胰岛素、环磷酸腺苷和皮质激素对磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶启动子的顺反式调节

目的观察体外环磷酸腺苷(cAMP)、皮质激素(DEX)和胰岛素对磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)550 bp启动子片段的顺反式作用.方法将重组的pGL2-PEPCK-Luc荧光素酶表达质粒通过脂质体转染法与内对照质粒pSV-β-Galactosidase共同转染大鼠肝肿瘤细胞系CBRH7919,通过荧光素酶报告系统观察胰岛素、cAMP和DEX对PEPCK启动子的调控作用.结果cAMP和DEX对PEPCK具有明显兴奋作用,两者同时刺激具有叠加效应.生理浓度下,胰岛素对基础状态及cAMP和DEX激活的PEPCK启动子均有明显的抑制作用,并且呈剂量依赖性.结论550 bp(-600- 69)PEPCK调控序列在肝细胞内具有较完善的正负反馈调节机制,可以作为糖尿病基因治疗的候选基因.     

脂联素对大鼠肝细胞葡萄糖激酶与磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶活性影响的研究

目的:探讨脂联素对体外培养大鼠肝脏细胞葡萄糖激酶与磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶活性影响,及其在胰岛素抵抗中的意义.方法:以BRL肝脏细胞株为细胞模型,分别用10μg/ml、30μg/ml、50μg/ml脂联素处理细胞,用6-磷酸葡萄糖脱氢酶偶联比色法、乳酸脱氢酶偶联比色法检测大鼠肝脏细胞葡萄糖激酶与磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶活性.结果:与对照组比较,磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶在脂联素处理24h后活性明显降低,且随脂联素浓度升高作用越明显,P＜0.05.葡萄糖激酶在脂联素处理24小时后,活性与对照组比较没有显著性差异,P＞0.5.结论:脂联素对葡萄糖激酶无明显的调节作用,而对于磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶具有显著的抑制作用.脂联素通过对肝细胞磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶活性的调节,降低肝脏葡萄糖异生,减少肝糖输出,改善胰岛素抵抗.     

抵抗素对肝细胞葡萄糖激酶和磷酸烯醇式丙酮酸激酶活性的影响

目的:观察抵抗素(Resistin)对肝细胞糖代谢关键酶葡萄糖激酶(GK)和磷酸烯醇式丙酮酸激酶(PEPCK)活性的影响及剂量效应.方法:正常大鼠的肝细胞,以不加Resistin与加不同剂量的Resistin培养24h,用6-磷酸葡萄糖脱氢酶偶联比色法、乳酸脱氢酶偶联比色法检测不同剂量Resistin对GK和PKPCK的影响.结果:Resistin浓度为10nM/L、50nM/L时,GK活性与空白对照组无明显差异,PEPCK活性明显升高(P＜0.05);当Resistin浓度上升为100nmol/L后,GK活性较空白对照组明显下降(P＜0.01),而PEPCK活性升高更明显(P＜0.01).结论:抵抗素浓度升高使大鼠肝细胞GK活性下降,PEPCK活性升高,从而抑制糖酵解促进糖异生,升高血糖.上述两种酶的活性与抵抗素浓度呈现不同的剂量依赖关系.     

不同代谢指标与脂联素基因单核苷酸多态性的相关性

[目的]分析延边地区朝鲜族和汉族小学生不同代谢指标与脂联素(ADIPOQ)基因单核苷酸多态性(SNPs)的相关性.[方法]自2011年8月至2013年8月间随机抽取延边地区3所小学校的1 206名小学生(朝鲜族706名,汉族500名)作为研究对象,测量体质量指数(BMI)、腰围(WC)、收缩压(SBP)和舒张压(DBP)值;检测空腹12 h血清三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、血糖(FBG)及胰岛素(FIns)水平;提取DNA并检测ADIPOQ基因SNP rs17846872位点的基因型.[结果]朝鲜族小学生ADIPOQ基因SNP rs17846872位点GG,GT,TT型频率分别为90.1%,9.3%,0.6%,汉族小学生分别为86.0%,14.0%,0.0%,朝鲜族和汉族小学生基因型分布频率间差异有统计学意义(P=0.011);朝鲜族小学生G和T等位基因频率分别为94.8%和5.2%,汉族小学生分别为86.0%和14.0%,朝鲜族和汉族小学生等位基因分布频率间差异有统计学意义(P<0.01).ADIPOQ基因SNP rs17846872位点不同基因型朝鲜族小学生WC,DBP和TG分布特征间存在差异(P<0.05),而汉族小学生TG和HOMA-IR分布特征间存在差异(P<0.05);ADIPOQ基因SNP rs17846872位点不同等位基因朝鲜族小学生WC分布特征间存在差异(P<0.05),而汉族小学生BMI,TG和HOMA-IR分布特征间存在差异(P<0.05).[结论]延边地区朝鲜族和汉族小学生ADIPOQ基因rs17846872位点具有SNPs,基因型和等位基因频率分布特征间存在民族差异;不同代谢指标与ADIPOQ基因SNPs的相关性有所不同,亦存在民族差异.     

延边地区朝鲜族和汉族小学生不同代谢指标与一氧化氮合酶3基因单核苷酸多态性的关系

[目的]分析延边地区朝鲜族和汉族小学生不同代谢指标与一氧化氮合酶3(NOS3)基因单核苷酸多态性(SNPs)的关系.[方法]选择2011年8月—2013年8月间吉林省延边朝鲜族自治州3所小学校的1 206名小学生(朝鲜族706名,汉族500名)作为调查对象,测量体质量指数(BMI)、腰围(WC)、收缩压(SBP)和舒张压(DBP)值;检测空腹血清三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、血糖(FBG)、胰岛素(FIns)值和NOS3基因rs3918227位点的基因型.[结果]朝鲜族小学生NOS3基因SNP rs3918227位点CC,CA及AA型的频率分别为93.5%,6.2%和0.3%,汉族小学生分别为84.4%,15.6%和0.0%,朝鲜族和汉族小学生的基因型分布频率间差异有统计学意义(P<0.001);朝鲜族小学生C,A等位基因频率分别为96.6%和3.4%,汉族小学生分别为84.4%和15.6%,朝鲜族和汉族小学生的等位基因频率分布间差异有统计学意义(P<0.001).NOS3基因SNP rs3918227位点不同基因型朝鲜族小学生WC,SBP,DBP和HOMA-IR分布特征间均存在显著差异(P<0.05),汉族小学生BMI和FBG分布特征间均存在显著差异(P<0.01).[结论]延边地区朝鲜族和汉族小学生NOS3基因rs3918227位点具有SNPs,且2个民族频率分布间存在差异;朝鲜族和汉族小学生多种代谢指标与NOS3基因rs3918227位点基因型和等位基因的关联程度有所不同.     

朝鲜族和汉族小学生游离脂肪酸与不同代谢指标的相关性

[目的]分析延边地区朝鲜族和汉族小学生血清游离脂肪酸(FFA)与多种代谢指标的相关性.[方法]自2011年8月至2013年8月间在延边地区选择4所小学校,随机抽取3 879名8～12岁小学生(朝鲜族2 011名,汉族1 868名)作为研究对象,测量身高、体质量、腰围(WC)、收缩压(SBP)及舒张压(DBP),准确计算体质量指数(BMI);检测空腹12 h血清三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、血糖(FBG)、胰岛素(FIns)及FFA水平,用稳态模式评估法(HOMA)估测人体胰岛素抵抗(IR)水平.[结果]调整年龄和性别的偏相关分析结果显示,朝鲜族小学生FFA与BMI,WC,SBP,DBP,FBG和稳态胰岛素评价指数(HOMA-IR)呈正相关(r=0.261,0.196,0.133,0.115,0.982,0.344,均P<0.001),与HDL-C呈负相关(r=-0.056,P<0.05);汉族小学生FFA与BMI,WC,SBP,HOMA-IR呈正相关(r=0.115,0.095,0.073,0.044,均P<0.01),与HDL-C呈负相关(r=-0.056,P<0.01).调整年龄、性别和民族的偏相关分析结果显示,延边地区小学生FFA与BMI,WC,SBP,DBP,FBG和HOMA-IR呈正相关(r=0.146,0.116,0.084,0.034,0.277,0.118,均P<0.01),与HDL-C呈负相关(r=-0.055,P<0.001).[结论]延边地区朝鲜族和汉族小学生FFA与不同代谢指标的相关程度有所不同,且存在民族差异.     

老化对磷酸烯醇型丙酮酸激酶基因转录作用的影响

使用６￣２６月龄Ｆｉｃｈｅｒ３４４禁食雄性大鼠肝脏研究了老化对磷酸烯醇型丙酮酸激酶（ＧＴＰ）（ＰＥＰＣＫ．ＥＣ．４．１．１．３２）基因表达的影响,结果表明６￣２６月龄大鼠肝脏提取物中的ＰＥＰＣＫ活力约下降５０％,且与年龄相关的ＰＥＰＣＫ活性的下降与ＰＥＰＣＫ ｍＲＮＡ水平的下降相平行。因此,ＰＥＰＣＫ活性的下降可能是因用于进行转译作用的ｍＲＮＡ的转录作用下降,且６月龄到２６月龄大鼠肝脏的ＰＥＰＣＫ     

铁皮石斛磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆及表达分析

目的 克隆铁皮石斛Dendrobium officinale磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（pepc）基因,并对其在F型和H型铁皮石斛中的表达进行分析,为研究铁皮石斛pepc基因的结构、功能提供依据。方法 基于GenBank上已知的pepc基因的同源序列设计引物,应用RT-PCR和RACE等方法,克隆铁皮石斛pepc基因全长。采用荧光定量PCR方法研究pepc基因在2种铁皮石斛中的表达。结果 成功克隆了铁皮石斛pepc基因,登录号为JF423930,该基因全长为3 560 bp,其中cds序列为2 895 bp,与兰科植物的同源性为80%左右,与其他科属植物的同源性达到70%以上,编码964个氨基酸。pepc基因在F型铁皮石斛中的表达量为H型的5.55倍。结论 成功克隆了铁皮石斛pepc基因,且F型铁皮石斛pepc基因的表达量高于H型。     

小檗碱对2型糖尿病中国地鼠肝脏葡萄糖激酶、葡萄糖-6-磷酸酶和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶mRNA表达的影响

目的研究小檗碱对2型糖尿病中国地鼠肝脏葡萄糖激酶（GcK）、葡萄糖-6-磷酸酶（G6P）和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）mRNA表达的影响,探讨小檗碱影响糖代谢的分子机制。方法以高脂高热量饲料喂养结合腹腔注射小剂量链脲佐菌素（STZ）的方法制作2型糖尿病中国地鼠模型,成模后随机分成模型组、小檗碱组、二甲双胍组,各药干预9周。同时设立对照组。观察小檗碱疗效及对肝脏GcK、G6P、PEPCK mRNA表达的影响。结果与模型组相比,小檗碱增强胰岛素敏感性,降低血糖血脂,增高肝脏GcK的mRNA表达,降低肝脏G6P、PEPCK mRNA的表达。结论小檗碱降低2型糖尿病血糖的作用机制可能与提高肝脏GcK mRNA的表达和降低G6P、PEPCK mRNA的表达有关。     

延边农村地区朝鲜族居民代谢综合征易感性与脂联素基因多态性的相关性

[目的]探讨延边农村地区朝鲜族人群脂联素基因外显子4个位点基因SNPs与代谢综合征(MS)易感性的关系.[方法]在延边农村地区筛选出197例MS病例组及147例同性别及年龄的非MS对照组.采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术检测脂联素基因SNP+45,SNP+276,SNP-11 377,SNP-11 391的基因型.[结果]MS组脂联素基因SNP+45TT,TG,GG基因型的分布频率分别为50.3%,43.1%,6.6%,非MS对照组分别为51.0%,41.5%,7.5%(P>0.05).MS组和非MS对照组T,G等位基因频率均为71.8%和28.2%(P>0.05).MS组脂联素基因SNP+276位点GG,TG及TT基因型的频率分布分别为65.5%,26.5%,7.6%,非MS对照组分别为48.3%,42.9%,8.8%(P<0.01).MS组T,G等位基因频率分别为21.1%,78.9%,非MS对照组分别为30.3%,69.7%(P<0.01).MS组脂联素基因SNP-11 377位点CC,CG,GG基因型的频率分布分别为62.4%,31.5%,6.1%,非MS对照组分别为44.2%,49.0%,6.8%(P<0.01).MS组C,G等位基因频率分别为78.2%,21.8%,非MS对照组分别为68.7%,31.3%(P<0.01).MS组脂联素基因SNP-11 391位点AA,GA,GG基因型的频率分布分别为8.1%,28.9%,62.9%,非MS对照组分别为9.5%,44.9%,45.6%(P<0.01).MS组A,G等位基因频率分别为32.0%,68.0%,非MS对照组分别为22.6%,77.4%(P<0.01).[结论]延边农村地区朝鲜族人群存在脂联素基因+45位点、+276位点、-11 377位点、-11391位点单核苷酸多态性,而且4个位点基因型的MS易感性不同.     

延边地区小学生脂肪细胞因子水平与多种代谢指标的相关性分析

[目的]分析延边地区朝鲜族和汉族小学生脂肪细胞因子水平与多种代谢指标的相关性.[方法]分别于2012年7月15—18日和2013年7月16—21日间,采用整群抽样方法抽取5 747例延边地区小学生(朝鲜族2 011人,汉族3 736人)作为研究对象,测量身高、体质量、腰围(WC)、收缩压(SBP)及舒张压(DBP),并测量清晨空腹血清三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、血糖(FBG)、胰岛素、脂联素、瘦素、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和脂肪细胞脂肪酸结合蛋白(A-FABP)水平.[结果 ]调整民族、年龄和性别的偏相关分析结果显示,延边地区小学生脂联素水平与体质量指数(BMI)、WC,SBP,DBP,TG,FBG和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)呈负相关(P<0.01),与HDL-C呈正相关(P<0.01);瘦素水平与BMI,WC,SBP,DBP,TG,FBG,HOMA-IR呈正相关(P<0.05),与HDL-C呈负相关(P<0.01);TNF-α水平与BMI,WC,SBP,DBP,TG,HOMA-IR呈正相关(P<0.01),与FBG,HDL-C呈负相关(P<0.05);A-FABP水平与BMI,WC,SBP,DBP,TG,HOMA-IR和HDL-C均呈正相关(P<0.01);朝鲜族与汉族小学生脂联素、瘦素、TNF-α和A-FABP水平与多种代谢指标的关联程度有所不同.[结论]延边地区朝鲜族与汉族小学生不同脂肪细胞因子水平与多种代谢指标的关联程度有所不同,且存在民族差异.     

延边地区朝鲜族和汉族小学生体格指标分布特征

[目的]调查延边地区朝鲜族和汉族小学生的身高、体质量及体质量指数(BMI),比较朝鲜族与汉族小学生体格指标的分布特征.[方法]于2011年6月—2012年6月间,采用整群抽样方法抽取延边地区3所小学校8¹2岁小学生3 159名,在清晨空腹状态下准确测量身高(cm)、体质量(kg)和BMI(kg/m2).[结果]朝鲜族和汉族男生身高平均水平分别为143.09±10.69和139.21±9.46,女生分别为143.08±10.52和138.22±10.23,相比较差异有统计学意义(t男=7.136,t女=8.502;P<0.000 1);延边地区小学生的身高(F朝男=2 440.147,F汉男=1 106.588,F朝女=3 147.320,F汉女=1 448.040)均随年龄的增长呈升高趋势(P<0.000 1).朝鲜族和汉族男生体质量平均水平分别为38.37±11.20和34.41±10.19,女生分别为37.75±10.67和32.75±9.05,相比较差异有统计学意义(t男=6.846,t女=9.568;P<0.000 1);延边地区小学生的体质量(F朝男=702.094,F汉男=250.931,F朝女=1 037.084,F汉女=403.717)均随年龄的增长呈升高趋势(P<0.000 1).朝鲜族和汉族男生BMI平均水平分别为18.43±3.50和17.46±3.37,女生分别为18.13±3.35和16.86±2.89,相比较差异均有统计学意义(t男=5.131,t女=7.631;P<0.000 1);延边地区小学生的BMI(F朝男=100.289,F汉男=28.879,F朝女=192.764,F汉女=47.303)均随年龄的增长呈升高趋势(P<0.000 1).[结论]延边地区小学生体格发育分布特征存在明显的民族差异.     

延边地区朝鲜族和汉族小学生体质量指数与重要脂肪细胞因子的相关性

[目的]分析延边地区朝鲜族和汉族小学生体质量指数(BMI)与重要脂肪细胞因子的相关性.[方法]于2011年7月—2012年7月间抽取延边地区3 879名小学生(朝鲜族2 011名,汉族1 868名)作为研究对象,测量身高和体质量,测定清晨空腹脂联素(ADP)、瘦素(LEP)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.[结果]延边地区朝鲜族小学生BMI和LEP平均水平均显著高于汉族小学生(FBMI=121.07,FLEP=90.35,P<0.001);汉族小学生ADP平均水平显著高于朝鲜族小学生(FADP=89.64,P<0.001).延边地区小学生LEP和TNF-α平均水平均随BMI水平增高而升高,且升高趋势显著(FLEP=1 003.39,FTNF-α=14.55,P<0.001);延边地区小学生ADP平均水平随BMI水平增高而降低,且降低趋势显著(FADP=66.27,P<0.001).Spearman相关分析结果显示,延边地区小学生BMI与LEP和TNF-α水平呈正相关(r=0.428和0.130,P<0.01),与ADP呈负相关(r=-0.195,P<0.01);调整年龄、性别、民族和生物化学指标的偏相关分析结果显示,延边地区小学生BMI与ADP水平呈负相关(r=-0.149),与LEP(r=0.572)和TNF-α(r=0.137)水平呈正相关,差异均有统计学意义(P<0.001).[结论]延边地区小学生BMI和重要脂肪细胞因子的分布特征呈现明显的民族差异;BMI与不同脂肪细胞因子均存在显著相关性,且与不同脂肪细胞因子的相关性程度有所不同.     

延边地区朝鲜族HLA-DR,DQ基因多态性与流行性出血热的相关性

[目的]探讨延边地区朝鲜族HLA-DR,DQ基因多态性与流行性出血热(EHF)的相关性.[方法]采用聚合酶链反应-序列特异性引物技术对118例EHF患者(患者组)和120例健康对照者(对照组)进行HLA-DR, DQ基因分型,比较等位基因频率(GF),并计算相对危险度(RR).[结果]患者组HLA-DRB1*15,DRB1*16等位基因频率分别为4.66%,31.40%,较对照组(1.25%,15.80%)明显增高,χ~2值为4.92,11.50,P值为0.03,0.00,RR为3.58,3.63.两组其他HLA-DRB基因频率间差异均无统计学意义(P>0. 05);两组各HLA-DQB1基因频率间差异亦无统计学意义(P>0. 05).[结论] HLA-DRB1*15,DRB1*16可能是延边地区朝鲜族EHF的易感基因.     

延边地区朝鲜族和汉族小学生睡眠状况分布特征

[目的]研究延边地区朝鲜族和双族小学生睡眠状况分布特征．[方法]于2011年6月－2012年6月间,选择8～12岁学生3147名（朝鲜族2207名,汉族940名）作为研究对象,收集其睡眠状况的相关信息．[结果]朝鲜族和汉族男生睡眠时间（h）分别为8．38±0．71,9．13±0．67,女生分别为8．41±0．75,9．17±0．65,睡眠时间随年龄的增长呈显著降低的趋势（F朝男=56．673,F朝女=98．225,F汉女=15．468,均P〈0．001）;朝鲜族和汉族男生就寝时间（h）分别为20．83±0．61和20．39±0．54,女生分别为20．78±0．65和20．35±0．58,就寝时间随年龄的增长呈显著升高的趋势（F朝男=38．044,F汉男=4．211,F朝女=81．110,F汉女=17．527,均P〈0．001）;朝鲜族和汉族男生晨起时间（h）分别为5．61±0．52,5．91±0．43,女生分别为5．59±0．52,5．93±0．39,晨起时间随年龄的增长呈显著降低的趋势（F朝男＝8．259,F朝女＝8．227,均P〈0．01）．睡眠时间〈8．6h,8．6～9．0h,≥9．1h者所占比例在朝鲜族男生中分别为45．6％,39．5％,14．9％,汉族男生中分别为13．1％,23．5％,63．3％,朝鲜族女生中分别为42．0％,41．1％,16．9％,汉族女生中分别为8．8％,29．9％,61．3％,不同民族学生睡眠时间分布特征存在差异（χ2男=37．001,）（χ2女=17．567,P〈0．001）．[结论]延边地区小学生睡眠状况及不同睡眠时间分布特征存在明显的民族差异,且年龄与睡眠状况具有剂量反应关系．     

延边地区小学生肥胖和胰岛素抵抗与不同脂肪细胞因子的相关性

[目的]探讨延边地区朝鲜族和汉族小学生肥胖和胰岛素抵抗(IR)与不同脂肪细胞因子的相关性.[方法]选择延边地区8~12岁朝鲜族和汉族小学生3 879例作为研究对象,测定肥胖指标和空腹血糖(FBG)、胰岛素、脂联素、瘦素及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.采用稳态模式评估法(HOMA)评估人体IR(HOMA-IR).[结果]朝鲜族小学生体质量指数(BMI)、腰围(WC)、HOMA-IR、脂联素和瘦素水平分别为18.2±3.4,62.4±8.7,13.1(9.9~16.9),3.3(2.1~4.3)和1.4(1.1~1.9),汉族小学生分别为17.1±3.1,61.3±7.4,12.0(8.2~16.5),4.1(2.7~5.6)和1.3(1.0~1.6).BMI,WC及HOMA-IR与脂联素呈负相关关系,与瘦素及TNF-α呈正相关关系(P<0.01);朝鲜族和汉族小学生BMI,WC及HOMA-IR与不同脂肪细胞因子的相关性程度有所不同.[结论]延边地区小学生肥胖指标、HOMA-IR和脂肪细胞因子的分布特征存在明显的民族差异;BMI,WC及HOMA-IR与不同脂肪细胞因子的相关性程度有所不同,亦存在民族差异.     

延边农村地区朝鲜族与汉族居民代谢异常患病水平的比较研究

[目的]比较延边农村地区朝鲜族和汉族居民代谢异常患病水平.[方法]于2004年8月-2004年9月间,在延边地区图们市选择2个镇,随机抽取30岁以上的朝鲜族和汉族常驻农民.采用面对面询问法收集研究对象的一般人口学特征,测量体格指标,并测定生物化学指标.[结果]完整地完成调查(问卷、体格及生物化学检查)者共有1 120名;朝鲜族男女的HDL-C平均值均显著低于汉族,而朝鲜族男女的SBP,DBP及空腹血糖平均值却显著高于汉族,且差异均有统计学意义;朝鲜族男女的血压、血糖及血脂异常的患病率均显著高于汉族,差异均有统计学意义.[结论]延边农村地区朝鲜族和汉族居民的代谢异常患病水平间存在显著差异.