速率散射比浊法测定肿瘤患者血清α1—抗胰蛋白酶

α1－AT是一种分子量为54,000D的糖蛋白,由一条多肽链和四条碳氢侧链组成.具有蛋白酶抑制作用的一种急性时相反应蛋白,α1 AT占血清中抑制蛋白酶活力的90%左右1.测定α1 AT的方法以速率散射免疫比浊法为准确快速,我们对128例肿瘤患者应用美国Beckman公司产生的ARRAY 360免疫测定仪进行检测,取得满意结果,现报告如下. 1 材料与方法 1．1 材料 1．1．1 材料来源 128例不同病源的标本均来源于我院在1997年12月～1999年10月期间住院及门诊患者,男性56例,女性72例,年龄45～72岁,平均年龄61岁,其中肝癌51例,胃癌47例,肺癌19例,胰腺癌11…     

α_1-抗胰蛋白酶缺陷与肝脏疾病

α_1-抗胰蛋白酶(α_1-antitrypsin,α_1AT)是人体血清中一种正常的蛋白酶抑制物。它具有抑制多种蛋白酶的生理功能。近20年来,逐渐发现α_1AT缺陷为常染色体显性遗传,且与某些肝脏疾病和肺气肿有密切关系,受到了多方面的重视。α_1AT的理化特性及生理功能 19世纪末期就发现人体血清具有抑制蛋白酶的活性。随后不久发现,具有这一抑制活性的成份存在于白蛋白组分,而且不是免疫球蛋白。60年代以后,对α_1AT的研究取得了很大进展。1963年Laurell等应用纸     

用 X 线胶片测定粪便中α_1—AT 的探讨

我们参考血清中的α_1—抗胰蛋白酶(α_1—AT),是参考血清中α_1—AT 能抑制蛋白酶溶解X 胶片表层蛋白质(明胶)原理,建立了粪便中α_1-AT 的测定方法,并对方法学作了探讨.本法简单、经济、省时、结果可信.一、方法1.取清洁华试管一支,加pH8.1 Tris 缓冲液     

竞争性分析提高α_1,抗胰蛋白酶缺乏的单点突变检测特异性

α_1抗胰蛋白酶(α_1AT)是血清中主要的蛋白酶抑制剂,由肝细胞产生。α_1AT缺乏常致机体酶类损伤组织,损伤肺脏可引起肺气肿。通常α_1AT由等位基因M决定,当发生点突变成为Z基因时(Glu342GAG→Lys AAG),造成α_1AT缺乏。α_1AT分型可用等电聚焦电泳,但有时结果难以解释,仍需基因分型确证。作者等用同位素标记等位基因特异的寡核苷酸,竞争性分析经PCR放大的α_1ATM,Z基因型,同非竞争分析相比,特异性提高3～4倍,且提高了信号噪比。     

慢性阻塞性肺气肿血清α1抗胰蛋白酶测定结果的分析

α_1AT是由肝脏合成的多种蛋白酶抑制剂,一般认为α_1-AT缺乏易早发肺气肿.近年来,国内一些学者进行了研究,有的报告肺气肿者无α_1-AT缺乏,亦有报告肺气肿者32～33.8%α_1-AT水平低于正常人.为了进一步了解α_1-AT和肺气肿之间的关系,我们对30肺气肿患者的血液α_1-AT进行了测定,现将结果报导如下:     

急性肺损伤患者血清中中性粒细胞弹性蛋白酶活性的变化

目的检测急性肺损伤(ALI)患者血清中中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)的活性,探讨其临床意义。方法选择符合ALI患者22例,健康对照组15例。计算动脉血氧分压(PaO2)与吸入气氧浓度(FiO2)比值,测定NE活性、α1抗胰蛋白酶α1AT)浓度和活性、白介素6(IL6)和白介素8(IL8)浓度等。结果ALI患者的NE活性、IL6和IL8均明显高于健康对照组,而α1AT活性较健康组降低(P<0.05)。ALI患者中死亡组(10例)的NE活性明显高于存活组(12例)(P<0.01)。而且ALI患者的血清NE活性与PaO2FiO2呈显著负相关(r=-0.874,P<0.01)。结论ALI患者的NE活性明显升高,α1AT活性显著降低,出现蛋白酶抗蛋白酶失衡,而且血清NE活性水平与患者的肺损伤严重程度和预后密切相关。     

血浆制品α1抗胰蛋白酶治疗肺部疾病的进展

血液由不同血细胞和血浆组成,随着人们对其中成分的功能的认识不断加深,各种血液制品,如白蛋白、球蛋白、纤维蛋白原等血浆衍生物,成为人类疾病治疗的宝贵资源.α1抗胰蛋白酶(alpha-1 antitrypsin,α1-AT)是20世纪80年代以后出现的1种治疗性血浆制品,它是由肝细胞合成的1种丝氨酸蛋白酶抑制剂,能抑制弹性蛋白酶、胰蛋白酶、血浆素、凝血酶等蛋白酶的活性,可以保护体内的正常组织不受蛋白酶的损伤[1].补充外源性α1-AT是治疗肺部疾病的重要手段,如先天性α1-AT缺乏引起的肺气肿、急性肺损伤、呼吸窘迫综合征、肺癌等.随着α1-AT制品临床应用,对其机理等的研究也更加深入,现对α1-AT在肺部疾病的治疗进展作一简要综述.     

家族性抗凝血酶Ⅱ缺乏症

目前最主要的抗凝血酶是抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)。ATⅢ是一种分子量约65,000的α-球蛋白。它能灭活抗凝血酶、因子Xa和在凝血过程中产生的其它丝氨酸蛋白酶。在肝素存在时灭活凝血酶和Xa的作用大大加速且更有效。 ATⅢ缺乏症是一种常染色体显性遗传性疾病,男女罹患相同。患者ATⅢ血浆浓度系正常的25-60%。不是所有ATⅢ缺乏者均患血栓形成,所报告的ATⅢ缺乏者中约45%并无血栓发生,但50岁前仅10%无症状,青春期前血栓形成虽少见但也有所发生。典型的首次血栓栓塞性疾病常与已知易患血栓形成的情况同时发生,如创伤、手术、妊娠、分娩或口服     

α_1-抗胰蛋白酶对急性肺损伤兔蛋白酶和表面活性物质的影响

目的 :观察 α1抗胰蛋白酶 ( α1AT)对内毒素致急性肺损伤兔蛋白酶和表面活性物质的影响。方法 :3 2只成年健康新西兰兔在给予定容机械通气基础上随机分成内毒素 ( L PS)组、L AV组 (内毒素 α1AT)、AT组 ( α1AT)和生理盐水组 ( NS)。稳定 3 0分钟 ,监测每小时动脉血氧分压 ( Pa O2 )、静态总呼吸顺应性 ( TRC) ,4和 8小时分别测定肺内动静脉分流 ( Qs/Qt)。比较 8小时后血浆 α1AT浓度和活性、支气管肺泡灌洗液( BAL F)中总蛋白 ( TP)浓度、弹性蛋白酶 ( NE)样活性、α1AT活性、总磷脂 ( TPL)和饱和磷酯酰胆碱 ( DSPC)含量等指标以及肺重 /干重 ( W/D)。结果 :动物静脉注射 LPS后 Pa O2 下降 ,氧合指数 ( Pa O2 /Fi O2 ) <2 6.7k Pa( 1 k Pa=7.5mm Hg) ,TRC下降 >50 % ,Qs/Qt增加 >2 5%。与 NS组相比 ,血浆 α1AT含量增高但活性下降 ;BAL F中 TP含量和 NE样活性增加 ,α1AT活性、TPL 和 DSPC/TPL下降 ;W/D增加。L AV组与 LPS组相比 ,上述指标的变化明显改善 :Pa O2 和 TRC的下降幅度较 L PS组减小 ,血浆 α1AT含量和活性、BAL F中α1AT活性、TPL和 DSPC%较 L PS组增高 ;Qs/Qt、BAL F中 TP含量、NE样活性和 W/D较 L PS组降低。结论 :预防性静注 α1AT,可提高机体内的抗蛋白酶活性 ,抑制 N     

抗凝血酶Ⅲ浓缩物的临床应用

生物化学及生物学背景抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)是一种α_2球蛋白,单链分子量为58000道尔顿,由424个氨基酸组成。活性中心位于连接精氨酸384-丝氨酸385的肽键。分子中的赖氨酸是肝素结合点,两者结合的克分子比例为1∶1。ATⅢ由肝脏合成,血浆中平均浓度为196mg/l,半衰期2.69天。ATⅢ具有灭活参与凝血的活性丝氨酸蛋白     

三个遗传性抗凝血酶缺乏症家系基因与表型分析

抗凝血酶(AT)为血浆中存在的主要天然抗凝血物质,主要抑制凝血酶活性,对其他丝氨酸蛋白酶(如凝血因子Ⅸa、Ⅺa、Ⅻa)以及纤溶酶、胰蛋白酶和激肽释放酶等的活性也有抑制作用[1],其抗凝活性占血浆总抗凝活性的50％ ～70％.AT缺乏症在正常人群中的发生率为2/10 000～5/10 000,在静脉血栓栓塞症(VTE)患者中发生率高达1％～ 2％[2].在临床上可分为2型:Ⅰ型表现为AT活性(AT∶A)及AT抗原(AT∶ Ag)同步减少,Ⅱ型主要是由于AT结构异常所致.遗传性AT缺乏症由AT基因突变引起,呈常染色体显性遗传规律,大多伴有家族史,临床以VTE(特别是下肢深静脉血栓)为主要表现.迄今为止,共发现256种AT基因突变.2002年国内首次报道了一个遗传性AT缺乏症家系的基因分析结果[3].我们对2011年11月至2012年4月发现的3个遗传性AT缺乏症伴VTE家系进行AT基因测序分析,发现2个新的导致AT缺乏症的基因突变,现报告如下.     

血清α_1抗胰蛋白酶的测定方法及其用于肝癌诊断的初步研究

本文报道用苯甲酰-DL-精氨酸-p-硝基苯胺(BAPNA)作为胰蛋白酶的底物,依据血清α_1抗胰蛋白酶(α_1AT)对标准胰蛋白酶活性的抑制作用,检测了原发性肝癌与良性肝病患者血清α_1AT的含量,并对检测方法的特点作了初步的探讨。结果表明,22例原发性肝癌血清α_1AT均值明显高于肝炎(30例)及正常人(p值<0.001)。肝癌的检出率为72.7％,与肝炎的交叉在8％以内。在所检测的肝癌患者中,4例为AFP阴性,但这4例中有3例α_1AT为阳性,故对AFP阴性肝癌患者也有较高的检出率。     

α_1抗胰蛋白酶异质体及其临床意义

α_1抗胰蛋白酶(α_1AT)异质体作为肿瘤的标志物受到人们的重视。本文介绍了α_1AT异质体的分子结构、检测方法及临床意义。     

血清α1-抗胰蛋白酶测定和甲胎蛋白阴性原发性肝癌关系的研究

目的和方法用速率散射比浊法(Raten Nephelometry)对正常人、各类肝病(AH、FVH、CPH、CAH、LC、HCC)、特别是AFP阴性的肝癌患者的血清进行α1-抗胰蛋白酶含量测定,以探讨α1AT与甲胎蛋白阴性原发性肝癌的临床联系及其诊断价值.结果原发性肝癌组血清α1-AG均值显著高于正常值,与其它肝病组比较有非常显著差异(P＜0.001),若以340 mg/L为肝癌诊断界限,肝癌组达79.54%(35/4 4),其中AFP阴性组达85%(17/20),慢性活动性肝炎占4.34%(1/23),重症肝炎占12.5%(1/8),肝硬化患者占6.06%(2/33),AH、CPH则无一人超过.结论α1AT作为一种肝癌标记物,临床上与AFP结合使用可大大提高肝癌检出率,特别是对AFP阴性肝癌病人的诊断,具有重要的临床应用价值.     

遗传性抗凝血酶Ⅲ缺陷症

一、概述抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)是血浆中一种α_2-糖蛋白,含糖约15%。主要由肝脏合成,静脉内皮细胞亦可能参与合成.ATⅢ分子量约58000,平均血浆浓度报道不一,约15—30mg/dl。ATⅢ为天然抗凝物质中最重要的物质,已知ATⅢ通过分子中精氨酸活性中心与凝血酶分子中的丝氨酸活性中心以1:1比例结合成不具有凝血活性的复合物,而使后者失活。肝素能与ATⅢ分子上赖氨酸残基结合,从而导致ATⅢ活性中心暴露,使ATⅢ更易与凝血酶结合,故肝素能增强ATⅢ的抗凝活性。此外,ATⅢ还能使凝血因子Ⅻa,Ⅺa,Ⅹa,Ⅸa,纤溶酶及血管舒缓素等失活。ATⅢ抗凝活性占血浆总抗凝活性的75%,故当ATⅢ活性水平降低,血浆抗凝活性下降时,易发生血栓栓塞。     

多核白细胞弹性蛋白酶在白细胞介素-1诱导下对角膜基质细胞胶原降解的作用

目的 观察多核白细胞弹性蛋白酶及白细胞介素-1α（Interleukin-1α,IL-1α）对人角膜基质细胞胶原降解作用的影响,探讨角膜溃疡的发生机理.方法 角膜基质细胞三维胶原凝胶模型表面添加含多核白细胞弹性蛋白酶及IL-1α的MEM液,培养5天,通过测定培养液中的羟脯氨酸（HYP）的量作为胶原降解活性单位.结果 多核白细胞弹性蛋白酶直接降解Ⅰ型胶原,但对角膜基质细胞胶原降解无明显影响,同时添加弹性蛋白酶和IL-1α,明显增加角膜基质细胞胶原降解.结论 多核白细胞弹性蛋白酶和IL-1α协同作用促进角膜基质细胞胶原降解,可能在角膜溃疡的发生过程中起着重要的作用.     

脑脊液α_1-抗胰蛋白酶、α_1-酸性糖蛋白测定在临床诊断中的价值

α_1-酸性糖蛋白(α1-AG)、α_1-抗肤蛋白酶(α_1-AT)是两种由肝脏合成的急性相反应蛋白。我们检测了133例神经系统疾病患者的CSFα_1-AT、α_1-AG以探讨其诊断价值。一、标本来源1.患者组:采集患者CSF133例(男73,女60,年龄1月～68岁。病名和例数详见表1。2.正常对照组:正常CSF 30例。二、方法采用上海生物制品所生产的抗血清     

雾化吸入α1-抗胰蛋白酶对绿脓杆菌肺部感染大鼠的作用研究

目的 :观察雾化吸入 α1 抗胰蛋白酶 (α1 AT)对绿脓杆菌肺部感染大鼠体内炎症反应的抑制作用及其机制。方法 :雾化吸入 α1 AT来干预绿脓杆菌肺部感染大鼠 ,比较干预组与对照组动物的死亡率、肺泡灌洗液 (BAL F)中细胞总数、蛋白酶 (NE)活性、白介素 8(IL 8)含量及肺内细菌总数。结果 :接种绿脓杆菌3.0× 10 6 CFU的大鼠 ,干预组动物死亡率 (8% )明显低于对照组 (5 8% ,P<0 .0 5 )。接种绿脓杆菌 2 .4× 10 6 CFU的大鼠 ,干预组 BAL F中 NE活性、IL 8含量及肺内细菌总数均较对照组显著降低 (P均 <0 .0 5 )。结论 :雾化吸入 α1 AT可抑制绿脓杆菌肺部感染大鼠肺内炎症反应程度 ,降低急性期动物死亡率及增强机体对细菌的清除力。     

多种细胞因子对滋养层细胞表达基质金属蛋白酶的调节

目的:观察重组人表皮细胞生长因子等多种细胞因子对滋养层细胞表达基质金属蛋白酶-2,9的影响.方法:将分离纯化的原代培养早孕滋养层细胞分别给予10 ng/mL重组人表皮细胞生长因子、白细胞介素-1α,10及5ng/mL肿瘤坏死因子-α处理48 h后,采用RT-PCR方法检测基质金属蛋白酶-2和9的转录表达.结果:重组人表皮细胞生长因子、肿瘤坏死因子-α增强滋养层细胞中基质金属蛋白酶-2的表达,而白细胞介素-1α,10则对早孕滋养层细胞中基质金属蛋白酶-2的表达具有抑制作用;重组人表皮细胞生长因子亦增强滋养层细胞中基质金属蛋白酶-9的表达,白细胞介素-10对早孕滋养层细胞中基质金属蛋白酶-9的表达同样具有抑制作用,而肿瘤坏死因子-α则对早孕滋养层细胞中基质金属蛋白酶-9的表达无影响.结论:重组人表皮细胞生长因子可通过诱导基质金属蛋白酶-2,9的表达时滋养层细胞侵入起促进作用;白细胞介素-10则通过抑制基质金属蛋白酶-2,9的表达对滋养层细胞的侵袭性起负调节作用.肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-1α亦可能通过对不同类型基质金属蛋白酶表达的影响参与滋养层细胞的侵入调节.     

胰腺癌病人血清蛋白酶和抗蛋白酶浓度

作者用放免法测定了10例胰腺癌术前病人血清的胰蛋白酶,弹性蛋白酶及三种抗蛋白酶:α_2—巨球蛋白、α_1—抗胰蛋白酶和α_1—抗糜蛋白酶的浓度。发现10例病人弹性蛋白酶浓度都升高,而α_2—巨球蛋白都减少,有9例病人α_1—抗糜蛋白酶升高,8例病人α_1—抗胰蛋白酶和胰蛋白酶增加。对一例化疗期间的病人连续测定其血清中这五种酶浓度,结果表明:蛋白酶浓度大为减少,而抗蛋白酶中的α_2—巨球蛋白持续低于正常,α_1—抗胰蛋白酶和α_1—抗糜蛋白酶持续高于正常。作者认为胰腺癌病人血清α_2—巨球蛋白减少是