统计学意义(P>0.05)。流式细胞仪分析显示,浓度为50μmol/L及100μmol/L的重楼皂苷Ⅶ作用A549/DDP细胞24 h后,与阴性对照组比较早期凋亡细胞比例明显增高;且对细胞周期时相分布影响明显,细胞阻滞G2期。结论重楼皂苷Ⅶ对人肺腺癌A549/DDP细胞的增殖具有明显抑制作用,并呈明显的浓度依赖性,与时间有一定相关性。重楼皂苷Ⅶ可引起早期凋亡细胞比例明显增加,并明显影响A549/DDP细胞周期时相分布。     

蛔虫粗抗原对人肺腺癌细胞凋亡中白细胞介素6和转化生长因子β分泌的影响

目的探讨蛔虫粗抗原对人肺腺癌细胞株(A549)凋亡,以及白细胞介素(IL-6)和转化生长因子β(TGF-β)分泌的影响。方法收集新鲜蛔虫虫体,制备蛔虫粗抗原。将A549细胞分别与低、中、高浓度的蛔虫粗抗原(蛋白浓度分别为25、125和500μg/ml)共培养,即低浓度组、中浓度组和高浓度组,同时设A549细胞+培养液的阴性对照组和阿霉素阳性对照组。用流式细胞术、ELISA和实时定量PCR(q PCR)分别检测作用1、18和24 h后A549细胞凋亡率和细胞周期,以及IL-6和TGF-β细胞因子水平和m RNA水平。结果 3个浓度的蛔虫粗抗原作用于细胞1、18和24 h后,细胞凋亡率均显著高于同时间点的阴性对照组(P0.01)。其中,中浓度组作用18 h后细胞凋亡率最高,为(47.10±3.68)%。细胞周期检测结果显示,中浓度组作用18 h后,G0/G1期细胞比例升高,S期细胞比例下降,与阴性对照组间差异有统计学意义(P0.01)。ELISA检测结果显示,相同作用时间下,A549细胞IL-6水平大多随蛔虫粗抗原作用浓度的增加而升高,TGF-β水平随着蛔虫粗抗原浓度和作用时间的不同,无明显的变化趋势。q PCR结果显示,中浓度组A549细胞的IL-6和TGF-βm RNA水平在作用18 h后达到最高,分别为5.95±0.31和3.43±0.35,且显著高于阴性对照组(P0.01)。结论蛔虫粗抗原可诱导A549细胞凋亡,并将细胞阻滞在G0/G1期,其调节过程可能有IL-6和TGF-β的参与。     

槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞增殖及周期的影响

目的研究槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞增殖及周期的影响。方法制备浓度为0、3、6、9 mg/ml的槐耳清膏与人肺腺癌A549细胞作用后,采用流式细胞检测观察细胞凋亡率,并分析药物干预36 h对细胞周期和细胞凋亡率的影响。结果流式细胞术检测结果显示,槐耳清膏各浓度组均可发生细胞凋亡,与对照组相比差异显著(P0.05)。各浓度组可使人肺腺癌A549细胞G0/G1、S期细胞比例减少,G2/M期细胞比例增多。结论槐耳清膏能诱导人肺腺癌A549细胞增殖,可能与细胞被阻滞于G2/M期有关。     

内质网应激介导棕榈酸诱导的成骨细胞凋亡

目的建立棕榈酸诱导成骨细胞凋亡的模型,探讨内质网应激在棕榈酸诱导成骨细胞凋亡中的作用。方法选取小鼠成骨细胞MC3T3-E1 14为研究对象,分组方法如下:(1)根据棕榈酸(palmitate,PA)作用浓度分为对照组(0μmol/L PA)、100μmol/L PA组、250μmol/L PA组和500μmol/L PA组,分别孵育24 h;随后选择棕榈酸作用敏感浓度500μmol/L,孵育成骨细胞不同时间(0、6、12、24 h)。(2)应用内质网应激抑制剂4-苯基丁酸(4-phenylbutyric acid,4-PBA)进一步验证棕榈酸对成骨细胞增生和凋亡的影响。选择4-PBA作用敏感浓度5 mmol/L,根据是否经4-PBA预处理分为对照组(0μmol/L PA,0 mmol/L 4-PBA)、4-PBA组(0μmol/L PA,5 mmol/L 4-PBA)、4-PBA+PA组(500μmol/L PA,5 mmol/L 4-PBA)和PA组(0 mmol/L 4-PBA,500μmol/L PA)干预24 h。培养结束后,采用CCK-8法检测细胞增生活力;Annexin V/PI双染色法流式细胞术检测细胞凋亡率;Realtime quantitative PCR检测各组细胞内质网应激相关基因GRP78、CHOP、caspase-12 m RNA的表达。结果与对照组相比,250和500μmol/L棕榈酸干预成骨细胞24 h可明显降低细胞增生活力(A值:1.015±0.068,0.816±0.108,0.479±0.050,P0.05),细胞凋亡率则分别增高了6.70%±1.40%,15.30%±1.28%(P0.05),CHOP和GRP78 m RNA的表达水平呈剂量依赖性增高(均P0.05),而caspase-12 m RNA的表达水平则有所降低(P0.05);100μmol/L PA组增生活力、凋亡率及各基因表达量差异均无统计学意义(P0.05)。与对照组相比,用500μmol/L棕榈酸干预成骨细胞6、12、24 h后,细胞增生活力呈时间依赖性下降(A值:0.952±0.064,0.788±0.043,0.683±0.044,0.482±0.052,P0.05);凋亡率则分别增高3.63%±1.45%,9.0%±2.31%,15.7%±0.61%(均P0.05);CHOP m RNA表达水平呈时间依赖性增高(P0.05),GRP78 m RNA的表达水平在12 h开始升高,24 h达到峰值(P0.05),caspase-12 m RNA表达水平则在12 h达到峰值,24 h后开始下降(P0.05)。与PA组相比,4-PBA+PA组成骨细胞增生活力升高(A值:0.355±0.029 vs.0.451±0.049,P0.05),凋亡率降低8.6%±2.05%(P0.05),GRP78、CHOP和caspase-12m RNA的变化水平则呈现与单纯棕榈酸干预组相反趋势(均P0.05)。结论棕榈酸可能通过内质网应激途径诱导成骨细胞凋亡,4-PBA可以通过抑制内质网应激在一定程度上减少棕榈酸诱导的成骨细胞凋亡。     

曲古抑菌素A对胃癌细胞生长的抑制作用

目的: 研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂-曲古抑菌素A(trichostatin A, TSA)对胃癌细胞系SGC-7901的生长抑制作用, 证实该作用是通过促使细胞凋亡而实现的.方法: 用不同浓度(0.2、0.4和0.8 mg/L)和不同作用时间(24、48和72 h)的TSA作用于SGC-7901细胞, 采用MTT法观察TSA对SGC-7901细胞增殖的抑制作用;通过流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率的变化;通过透射电镜观察细胞超微结构的变化.结果: TSA可抑制胃癌SGC-7901细胞的生长,且这种作用呈时间和剂量依赖关系. 当TSA作用浓度分别为0.2、0.4和0.8 mg/L时, 与SGC-7901细胞均作用72 h, TSA对SGC-7901细胞生长的抑制率分别为25%±1.2%, 45%±1.4%和73%±1.7%, 各组均与TSA 0.2 mg/L组比较, 差异显著( P<0.05). 当0.8 mg/L TSA分别与SGC-7901细胞作用24、48和72 h, TSA对SGC-7901细胞生长的抑制率分别为21%±1.1%, 37%±2.0%和73%±1.7%, 各组均与TSA作用24 h组比较, 差异显著( P<0.05). TSA可延缓细胞周期, 具有明显的诱导细胞凋亡作用. 电镜下见细胞染色质凝聚成段片状, 细胞核固缩断裂, 核膜破裂, 细胞器及胞膜自溶, 凋亡小体形成.结论: TSA通过诱导细胞周期阻止和凋亡来抑制胃癌细胞系SGC-7901的生长, 且这种作用呈时间和剂量依赖性, 为TSA用于胃癌的治疗提供理论依据.     

高乌甲素对人非小细胞肺癌A549细胞株的作用及机制

目的观察高乌甲素(LA)对人非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞株的作用并探讨其可能存在的分子机制。方法采用由中山大学医学院实验动物中心细胞库提供的人NSCLC细胞株A549株。通过给予不同浓度的LA进行干预和MTT比色分析法、实时荧光定量PCR以及流式细胞仪等检测方法,探讨不同浓度的LA对NSCLCA549细胞株的生长抑制、凋亡率、细胞周期和Cyclin E1表达的影响。结果 LA对细胞的抑制作用规律呈剂量依赖性,相较于对照组,浓度在0.48~7.68 mg/ml的LA对于细胞的抑制作用均有着统计学差异(P0.05);在相应的各时间点,浓度为0.48和0.96 mg/ml的LA组A549细胞凋亡率均有着统计学的差异(P0.05);浓度为0.96 mg/ml的LA组细胞周期G0/G1期比例显著上升,而S期比例下降(P0.05);浓度为0.48和0.96 mg/ml的LA组A549细胞的Cyclin E1 m RNA相对表达量均明显低于对照组(P0.05)。结论 LA具有抗肿瘤的疗效,其分子机制可能与肿瘤细胞的生长、凋亡、细胞周期以及Cyclin E1表达有关。     

通心络下调caspase-3蛋白表达及活性抑制软脂酸诱导的人外周血内皮祖细胞凋亡

目的:探讨通心络(tongxinluo,TXL)对软脂酸(palmitic acid,PA)诱导的人外周血内皮祖细胞(endothelialprogenitor cell,EPCs)凋亡及caspase-3蛋白表达和活性的影响。方法:密度梯度离心法获取人外周血单个核细胞,培养7d后,贴壁细胞分成7组:对照组以M199培养液培养48h;PA各浓度组(共3组)分别用含200,400,800μmol/L PA的M199培养液孵育48h;通心络干预组(共3组)分别先用含100,200,400μmol/L TXL的M199培养液干预2h后,再加入400μmol/L PA孵育48h。采用流式细胞仪检测细胞凋亡率;提取细胞蛋白,采用Westernblot技术检测caspase-3蛋白表达水平;采用分光光度法检测caspase-3蛋白活性水平。结果:PA呈浓度依赖性诱导EPCs凋亡;加入TXL干预,EPCs细胞凋亡率明显降低;Western blot和分光光度法检测显示,PA组EPCs的caspase-3蛋白表达及活性明显高于对照组,200和400μmol/L TXL干预组明显低于PA组(P0.05)。结论:PA呈浓度依赖性诱导EPCs凋亡,TXL能部分抑制PA的上述作用,其机制与下调caspase-3蛋白表达及活性有关。     

辛伐他汀对耐紫杉醇人肺腺癌细胞增殖和细胞周期的影响

目的探讨辛伐他汀联合紫杉醇对人肺腺癌耐紫杉醇细胞株增殖的影响。方法用0、10、20、40、80μmol/L的辛伐他汀处理耐紫杉醇A549细胞(A549/Taxol)24、36、48 h,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测算各组细胞增殖率。用含有20μmol/L的辛伐他汀(辛伐他汀组)、10-7mol/L紫杉醇(紫杉醇组)及20μmol/L的辛伐他汀+10-7mol/L紫杉醇(联合组)培养A549/Taxol细胞,24、48 h后用MTT法测算各组细胞增殖率,24、36、48 h后用流式细胞术检测各组细胞周期。结果辛伐他汀能浓度依赖性(10~40μmol/L)地抑制耐紫杉醇A549/Taxol细胞增殖,而且抑制作用呈时间依赖性(P均<0.05)。相同时点比较联合组细胞增殖抑制率和G1期细胞比例高于辛伐他汀组、紫杉醇组和空白对照组。结论辛伐他汀可抑制A549/Taxol增殖,辛伐他汀联合紫杉醇对A549/Taxol增殖有协同抑制作用。     

丹参酮ⅡA抑制波动性高糖诱导的雪旺细胞凋亡的观察

目的观察丹参酮ⅡA(TanⅡA)对波动性高糖(IHG)所致的雪旺细胞(SC)凋亡的影响。方法原代培养大鼠SC分为正常糖组(Con,5.6 mmol/L)、稳定性高糖组(HG,50 mmol/L)、IHG组(IHG,5.6~50.0mmol/L)、渗透压对照组(mannitol)及IHG加不同浓度TanⅡA(0.1、1、10μmol/L)组。检测线粒体膜电位(MMP)、细胞凋亡率及凋亡相关蛋白表达。结果与Con组和HG组比较,IHG组MMP下降[(0.51±0.02)vs(1.42±0.08)vs(0.66±0.02)],细胞凋亡率增高[(5.01±0.26)%vs(42.33±2.76)%vs(31.64±3.04)%](P0.05或P0.01)、线粒体细胞色素c(cyto-c)及凋亡诱导因子(AIF)水平降低,胞浆cyto-c及胞核AIF表达增高(P0.01);活化半胱天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)及caspase-3表达增高(P0.01)。TanⅡA可升高MMP,减少细胞凋亡,抑制cyto-C释放及AIF转位,降低caspase-9及caspase-3的活化。结论 TanⅡA能抑制SC凋亡,其机制是caspase活性降低,从caspase依赖性及非依赖性途径发挥作用。     

青蒿琥酯联合热疗对肺腺癌细胞A549增殖和凋亡的影响

目的观察青蒿琥酯联合热疗对肺腺癌细胞A549的增殖抑制作用。方法将A549分为四组:A组给予不同浓度的青蒿琥酯;B组给予热疗(43℃加热1 h);C组给予青蒿琥酯联合热疗;D组为正常培养A549(对照组)。分别在处理24、48 h时用MTT法检测四组A549的生长抑制情况;流式细胞术检测细胞周期和凋亡率。结果青蒿琥酯对A549生长抑制作用与剂量—效应—时间呈正相关系,在100～800μmol/L的范围内呈线性关系。青蒿琥酯及青蒿琥酯联合热疗作用24 h半数抑制浓度(IC_(50))分别为396μmol/L和172μmol/L。与D组相比,A、C组G_0/G_1期细胞数增多,S期和G_2/M期细胞数减少(P<0.01)。A、C组细胞凋亡率分别为16.77%和28.90%,均高于D组的2.08%(P<0.01)。结论青蒿琥酯、青蒿琥酯联合热疗可抑制A549生长,诱导细胞凋亡可能是其作用机制之一。